MLPA技术在快速检测胎儿染色体非整倍体异常中的应用

目的:探讨多重探针连接依赖式扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)在快速检测胎儿染色体非整倍体异常中的应用价值。方法:282例产前诊断标本(羊水179例、脐带血90例和绒毛13例)同时进行MLPA检测及核型分析,用计算机辅助数据分析方法得出MLPA检测结果。结果:MLPA分析在标本接收后24h内即可得出结果,共检出染色体倍体异常产前诊断标本17例,包括唐氏综合征(Down Syndrome,47,+21)7例、爱德华氏综合征(Edwards Syndrome,47,+18)5例、特纳氏综合征(Turner Syndrome,45,X)3例、帕陶氏综合征(Patau Syndrome,47,+13)1例及XYY综合征(47,XYY)1例。MLPA检测24h报告结果临床符合率为97.9%。结论:MLPA技术具有快速、准确性高、成本低等优点,可作为诊断常见染色体非整倍体异常的可靠方法。     

MLPA快速诊断胎儿染色体非整倍体疾病方法的研究与应用

目的将多重探针依赖式扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)用于检测大部分胎儿染色体非整倍体疾病(如13、18、21、X、Y等染色体非整倍体疾病),并将结果与常规经典染色体核型分析相比较,以此来评估其应用价值。方法 305份产前诊断标本(羊水201例,脐血70例,绒毛34例)收集做MLPA研究。用试剂盒kit P095检测从样本中提取的DNA,接着用ABI3100毛细管电泳分析仪得到结果,用分析软件RH-MLPA-Analysis分析13、18、21、X和Y染色体的异常拷贝情况。同时进行常规的核型分析,然后比较。结果 MLPA检测在标本收后24h内即可出结果。共检测出异常倍体21例,包括8例唐氏综合症、5例爱德华综合症、2例帕陶氏综合症、4例特纳氏综合症、1例47,XXY和1例47,XYY。临床检出率达98.36%。结论 MLPA检测13、18、21、X、Y等染色体非整倍体疾病时,与核型分析相比较,MLPA是一种快速、高效的分析非整倍体的产前诊断方法,具有临床应用价值。     

反复IVF-ET失败与卵细胞染色体的非整倍体异常

目的研究反复试管婴儿(IVF-ET)失败与卵细胞染色体非整倍体间的相关关系.方法取反复IVF-ET失败和初次行IVF-ET患者助孕技术后未能受精成功的卵母细胞,采用多色荧光原位杂交方法检测两组卵母细胞13、16、18、21和22号染色体的核型情况.结果反复IVF-ET失败组卵母细胞的非整倍体率为66.67%,明显高于初次行IVF-ET患者的未受精卵母细胞的非整倍体率为30.77%(P＜0.025).结论卵细胞的非整倍体异常可能是导致反复IVF-ET失败的一个重要原因.     

超声产前筛查非整倍体染色体异常胎儿的研究

目的通过超声测量10～24孕周胎儿颈后皮肤的厚度(NT)、双顶径／股骨长度(BPD／FL)的正常值，筛查出异常、可疑的病例，再作胎儿细胞培养染色体分析，诊断非整倍体染色体畸形胎儿。方法对孕10～24周的孕妇，通过B超测定胎儿孕囊大小或胎儿头臀长或胎儿BPD、FL和AC确定孕周，再测量NT、BPD／FL。每孕周测量100例。分别绘制NT、BPD/FL正常曲线，制定出第90和第10百分位。回顾分析5例21-三体综合征。结果 孕10-13周，正常NT平均值为1．76mm，孕14-24周平均值3．52mm。孕10～24周的孕妇，BPD／FL第50百分位为2．40-1．40。结论 达到或超过NT及BPD／FL比值相应孕周的第90百分位，21-三体综合征敏感度增加。     

反复IVF-ET失败与卵细胞染色体的非整倍体异常

目的:研究反复试管婴儿(IVF-ET)失败与卵细胞染色体非整倍体间的相关关系。方法:取反复IVF-ET失败和初次行IVF-ET患者助孕技术后未能受精成功的卵母细胞,采用多色荧光原位杂交方法检测两组卵母细胞13、16、18、21和22号染色体的核型情况。结果:反复IVF-ET失败组卵母细胞的非整倍体率为66.67%,明显高于初次行IVF-ET患者的未受精卵母细胞的非整倍体率为30.77%(P<0.025)。结论:卵细胞的非整倍体异常可能是导致反复lVF-ET失败的一个重要原因。     

FISH技术快速诊断胎儿染色体数目异常

目的:使用荧光原位杂交(FISH)技术对胎儿染色体数目异常进行快速检测并评估其临床应用价值。方法:使用第13、18、21、X和Y5条染色体特异性的FISH探针对245例孕妇采用未经培养的新鲜羊水进行产前诊断,并与同时进行的羊水染色体检查结果进行对照。另外,选取36例染色体分析结果异常的存档标本(包括20例羊水标本和16例外周血/脐带血标本)对该检测技术进行验证。结果:使用FISH方法成功诊断唐氏综合征9例,18-三体综合征2例,性染色体数目异常3例,和同时进行的常规羊水染色体检查结果一致。但有4例经羊水染色体检出的染色体数目和结构异常,FISH因固有技术限制无法检出。在验证实验中,36例存档标本,全部染色体数目异常均能成功检出,成功率100%。结论:荧光原位杂交(FISH)技术检测第13、18、21、X和Y数目异常是准确快捷的产前诊断方法,值得推广应用。     

引物原位标记技术在人类染色体非整倍体嵌合体诊断中的应用

目的:探讨快速和准确诊断人类染色体非整倍体嵌合体的新方法。方法:采用引物原位标记(PRINS)技术和染色体G显带技术检测2例21三体嵌合体和3例Turn综合征嵌合体,并比较其结果。结果:在间期核和中期分裂相中,PRINS技术均能特异性地检测出21号和X染色体,其标记率分别为90%和89%;PRINS技术检测的21三体嵌合体和Turn综合征嵌合体100个细胞中,异常核型细胞数目高于染色体G显带技术检测。结论:PRINS技术能够快速、准确地检测染色体数目异常,与染色体G显带技术相结合,可提高人类染色体非整倍体嵌合体诊断的准确性。     

女性年龄与卵细胞染色体非整倍体异常的相关关系

目的 :直接从卵细胞水平研究女性年龄与其卵细胞染色体非整倍体间的相关关系。方法 :取试管婴儿助孕技术后未能受精成功的卵细胞 ,采用多色荧光原位杂交方法检测卵细胞 13,16 ,18,2 1和 2 2号染色体的情况。结果 :卵细胞的非整倍体率为 2 7.1% ,随着女性年龄的增加 ,卵细胞的非整倍体率也随之上升 ,两者呈较强的正相关关系 ( r=0 .88,P<0 .0 0 1)。结论 :女性年龄与其染色体非整倍体异常间存在相关性 ,对于 35岁以上行试管婴儿助孕术的妇女应同时进行遗传咨询     

女性年龄与卵细胞染色体非整倍体异常的相关关系

目的直接从卵细胞水平研究女性年龄与其卵细胞染色体非整倍体间的相关关系.方法取试管婴儿助孕技术后未能受精成功的卵细胞,采用多色荧光原位杂交方法检测卵细胞13,16,18,21和22号染色体的情况.结果卵细胞的非整倍体率为27.1%,随着女性年龄的增加,卵细胞的非整倍体率也随之上升,两者呈较强的正相关关系(r=0.88,P<0.001).结论女性年龄与其染色体非整倍体异常间存在相关性,对于35岁以上行试管婴儿助孕术的妇女应同时进行遗传咨询.     

染色体非整倍体异常的产前筛查新进展(综述)

非整倍体异常是胎儿最常见的一类染色体异常，包括21三体综合征、18三体综合征、13三体综合征以及一些性染色体异常：X单体，如45，X(Turner综合征)或性染色体三体，如47，XXX、47，XXY、47，XYY等。常用的产前诊断方法，如绒毛取样、羊膜腔穿刺、脐带穿刺术均属于创伤性产前诊断技术，都有其并发症及一定的胎儿丢失率。     

中孕期染色体非整倍体异常胎儿的超声表现分析

目的:分析胎儿染色体异常中孕期超声表现,为胎儿染色体的异常诊断提供线索。方法:回顾性分析49例胎儿染色体异常的中孕期超声表现。结果:49例胎儿非整倍体患者中42例有异常超声表现,30例为超声形态结构异常,18例发现超声软指标,其中6例合并结构异常,7例超声未见明显异常。结论:大部分非整倍体胎儿中孕期可有异常的超声表现,包括形态学和软指标上的异常。提示当胎儿中孕期有异常的超声表现时,应考虑染色体异常的可能性,并提供相应的遗传学咨询。     

颈项透明层联合无创DNA诊断在胎儿染色体非整倍体异常疾病中的应用价值

目的探讨胎儿颈项透明层(NT)联合无创DNA诊断在胎儿染色体非整倍体异常疾病中的应用价值。方法选取2012年9月至2017年4月期间于我院就诊的1 235例孕妇,分别采用NT、无创DNA和NT联合无创DNA进行诊断。分析比较三种方法的诊断价值。结果 NT检测显示患病胎儿的NT值为(2.95±0.26)mm,高于正常胎儿的(1.65±0.22)mm,差异有统计学意义(t=5.24,P<0.05);患病胎儿无创DNA诊断值为8.54~16.32,平均诊断值为12.87±1.87;无创DNA诊断中12例为21-三体,诊断值为8.54~11.48;6例为18-三体,诊断值为12.48~16.32;7例为13-三体,诊断值为10.83~14.35;6例为性染色体异常,诊断值为11.40~13.76。联合诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、有效性均为100.00%,略高于无创DNA,高于单独NT诊断的敏感性、阳性预测值。结论胎儿染色体异常能引起NT明显增厚,在此基础上联合无创DNA诊断,能明显提高胎儿产前染色体非整倍体异常疾病的诊断效果。     

高通量测序技术在胎儿染色体非整倍体检测中的临床应用

目的探讨高通量测序技术行孕妇外周血浆中游离DNA检测胎儿染色体非整倍体的可行性。方法选择2011年11月-2014年7月,在浙江省温州市中心医院接受孕妇外周血中游离胎儿DNA检测的孕妇共3 447例,孕周为12周~33周,对检测结果阳性者行介入性穿刺及胎儿染色体分析,对检测结果阴性者随访。结果 38例均行介入性产前诊断,其中21-三体检测阳性者22例,诊断符合率为100%;18-三体检测阳性者3例,均行羊膜腔穿刺,核型均为47,XN,+18;13-三体检测阳性者1例,与核型分析相符。结论高通量测序技术行胎儿染色体非整倍体检测,敏感性、特异性高,可作为二次筛查方法,减少介入性产前诊断的压力。     

Identifiler~(TM)系统在产前染色体非整倍体快速检测中的应用

正染色体异常是严重的先天性疾病,由于其不可治愈,给家庭和社会带来沉重的经济和精神负担,产前诊断作为二级预防措施一直是降低此类疾病发生率的主要途径~([1])。短串联重复序列(STR)多态性符合孟德尔遗传规律,具有杂合性高、多态信息量大和高灵敏度等特点,已广泛应用于法医学亲子鉴定、个体识别及人类进化等研究中~([2])。本研究利用Iden-     

NIPT在胎儿染色体非整倍体产前筛查中的应用

目的 通过对孕妇行无创产前基因检测(NITP)和孕妇行血清学产前筛查,探讨NIPT在胎儿染色体非整倍体产前筛查中的效能.方法 选取天津市南开区妇女儿童保健和计划生育服务中心2016年1月1日-2020年12月31日行NIPT检测的16799例孕妇筛查结果,同时选取2015年1月1日-2019年12月31日行血清学产前筛...     

探讨无创产前基因检测胎儿染色体非整倍体技术的应用

我国为出生缺陷的高发国家,降低出生缺陷,以预防为主.目前我国以产前血清学筛查、超声检测和产前诊断技术为主要预防手段,随着母体外周血中游离DNA的发现和基因测序技术的发展,无创胎儿染色体非整倍体检测技术集合了多项优势,为临床提供新的技术支持.本研究对近年来无创产前诊断国内外发展状况进行综述,为进一步临床研究与应用提供参考.     

染色体非整倍体嵌合在产前诊断中的研究进展

染色体嵌合现象一直是产前诊断中的难点之一,受到标本来源、实验室体外培养等因素影响,且临床结局多样,给遗传咨询带来困难。针对这些问题,本文将对产前诊断中嵌合体的类型、机制、实验室评估方法、侵入性诊断技术,在遇到嵌合体时的处理方式以及嵌合体现象对无创产前检测与核型诊断不一致的影响作一综述。     

应用QF-PCR技术对胎儿常见非整倍染色体的快速诊断

目的探讨多重荧光定量PCR(QF-PCR)技术在快速产前诊断常见非整倍染色体中的临床应用价值。方法应用QF-PCR技术快速诊断205例产前羊水标本中的13、18、21、X、Y染色体,并与常规核型分析结果对比。结果 205例产前诊断标本QF-PCR法共检出17例非整倍染色体,其中10例21三体、3例18三体、1例13三体和3例性染色体异常,与染色体核型分析结果一致;另有1例平衡易位、1例嵌合体及3例倒位核型无法通过QFPCR检测出,两种方法一致性97.6%。结论QF-PCR作为一种快速诊断常见非整倍染色体技术,结果准确可靠,可在产前诊断应用中发挥重要作用。     

染色体非整倍体无创产前检测技术质控要点及临床应用进展

基于下一代测序(next generation sequencing,NGS)技术的染色体非整倍体无创产前检测技术是产前诊断领域的重要突破,其检测原理简单、技术灵敏度和准确性很高,已成为目前非整倍体产前筛查发展及推广的主要方向。但由于NGS技术检测流程复杂,影响因素较多,需要在样本采集、运输、核酸提取、文库构建、上机测序、数据分析各个关键节点进行质控。同时,由于其试剂成分复杂、技术难度大、社会关注度高,也需对注册产品指标进行明确。鉴于此,本文对染色体非整倍体无创产前检测技术质控要点、产品规范要求及临床应用状况进行简要评述。