雷公藤甲素及地塞米松对哮喘豚鼠体外嗜酸细胞凋亡与Fas mRNA表达的影响

目的：观察雷公藤甲素及地塞米松在体外对哮喘豚鼠肺泡灌洗液中不同密度嗜酸细胞（Eos）凋亡及Fas mRNA表达的影响，探讨其促进哮喘Eos凋亡的机制。方法：卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型48h后行支气管肺泡灌洗，分离不同密度Eos。雷公藤甲素（TP）（10^-7～10^-4mot／L）或地塞米松（DM）（10^-10～10^-5mot／L）干预24h，原位杂交检测Eos的Fas mRNA表达。TUNEL法检测细胞凋亡。结果：TP或DM干预24h，Eos凋亡增加，Fas mRNA表达增强，并且呈剂量依赖性。Fas mRNA的表达与Eos凋亡呈正相关。结论：TP及DM可提高Fas mRNA表达，促进Eos凋亡。Fas可能是TP及DM调节Eos凋亡的通路之一。     

电离辐射对EL-4细胞凋亡与坏死的影响

目的 研究不同剂量电离辐射对EL－4细胞凋亡和细胞坏死的影响。方法 采用PI和Hoechst 33342双染、流式细胞术检测。结果 实验结果表明：给予50－200mGy低剂量照射后6h,EL－4细胞凋亡和坏死较对照组没有升高,而给予1．0－8．0Gy大剂量X射线照射后6h,细胞凋亡较对照组有明显升高,4．0Gy以上剂量,细胞坏死显著升高。结论 一定剂量的电离辐射不仅可以诱导凋亡的产生,而且可直接导致细胞坏死,即细胞的死亡模式与受照剂量有关。     

地塞米松对尾悬吊大鼠肺组织细胞凋亡的影响

目的　探讨地塞米松对尾悬吊大鼠肺组织细胞凋亡的影响。方法　采用尾悬吊大鼠模拟失重模型 ,将健康雄性SD大鼠分为尾悬吊组 (尾悬吊 7天模拟失重 )、地塞米松干预组 (尾悬吊第 3天开始腹腔注射地塞米松 5mg/kg,共 5天 )和正常对照组 ,每组 10只 ,用TUNEL技术检测肺组织细胞凋亡情况。结果　尾悬吊组凋亡指数显著高于对照组 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ,地塞米松干预后细胞凋亡水平明显低于尾悬吊组 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论　尾悬吊模拟失重的大鼠肺组织细胞凋亡指数增高 ,而地塞米松可抑制模拟失重大鼠肺组织细胞的凋亡。     

地塞米松对嗜酸性粒细胞凋亡及Fas mRNA表达的影响

目的:观察地塞米松对哮喘豚鼠体外不同密度嗜酸性粒细胞(Eos)凋亡及Fas mRNA表达的影响,探讨其促进哮喘Eos凋亡的机制。方法:卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型48 h后行支气管肺泡灌洗,分离不同密度Eos。地塞米松(DM)(10-10~10-5mol/L)干预24 h,原位杂交检测Eos的Fas mRNA表达,3'末端脱氧核苷转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷(d-UTP)缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡。结果:DM干预24 h,可见Eos凋亡增加,以低密度Eos(HEos)为明显,与对照组相比,在10-9mol/L时出现显著差别(P<0.05);DM可使Eos表达Fas mRNA增加,并具有剂量依赖性;HEos与NEos相比,其Fas mR-NA表达无明显差别;Eos Fas mRNA表达与其细胞凋亡呈正相关。结论:DM可提高Fas mRNA表达,促进Eos凋亡。Fas可能是DM调节Eos凋亡的通路之一。     

不同浓度地塞米松对人骨髓间充质干细胞体外增殖及凋亡的影响

目的观察地塞米松对体外培养人骨髓间充质干细胞增殖及凋亡的影响。方法利用1.073g/mLPercoll分离液以梯度密度分离法获取人骨髓间充质干细胞（hMSCs）,进行体外培养。成骨诱导组细胞用地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸钠处理,分别进行ALP染色和矿化结节染色。实验组细胞分别以10^-9mol/L、10^-8mol/L、10^-7mol/L和10^-6mol/L地塞米松加以干预,MTT法检测各组细胞的增殖率;流式细胞仪定量分析hMSCs的凋亡率。结果成骨诱导组细胞ALP染色和矿化结节染色均为阳性,对照组为阴性;低浓度（10^-9mol/L）地塞米松对细胞的体外增殖无明显影响（P〉0.05）,10^-8mol/L及以上浓度地塞米松可明显抑制细胞的增殖（P〈0.01）;hMSCs凋亡率随地塞米松浓度的增加而升高（P〈0.01）。结论地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸钠可促使hMSCs成骨分化,10^-8mol/L及以上浓度的地塞米松可明显抑制细胞的增殖,地塞米松能促进体外培养的人骨髓间充质干细胞凋亡。     

急性肺损伤后RGS4的表达变化及地塞米松对其的影响

目的：研究急性肺损伤后RGS4的表达变化及地塞米松对其的影响,以探讨RGS4在急性肺损伤发病机制中的作用。方法：采用油酸性急性肺损伤模型,以肺含水率为肺水肿的指标,采用Westernblot和免疫组织化学方法检测急性肺损伤后RGS4的表达变化。结果：油酸性急性肺损伤后6h肺含水率即显著升高,24h达到高峰,48h较24h有所降低但仍高于生理盐水组;RGS4蛋白含量在伤后6、24、48h均显著升高,与肺含水率的变化趋势一致。地塞米松处理后可显著降低各时点的肺含水率和RGS4蛋白含量。结论：RGS4参与了油酸性急性肺损伤的发病机制,糖皮质激素治疗可降低急性肺损伤后的RGS4蛋白含量。     

一氧化氮在神经元凋亡中的作用

生理性细胞死亡 ,又称为编程性细胞死亡(ＰＣＤ) ,形态学上表现为细胞凋亡。近些年 ,实验证明神经系统的疾病 ,如癫、帕金森病 (ＰＤ)、老年性痴呆 (ＡＤ)和脑缺血等 ,与细胞凋亡之间存在着密切关系 ,ＰＣＤ为衰老及老年性痴呆等神经退行性疾病神经元丧失的原因之一 ,而内外因素激活细胞自身基因程序常易引起神经元凋亡。作者现就凋亡的概念、一氧化氮 (ＮＯ)在凋亡发生中的作用 ,以及凋亡与神经系统常见疾病的关系作一综述。1　凋亡的定义细胞凋亡是指细胞在一定的生理或病理条件下 ,遵循自身的程序自己结束其生命的过程 ,以胞核皱缩、染…     

细胞凋亡在燃煤型砷中毒肝损伤中的作用

目的 通过观察肝细胞表面分子介导细胞凋亡的Fas、FasL及相关基因Bax、Bcl-2、Bcl-X／L的变化来探索燃煤型砷中毒肝损伤的分子机制。方法 对25例砷中毒肝损伤患者按职业性中毒性肝病诊断标准分为A组4例（无明显肝病患者）、B组11例（轻度砷中毒肝损伤患者）、C组10例（中、重度砷中毒肝损伤患者）。采用免疫组化ABC法进行Fas、FasL、Bax、Bcl-2、Bcl-X／L检测。结果 采用PEMS统计软件进行Radit分析。结果Fas、FasL表达在肝损伤较重的C组比肝损伤较轻的B组显著增强，两组间分级构成上差异均有统计学意义（P〈0．05）；Bax表达在B、C两组间分级构成上差异均有统计学意义（P〈0．05），而Bcl-2和Bcl-X／L表达在B、C两组间分级构成上差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论 Fas、FasL的表达程度在肝损伤较重的C组比肝损伤较轻的B组显著增强，其阳性表达多分配在Ⅱ、Ⅲ级。Bax在肝损伤程度不同的B、C组间的表达强度及分布随肝损伤加重而增强。而抗凋亡蛋白bcl-2和bcl-X／L在两组间的表达强度及分布则基本一致。推测砷可能通过上调凋亡基因蛋白Fas／FasL和bcl-2家族中促凋亡蛋白Bax的表达而启动肝细胞的胞内凋亡信号传递过程，导致肝细胞凋亡增加。     

NF-κB活化在烟雾吸入性损伤发生中的作用及地塞米松对其影响

为探讨NF－κB活化在大鼠烟雾吸入性损伤发生中的作用及地塞米松对NF－κB活化的影响，制作大鼠烟雾吸入性损伤模型，将大鼠随机分为正常对照组、烟雾致伤组及地塞米松治疗组，应用免疫组化方法观察伤前及伤后2、6、12、24、48、72h肺组织NF－κBP^65、IκB-α、TNF-α、ICAM-1蛋白表达的动态变化。结果显示，烟雾吸入性损伤后肺组织NF－κBP^65、TNF-α、ICAM－1蛋白表达升高，IκB-α表达降低。而地塞米松治疗组则下调NF－κBP^65、TNF-α、ICAM-1表达，上调IκB-α表达。提示NF－κB活化参与了烟雾吸入损害的发生、发展，而地米松则抑制NF－κB活化，部分阻断细胞因子及粘附分子产生，从而减轻炎症性损害。NF－κB活化可能是烟雾吸入性损伤炎症发展的关键点，从而为从转录水平作为靶点治疗烟雾吸入性损伤提供了理论依据。     

线粒体在细胞凋亡中的作用研究进展

在细胞凋亡中,线粒体起着中心调控作用,在某种意义上,线粒体可以决定细胞的生存或死亡[1,2]。线粒体具有氧化磷酸化、传递电子、贮存Ｃａ2+、能量代谢、抗活性氧化等重要生理作用,它为细胞的各种生命活动提供基础能量。细胞凋亡过程中许多重要事件的发生都与线粒体密切相关,包括Ｃａｓｐａｓｅ激活因子的释放,如细胞色素Ｃ(ＣｙｔｏｃｈｒｏｍｅＣ,ＣｙｔＣ)、电子传递链的改变、线粒体膜电位(ΔΨｍｔ)的丧失、细胞内氧化还原状态的改变、Ｂｃｌ-2家族促进和抑制凋亡蛋白的参与等。不同信号的传导最终都集中到线粒体上来启动或抑制这些…     

地塞米松治疗原发性三叉神经痛疗效观察

目的：观察地塞米松短程静点治疗原发性三叉神经痛的临床疗效.方法：将40例原发性三叉神经痛患者分为对照组16例和研究组24例,均给予常规药物治疗配合针刺运动治疗,对照组在此基础上加用卡马西平,研究组则加用地塞米松,采用目测类比疼痛评分法（VAS）分别于治疗前后及半年后予以测评,观察治疗后患者面部疼痛缓解率.结果：研究组与对照组有效率分别为91.7%和75.0%,研究组与对照组总有效率的差异有显著地统计学意义（P＜0.05）,地塞米松短程静点治疗原发性三叉神经痛疗效优于口服卡马西平.结论：地塞米松短程静点治疗原发性三叉神经痛显示出良好的治疗效果,且治疗费用低,病人经治疗后无明显不良反应出现,值得在临床上推广应用.     

The Effect of the Dexamethasone Treatment on Trigeminal Neuralgia

目的:观察地塞米松短程静点治疗原发性三叉神经痛的临床疗效.方法:将40例原发性三叉神经痛患者分为对照组16例和研究组24例,均给予常规药物治疗配合针刺运动治疗,对照组在此基础上加用卡马西平,研究组则加用地塞米松,采用目测类比疼痛评分法(VAS)分别于治疗前后及半年后予以测评,观察治疗后患者面部疼痛缓解率.结果:研究组与对照组有效率分别为91.7%和75.0%,研究组与对照组总有效率的差异有显著地统计学意义(P＜0.05),地塞米松短程静点治疗原发性三叉神经痛疗效优于口服卡马西平.结论:地塞米松短程静点治疗原发性三叉神经痛显示出良好的治疗效果,且治疗费用低,病人经治疗后无明显不良反应出现,值得在临床上推广应用.     

炎症在内支架植入术后再狭窄中的作用及地塞米松干预的实验研究

目的 观察活化巨噬细胞培养上清液对原代培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞（VSMCs）增殖的影响,以及地塞米松的干预作用。材料与方法 体外培养大鼠VSMCs并制备活化巨噬细胞培养上清液,利用四甲基偶氮唑盐（MTT）法及^3H-胸腺嘧啶脱氧核苷（^3H-TdR）掺人法检测不同浓度的活化巨噬细胞上清液对VSMCs增殖的效果,并用地塞米松进行干预,观察地塞米松对巨噬细胞活化及其对VSMCs增殖的影响。结果 （1）活化巨噬细胞培养上清液促进VSMCs的增殖,呈浓度依赖性,随浓度增加,吸光度（OD）值及每分钟闪烁次数（cpm）值也相应增加,方差分析,值分别为15．23和23．98（P〈0．01）;两两比较各组间差异显著（P〈0．05）;（2）不同浓度地塞米松干预后OD值及cpm值随地塞米松浓度增加而降低,方差分析F值分别为63．36及13．07（P〈0．01）;两两比较10^-11mol／L、10^-9moL／L及对照组之间无统计学差异,其余各组间差异显著。结论 活化巨噬细胞促进VSMCs增殖,表明炎症反应是血管内支架植入术后再狭窄的重要机制之一。地塞米松能够抑制其促增殖作用,可能在一定程度上达到预防或治疗再狭窄的作用。     

The Role of Apoptosis in the Response of Cells and Tumours to Mild Hyperthermia

Summary

There is now abundant evidence that apoptosis, the cell death mechanism responsible for physiological deletion of cells, can be triggered by mild hyperthermia. However, the overall importance of this mode of death in heated tumours has not yet been established. In this light and electron microscopic study, apoptosis induced by 43°C or 44°C water bath heating for 30 min in a range of murine and human tumours growing in vitro and in four murine tumours growing as solid nodules in vivo, was identified on the basis of its characteristic morphology, and the amount present quantified. Apoptosis was found to play a variable role in the response of tumours to heating, with the lowest levels produced in human melanoma lines (< 1%) and the highest levels in some Burkitt's lymphoma lines (up to 97%). In these latter tumours the induction of apoptosis is clearly a major component of the hyperthermic response.     

β4整合素结合蛋白调控成纤维细胞胞外基质生成的实验研究

目的探讨β4整合素结合蛋白（ITGB4BP）对成纤维细胞胞外基质生成的调控作用。方法分别构建、包装能在哺乳动物细胞中促进和抑制ITGB4BP表达的腺病毒表达载体pAdEasy-ITGB4BP-EGFP和慢病毒表达载体Lentivirus-FIV-H1／U6-copGFP-ITGB4BP-RNAi,经筛选鉴定有效后,分别感染人正常皮肤成纤维细胞和增生性瘢痕（HTS）成纤维细胞,利用ELISA检测细胞培养上清内基质金属蛋白酶（MMP-9）、转化生长因子-β1（TGF-β1）和I型胶原蛋白（collagen I）的表达情况。结果正常皮肤成纤维细胞内IT—GB4BP高表达后,引起MMP-9、TGF-β1和collagen I表达降低;反之HTS成纤维细胞内ITGB4BP表达抑制后,MMP-9、TGF-β1和collagen I表达增高。结论ITGB7BP对MMP-9、TGF-β1和collagen I表达具有重要调节功能。提示ITGB4BP可能具有抗纤维化的重要功能,为下一步深入探讨HTS的形成机制提供了重要依据。     

去氢雌马酚对急性早幼粒白血病NB4细胞的增殖抑制作用及其初步机制研究

目的研究黄酮类化合物去氢雌马酚（dehydroequol）对急性早幼粒白血病NB4细胞的增殖抑制作用,并对其作用机制进行初步研究。方法应用噻唑蓝比色法及台盼蓝计数法观察去氢雌马酚及其结构类似物对不同肿瘤细胞增殖的影响,并应用细胞周期分析及细胞凋亡检测研究去氢雌马酚抑制NB4细胞增殖的机制。结果通过比较去氢雌马酚及其3个结构类似化合物对NB4细胞的增殖抑制作用。发现去氢雌马酚抗肿瘤活性最强,并且去氢雌马酚能显著抑制多种肿瘤细胞增殖,其中对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞的抑制作用更显著,并能浓度与时间依赖性地抑制NB4细胞增殖,引起NB4细胞G1期阻滞并诱导细胞凋亡。结论去氢雌马酚对急性早幼粒白血病NB4细胞的增殖有很强的抑制作用,并且通过引起细胞G1期阻滞和诱导细胞凋亡而显著抑制NB4细胞的增殖。     

新型黑皮质素4受体激动剂减肥作用研究

目的筛选具有黑皮质素4受体（MC4R）高亲和活性的α-MSH类似化合物,分析其激动活性,并观察其对小鼠体质量的调控作用与可能机制。方法从大鼠下丘脑及周围组织中提取富含MC4R的膜蛋白,采用放射性配体受体结合分析,比较并找出与MC4R具有高亲和力的α-MSH类似化合物。用LANCETMcAMP384在稳定转染MC4R的HEK293细胞上测试α-MSH类似化合物对cAMP释放的影响,确定其激动活性。采用高脂饲料喂养的小鼠,将筛选出的化合物经脑室给药一定时间后,观察小鼠体质量、摄食量及血糖、血脂、瘦素及胰岛素的变化,在整体水平上分析药物效果。结果受试化合物中LK-SPL-024对脑内MC4R亲和力最高。cAMP释放实验证明LK-SPL-024与α-MSH性质相同,均为MC4R激动剂,且激动活性与α-MSH相当。脑室注射给药,与生理氯化钠溶液对照组相比能有效减少肥胖小鼠进食量,显著降低血糖、血脂浓度并提高瘦素、胰岛素浓度;具有明显降低肥胖小鼠体质量的作用。结论本研究从α-MSH类似化合物中筛选得到了与MC4R高亲和力结合的化合物LK-SPL-024,该化合物是MC4R的激动剂,具有明确的减肥效应,机制可能与其升高血清瘦素和胰岛素水平有关。     

PDLIM4基因对胶质瘤预后及胶质瘤细胞放射敏感性的影响

目的 分析PDLIM4（PDZ and LIM domain 4）基因与胶质瘤预后及放射敏感性的影响。方法 应用生物信息学技术对GSE53733芯片进行分析得出差异性表达基因,并使用免疫印迹法（Western blot）检测PDLIM4蛋白表达,实时荧光定量PCR、siRNA、MTT、流式细胞法检测、X射线照射等方法研究PDLIM4基因对胶质瘤预后及胶质瘤细胞照射敏感的相关性。结果 生物信息学分析结果提示PDLIM4在芯片中表达差异最明显（logFC=1.055 897, P<0.05）。通过40例胶质瘤的qPCR结果证实PDLIM4在高级别与低级别胶质瘤中差异表达（t=4.44, P<0.05）,并与患者生存时间具有相关性（χ²=5.52, P<0.05）,且PDLIM4基因与胶质瘤细胞的放射敏感性相关（t=35.99, P<0.05）。结论 PDLIM4基因表达水平与胶质瘤恶性程度及预后相关,并参与了细胞的X射线抵抗。     

过度训练对大鼠骨骼肌糖原含量、AMPK活性及肌膜GLUT4的影响

目的:观察过度训练后大鼠骨骼肌糖原含量、AMPK活性和肌膜GLUT4蛋白含量的变化,探讨过度训练与骨骼肌葡萄糖代谢之间的联系。方法:27只SD大鼠随机分为安静对照组(A组),大强度运动组(B组)和过度训练组(C组)。B、C组进行9周大强度耐力训练,其中B组每天训练60分钟,C组每天训练120分钟,每周训练6天。9周后分别测定各组大鼠腓肠肌糖原、AMPK活性和肌膜GLUT4含量。结果:与A组比较,B组肌膜GLUT4升高,AMPK活性显著提高,肌糖原含量有上升趋势;C组肌膜GLUT4明显低于B组,AMPK活性受到抑制,但肌糖原含量正常。结论:过度训练状态下,大鼠肌肉AMPK活性降低,GLUT4蛋白向肌膜转位受抑,可能影响肌膜葡萄糖的转运。本实验结果不支持过度训练的糖原耗竭学说。