表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对小鼠脱发模型毛发生长的影响

目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对C57BL6小鼠脱发模型毛发生长及毛发周期的影响。方法：采用松香、蜡脱毛法诱导小鼠体毛由休止期进入生长期。脱毛次日分组,各组小鼠每日分别以8%EGCG乙醇制剂、5%米诺地尔溶液、乙醇涂擦脱毛区,连续21天,记录小鼠皮肤颜色变化过程及新生毛发生长状况,并通过HE切片观察EGCG对皮肤、毛囊形态,毛囊数目的影响。结果：与阴性对照组相比,实验组和阳性对照组提前24h由粉红变为红色、推迟48h由黑色变为灰色,而基质组与阴性对照组无明显差别;实验组和阳性对照组小鼠毛囊数目在统计学上均与阴性对照组小鼠具有显著性差异。结论：EGCG可诱导小鼠毛囊进入生长期,延长生长期时间,推迟进入退行期,并刺激小鼠毛囊数目增多。     

中药育发洗剂对C57BL/6小鼠毛发生长影响的实验研究

目的:研究中药育发洗剂对C57BL/6小鼠毛发、毛囊生长周期的影响。方法:40只C57BL/6小鼠以脱毛膏脱毛2cm×4cm面积大小造模,造模成功后次日分5组(n=8):模型组、生理盐水组、空白洗剂组、米诺地尔组、中药育发洗剂组,每日涂抹给药1次,持续18d。每日同一光源下拍照1次,观察目标区小鼠皮肤颜色变化、毛发生长情况;每日固定时间毛发镜检测4次,记录毛发镜下皮肤颜色变化直至小鼠毛发长度影响检测效果;第18天取小鼠背部毛发测量毛长,取背部组织HE染色观察毛囊数量、毛囊形态、皮肤真皮层厚度。结果:中药育发洗剂组可减少小鼠皮肤由粉色到黑色的变化时间,差异有统计学意义(P0.05)。第18天毛发长度,中药育发洗剂组与米诺地尔组相当(P0.05),且较其他各组长,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组、生理盐水组、空白洗剂组相比较,中药育发洗剂组皮肤真皮层厚度明显增加,毛囊数目增多,差异有统计学意义(P0.05)。结论:中药育发洗剂可加快小鼠毛发生长、促进小鼠毛囊生长期转化进程,且其疗效与米诺地尔相当。     

睡眠剥夺对小鼠毛发生长周期的影响

目的探讨睡眠剥夺对小鼠毛发生长周期的影响。方法将72只成年C57BL/6J小鼠采用抽签法随机分为对照组和实验组, 每组36只。对照组小鼠脱毛后在水平台环境下常规饲养, 每天16 h;实验组小鼠脱毛后通过改良水平台的方法进行睡眠剥夺, 每天16 h。于实验后第1、9、19天, 取2组小鼠脱毛区皮肤组织制作HE染色切片, 通过光学显微镜观察毛囊形态, 对小鼠毛发进行分期和评分:以休止期为起始点, 设为0分;生长期Ⅰ～Ⅴ期分别设为1～5分;生长期Ⅵ期及退行期Ⅰ期设为6分;退行期Ⅱ～Ⅷ期分别设为7～13分。采用SPSS 26.0软件进行统计学分析, 毛发周期评分以±s表示, 组间同一时间点评分比较采用独立样本t检验, 组内不同时间点评分比较采用韦尔奇检验, P<0.05为差异有统计学意义。结果第1、9、19天, 对照组小鼠毛发周期评分分别为(1.00±0.57)、(5.04±0.94)、(9.52±0.87)分, 实验组分别为(0.85±0.62)、(2.40±0.50)、(6.08±0.42)分。组间比较显示, 3个时间点实验组毛发周期评分均低于对照组, 第1天差异无统计学意义(t=1...     

生姜提取物6-姜酚对毛发生长的影响和机制探讨

目的:探讨生姜提取物6-姜酚对毛发生长的影响和机制研究。方法:取高、中、低不同浓度6-姜酚分别与C57BL/6小鼠触须毛囊一起培养,11d后采用MTT法测定不同浓度6-姜酚与DPCs共培养的吸光度A值;比较不同浓度6-姜酚涂抹小鼠背部脱毛区皮肤后毛发的生长长度和皮肤组织中MMP-2,MMP-9 m RNA的数值变化。结果:不同浓度6-姜酚对DPCs以及DPCs中表达活性影响结果不同,结果表明高剂量组吸光度值明显小于低剂量组;在体内实验中,高剂量组C57BL/6小鼠背部毛发生长长度明显低于中、低剂量组,MMP-2,MMP-9 m RNA的表达随时间增加。结论:6-姜酚可明显抑制毛发的生长,其作用机制可能为通过增加皮肤组织中MMP-2,MMP-9 m RNA的表达量抑制毛发的生长。     

龟板有效成分对小鼠毛囊生长和毛发生长周期的影响

目的:观察龟板有效成分对脱发模型小鼠毛发生长及周期的影响。方法:制作小鼠休止期脱毛模型。脱毛后分组,其中阳性对照组予5%米诺地尔溶液、实验A、B、C组分别予0.15%、0.2%、0.4%龟板有效成分溶液外用于脱毛区。比较各组小鼠毛发生长差异,且在实验第19天切取小鼠背部脱毛区皮肤作HE染色及毛囊计数,观察龟板有效成分对毛囊数量的影响。结果:适当浓度的实验B组与阳性对照组的小鼠毛发生长优先于其他组;实验组小鼠毛囊毛干色素深,以终毛为主;实验组小鼠背部脱毛区皮肤毛囊数量比模型组多(P0.05),有显著统计学意义。结论:龟板有效成分能促进毛发和毛囊生长,延长毛发生长期。     

毛发诱导结合自体毛囊单位移植技术进行毛发定向重建的研究

目的 将异位诱导形成的毛发组织进行移植,实现毛发的定向重建.方法 制备新生C57鼠的皮肤细胞悬液注射于裸鼠体内,诱导形成皮下异位毛发组织,取出后在体视显微镜下分离成单个毛囊单位,移植至裸鼠体表,并进行大体观察和组织学检测.结果 按照预定密度移植后的毛发成活良好并呈周期性生长,组织学可见各时期相应的毛囊形态.结论 诱导形成的毛发组织可以作为移植物,通过毛囊单位移植的方式,实现毛发组织密度和方向的可控性重建.     

ⅩⅦ型胶原蛋白对雄激素性脱发模型小鼠毛发生长的作用及机制研究

目的探讨ⅩⅦ型胶原蛋白(COL17)对雄激素性脱发(AGA)模型小鼠毛发生长的作用及机制。方法将48只C57BL/6J小鼠建立AGA模型(脱去小鼠背部毛发并外涂二氢睾酮溶液), 采用随机数表法分为6组, 每组8只。阴性对照组, 脱毛区注射生理盐水(单点注射0.05 ml, 共5个点);阳性对照组, 脱毛区外用5%米诺地尔酊, 1 ml/d;COL17低、中、高浓度组, 在脱毛区分别注射0.5、1.0、2.0 mg/ml的COL17(单点注射0.05 ml, 共5个点);Ⅲ型胶原蛋白(COL3)、COL17(COL3+COL17)联合高浓度组, 在脱毛区注射2.0 mg/ml的COL3和COL17(单点注射0.05 ml, 共5个点)。共给药21 d, 期间观察记录各组小鼠毛发生长情况;21 d后, 取小鼠脱毛区皮肤及皮下组织制作病理切片行HE染色, 观察毛囊数量及形态变化;取小鼠脱毛区新鲜皮肤组织行总RNA测序分析, 对差异共表达基因进行基因本体论(GO)功能注释、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析和基因集富集分析(GSEA)。结果给药21 d后, 与阴性对照组相比, 阳性对...     

应用小室模型再生毛发的实验研究

目的 建立毛囊重建小室模型,并应用该模型进行毛发再生实验研究。方法 制备小室模型,分离C57BL/6新生小鼠的表皮和真皮细胞,混合后注入小室内。7 d后拆除小室,并观察创口部位的毛发再生情况。30 d后对创口部位皮肤取材,行HE染色,观察其形态结构。结果 裸鼠小室植入部位创面愈合并可见毛发再生,新生毛发大体观和镜下观与正常毛发无明显差异,且排列极性、生长密度良好。对部分无毛发再生的创面进行分析,发现模型构建过程中小室植入的位置对毛囊再生具有重要的影响。结论 应用小室模型和新生鼠表皮真皮细胞可以成功实现毛发再生,小室模型是一种可用于毛囊再生研究的良好动物模型,且小室的植入位置对该模型的成功与否具有重要影响。     

米诺地尔脂质体制剂与普通制剂对C57BL/6小鼠毛囊VEGF表达影响的对比研究

目的:探讨米诺地尔脂质体制剂与普通制剂对C57BL/6小鼠毛囊VEGF表达的影响。方法:将C57BL/6小鼠随机分组,在背部涂抹两种制剂的米诺地尔,通过小鼠皮色变化以及组织学特征对毛囊进行分期,并采用了数码照相和ImageProPlus图像分析处理系统相结合的方法对小鼠涂药部位VEGF表达进行分析。结果:米诺地尔各组小鼠毛囊从休止期转变为生长期,并且处于生长期毛囊VEGF表达阳性部位较多,而1.4%脂质体米诺地尔组较1.4%米诺地尔普通制剂组效果更显著。结论:实验结果表明米诺地尔可增强VEGF表达,而脂质体制剂较普通制剂效果更为显著。     

外源性骨髓细胞在体诱导形成毛囊上皮细胞的研究

目的 观察外源性骨髓细胞能否在体诱导形成皮肤的上皮细胞.方法 获取转增强型绿色荧光蛋白基因的C57BL/6J小鼠原代骨髓细胞和野生型C57BL/6J小鼠原代表皮干细胞,植入野生型C57BL/6J小鼠背部创面并打包.分A、B两组各10只,A组每只植入1.0×107个单纯骨髓细胞,B组每只植入混合骨髓细胞、表皮干细胞各1.0×107个.创面痊愈后应用荧光法和免疫组织化学技术检测新生皮肤内EGFP的表达.结果 两组动物3个月后创面痊愈并有完整的毛发生长.A组新生皮肤内未见EGFP的表达;B组所有新生皮肤(100%)均可见EGFP阳性细胞群,多分布在毛囊内.结论 创伤后小鼠毛囊的再生过程中,骨髓细胞-表皮干细胞接触诱导对骨髓来源细胞向毛囊上皮细胞转化至关重要.     

脐带间充质干细胞调节炎性微环境干预急性肾损伤的效应研究

目的：观察移植外源性脐带间充质干细胞（UC-MSCs）对小鼠急性肾损伤（AKI）炎性微环境的影响及对肾组织的修复作用。方法：分离培养孕后期C57BL/6雌性小鼠的UC-MSCs。另取雌性C57BL/6小鼠60只,随机分为正常对照组、AKI组、AKI＋MSC移植组,每组20只。AKI组和AKI＋MSC组用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂45 min复制AKI模型,并于模型制备成功时腹腔内注射生理盐水0.2 ml（AKI组）或1＆#215;106 UC-MSCs（AKI＋MSC组）。于第2天和第7天每组活杀10只小鼠,取眼球血及肾组织,检测血尿素氮（BUN）及血肌酐（SCr）水平;肾组织行HE染色,观察组织病理学变化;ELISA法检测肾组织匀浆中促炎因子IL-1β、TNF-α、干扰素-1（IFN-1）及抗炎因子碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、IL-10、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）的水平。结果：2 d时AKI组小鼠肾小管上皮细胞肿胀,胞质空泡性变,BUN和Cr均显著高于正常对照组,提示造模成功后肾小管受损严重,7 d稍有减轻;AKI＋MSC移植组小鼠肾功能在2 d时较AKI组有所恢复,肾组织病理学变化明显减轻（P＜0.01）,7 d基本恢复正常。ELISA结果显示,与正常对照组比较, AKI组各时间点肾组织匀浆中促炎因子的水平均显著升高（P＜0.01或P＜0.05）,抗炎因子的水平均显著降低（P＜0.01或P＜0.05）,2 d较7 d更加明显。各时间点AKI＋MSC组抗炎因子的水平较AKI组明显升高,促炎因子的水平明显下降,但与正常对照组比较差异均有显著性（P＜0.01或P＜0.05）,7d较2 d改善更明显。结论：MSC可通过减轻AKI肾组织炎症反应,调节损伤肾脏组织微环境中的细胞因子水平发挥保护肾损害的修复作用。     

间充质干细胞在小鼠体内可以向前列腺癌组织募集促进前列腺癌的生长

目的探索间充质干细胞在小鼠体内与前列腺癌组织生长的关系,以期为前列腺癌的治疗探索新的靶点。方法野生型C57BL/6小鼠经致死剂量照射后,接受EGFP绿色荧光转基因C57BL/6小鼠的MSCs以及野生型小鼠全骨髓细胞的混合移植。1月后在骨髓移植成功的小鼠身上建立前列腺癌RM-1细胞皮下移植瘤模型,检测前列腺癌肿瘤的生长情况。同时以荧光显微镜显像技术及流式细胞仪技术观察、检测MSCs在小鼠前列腺癌组织中的表达情况。结果皮下接种RM-1前列腺癌细胞后,给予小鼠尾静脉注射MSCs的实验组肿瘤的生长速度要快于注射生理盐水的对照组,肿瘤重量分别为(3.730±0.632)g、(2.019±0.254)g(P0.05);无论是骨髓移植后内源性的MSCs还是直接尾静脉注射的外源性MSCs都可以在前列腺癌组织中检测到。结论内源性以及外源性的MSCs都可以向前列腺癌组织趋化募集,并促进前列腺癌的生长。     

小鼠胆囊胆固醇结石模型的建立

目的建立简单、可靠、高效的小鼠胆囊胆固醇结石模型,为研究胆石成因及防治提供重要手段。方法C57BL／6小鼠随机分为对照组和模型组,对照组喂饲基础饲料,模型组喂饲致石饲料（基础饲料加10％猪油、1％胆固醇及0．5％胆酸）。两组小鼠分别于喂养4周和8周后,计算小鼠存活率,同时各取一半数量小鼠在乙醚吸入麻醉下手术取胆囊及血液标本,分别检测成石率、血脂浓度及胆汁胆固醇饱和度。结果对照组小鼠8周存活率100％,模型组小鼠死亡1只,存活率95％。对照组8周成石率为零,模型组4周成石率80％,8周成石率100％。血脂分析表明,与对照组比较,模型组4周和8周总胆固醇及低密度脂蛋白显著升高（P〈0．01）,甘油三酯浓度轻度升高（P〈0．05）,高密度脂蛋白显著降低（P〈0．01）。4周和8周时胆汁胆固醇饱和度测定,对照组分别为0．48±0．29和0．58±0．21,模型组分别为1．36±0．36和1．52±0．37,模型组胆固醇浓度处于过饱和状态。结论本模型方法简单、成石率高、动物死亡率低,可作为研究胆石成因及防治的备选模型。     

血管紧张素Ⅱ受体2型对创面愈合过程中微血管形成的影响

目的：观察血管紧张素Ⅱ受体2型（AT2R）在创面肉芽组织微血管形成中的作用,探讨其影响新血管形成的可能机制.方法：用打孔器在小鼠背部制成直径6.0 mm全层皮肤缺损创面模型,将24只C57BL/6J小鼠分成两组（n=12）：PD123319处理组腹腔注射特异性AT2R阻断剂PD123319（10 mg·kg-1·d-1）,对照组腹腔注射等量生理盐水.分别在创面形成后第3、5、7、和14天取创面组织标本,每个时间点3只小鼠.另有6只作为正常对照.采用HE染色观察肉芽组织和新血管形成的情况,应用ELISA法检测创面愈合过程中创面局部组织血管内皮生长因子受体1（VEGFR1）的变化,免疫组织化学方法检测正常小鼠皮肤与创面愈合过程中创面局部组织AT2R的表达情况.结果：正常小鼠皮肤AT2R在整个表皮层均有阳性表达,在真皮层,AT2R主在微血管内皮细胞,皮肤附件如毛囊、汗腺、皮脂腺有阳性表达.在小鼠全层皮肤缺损创面愈合过程中,创面局部组织AT2R产生逐渐增加,第7天达到峰值,以后逐渐下降.在伤后第5天和第7天,对照组创面肉芽组织的面积分别为（9.37±0.53）mm2和（7.15±0.42）mm2,PD123319处理组创面肉芽组织面积分别为（11.51±0.98）mm2和（9.32±0.67）mm2,两组间差异有统计学意义（P〈0.05）.PD123319可随时间的延长明显增加肉芽组织中VEGFR1的表达和血管形成的组织学评分,在第7天达到峰值,两组间差异有显著性（P〈0.05）,然后均逐渐下降.结论：在创面愈合过程中,AT2R可能参与创面的愈合及其后期的塑性改建,并通过调节VEGFR1水平影响肉芽组织中微血管的形成.     

不同治则中药对胆囊胆固醇结石小鼠模型的成石影响

目的：观察中药清胆胶囊和养肝利胆颗粒对C57小鼠胆囊胆固醇结石模型成石的影响和差异。方法：应用C57BL/6J雌性10周龄小鼠建立胆固醇结石模型（n=15）,并设立正常对照组（n=10）、清胆胶囊组（n=13）及养肝利胆颗粒组（n=13）,观察各组动物的成石率、血清胆固醇、钙离子及肝脏丙二醛（MDA）及过氧化物歧化酶（SOD）等生化指标的差异。结果：各组动物成石率分别73.33%、0%、23.08%及30.77%（P〈0.001）。模型组各项指标均出现明显异常,而清胆胶囊和养肝利胆颗粒组的各项指标均有不同程度的改善,其中二者在改善血清总胆固醇（TC）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）有明显差异（均P〈0.01）。两种中药相比,清胆胶囊更能显著升高高密度脂蛋白（HDL-C）含量（P〈0.05）,而养肝利胆颗粒更能增强肝脏SOD活性（P〈0.05）。4组间血清Ca2＋浓度无显著性差异。结论：疏肝清热利胆中药清胆胶囊和养肝柔肝中药养肝利胆颗粒均可降低小鼠胆固醇结石模型成石率,改善与成石相关的血清及肝脏等生化学异常,二者均呈多靶点作用,但仍存在着一定的差异。养肝利胆颗粒在增强肝脏SOD活性方面优于清胆胶囊。     

CytoMPS原位疫苗治疗肝癌的抗瘤作用及其免疫效应

目的制作成细胞因子缓释微粒原位瘤苗(CytoMPS-ISV),观测CytoMPS-ISV抗瘤作用及其免疫效应。方法 C57BL/6J小鼠皮下移植性肝癌模型瘤内注射CytoMPS3次制作CytoMPS-ISV,观察其抗肿瘤作用及小鼠生存率;流式细胞仪检测小鼠外周血淋巴细胞变化,免疫组化法检测肿瘤组织的CD4+、CD8+和NK1.1+细胞浸润情况,体外检测小鼠脾CTL和NK细胞的杀瘤活性,检测疫苗诱导脾CTL的抗体阻断作用。结果与PBS注射组和对照组相比,瘤内注射CytoMPS后肿瘤生长受到显著抑制(P0.01)。瘤内注射CytoMPS组血液中及局部浸润的CD4+、CD8+和NK细胞明显高于PBS组和对照组(P0.05);淋巴细胞杀伤试验结果显示瘤内注射CytoMPS组小鼠的脾CTL对靶细胞的杀伤率明显高于PBS组(P0.01)和对照组(P0.05);抗体阻断作用试验显示接种疫苗的小鼠脾CTL的杀瘤活性可被抗CD8+、抗MHC-I单克隆抗体所阻断,但不被抗CD4+、抗MHC-II单克隆抗体所阻断。结论 CytoMPS-ISV可以显著抑制肿瘤生长,能明显增强机体的抗肿瘤免疫作用,其诱导的CTL杀瘤特性是由MHC-I限制的CD8+T细胞所介导。     

二硝基苯修饰B16细胞对黑色素瘤小鼠疗效的实验研究

目的：探讨半抗原——二硝基苯（DNP）修饰的恶性黑色素瘤（恶黑）细胞激活树突状细胞（DC）后,对转移性黑色素瘤小鼠的抗肿瘤效应。方法：采用DNP修饰恶黑细胞B16（H-2^b）,在体外激活C57BL/6小鼠（H-2^b）外周血来源的DC,用于激发自体的T细胞,观察其对T细胞的增殖和特异性T细胞杀伤功能。在由B16细胞接种产生的荷瘤C57BL/6小鼠实验中,将小鼠随机分为5组,于左背部注射及于左耳背面涂抹DNP修饰B16瘤苗联合DC（DNP-B16-DC组）、B16激活DC（B16-DC组）、单纯DC（DC组）、单纯DNP（DNP组）和生理盐水（生理盐水组,每组6只）,观察各组抑瘤率和迟发型超敏反应。结果：经DNP修饰的B16细胞激活的DC,诱发的T细胞增殖能力和对B16细胞的特异性杀伤效应均明显高于未其修饰的B16细胞组和DC组。荷瘤小鼠实验显示,DNP-B16-DC组和单纯DNP组小鼠耳肿胀明显增加,其迟发型超敏反应明显强于其他各组。实验中DNP组有1只小鼠用药后20d死亡,其余小鼠DNP-B16-DC组抑瘤率（96.16%）明显高于B16-DC组（50.11%）、DC组（22.12%）和DNP组（57.79%,P〈0.01）,显示DNP-B16-DC具有更强的抑瘤作用。结论：DNP修饰B16所激活的DC可以诱导更强的特异性抗肿瘤作用。     

老鹳草提取物对Lewis结肠癌瘤株转染的Livin基因影响的实验研究

为研究老鹳草提取物对Lewis结肠癌瘤株转染的C57BL／6小鼠Livin基因表达的影响,探讨其抗转移机制,本研究成功建立了Lewis结肠癌瘤株小鼠皮下移植瘤模型,并将48只小鼠随机分为空白对照组、老鹳草提取物组和羟基喜树碱组,观察各组移植瘤体生长情况,免疫荧光法检测移植瘤组织中Livin基因表达情况。结果显示,与空白对照组相比,老鹳草提取物组和羟基喜树碱组移植瘤体积均缩小（P〈0．01）,移植瘤组织中Livin基因表达均降低（P〈0．01）;但老鹳草提取物组比羟基喜树碱组移植瘤体积缩小及移植瘤组织中Livin基因表达降低更明显（P〈0．01）。结果表明,老鹳草提取物的抗Lewis结肠癌转移机制可能与降低Livin基因的表达有关。