栀子拮抗细菌脓毒症有效成分京尼平苷的研究

目的：脓毒症是感染因素介导的全身炎症反应综合征,是烧伤、创伤和感染性疾病患者的常见并发症,其中内毒素（LPS）是介导细菌脓毒症的重要病原体相关分子模式。重组人活化蛋白C作为FDA批准的第一个用于治疗重度脓毒症的药物,经过6年的应用评估,其疗效已被否定,迄今脓毒症治疗仍缺乏有效药物。本文通过从中药栀子中提取分离具有中和LPS作用的有效成分京尼平苷,研究其拮抗细菌脓毒症的活性。方法：以LPS活性中心LipidA为靶点,采用生物传感器技术,从传统清热中药中筛选出具有LipidA结合活性的栀子,进而利用现代色谱技术分离出具有拮抗LPS活性的单体京尼平苷,通过鲎试剂法检测京尼平苷对LPS的体内外中和作用;RT-PCR法检测京尼平苷对LPS诱导巨噬细胞TLR4和TNF—αmRNA表达的影响;ELISA法检测京尼平苷对LPS刺激RAW264．7细胞产生细胞因子（TNF—α）的抑制作用;观察京尼平苷对脓毒症模型小鼠的保护作用。结果：京尼平苷在体外对LPS具有直接的中和作用,并呈现出较好的剂量效应关系：同时可剂量依赖的抑制LPS刺激引起的RAW264．7细胞的活化（TLR4和TNF-αmRNA的表达下调,细胞因子TNF-α的产生减少）;在体内可降低LPS血症模型动物血中的LPS水平;对致死剂量热灭活大肠埃希氏菌攻击的小鼠具有显著的保护作用。     

高密度脂蛋白（HDL）拮抗内毒素的实验研究

目的：通过对高密度脂蛋白（HDL）体内外生物学活性实验研究，探讨HDL对内毒素的中和作用。方法：应用勤和生物传感器技术检测HDL与LPS的结合活性，采用ELISA方法检测HDL对LPS攻击小鼠的保护作用等试验来阐明HDL对LPS的中和效果。结果：应用亲和生物传感器亲和力检测，结果发现HDL与lipidA之间具有很高的．木和能力；HDL可以显抑制LPS刺激小鼠RAW264．7细胞释放TNF—α，并成量效关系；在小鼠体内使用剂量为120mg／kg的HDL可以明显保护致死剂量LPS攻击小鼠，保护率达到70％。结论：HDL在体内外与LPS结合，从而抑制了LPS的生物学活性，被认为是一种内毒素清除剂，对防治脓毒症具有临床指导意义，     

姜黄素衍生物体外抗炎及防治小鼠脓毒症的研究

目的探讨姜黄素衍生物FM0901体外抗炎作用,及其对大肠埃希菌引起的细菌脓毒症小鼠的保护作用。方法①用脂多糖（LPS）刺激RAW264.7细胞,ELISA法测定FM0901对细胞分泌TNF-α、IL-6水平的变化硝酸还原酶法测定NO的变化;②小鼠尾静脉注射大肠杆菌建立脓毒血症模型,考察FM0901对小鼠血清中TNF-α、IL-6及NO的影响,观察小鼠的活动状态及生存率。结果①FM0901显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞的TNF-α、IL-6和NO释放,并具有明显的量效关系;②FM0901降低脓毒血症小鼠血清中TNF-α、IL-6和NO的含量,改善小鼠的状态,低剂量组提高大肠埃希菌感染小鼠的生存率。结论FM0901抑制RAW264.7细胞炎症介质释放,减轻脓毒症小鼠的炎症反应,提高其生存率。     

青蒿素对CpG DNA攻击小鼠保护作用的实验研究

目的:观察青蒿素对CpGDNA攻击小鼠的保护作用及对CpGDNA诱导小鼠单核 巨噬细胞RAW2 6 4.7释放促炎细胞因子的影响。方法:清洁级昆明小鼠6 0只,随机分为CpGDNA、青蒿素(2 0 0mg·kg-1)、CpGDNA 青蒿素(5 0、10 0、2 0 0mg·kg-1)及生理盐水对照组,每组动物10只。CpGDNA及CpGDNA 青蒿素组小鼠提前1h腹腔注射D 氨基半乳糖溶液(6 0 0mg·kg-1)进行敏化。CpGDNA组尾静脉给予4mg·kg-1的CpGDNA敏化;青蒿素组,灌胃给予2 0 0mg·kg-1的青蒿素;CpGDNA 青蒿素组在给予不同剂量的青蒿素后,立即给予4 0mg·kg-1的CpGDNA敏化;生理盐水对照组仅给予相同量的生理盐水。体外培养小鼠巨噬细胞RAW2 6 4.7,加入不同浓度的青蒿素,观察其对CpGDNA刺激细胞分泌TNF α及IL 6的拮抗作用及其量效、时效关系。结果:青蒿素可降低CpGDNA引起的小鼠死亡,死亡率由80 %降至10 % (P <0 .0 1)。青蒿素在2 0g·ml-1时显著抑制CpGDNA诱导RAW2 6 4.7释放TNF α和IL 6 (P <0 .0 1)。提前给予青蒿素,其拮抗CpGDNA诱导细胞因子释放的作用非常显著(P <0 .0 1) ,但青蒿素在刺激物CpGDNA给予后再加入,也能观察到显著拮抗作用(P <0 .0 5 )。结论:青蒿素对CpGDNA攻击小鼠具有显著保护作用,该保护作用可能与其明显抑制CpGDNA诱导的促炎细胞因子释放     

脓毒症诱导脑神经细胞凋亡的实验研究

目的：研究肮脏毒症时脑神经细胞凋亡的发生情况及其发病机制。方法：采用胆管内注射大肠杆菌的方法制作大鼠急性重症胆管炎模型，４天后取血化验ＴＮＦα、ＩＬ－１及ＩＬ－６活性，并取脑海马组织作原位细胞凋亡检测及电镜检查。结果：（１）观察组比对照组血ＩＬ－１、ＩＬ－６及ＴＮＦα水平明显增高。（２）用ＴＵＮＥＬ染色法镜下观察发现，观察组的原位细胞凋亡数目较对照组增多。（３）电镜下观察发现海马区神经细胞发生早期     

大黄拮抗CpG DNA有效成分的分离制备及活性研究

目的：脓毒症是感染因素介导的全身炎症反应综合征,至今无有效的治疗手段。细菌Cp6DNA是引起脓毒症的主要病原分子。CpGDNA通过与TLR9结合,介导单核／巨噬细胞的活化,是介导脓毒症发生的重要途径。本研究以CpGDNA为靶点,从中药中定向分离具有拮抗CpGDNA和治疗脓毒症作用的活性物质。方法：（1）应用生物传感器技术、建立以CpGDNA为靶点的筛选抗炎中药的技术平台并对78种中药进行筛选;（2）利用生物传感器技术、硅胶柱层析、离子交换柱层析技术,从大黄中定向分离与CDGDNA具有较高结合活性的组分,并对得到的组分进行初步的活性评价,确定活性组分;（3）在体外实验中,测定活性组分与CpGDNA、lipidA的结合能力,观察活性组分对LPS、CpGDNA刺激小鼠RAW264．7细胞分泌炎症介质的抑制作用,在体内实验中,观察活性组分对致死剂量热灭活大肠杆菌攻击小鼠的保护作用。（4）利用反相HPLC技术对活性组分进行制备分离,获得活性单体化合物;（5）在体外实验中,检测单体化合物与CpGDNA和lipidA的结合能力．观察化合物对LPS、CpGDNA刺激小鼠RAW264．7细胞分泌炎症介质的抑制作用。结果：（1）建立了以CpGDNA为靶点应用生物传感器筛选抗炎中药的技术平台;从78种中药中筛选出大黄等14种中药与CpGDNA具有较高结合能力;（2）利用生物传感器技术、硅胶柱层析、离子交换柱层析等技术从大黄水提物中定向分离得到与CpGDNA有较高结合活性大黄D组分;（3）在体外,大黄D组分与CpGDNA、LipidA均具有较高的结合活性,对CpGDNA及LPS刺激小鼠RAW264．7细胞分泌TNF-α有显著的抑制活性,并呈现良好的量一效关系。在体内,大黄D组分对致死剂量的热灭活大肠杆菌攻击小鼠有显著的保护作用,并呈现良好的量-效关系;（4）通过反相HPLC从D组分中分离得到单体化合物大黄酸和大黄素;（5）在体外,大黄酸和大黄素与CpGDNA均具有较高结合能力,均能单独或协同对CpGDNA及LPS刺激RAW264．7细胞分泌TNF—Q产生显著抑制作用。结论：（1）应用生物传感器、以病原分子CpG DNA为靶点,成功地建立了筛选抗炎中药的技术平台;（2）从大黄中分离得到与CpGDNA有较高结合活性的大黄D组分,体内、外生物学活性评价结果显示：大黄D组分对CpGDNA及LPS刺激小鼠RAW264．7细胞分泌TNF—α具有显著的抑制活性,并对致死剂量的热灭活大肠杆菌攻击小鼠有显著的保护作用;（3）从大黄D组分中分离得到单体化合物大黄酸和大黄素,生物学活性评价结果显示,大黄酸和大黄素对CpGDNA及LPS刺激小鼠RAW264．7细胞分泌TNF—α具有显著的抑制活性,提示大黄酸和大黄素可能是D组分以及大黄提取物拮抗cpGDNA和脓毒症的主要物质基础。     

以多黏菌素B为基础联合治疗耐碳青霉烯革兰阴性菌脓毒症的临床疗效分析

摘要：目的　探讨以多黏菌素B为基础联合其他抗生素治疗耐碳青霉烯革兰阴性菌（CR-GNB）脓毒症患者的临床疗效。方法　回顾性分析48例使用多黏菌素B为基础联合其他抗生素治疗CR-GNB感染的脓毒症患者的临床相关资料。（1）按照标本采集送检时间至开始使用多黏菌素B时间分组,分为早期组（≤7 d,30例）和推迟组（＞7 d,18例）。（2）按照多黏菌素B治疗的持续用药时间分组,分为≤7 d组（16例）和＞7 d组（32例）。（3）按照多黏菌素B联合其他抗生素治疗的用药方案不同分组,分为替加环素组（23例）、碳青霉烯组（9例）和其他药物组（哌拉西林他唑巴坦、头孢哌酮舒巴坦、环丙沙星、依替米星等,16例）。比较各组患者细菌总清除率、治疗有效率、28 d病死率的差异。结果　（1）早期组治疗后细菌总清除率（76.7% vs. 44.4%,χ2=5.107,P＜0.05）和治疗有效率（73.3% vs. 44.4%,χ2=4.006,P＜0.05）均高于推迟组,28 d病死率比较差异无统计学意义（30.0% vs. 38.9%,χ2=0.400,P＞0.05）。（2）治疗持续时间＞7 d组治疗后细菌总清除率（78.1% vs. 37.5%,χ2=7.696,P＜0.01）、治疗有效率（75.0% vs. 37.5%,χ2=6.400,P＜0.05）、28 d病死率（21.9% vs. 56.3%,χ2=5.672,P＜0.05）较≤7 d组明显改善。（3）多黏菌素B联合治疗用药方案中,替加环素组、碳青霉烯组和其他药物组之间的细菌总清除率（69.6% vs. 66.7% vs. 56.3%,χ2=0.823）、治疗有效率（69.6% vs. 55.6% vs. 56.3%,χ2=1.051）,28 d病死率（26.1% vs. 33.3% vs. 43.8%,χ2=1.390）的比较,差异无统计学意义（均P＞0.05）。结论　对于CR-GNB感染致脓毒症患者,多黏菌素B应早期、足疗程地与其他抗感染药物联合使用,以利于患者获益更多。     

葛根素葡萄糖注射液细菌内毒素检测法实验研究

本文报道了葛根素葡萄注射液用细菌内毒素检查法控制热原，用了两个生产厂的鲎试剂进行干扰试验研究，结果表明本品可用此法来控制热原。     

抗菌药物诱导细菌内毒素释放的研究概况

内毒素(endotoxin),又名脂多糖(LPS),主要是革兰阴性菌(G-)细胞壁的外部结构由O-特异性侧链、核心多糖、类脂A组成.其中核心多糖分为连接O-特异链的外核部分和连接类脂A的内核部分,内核部分含有庚糖的2-酮基-3-脱氧辛酸(KDO)两种特殊的糖类分子,而KDO和类脂A具有毒性[1].     

舒胆通颗粒防治胆石症的实验研究

目的：观察舒胆通颗粒对豚鼠实验性胆石症的防治作用。方法：62只DHA系豚鼠随机分为正常组、模型对照组、阳性对照组（复方胆通胶囊,0.6 g/kg）以及舒胆通颗粒5、10、20 g（按生药量折算,下同）/kg剂量组,除正常组外均采用高胆固醇低蛋白致石饲料喂养复制胆石症模型,同时灌胃给药连续70 d,观察豚鼠一般状况、结石形成、胆汁分泌及其成分、血液生化等方面的变化。结果：舒胆通颗粒5、10、20 g/kg剂量能明显改善胆石症豚鼠一般状况,降低结石形成比率,提高胆汁中总胆汁酸（TBA）含量,10、20 g/kg并能明显提高胆汁分泌量以及血浆胆囊收缩素（CCK）含量,降低血清TC水平。结论：舒胆通颗粒对胆石症豚鼠模型有较好的防治作用。     

外科手术感染细菌种类的分布及耐药性分析

由于抗生素的大量应用,感染细菌的种类发生了明显变化,其中内源性细菌、耐药菌株及革兰阴性菌,特别是MRSA、PRP、VRE、产ESBL的大肠杆菌、克雷伯菌及持续高产AmpC酶的细菌引起的感染明显增加,真菌感染也呈上升趋势,外科手术的感染细菌变化情况与围手术期及术后抗生素的合理应用     

肌苷葡萄糖注射液细菌内毒素检查法的实验研究

为建立肌苷葡萄糖注射液细菌内毒素检查法,对肌苷葡萄糖注射液稀释到2倍（1mg／ml）进行了干扰试验。结果证明肌苷葡萄糖注射液建立细菌内毒素检查法是可行的。现将实验情况报告如下。     

泽兰防治肝硬化的实验研究

目的：为了解中药泽兰抗肝硬化的确切疗效。方法：采用四氯化碳皮下注射造成大鼠、小鼠肝硬化模型。结果：泽兰预防给药有对抗肝纤维增生的作用,使ｓＧＰＴ、ｓＧＯＴ降低,使血清总蛋白、白蛋白显著升高。结论：泽兰有较好的抗实验性大鼠、小鼠肝硬化形成的作用。     

“防治灵”防治电光性眼炎的动物实验研究

“防治灵”防治电光性眼炎的动物实验研究张东普，陈胜利，苏树祥电光性眼炎是紫外线辐射所致的角膜损伤（１，２），有关治疗本病的药物颇多，疗效不一，模拟电光性眼炎的动物实验研究少见报道；仅刘艳艳等曾开展了动物实验研究（３），至于预防性治疗药物国内外尚无报道...     

大肠杆菌发酵中包含体形成减少的实验研究

目的：减少大肠杆菌发酵过程中包含体的形成。方法：在发酵过程中，加入IPTG后，降低培养温度进行低温诱导。结果：表达产物在细胞内大部分没有形成包含体。结论：低温诱导可减少大肠杆菌发酵中包含体的形成。     

中药防治硫酸镍致肝肾损伤的实验研究

文献报道 ,硫酸镍直接损伤肝肾组织 ,并使天冬氨酸转氨酶 (ＡＳＴ) ,丙氨酸转氨酶 (ＡＬＴ)等酶活力增加[1～ 5] 。本实验观察了扶正解毒汤 (ＦＪＤ)对硫酸镍致肝肾损伤的防治作用 ,现报告如下。1　材料与方法1 1　材料　ＦＪＤ由红芪、当归、丹参、连翘、莪术等组成。按比例配方 ,制成水煎剂 ,过滤 ,浓缩成含生药 4ｇ/ｍＬ的溶液 ,高温高压消毒灭菌 ,密封 ,4℃以下储存备用。硫酸镍ＮｉＳＯ4为分析纯 ,西安化学试剂厂 ,批号 :92 0 0 14。ＡＳＴ ,ＡＬＴ ,ＡＫＰ及ＢＵＮ试剂盒 :均由南京建成生物工程研究所提供 ,批号 :980 112。 75 4型紫…     

SOD防治缺血性急性肾衰的实验研究

以免肾缺血再灌流致急性肾衰模型，分别测定了假手术组、缺血再灌流组、ＳＯＤ１组和ＳＯＤ２组肾组织中ＬＰＯ含量和ＣＡＴ活力，并动态观测了术后ＢＵＮ和Ｃｒ的变化，结合肾组织超微结构的改变，对ＳＯＤ防治缺血性急性肾衰的作用机理和投药时程进行了探讨。结果表明：缺血再灌流时应用ＳＯＤ对缺血性急性肾衰具有明显的保护作用