遗传性运动感觉性神经病合并肥厚性心肌病的3D-TCD、rCBF、BAEP和ECG的研究

目的了解遗传性运动感觉性神经病（ＨＭＳＮ）合并肥厚性心肌病（ＨＣＭ）的经颅多普勒（ＴＣＤ）、局部脑血流量（ｒＣＢＦ）、脑干听觉诱发电位（ＢＡＥＰ）和心电图（ＥＣＧ）的变化。方法对一家三代ＨＭＳＮ合并ＨＣＭ１２例患者和１例无症状者常规进行这四项检查。结果ＴＣＤ、ｒＣＢＦ、ＢＡＥＰ和ＥＣＧ的异常率分别为８５％、７６％、９２％和９２％。结论绝大多数ＨＭＳＮ合并ＨＣＭ患者的ＴＣＤ、ｒＣＢＦ、ＢＡＥＰ和ＥＣＧ均异常。     

肝细胞癌整合蛋白α5β1,纤维连接蛋白及其降解片段的表达

目的探讨整合蛋白α５β１、纤维连结蛋白（ＦＮ）及其降解片段——恶性疾病相关性ＤＮＡ结合蛋白２（ＭＡＤ２）与肝细胞癌（ＨＣＣ）生物学行为间的关系及血浆ＭＡＤ２检测的意义。方法应用免疫组化及图像分析技术对４０例ＨＣＣ组织作整合蛋白α５β１、ＦＮ和ＭＡＤ２定位和定量分析,并以酶联免疫吸附法检测３０／４０例ＨＣＣ患者血浆中ＭＡＤ２和ＦＮ浓度。结果高分化ＨＣＣ组织整合蛋白α５β１、ＦＮ和ＭＡＤ２表达与正常及癌旁组织相近,而中、低分化ＨＣＣ中三者均明显减弱或消失;肿瘤浸润包膜处三种蛋白表达减少,但血管内癌栓外侧缘癌细胞整合蛋白α５β１和ＦＮ表达较强,并与相应血管内皮的强表达相映。ＨＣＣ患者血浆ＭＡＤ２平均浓度显著高于慢性肝病及正常对照者。结论整合蛋白α５β１和ＦＮ表达可能在ＨＣＣ分化、浸润及转移中起作用;ＨＣＣ患者血浆ＭＡＤ２含量的检测可能有一定临床意义。     

低氧对人胚肺成纤维细胞转化生长因子β1表达的影响

应用核酸原位杂交及增强化学发光免疫斑点法,观察常氧（Ｎ）、低氧（Ｈ）、常氧和低氧猪肺动脉内皮细胞条 件培养液（ＮＥＣＣＭ和 ＨＥＣＣＭ）对人胚肺成纤维细胞转化生长因子β_１（ＴＧＦβ_１） ｍＲＮＡ和蛋白表达的影响。结果表 明：Ｈ组ＴＧＦβ_１ｍＲＮＡ表达为Ｎ组的１．３６倍（Ｐ＜０．０１）,同时在其培养上清液中,ＴＧＦβ_１蛋白含量也明显升高为Ｎ 组的１．８倍。ＨＥＣＣＭ组ＴＧＦβ_１ｍＲＮＡ和蛋白表达较ＮＥＣＣＭ组均下降,ｍＲＮＡ为ＮＥＣＣＭ组的９０％,Ｐ＜０．０１。蛋 白含量为后者的６２．２％。提示：（１）低氧促进入胚肺成纤维细胞合成和分泌ＴＧＦβ_１。（２）在低氧条件下,肺动脉内皮 细胞可能合成某种因子,抑制成纤维细胞ＴＧＦβ_１基因转录和蛋白表达。     

NFG和TGF—β1的表达与滋养细胞肿瘤相关性的免疫组化研究

为了探讨非分蚀性葡萄胎（ＨＭ）转化为侵蚀性葡萄胎（ＩＨＭ）的细胞生物学机制，本研究采用免疫组织化学法观察了ＮＧＦ和ＴＧＦ－β１在ＨＭ和ＩＨＭ中的分布。结果显示：在ＨＭ绒毛中，合体滋养细胞（ＳＴ）和新生基质细胞ＮＧＦ和ＴＧＦ－β１呈阳性和阳性；老年基质细胞和细胞滋养细胞（ＣＴ）呈阴性；在ＨＭ的中间型滋养细胞，ＮＧＦ呈阳强性着色，ＴＧＦ－β１阴性；在ＨＭ绒毛干中，ＳＴ的ＮＧＦ呈强性阳，ＮＧＦ和ＴＧＦ－     

高频心电图与核素心肌断层显像对冠心病诊断价值的比较

以￣（９９ｍ）锝一ＭＩＢＩ核素心肌断层显像（ＳＰＥＣＴ）为参照标准，在１２６例检测对象中评价了高频心电图（ＨＦＥＣＧ）对冠心病（ＣＡＤ）的诊断价值。结果显示在患病率为６１．９０％的情况下，ＨＦＥＣＧ诊断ＣＡＤ的敏感性和特异性分别为８８．１％和７６．６％；阳性预测值和阴性预测值分别为８５．９％和７９．９％。结果表明，ＨＦＥＣＧ是一种较理想的ＣＡＤ辅助检测手段。     

rIL—2逆转扩张型心肌病NK细胞活性的研究

本文检测了扩张型心肌病（ＤＣＭ）、冠心病（ＣＨＤ）和正常人（ＮＣ）的自然杀伤细胞（ＮＫ）数目及活性。结果发现ＤＣＭ患者ＮＫ数目与ＣＨＤ及ＮＣ组比较无统计学差异（Ｐ＞０．０５），而ＮＫ活性低于其它二组（Ｐ＜０．００１）。经重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）温育ＮＫ后，ＮＫ活性明显升高（Ｐ＜０．００１），同时ＮＫ活性与ＤＣＭ病情严重程度有关，提示ＮＫ和ＤＣＭ发病中有意义，并可作为判断ＤＣＭ病情严重程度的指     

缺氧对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及其传递途径

本文观察了低氧对离体培养成年牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）＾３Ｈ－ＴｄＲ参入的影响，并用异搏定、Ｈ７、ＰＭＡ和ＥＧＦ进行干预实验，对ＭＳＣ增殖中信息传递途径作了初探。结果显示：（１）缺氧２４ｈ，ＰＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入显著增高。（２）异搏定及Ｈ７显著降低低氧Ｈ－ＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入，而ＰＭＡ及ＥＧＦ显著增加ＨＳＭＣ＾３ＨＴｄＲ参入。（３）Ｈ－ＳＭＣ对ＰＭＡ和ＥＧＦ反应强于常氧Ｎ－ＳＭＣ；     

血管紧张素Ⅱ刺激肥大心肌细胞和心肌成纤维细胞核酸蛋白质及胶原合成

本实验用压力（ＰＯ）和容量超负荷（ＶＯ）性分离的肥大心肌细胞（ＭＣ）及培养的心肌成纤维细胞（Ｆｂｓ），就血管紧张素（Ａｎｇ）Ⅱ对其￣３Ｈ－Ｌｅｕ，￣１４Ｃ－ＵＲ，￣３Ｈ－ＴｄＲ和￣３Ｈ－ｐｔｏ掺入率的影响进行了对比研究。发现尽管ＡｎｇⅡ可提高正常和两种肥大ＭＣ的￣３Ｈ－Ｌｅｕ和￣１４Ｃ－ＵＲ掺入率，但肥大ＭＣ增加幅度显著高于假手术对照（ＳＯ）组，尤其以ＶＯ组最为明显（Ｐ＜０．０５ｖｓＰＯ）。相反，ＰＯ组ＦｂＳ的￣３Ｈ－ＴｄＲ，￣１４Ｃ－ＵＲ和￣３Ｈ－Ｐｒｏ掺入率增加幅度又显著高于ＳＯ和ＶＯ组。除￣３Ｈ－Ｐｔｏ外，ＶＯ组的￣３Ｈ－ＴｄＲ及￣１４Ｃ－ＵＲ掺入率与ＳＯ组相比差异无显著性。表明ＡｎｇⅡ对两种肥大心肌的ＭＣ和Ｆｂｓ的核酸、蛋白质及胶原合成的促进作用存在明显差异。提示：ＡｎｇⅡ的这种作用可能是导致压力和容量超负荷性心肌肥大时，心肌实质细胞与胶原增生出现不同步发展的主要和直接原因之一。     

丙型肝炎病毒感染慢性化的分子生物学机制

丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染有较高的慢性化比例。ＨＣＶ的核心蛋白对于淋巴毒素β受体（ＬＴ－βＲ）,肿瘤坏死因子α受体（ＴＮＦαＲ）,包膜糖蛋白Ｅ２对Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）,非结构蛋白ＮＳ５Ａ对双链ＲＮＡ结合蛋白ＰＫＲ和干扰素α（ＩＦＮα）诱导的抗病毒蛋白ＭｘＡ等机体免疫系统的调变作用是ＨＣＶ感染慢性化的主要分子生物学机制。     

多发性硬化症脑脊液中活化T细胞抗原受体V_β基因的表达

应用定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对４例多发性硬化症（ＭＳ）脑脊髓液（ＣＳＦ）细胞及末梢血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中Ｔ细胞抗原受体（ＴＣＲ）Ｖ_β基因（Ｖ_β１～Ｖ_β２０）表达进行了探讨。结果表明：未经刺激的ＣＳＦ细胞和ＰＢＭＣ表达广谱Ｖ_β基因，经ＴＣＧＦ／ＩＬ－２／ＩＬ－４短期培养的ＣＳＦ细胞则表达限制性Ｖ_β基因，而经同样培养的ＰＢＭＣ各Ｖ_β基因表达的百分率同培养前ＰＢＭＣ相同。说明在ＭＳ疾病的中枢神经系统中存在着对某种抗原的特异性Ｔ细胞应答，为ＭＳ的免疫治疗提供了新的启示。     

IL—6与心血管疾病关系的初步研究

应用ＭＴＴ比色法检测了２０例病毒性心肌炎（ＭＣ）、２０例扩张型心肌病（ＤＣＭ）、２０例急性心肌梗塞（ＡＭＩ）及１５例肥厚型心肌病（ＨＣＭ）患者血清白细胞介素６（ＩＬ－６）的活性，并与２０例正常对照组（ＮＣ）比较，结果发现ＭＣ、ＤＣＭ及ＡＭＩ病人ＩＬ－６水平明显高于ＮＣ组，表明ＩＬ－６与ＭＣ、ＤＣＭ及ＡＭＩ的病理过程有关。     

高糖、肿瘤坏死因子促进血管内皮细胞表面整合素（α_vβ_3）表达

本文采用ＥＬＩＳＡ方法检测培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）表面玻璃连接蛋白受体（ＶｉｔｒｏｎｅｃｔｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒＶｎＲ即整合素家庭的α＿ｖβ＿３）的表达改变；用（５１）Ｃｒ－标记血小板（（５１）Ｃｒ－ｐｌａｔｅｌｅｔｅ，（５１）Ｃｒ－ｐＬ）检测ＨＵｖＥｃ的粘附功能；Ｆｕｒａ－２／Ａｍ负载ＥＣ，测定ＨＵＶＥＣ胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ（２＋）］），观察了高糖、肿瘤坏死因子－α（Ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α，ＴＮＦ－α）对ＥＣ粘附功能的影响。结果表明：①高糖（３０ｍｍｏｌ／Ｌ）可明显促进ＥＣ与ＰＬ的粘附（ＣＰＭ值：３６１±２ｌ．９３ＶＳ２ｌ９．６７±１６．２６，ｎ＝６Ｐ＜０．０１），抗β３亚单位单抗（β３ＭｃＡｂ）可部分阻断ＥＣ与ＰＬ粘附。ＴＮＦ－α（１０００μ／ｍ１）也有相同作用（ＣＰＭ值：４ｌ０．７±１７．６ＶＳ２１９．６７±１６．２６１ｎ＝６Ｐ＜０．０１），β３ＭｃＡｂ也部分阻断ＴＮＦ－α诱导的ＥＣ－ＰＬ间的粘附。②不同浓度高糖和ＴＮＦ－α不同时间可影响ＥＣ表面的α＿ｖβ＿３表达，并且在一定范围内有浓度和时间依赖性。③高糖和ＴＮＦ－α可明显增加ＥＣ的［Ｃａ（２＋）］ｉ，上述资料提示?     

急性白血病患儿脑脊液PCR扩增HCMV－DNA的研究

应用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）扩增和洋地黄探针杂交的方法，对５３例急性白血病（ＡＬ）患儿脑脊液（ＣＳＦ）样本进行了检测。经过ＰＣＲ扩增，可见明显的人巨细胞病毒ＤＮＡ（ＨＣＭＶ－ＤＮＡ）４００ｂｐ扩增带；经洋地黄探针特异性杂交鉴定，ＡＬ患儿ＣＳＦ标本ＰＣＲ扩增产物的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性检出率为８３．０２％。本实验为ＡＬ病人ＣＳＦ的ＨＣＭＶ检测提供了一个简便方法。     

急性白血病患儿脑脊液PCR扩增HCMV—DNA的研究

应用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）扩增和洋地黄深针杂交的方法，对５３例急性白血病（ＡＬ）患儿脑脊液（ＣＳＦ）样本进行了检测，经过ＰＣＲ扩增，可见明显的人巨细胞病毒ＤＮＡ（ＨＣＭＶ－ＤＮＡ）４００ｂｐ扩增带，经洋地黄探针特异性杂交鉴定，ＡＬ患儿ＣＳＦ标本ＰＣＲ扩增产生的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性检出率为８３．０２％。本实验为ＡＬ病人ＣＳＦ的ＨＣＭＶ检测提供了一个简便方法。     

rIL－2逆转扩张型心肌病NK细胞活性的研究

本文检测了扩张型心肌病（ＤＣＭ）、冠心病（ＣＨＤ）和正常人（ＮＣ）的自然杀伤细胞（ＮＫ）数目及活性。结果发现ＤＣＭ患者ＮＫ数目与ＣＨＤ及ＮＣ组比较无统计学差异（Ｐ＞０．０５），而ＮＫ活性低于其它二组（Ｐ＜０．００１）。经重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）温育ＮＫ后，ＮＫ活性明显升高（Ｐ＜０．００１），同时ＮＫ活性与ＤＣＭ病情严重程度有关，提示ＮＫ在ＤＣＭ发病中有意义，并可作为判断ＤＣＭ病情严重程度的指标。     

TNF-α、IL-1β 、LPS对人多核白细胞、脐静脉内皮细胞血小板内皮细胞粘附分子-1表达的影响

目的：初探炎性刺激对人多核白细胞（ＰＭＮ）和脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）的血小板内皮细胞粘附分子－１（ＰＥＣＡＭ－１）表达的影响和ＰＥＣＡＭ－１的可能作用。方法：使用流式细胞仪和免疫组化法,观察脂多糖（ＬＰＳ）、白介素（ＩＬ）－１β和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）－ａ对ＰＭＮ和ＨＵＶＥＣ ＰＥＣＡＭ－１表达的变化。结果：ＬＰＳ、１Ｌ－１β和ＴＮＦ－ａ可引起ＰＭＮ表达ＰＥＣＡＭ－１蛋白减少,而对ＨＵＶＥＣ　ＰＥＣＡＭ－１的表达无显著影响,但组化显著在ＨＵ－ＶＥＣ连接部的ＰＥＣＡＭ－１染色变淡。结论：上述炎性刺激物不仅可引起ＰＭＮ表达ＰＥＣＡＭ－１减少、激活ＰＭＮ,而且可改变内皮细胞ＰＥＣＡＭ－１的分布,因此ＰＥＣＡＭ－１在炎症中可能起重要作用。     

H—2K^b基因导入小鼠造血细胞的研究

本研究应用分子克隆技术，用脂质体（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）将ＭＨＣ－Ｉ类基因（即小鼠Ｈ－２Ｋ＾ｂ基因）导入包装细胞ＰＡ３１７。用培养的病毒上清进一步感染ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的造血细胞，且形成了抗Ｇ４１８的ＣＦＵ－ＧＭ。通过多聚酶链式反应（ＰＣＲ）和反转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），表明病毒上清感染后小鼠造血细胞及其形成的ＣＦＵ－ＧＭ中均整合了ＭＨＣ－Ｉ类基因，且已转录为ｍＲＮＡ，流式细胞仪（ＦＡＣＳ     

人肝细胞癌中整合素α5,β1亚基和纤维连接蛋白mRNAs的表达

目的研究肝细胞癌（ＨＣＣ）中整合素α５、β１亚基和纤维连接蛋白（ＦＮ）ｍＲＮＡｓ表达的生物学意义。方法应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交和核酸原位杂交技术，对１５例ＨＣＣ癌组织、５例癌旁肝硬化和３例正常肝组织中整合素α５、β１亚基和ＦＮｍＲＮＡｓ表达作杂交分析。结果高分化ＨＣＣ癌组织中三种ｍＲＮＡｓ表达水平与癌旁及正常肝组织相近，而低、中分化ＨＣＣ癌组织内明显减少，甚至消失（分别Ｐ＜００１）；整合素α５亚基和ＦＮｍＲＮＡｓ主要见于癌细胞胞浆内；ＨＣＣ伴肝内浸润和／或转移组癌组织内三种ｍＲＮＡｓ水平较无浸润转移组显著下降（Ｐ＜００５）；５例伴肝内转移的ＨＣＣ癌组织中ＦＮｍＲＮＡ呈异质性表达。结论ＨＣＣ中整合素α５、β１和ＦＮ蛋白的表达变化系癌细胞基因转录水平下调的结果，可能与ＨＣＣ细胞分化、浸润和转移相关；异质性ＦＮｍＲＮＡ及其编码的ＦＮ蛋白可能在ＨＣＣ转移中有意义。     

bFGF、NGF和TGF-β_1的表达与滋养细胞肿瘤相关性的免疫组化研究

为了探讨非侵蚀性葡萄胎（ＨＭ）转化为侵蚀性葡萄胎（ＩＨＭ）的细胞生物学机制,本研究采用免疫组织化学法观察了ＮＧＦ和ＴＧＦ－β１在ＨＭ和ＩＨＭ中的分布。结果显示：在ＨＭ绒毛中,合体滋养细胞（ＳＴ）和新生基质细胞ＮＧＦ和ＴＧＦ－β１呈强阳性和阳性;老化基质细胞和细胞滋养细胞（ＣＴ）呈阴性;在ＨＭ的中间型滋养细胞,ＮＧＦ呈强阳性着色,ＴＧＦ－β１阴性;在ＨＭ绒毛干中,ＳＴ的ＮＧＦ呈强阳性,ＮＧＦ和ＴＧＦ－β１呈弱阳性;ＣＴ的ＮＧＦ呈弱阳性,ＮＧＦ和ＴＧＦ－β１为阴性;在ＨＭ的绒毛干近滋养层基质细胞,ＮＧＦ呈弱阳性,ＮＧＦ和ＴＧＦ－β１呈阳性;在远滋养层基质细胞,免疫组化染色皆为阴性。在ＩＨＭ的绒毛ＳＴ和ＣＴ免疫组化染色皆为阴性,在绒毛新生基质细胞,免疫组化染色呈阳性;在绒毛老化基质细胞,皆为阴性     

hGM—CSF基因转导的人胃癌,肝癌细胞研究

ｈＧＭ－ＣＳＦ是一种细胞因子，能通过多种机制激活机体免疫功能。为了研究ｈＧＭ－ＣＳＦ修饰的人肝癌、胃癌细胞的免疫功能的变化，将含该基因的逆转录病毒载体ＬＸＳＮ转染ＰＡ３１７包装细胞，经Ｇ４１８筛选较高滴度病毒分泌株（滴度为１．５×１０４ＣＦＵ／ｍｌ），用病毒上清感染肝癌（ＨＨＣＬ）和胃癌（ＭＫＮ４５），筛选后测ｈＧＭ－ＣＳＦ活性，最高分别为２７１Ｕ／１０６细胞·２４小时和２４３．８０Ｕ／１０６细胞·２４小时。ｈＧＭ－ＣＳＦ基因在肝、胃癌细胞中整合，未发生重排。ＭＨＣ分子测定结果显示经修饰的肝癌ＨＨＣＬ细胞ＭＨＣ分子的表达无改变，而修饰后胃癌细胞ＭＫＮ４５的ＭＨＣⅠ类分子表达明显增加。本实验为今后瘤苗研制提供了资料。