参芪扶正注射液联合IFN-α对肝癌细胞STAT1基因表达的影响

目的:研究参芪扶正注射液与干扰素α(IFN-α)联用时对肝癌细胞STAT1基因表达的影响,探讨其对IFN-α协同增效的作用机制。方法:运用MTT法检测IFN-α注射液单独或与参芪扶正注射液联合对MHCC97-L细胞增殖的影响;运用Real-time PCR和Western-blot分别检测IFN-α单独或与参芪扶正注射液联用对STAT1 RNA和蛋白质表达的影响;构建STAT1干扰慢病毒载体并实现其在MHCC97-L中表达,通过RT-PCR、We s te rn-Blot验证其干扰STAT1表达的有效性;MTT法检测IFN-α单独或联合参芪扶正注射液对STAT1基因"沉默"细胞株增殖的影响。结果 :与单独使用IFN-α相比,参芪扶正注射液与IFN-α联用可以增强IFN-α对人肝癌MHCC97-L的抑制作用(P<0.01),并上调STAT1 mRNA(P<0.05)和蛋白质的表达(P<0.05);成功构建STAT1基因"沉默"的MHCC97-L细胞株;参芪扶正注射液协同IFN-α对STAT1基因"沉默"MHCC97-L的抑制率与单独使用IFN-α差异无统计学意义(P>0.05)。结论:参芪扶正注射液可上调人肝癌细胞MHCC97-L中STAT1的表达,从而提高IFN-α的疗效。     

基于RNAi技术研究参芪扶正注射液联合IFN-α对肝癌细胞增殖能力的影响

目的:研究参芪扶正注射液与干扰素α(IFN-α)联用时对肝癌细胞增殖能力的影响,并通过RNA干扰技术明确其对IFN-α协同增效的作用机制。方法:运用细胞增殖实验(MTT)技术检测IFN-α注射液(6000 IU)单独或与参芪扶正注射液(0.5 g/L)联合时对SMMC-7721细胞增殖能力的影响;用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术和蛋白质印迹法(Western-blot)分别检测IFN-α单独或与参芪扶正注射液联用时,实验组、阴性对照组(NaCl)和空白对照组中STAT1的RNA转录和蛋白质表达情况,确定参芪扶正注射液对STAT1转录和表达的影响;运用Western blot检验STAT1基因经RNA干扰后SMMC-7721的STAT1蛋白质表达,确定干扰效果;MTT实验检测IFN-α单独或联合参芪扶正注射液作用于STAT1基因"敲低"细胞株时,对细胞增殖能力的影响。结果:与单独使用IFN-α及参芪扶正注射液相比,小剂量参芪扶正注射液与IFN-α联用可以增强IFN-α对人肝癌细胞SMMC-7721增殖能力的抑制作用,并上调STAT1 mRNA和蛋白质的表达;SMMC-7721的STAT1基因"敲低"细胞株中STAT1蛋白表达明显降低;针对SMMC-7721的STAT1基因"敲低"细胞株,参芪扶正注射液协同IFN-α与单独IFN-α及阴性对照组相比,对细胞增殖能力的影响无显著性差异。结论:参芪扶正注射液通过上调人肝癌细胞SMMC-7721中STAT1的表达,是提升干扰素α对肝癌细胞增殖能力抑制作用的主要机制之一。     

参芪注射液协同IFN-α抑制肝癌细胞体外增殖、迁移能力和侵袭性的研究

目的：探讨参芪扶正注射液协同IFN-α对肝癌SM M C-7721细胞体外增殖与侵袭力的影响。方法：在SMMC-7721体外培养系中加入小剂量参芪扶正注射液（0.5 g/L）及IFN-α,MTT法检测参芪扶正注射液协同IFN-α对SMMC-7721细胞增殖作用的影响;Transwell检测参芪扶正注射液对SM M C-7721细胞迁移能力的抑制作用;Invasion实验检测参芪扶正注射液对SM M C-7721细胞增殖能力的影响。结果：与单独使用IFN-α相比较,参芪扶正注射液联合IFN-α能够降低SMMC-7721细胞的增殖能力（P<0.05）;同时还能够抑制SMMC-7721细胞的迁移能力（P<0.05）以及侵袭能力（P<0.05）。结论：参芪扶正注射液协同IFN-α在体外可以有效抑制SMMC-7721细胞的增殖能力,并降低其迁移力及侵袭性。     

RNA干扰技术探讨参芪扶正注射液对MHCC97L细胞侵袭力的影响

目的:通过检测参芪扶正注射液对肝癌MHCC97L细胞侵袭力及其VEGF基因表达的影响,明确其降低肝癌瘤株侵袭力的作用,并通过RNA干扰技术加以验证。方法:在MHCC97L体外培养系中加入参芪扶正注射液(0.5 g/L)作用24 h后,Transwell检测参芪扶正注射液对MHCC97L细胞侵袭性的影响;同时使用Real-time PCR和Western-blot分别检测药物组、阴性对照组和空白对照组中VEGF基因的转录与表达情况,确定参芪扶正注射液对VEGF基因转录与表达的影响;构建VEGF干扰慢病毒载体并实现其在人肝癌细胞MHCC97L中表达,并通过RT-PCR、Western-Blot进行验证,确定其干扰VEGF基因表达的有效性;Transw ell检测参芪扶正注射液对VEGF"沉默"瘤株侵袭力的影响并与正常瘤株进行比较。结果:参芪扶正注射液能够降低MHCC97L细胞中VEGF基因的转录与表达(P0.05),并能够降低肿瘤侵袭力(P0.05);VEGF基因"沉默"瘤株构建成功;VEGF基因"沉默"后,参芪扶正注射液对MHCC97L瘤株侵袭力的影响不显著(P0.05)。结论:参芪扶正注射液可以通过抑制MHCC97L细胞VEGF基因的表达以降低其侵袭力。     

参芪扶正注射液对重症急性胰腺炎大鼠心肌保护的作用

目的:探讨参芪扶正注射液对SAP大鼠心肌保护的作用及机制。方法:清洁级雄性SD大鼠26只随机分为3组:K组为假手术组;M组为仅建立SAP大鼠模型组;S组为造模后予腹腔注射中药参芪扶正注射液。观察3组大鼠术后24h血清肌酸磷酸肌酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌细胞Na+-K+-ATPase活性、线粒体膜电位及心肌细胞凋亡指数,并对心脏及胰腺组织行病理学检查。结果:S组大鼠血清CK-MB、LDH、胰腺及心脏病理评分和心肌细胞凋亡指数均低于M组(P<0.01),但高于K组(P<0.01),S组Na+-K+-ATPase活性、线粒体膜电位没有降低的细胞比例高于M组(P<0.05),但低于K组(P<0.01)。结论:参芪扶正注射液对SAP引起的心肌损伤有保护作用。     

参芪扶正注射液配合化疗治疗恶性肿瘤临床疗效观察

目的　 通过 5 0 4例恶性肿瘤应用参芪扶正注射液 (简称参芪液 ) ,验证该药的临床疗效及安全性。 方法　 随机分为三组比较疗效。参芪加化疗组 (治疗组 ) 2 79例 ,单纯化疗对照组 (化疗组 ) 10 6例 ,单纯参芪组 (参芪组 ) 119例 ,按照新药Ⅲ级临床的观察方案进行严密观察。结果参芪加化疗组对恶性肿瘤癌灶缓解率 (CR +PR)为 32 .3% ,化疗对照组 (CR +PR)为17.2 % ,参芪组 (PR)为 2 .6 % ;治疗组症状改善率 82 .8% ,参芪组为 79.8% ,化疗组 36 .8% ,其中对乏力、食欲、睡眠及呕吐的症状改善更为明显 ,对体重有很好的维护作用 ,三组的体重提高率和稳定以上率分别为 :治疗组 4 7.6 %、90 .3% ,参芪组 4 0 %、87.4 % ,化疗组 7.5 %、4 5 .3% ;对骨髓造血功能也有较好的维护作用 ,治疗组疗后低于 4× 10 9/L者占 6 .8% ,参芪组疗后无低于 4× 10 9/L者 ,而化疗组高达 2 3.6 % ;该药可提高NK细胞和T淋巴细胞亚群的活性 ,能增加巨噬细胞的吞噬功能。未发现对肝、肾功能有损伤作用 ,无静脉炎发生 ,极个别患者有低度发热 ,可自行缓解。 结论　 说明该药对肿瘤的癌灶有缓解和稳定作用 ,对临床症状有明显的改善效果 ,可提高患者的生存质量     

TRAIL和TRAILR在肝癌中表达及对肝癌的治疗作用

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosisfactorrelatedapoptosis-inducingligand,TRAIL)与其受体(TRAILR)在肝细胞肝癌中的表达及TRAIL联合应用化疗药对肝癌细胞的杀伤作用。方法采用免疫组化和原位杂交检测100例肝癌及癌旁组织中TRAIL及TRAILR的表达。用MTT法检测TRAIL与化疗药联合应用对肝癌细胞的杀伤作用。结果TRAIL在正常肝组织中无表达,在癌旁组织中的表达明显高于癌组织;肝癌组织中死亡受体(DR5、DR4)的表达量显著强于正常肝组织,诱捕受体为低表达,与正常肝组织相比,两者差异显著(χ2=4·68,P<0·05)。Ⅲ/Ⅳ期肿瘤死亡受体的表达显著低于Ⅰ/Ⅱ期(χ2=6·17,P<0·05)。联合使用亚细胞毒性剂量的化疗药大幅度提高了TRAIL的细胞毒活性。结论TRAIL与化疗药物联合运用具有协同杀伤肝癌细胞的作用。     

化学治疗药物对肝癌细胞增殖抑制作用的观察

目的 评价化学治疗药物（下称化疗药）在肝癌治疗中的作用和地位。方法 采用MTT法测定5-Fu、顺铂和4-PA对肝癌细胞增殖的抑制作用。结果 （1）5-Fu、顺铂两药分别单剂使用,在给药后0.5h肝癌细胞增殖h后肝癌细胞增殖均受到抑制;对氯苯乙酸在给药后0.5h肝癌细胞增殖即被抑制。（2）肝癌细胞抑制率随化疗药的作用时间延长而增加,48-72h达50%以上的抑制率。（3）化疗药对肝癌细胞的作用早期,癌细胞的生长有返跳活跃阶段。但总体上癌细胞伯生长被抑制。结论 连续用药可很好地抑制肝癌细胞增殖,提高恶性肿瘤化学药物治疗的效果。     

参芪注射液辅助消化道肿瘤化疗疗效分析

参芪注射液辅助消化道肿瘤化疗疗效分析北京中医药大学东直门医院（北京１００７００）王广，史晓光李乃卿指导历代医籍都把党参、黄芪视为重要的补益扶正药物，并认为它们具有一定的免疫调节作用，通过提高机体的免疫功能，达到扶正固体的目的。本科研组对党参、黄芪进行...     

老年消化道肿瘤围手术期的中西医结合处理

目的 :观察老年消化道肿瘤围手术期中西医结合处理的临床效果和应用前景。 方法 :手术方式采用个体化、灵活性的设计方案。术后应用醒肺雾化散 ,预防肺部并发症 ,口服或灌肠通腑汤 ,尽早恢复胃肠道功能。术后采用中、小剂量的化疗药物 ,配合参芪扶正注射液 ,减轻化疗的毒副作用。应用百普素和能全力观察肠内营养支持的效果。 结果 :手术的切除率 86 84 % (6 6 / 76 ) ,根治率 84 16 % (6 4 / 76 ) ,围手术期死亡率 6 5 8% (5 / 76 ) ,术后并发症发生率 2 3 6 8% ,其中通腑汤使术后排气、排便时间提前了 36h和 73h ;肺醒气雾散吸入后 ,仅有 4例轻度肺部感染发生 ;参芪扶正注射液较好的保护了机体的造血功能 ,全组顺利完成了化疗全过程 ,白细胞下降不明显 ;应用肠内营养剂 ,提高了各项白蛋白水平。 结论 :本临床研究说明老年消化道肿瘤患者围手术期中西医结合处理方案是合理的、可行的 ,有广阔的应用前景。     

VEGF-C对肝门部胆管癌细胞增殖以及侵袭能力的影响

目的:探讨血管内皮生长因子-C(VEGF-C)对肝门部胆管癌细胞侵袭和增殖的影响。方法:采用MTT法测定VEGF-C对肝门部胆管癌细胞系(FRH0201)细胞增殖的影响,流式细胞仪观察VEGF-C抗凋亡作用,应用3H-TdR掺入试验测定VEGF-C对FRH0201细胞同质黏附作用以及Boyden小室观察VEGF-C诱导肝门部胆管癌细胞转移的作用。结果:MTT法示VEGF-C能显著提高FRH0201的增殖活性,其效应随VEGF-C剂量以及时间增加而增加,并显著抑制细胞凋亡。在Boyden小室培养的FRH0201细胞中分别加入1、5和10ng/ml的VEGF-C刺激培养后,Boyden小室碳酸酯滤膜下层浸润的胆管癌细胞数均高于对照组。分别用上述浓度的VEGF-C诱导FRH020160、90和120min后,FRH0201细胞的黏附能力显著低于对照组。结论:VEGF-C可以促进胆管癌细胞增殖,抑制其凋亡,增强细胞侵袭能力,并且与降低细胞的同质黏附作用密切相关。     

黄芪注射液及扶正流浸膏对大鼠诱发性肺癌抑制作用的实验研究

３－甲基胆蒽（ＭＣＡ）碘油溶液诱发大鼠肺癌过程中，用黄芪注射液及扶正流浸膏分别进行抑癌实验。发癌率（％）：黄芪组１６．２８，扶正组３６．９６，对照组５１．５２。黄芪组发癌率与对照组比较差异有非常显著性（Ｐ＜０．００５）。扶正组发癌率与对照组比较差异无显著性（０．２５＞Ｐ＞０．１）。光镜和透射电镜观察，各组癌例均为肺鳞癌，黄芪组与对照组不同，其特点：癌巢规整，核分裂相极少，核空化，明显角化，癌细胞表面突起锐减或肿胀，线粒体与粗面内织网极度扩张，膜结构破坏，枚染色质凝集、固结、核空化等，最后癌细胞崩解及消失。结果表明：黄芪注射液有明显抑癌效果。扶正组肺癌组织形态学呈退行性交的特点与黄芪组相似，据此，扶正流浸膏也可能有抑癌作用。     

参芪容颜胶囊治疗黄褐斑、雀斑的临床疗效观察

目的:探讨参芪容颜胶囊治疗黄褐斑、雀斑的临床疗效.方法:选择108名女性,其中分为参芪容颜胶囊治疗组(简称参芪容颜组)和谷胱甘肽、维生素C治疗组(简称对照组),进行临床试验治疗及对照观察.结果:治疗组及对照组对黄褐斑的改善均有治疗作用.且参芪容颜组即治疗组优于对照组,且有极显著性差异.结论:参芪容颜胶囊对黄褐斑、雀斑有很好的治疗作用.     

上皮-间充质转化在营养剥夺促进肝癌细胞侵袭中的作用

目的 观察上皮-间充质转化在营养剥夺条件下促进肝癌细胞侵袭的作用.方法 以Hank's平衡盐缓冲液对肝癌细胞株HepG2和BEL7402细胞进行营养剥夺培养,观察营养剥夺对肝癌细胞上皮间质标记表达和侵袭能力的影响,并以转化生长因子(TGF)-β/Smad3通路抑制剂SIS3(2μmol/L)处理营养剥夺的肝癌细胞,分析上皮间质标记表达与细胞侵袭力之间的关系.结果 平衡盐缓冲液显著增加HepG2和BEL7402肝癌细胞的侵袭数[(58 450±1245)个;(61 750±1800)个,P＜0.05],同时其上皮标记CK18表达下调而间质标记纤维连接蛋白(fibronectin)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达升高.以TGF-β/Smad3通路抑制剂SIS3处理平衡盐溶液培养的HepG2和BEL7402细胞后,较对照组细胞未出现明显上皮间质标记表达改变,细胞侵袭数较SIS3未处理组也明显减少[(16500±1050)个比(15 450±985)个,P＜0.05].结论 上皮-间充质转化可能是营养剥夺条件下促进肝癌细胞侵袭性的机制之一.     

AnnexinⅤ法检测HepG2细胞凋亡

目的 应用Annexin V-PITC/PI技术检测化疗药物顺铂(CDDP)诱导肝癌细胞(HepG2)凋亡作用的特性.方法 将不同浓度的CDDP与肝癌细胞株HepG2共孵育4 h、15 h、24 h、36 h后,应用流式细胞术和Annexin V-PITC/PI双染免疫荧光法观察细胞凋亡情况.结果 CDDP可以诱导HepG2细胞发生凋亡,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,发生凋亡和坏死细胞的比例增加.结论 化疗药物CDDP诱导肝肿瘤细胞凋亡呈时间和剂量依赖性.AnnexinⅤ-FITC /PI双标记流式细胞术可用于早期细胞凋亡的检测.     

不同压力CO2气腹对肝癌细胞体外侵袭能力的影响

腹腔镜肝癌手术中,CO2气腹是否会增加肝癌细胞的侵袭能力,以及由此促进了肿瘤在腹腔内的种植和转移,是腹腔镜外科医生尤为关心的问题.我们应用体外模拟CO2气腹环境,观察不同气腹压力对肝癌细胞体外侵袭能力的影响.一、材料和方法1.细胞培养及分组:肝癌SMMC-7721细胞(取自南昌大学消化研究所)常规培养于含10％小牛血清的RPMI 1640中.     

结合半乳糖基抗CD3单抗的肿瘤浸润淋巴细胞对自体肝癌细胞杀伤的形态学研究

目的　获取与半乳糖基抗CD3 单抗结合的肿瘤浸润淋巴细胞 (McAb TIL)杀伤自体肝癌细胞的形态学证据 ,并进行杀伤机制探讨。方法　制备McAb TIL ,将其与H2 2 小鼠肝癌细胞共同孵育 ,于不同时间在倒置显微镜和透射电镜下观察。结果　McAb TIL呈增殖活化状态 ,与靶细胞共同孵育 0 .5h即可导致靶细胞严重损伤。杀伤靶细胞后的McAb TIL结构清晰、完整。凋亡与坏死形态学改变可共存于同一个被杀伤靶细胞。结论　偶联了大量半乳糖基的抗CD3 单抗仍具有很强的肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)活化作用。McAb TIL通过多种杀伤机制杀伤自体肝癌细胞 ,杀伤力极强 ,具有连续杀伤靶细胞的能力。     

参芪扶正注射液联合多西他赛对乳腺癌患者细胞免疫功能影响

目的:探讨参芪扶正注射液联合多西他赛治疗乳腺癌晚期患者的临床疗效以及对细胞免疫功能的影响。方法:搜集晚期乳腺癌患者100例,按照随机数字表法随机分为两组,研究组采用参芪扶正注射液联合多西他赛常规化疗,对照组采用生理盐水联合多西他赛常规化疗,每组50例。所有患者均接受常规化疗方案,于治疗结束后观察疗效及T淋巴细胞亚群和树突状细胞指标的变化。结果:治疗后研究组完全缓解+部分缓解的患者为30例(60%),显著高于对照组17例(34%)(P0.05)。研究组患者CD3+、CD4+比例[(66.48±9.76)%和(42.89±8.66)%]和CD4+/CD8+比例[(1.88±0.84)%]均显著高于治疗前(59.68±8.54)%、(22.67±5.59)%、(1.06±0.56)%(P0.05),同时也显著高于治疗后的对照组(61.59±8.77)%、(25.16±4.69)%、(1.23±0.71)%(P0.05),而CD8+比例显著下降[(22.55±3.79)%],明显低于治疗前(29.36±4.62)%以及对照组(28.87±5.19)%患者(P0.05)。治疗后研究组患者CD80、CD83、CD86细胞百分比(9.29±2.78)%、(12.48±3.26)%、(48.17±11.21)%显著高于治疗前(6.76±1.59)%、(8.26±2.15)%、(35.49±8.73)%(P0.05),而对照组在治疗前后变化不显著(P0.05)。对照组总的不良反应事件为26例(52%),显著高于研究组患者14例(28%)(P0.05)。结论:参芪扶正注射液能够提高乳腺癌患者细胞免疫功能,在乳腺癌的化疗过程中可作为减毒增效的辅助用药。     

Cathepsin B影响肝细胞肝癌增殖与凋亡的实验研究

目的:探讨组织蛋白酶B(Cat B)对肝细胞肝癌增殖和凋亡的影响及其相关作用机制。方法:将pcDNA3-Cat B过表达质粒转染肝细胞肝癌细胞系BEL-7402,RT-PCR及免疫印迹法分别检测Cat B mRNA及蛋白的表达,CCK-8、流式细胞法观察Cat B的过表达对BEL-7402细胞系增殖和凋亡的影响;将Cat B siRNA转染肝细胞肝癌细胞系HepG2,RT-PCR及免疫印迹法分别检测Cat B mRNA及蛋白的表达,CCK-8、流式细胞法观察Cat B的低表达对HepG2细胞系增殖和凋亡的影响;针对转染了Cat B siRNA的HepG2细胞系及经整合素αvβ3抗体预处理的过表达Cat B的BEL-7402细胞系,应用免疫印迹法检测Akt和p-Akt的表达情况。结果:CCK-8法发现,Cat B表达上调能够显著促进肝癌细胞的增殖,相反Cat B的表达下调能够显著抑制肝癌细胞的增殖(P0.001),流式细胞法发现,Cat B表达上调能够抑制肝癌细胞的凋亡,而Cat B表达下调能够促进肝癌细胞的凋亡(P0.05);Cat B能显著促进p-Akt的表达,而经过整合素αvβ3抗体预处理的过表达Cat B的肝癌细胞系中,p-Akt的表达情况显著下降。结论:Cat B显著促进肝癌细胞的增殖并且抑制细胞凋亡,这种作用可能是通过整合素αvβ3/PI3K/p-Akt信号通路来实现的。     

参芪肝康片保护乙型肝炎病毒大鼠肝功能机制研究

目的:探讨参芪肝康片抑制乙型肝炎病毒(HBV)致肝功能损伤及其机制。方法:将60只SD大鼠分为对照组(未行任何处理)、乙肝病毒模型组(乙型病毒性肝炎模型)、拉米夫定组(拉米夫定处理)以及低、中和高剂量参芪肝康片组[分别将2.5、5.0和10.0 mg/(kg·d)剂量参芪肝康片处理],每组均含有10只SD大鼠。检测并比...