安徽汉族人群血小板膜糖蛋白Ⅱb基因多态性与冠心病的相关性

正近年来,我国冠心病(coronary heart disease,CHD)的发病率呈上升趋势,严重威胁人们的健康。血栓形成易导致冠状动脉闭塞,引起心肌梗死、心绞痛,是CHD患者病情加重的主要始发因素~[1]。血小板膜糖蛋白(glycoprotein,GP)覆盖在血小板质膜表面,在血小板活化和血栓形成中发挥关键作用~[2-3]。目前已发现GP的5种血小板膜受体;GP与受体在一定条件下形成复合体,调节血小板性血栓的形成,其中GPⅡb HPA-3基因具有重要作     

血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa基因多态性与血小板输注疗效的关系

目的通过对98例患者血小板膜糖蛋白（GP）Ⅱb／Ⅲa基因多态性及血小板抗体的检测,探讨其与血小板输注疗效的关系。方法采用聚合酶链反应（PCR）扩增结合测序的方法检测患者GPⅡb／Ⅲa基因中5个外显子的9个多态性位点,采用固相凝集法检测患者血小板抗体。结果98例患者中只检测到GP11b基因的第26外显子存在T18809G变异,导致Ile843Ser多态性,产生HPA-3aa／ab／bb血型的3种基因型。此3种基因型均与血小板抗体产生相关,造成血小板输注无效。98例患者的血小板抗体阳性率为52．0％,1468袋血小板输注总有效率为77．8％,其中65袋配合性血小板输注的有效率为83．1％。3种基因型之间均无明显差异。结论血小板特异性及相关性抗体的存在是造成血小板输注无效的主要免疫性因素,GP11b基因上的HPA-3多态性与血小板输注无效有关。     

蛋白激酶A抑制剂对血小板膜糖蛋白I bα表达及血小板功能的影响

目的 探讨蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)对血小板膜糖蛋白(Glycoprotein,GP)I bα表达的调控作用.方法 用健康人洗涤血小板与PKA抑制剂H89温育.用Westem blot检测血小板悬液中GP I bα的酶切片段糖萼蛋白(glycocalicin,GC),并用流式细胞术检测GP I bα的膜表达量.用Western blot检测血小板骨架蛋白的酶切程度来确定钙依赖蛋白酶(calpain)活性,并用流式细胞术检测血小板表面calpain的表达.用血小板聚集仪检测PKA抑制剂H89对瑞斯托霉素诱导的血小板聚集功能的影响.结果 洗涤血小板经H89处理后,血小板表面GP I bα被酶切并释放于血小板悬液中,使血小板表面GP I bα的表达水平显著降低(P＜0.05).多种calpain抑制剂与血小板预温育均可减少GP I bα的酶切程度,表明PKA抑制剂所致的酶切是calpain依赖性的.肌动蛋白结合蛋白(actin-bindingprotein,ABP)和踝蛋白(talin)的酶切表明calpain可被PKA抑制剂激活,流式细胞术结果 表明calpain在血小板表面有所表达.血小板经PKA抑制剂处理后,瑞斯托霉素诱导的聚集功能受到抑制.结论 抑制血小板PKA活性,可导致calpain依赖性的GP I bα酶切,使GP I bα膜表达量减低,并导致GP I bα依赖的血小板聚集功能减低.     

血小板膜糖蛋白Ⅰbβ基因VNTR多态性与脑梗死的相关性

目的探讨中国哈尔滨地区汉族人群血小板膜糖蛋白Ⅰbα(platelet membrane glvcoproteinⅠbα,GPⅠbα)基因可变数目串联重复序列(variable Brimber of tandem repeats,VNTR)多态性与脑梗死之间的关系。方法选择哈尔滨地区汉族人,137例经脑CT或MRI及临床检查确诊的脑梗死患者作为脑梗死组,其中男73例,女64例;105例查体者作为对照组,应用PCR技术进行VNTR多态性检测。结果脑梗死组中有吸烟、高血压及糖尿病史的比例明显高于对照组(P<0.05),而脑梗死组与对照组之间年龄、性别比较无显著性差异(P>0.05)。试验中检测出五种基因型,分别为BC、BD、CC、CD、DD。未发现含A等位基因的个体,也没有发现B等位基因纯合子。脑梗死组GPⅠbαVNTR基因型分布与对照组比较无统计学意义(P=0.309)。B等位基因频率在脑梗死组较对照组高,但无统计学意义(OR=3.16,P= 0.063)。多因素Logistic回归分析结果:各基因型和等位基因不是影响脑梗死的独立因素。结论哈尔滨地区汉族人群血小板GPⅠbα基因VNTR多态性与脑梗死可能无相关性。     

血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa基因Leu33Pro多态性与缺血性脑卒中的 …

目的：探讨中国人缺血性脑卒中与血小板膜糖蛋白（ＧＰ）Ⅱｂ／Ⅲａ基因Ｌｅｕ３３Ｐｒｏ多态性之间的关系。方法：利用ＰＣＲ技术和分子杂交技术对北京地区２９４例缺血性脑卒中患者进行ＧＰⅡｂ／Ⅲａ基因Ｌｅｕ３３Ｐｒｏ多态性的检测和分析。并与２７９例北京地区的非卒中对照进行比较。结果：缺血性脑卒中患者ＧＰⅡｂ／Ⅲａ基因Ｌｅｕ３３Ｐｒｏ多态性的基因型频率和等位基因频率与对照组相比无明显差异。结论：ＧＰⅡｂ／Ⅲａ     

血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa的结构及激活机制研究进展

1974年Nurden和Caen发现血小板聚集障碍引起的的血小板无力症主要分子机制是膜缺失GPⅡb／Ⅲa，从而开展了GPⅡb／Ⅲa与血小板聚集的相关性研究，此后一系列的研究证实，     

2型糖尿病血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa、GMP-140及血小板聚集率的改变及其临床意义

目的观察 2型糖尿病患者血小板膜糖蛋白 b/ a复合物、GMP-1 40及血小板聚集率的改变及其临床意义。方法应用流式细胞术 ( F CM)观察 6 4例 2型糖尿病患者及 2 0例正常对照者血小板膜上 GP b/ a复合物及 GMP-1 40的表达阳性率 ,同时检测其血小板聚集率 ( PAg R)。结果 FCM测得的血小板膜上 GP b/ a表达阳性率糖尿病合并血管病变组为 ( 76 .2 3± 1 2 .0 4) %、无血管病变组为 ( 72 .6 8± 1 2 .6 0 ) % ,均明显高于正常对照组 ( 49.6 4± 1 0 .1 8) % ( P<0 .0 1 )。 GMP-1 40表达阳性率合并血管病变组 ( 8.86±2 .1 7) % ,明显高于无血管病变组 ( 5 .74± 2 .2 3 ) % ( P<0 .0 1 ) ,两者均明显高于正常对照组 ( 3 .2 2± 1 .6 4) % ( P<0 .0 1 )。同时合并血管病变组的 PAg R与无血管病变组及正常对照组相比 ,有显著性差异 ( P<0 .0 1 )。结论检测 GP b/ a、GMP-1 40及 PAg R能预测糖尿病患者血小板活化状态 ,对防治 2型糖尿病及其血管病变的发生、发展具有重要意义     

抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa单克隆抗体对原发性血小板减少性紫癜诊断价值的研究

目的 旨在探讨血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa单克隆抗体（Ⅱb/Ⅲa McAb）检测对原发性血小板减少性紫癜（ITP）的诊断价值。方法 共检测成人慢性ITP114例，应用Ⅱb/Ⅲa McAb(SZ-21 SZ-22)与ITP患者的血小板共同孵育，用吸光度计检测其吸光度值并与正常值相比较（做为结合值），如此值＜0．5为阳性，即判定患者血小板膜上原已结合有抗Ⅱb/Ⅲa的自身抗体。同时用竞争性酶联免疫吸附法检测患者的血小板相关IgG(PA IgG)。以非ITP性血小板减少患者做为对照组。结果 114例成人慢性ITP中，GPⅡb/Ⅲa检测阳性率为49％；非ITP组无1例假阳性。ITP组PAIgG阳性率为64％；非ITP组假阳性率为26．6％。结论 实验证实本检测法特异性好，操作简单技术稳定，对ITP的诊断、疗效观察及发病机理研究具有实用价值。     

100例脑梗死患者血小板糖蛋白Ⅰbα基因多态性测定及临床意义的研究

目的探讨血小板糖蛋白Ⅰbα基因HPA2多态性在脑梗死发病中的作用。方法以分子生物学技术采用PCR方法测定100脑梗死患者与正常对组血小板糖蛋白Ⅰbα基因HPA2多态性。结果100例脑梗死患者组、大动脉粥样硬化型脑梗死患者组及小动脉闭塞型脑梗死患者组(TOAST分型)与相应对照组之间GPⅠbαHPA2基因型频率的分布差异无显著性;大动脉粥样硬化型中杂合突变型比例(16.1%)要高于小动脉闭死型中杂合突变型比例(10.1%),但差异无显著意义。结论GPⅠbαHPA2基因杂合突变型可能并非是脑梗死的危险因素。     

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa基因Leu33Pro多态性与缺血性脑卒中的关系

目的 :探讨中国人缺血性脑卒中与血小板膜糖蛋白 (GP)Ⅱb/Ⅲa基因Leu33Pro多态性之间的关系。方法 :利用PCR技术和分子杂交技术对北京地区 2 94例缺血性脑卒中患者进行GPⅡb/Ⅲa基因Leu33Pro多态性的检测和分析 ,并与 2 79例北京地区的非卒中对照进行比较。结果 :缺血性脑卒中患者GPⅡb/Ⅲa基因Leu33Pro多态性的基因型频率和等位基因频率与对照组相比无明显差异。结论 :GPⅡb/Ⅲa基因Leu33Pro多态性可能不是中国人群缺血性脑卒中发病的遗传学危险因素。     

ACS患者P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体及血小板聚集率的研究——附80例分析

目的：探讨不同类型ACS患者P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体及血小板聚集率的变化。方法：测定80例ACS患者[其中AMI组35例、不稳定型心绞痛（un-stableangina,UA）45例]和同期56名健康体检者（对照组）的P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体及血小板聚集率,并进行比较：P-选择素及血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体采用流式细胞仪检测,血小板聚集率采用四通道血小板聚集仪检测。结果：VAMI组的P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体、血小板聚集率分别为（5．8±0．4）％、（5．7±0．3）％、（67±10）％,UA组相应为（5．6±0．3）％、（5．5±0．4）％、（55±10）％,对照纽相应为（2．6±0．3）％、（3．3±0．2）％、（46±8）％。AMI组和UA组的P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体、血小板聚集率水平均较对照组高（均为P〈0．01）,而AMI组上述3项指标的水平均较UA组高（P〈0．05～0．01）。结论：ACS患者的P-选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体、血小板聚集率水平均较正常人高,对上述3项指标的检测有助于ACS类型的筛选,早期发现AMI,以便临床采取及时有效的干预措施。     

天津地区汉族人血小板膜GPⅡb HPA-3基因多态性与缺血性脑卒中复发的关系

目的 本研究了解天津地区汉族人群血小板膜GPⅡb HPA-3基因多态性的分布情况,探讨其与缺血性脑卒中（IS）复发的关系.方法 应用聚合酶链式反应结合限制性内切酶片段长度多态性（PCR-PFLP）方法对全部样本进行基因分型,并抽样测序验证.结果 首发病例组ab 35.1％、aa 32.0％、bb33.0％、a等位基因49.5％、b等位基因50.5％;对照组分别为23.7％、51.1％、25.2％、63.0％、37.0％.b等位基因频率IS组与对照组分别是55.3％、37.0％,P=0.000.首发组与复发组等位基因比较有显著性,其中b等位基因频率分别是50.5％、64.2％,P=0.023.结论 血小板膜GPⅡb HPA-3基因多态性与天津地区汉族人IS发生及复发相关,bb基因型可能是该人群IS的危险因素及复发高危因素,b等位基因可能是该人群IS发病及复发的危险因素.     

绿色荧光蛋白(GFP)融合于人整合蛋白αⅡb C端不影响αⅡbβ3复合物在CHO细胞正常表达

本研究选择αⅡb作为靶蛋白观察绿色荧光蛋白(GFP)标记对αⅡbβ3复合物生物合成过程和表达的影响。从人αⅡb表达载体p3．1—2b中经PCR扩增的αⅡb基因全长cDNA，插入表达载体pEGFP—N1中构建αⅡbGFP融合蛋白表达载体，测序正确后利用脂质体将重组质粒与表达人整合蛋白B，亚基的真核表达质粒p3．1—3a共转染CHO细胞，对转染后细胞用Western blot方法鉴定αⅡbGFP基因在CHO细胞中的表达并用激光共聚焦显微镜确定融合蛋白的细胞内定位，结果表明：经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒，Western blot证明转基因CHO细胞有人αⅡbGFP基因的表达，融合蛋白细胞内定位研究显示αⅡbGFP可以由内质网转运至高尔基体．．结论：成功构建了人αⅡbGFP融合蛋白真核表达载体；GFP融合于αⅡbC端不影响αⅡbβ3复合物在CHO细胞的正常表达。     

激素替代疗法对绝经后妇女血小板活化的影响 --附15例报告

目的:探讨激素替代疗法(hormonereplacementtherapy,HRT)对绝经后妇女凝血系统中血小板活化的影响。方法:选择15名血脂正常的绝经妇女,用流式细胞技术(flowcytometry,FCM)测定绝经妇女使用HRT前后血小板膜糖蛋白CD41、CD62P的含量,并以15名同年龄未绝经妇女作为对照组。结果:①绝经组血小板活化率CD62P及相对荧光强度CD62P、CD41较对照组高(P<0.05)。使用HRT前后,其CD62P(0.36±0.06)降至(0.30±0.06)、CD62P(I)(38±6)降至(27±5)、CD41(I)(470±74降至(303±73),有统计学意义(P<0.05)。结论:绝经妇女血小板活化率较同龄未绝经妇女的高。使用个月后,血小板活化率显著下降。     

佐剂性关节炎大鼠外周血血小板α颗粒膜糖蛋白的变化及新风胶囊对其影响

目的:观察佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis,AA)血小板α颗粒膜糖蛋白(granule membrane protein 140,GMP-140)的变化及新风胶囊对其的影响。方法:将60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和甲氨喋呤、雷公藤多苷片、新风胶囊治疗组,每组12只,用弗氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant,FCA)0.1ml分别向除正常对照组以外的其余大鼠右后足跖皮内注射诱发大鼠产生关节炎,采用流式细胞仪检测并观察各组大鼠血小板GMP-140的变化。结果:①与正常对照组相比,模型对照组大鼠血小板GMP-140及PLT、PCT、足跖肿胀度、关节炎指数显著升高(P<0.05或P<0.01)。②与模型对照组相比,治疗组均能降低GMP-140和PLT、PCT、足跖肿胀度、关节炎指数(P<0.05或P<0.01)。③AA大鼠的血小板参数GMP-140与PLT、PCT、足跖肿胀度、关节炎指数呈正相关(P<0.01或P<0.05)。结论:AA大鼠存在血小板的活化,血小板活化标志物GMP-140与足跖肿胀度、关节炎指数炎症指标及反映疾病活动性指标PLT、PCT具有相关性。GMP-140在关节炎的发生发展中起着重要作用。新风胶囊与甲氨喋呤、雷公藤多苷片一样能降低AA大鼠的足跖肿胀度、关节炎指数、PLT、PCT,而且在增加大鼠体重方面优于其他两个治疗组。新风胶囊可能通过降低血小板GMP-140,抑制血小板活化引起的炎症反应。