牵张成骨修复腭裂动物实验组织学研究

目的　观察牵张技术修复犬硬腭骨缺损的过程中不同时期新骨形成的结构特点 ,研究新骨形成的连续过程及规律。方法　实验组动物 5只建立人工腭裂模型后使用牵张成骨技术 ,以每次 0 .3mm ,每日 2次的速率牵张关闭裂隙 ,裂隙关闭后每隔 14d以 2 5mg/kg体重为动物肌肉注射四环素 ,分别在裂隙关闭后 2周处死动物 1只 ,6周、10周各处死动物 2只 ,取牵张区新骨组织 ,进行组织学及四环素荧光标记观察。结果　牵张保持期第 2周 ,牵张区为沿牵张方向排列的胶原纤维束 ,其间可见大量成纤维细胞 ,在骨切开边缘区域可见散在荧光带。 6周时 ,牵张区成骨活跃 ,出现沿牵张方向排列的新生骨小梁 ,其间仍可见钙化度低的类骨基质 ,并出现沿骨小梁排列的强荧光带。 10周 ,逐渐成熟的新骨呈现较粗壮的骨小梁 ,钙盐沉积 ,钙化程度高 ,可见较成熟的哈佛氏系统 ,此时因骨改建活跃 ,荧光沉积呈现不连续的线段状。结论　新骨形成是沿牵张方向的膜内成骨方式完成的 ,不同时期新骨的钙化程度及骨改建活跃程度不同 ,新骨组织最终改建成熟而完成硬腭骨缺损修复。     

牵张成骨矫治腭裂新骨生成区超微结构特征的研究

目的:观察不同时间间期牵张生成的新骨组织的超微结构特征,探讨新骨生成的规律。方法:建立12只动物的人工腭裂实验模型,实验组动物10只:应用牵张成骨术,以每日2次,每次014 mm的速度和恒定的方向整复其腭部软硬组织缺损,至裂隙完全封闭。于术后固定期第2、4、6、8及12周分别安乐处死2只实验动物,切取标本后于扫描电镜下观察,并与实验对照组及空白对照组(动物各2只)观察结果对比。结果:第2周时,牵张区以大量沿牵张方向排列的胶原纤维束为主,成纤维细胞大量增殖,新生骨小梁钙化程度低。第4~6周时,成骨活动极其活跃,骨小梁较致密,其表面密集排列成骨细胞。新骨呈/蜂巢样0结构。第8~12周时,骨小梁结构逐渐钙化成熟。实验对照组裂隙创缘处无明显新骨形成。结论:应用牵张成骨术矫治腭裂骨质缺损,以原位产生新骨,增加骨量的方式推移骨运送盘封闭腭裂裂隙。术后早期即有膜内成骨的新骨形成,并最终改建成熟为适应正常生理功能需要的骨质结构。     

应用牵张成骨术整复腭裂骨质缺损的组织学研究

目的 :观察牵张成骨术整复腭裂过程中 ,新骨组织形成与改建活动的特点 ,探讨新骨生成的规律。方法 :家猫 14只为实验对象。其中 12只建立人工腭裂实验模型。实验组 (动物 10只 ) :以 0 .4mm× 2次 /d的速度与频率牵张整复腭裂缺损。于术后固定期 2、4、6、8及 12周 ,观察期结束前 6d ,各对 2只动物肌注四环素标记 ( 30mg/kg)。 6d后取标本 ,切片行荧光显微镜及组织学观察 ,并与实验对照组及空白对照组 (动物各2只 )结果对比。结果 :实验组标本牵张区新骨组织均为膜内成骨 ,由中央向外分为胶原纤维区、新骨形成区及改建成熟区 ;随时间发展 ,新生骨逐渐取代纤维组织并改建成熟。软组织也得到相应伸展。对照组裂隙无自行修复。结论 :应用牵张成骨术矫治腭裂骨质缺损 ,以原位产生新骨 ,增加骨量的方式推移骨运送盘封闭腭裂裂隙。在良好固定条件下 ,新骨形成与改建活跃 ,最终整复腭裂骨质缺损并适应功能需要     

硬腭骨膜牵张成骨过程中ACTA和FS的表达研究

目的:检测犬腭裂骨膜牵张成骨各时期ACT A和FS mRNA的表达,探讨ACT A/FS系统对其修复的调节模式。方法:用幼犬15只建立腭裂模型,2月后,于腭裂裂隙缘骨膜下安放牵张器,牵张力(2.45±0.20)N。牵张器放置后10、20、30、40和60 d,各处死3只,取牵张侧及对照侧骨组织,提取RNA并用RT-PCR检测ACT A和FS mRNA的表达。结果:对照侧10～60 d标本检出少量ACT A和FS mRNA,各组间比较无统计学意义(P>0.05)。牵张侧10 d标本可检出ACT A和FS mR-NA;20、30、40及60 d ACT A mRNA含量分别为10 d的1.78、2.82、4.27及3.04倍,FS mRNA分别为1.52、2.12、2.47及1.90倍。结论:在牵张期间,ACT A可能直接或间接地增强膜内成骨,FS参与ACT A生物活性的调节。     

腭裂牵张成骨整复术的新设计--动物实验结果与评价

目的在建立腭裂实验动物(猫)模型的基础上,采用研制的口内腭裂牵张装置,用于新设计的腭裂牵张成骨整复术,并观察评价其效果。方法设立空白对照组(动物2只)及实验对照组(动物3只)。设计制备个体化的纯钛口内腭裂牵张整复装置;以20只家猫为实验对象,建立腭裂实验动物模型。在实验动物的上颌腭侧,通过磨牙带环及纯钛自攻螺钉固位,安置腭裂牵张装置。4周后,实施单骨运送盘形成术,术后第6天起,以0.4mm×2次/d的速度与频率,向裂隙健侧行牵张成骨术,至健侧骨运送盘与裂缘紧接,裂隙封闭。于原位固定的不同时期分别处死实验动物各3只,取标本行大体及组织学、荧光标记、免疫组化、超微结构以及激光共聚焦显微镜与生长因子的表达等系列检测,并对矫治前后的咬合模型进行对比测量。结果在建立腭裂实验动物模型的基础上,首次采用新设计的腭裂牵张装置及术式,通过骨牵张间隙的新骨形成及覆盖黏骨膜的伸展,直至骨运送盘与健侧裂缘衔接。各项检测结果表明,所设计的新术式,在修复腭部软硬组织缺损的基础上,牵张间隙以膜内成骨方式形成新骨,成功地整复了腭裂。结论新设计的腭裂牵张成骨整复术,是一种以局部新生软硬组织的增殖为基础,在保持功能与结构稳定的前提下,关闭裂隙的功能性腭裂整复术。     

牵张成骨整复猕猴腭裂模型成骨区骨形态发生蛋白-2的表达

目的观察牵张成骨术整复腭裂新骨形成的骨形态发生蛋白-2（BMP-2）表达分布规律。方法猕猴23只以外科方法建立腭裂动物模型。其中实验组动物21只,以牵张成骨术整复其腭部软硬组织缺损,至骨运送盘移动关闭裂隙后原位固定。分别于固定期第1、2、4、6、8、12及24周取材3只实验动物,标本行免疫组化染色,观察其不同时间的表达分布,并与实验对照组及空白对照组结果对比。结果免疫组化实验表明, BMP-2于新骨形成过程中主要存在于成骨细胞胞浆中,在牵张成骨早期新生骨小梁的周围存在大量成骨细胞,染色为强阳性;4~6周时,成骨细胞进一步增多,BMP-2表达也呈现强阳性,表明成骨过程到达高峰;8周时成骨细胞数量减少,BMP-2表达趋于减弱;至12周时,成骨过程已基本完成,免疫组化染色基本无着色。结论术后固定成骨期内,BMP-2的表达与分布是一个由弱变强,达到成骨高峰后,随着新骨改建成熟又逐渐趋弱的动态变化过程。     

腭裂实验动物模型的建立及缝牵张成骨的实验研究

目的 探讨手术建立腭裂实验动物模型及应用NiTiSMA牵张器行缝牵张成骨治疗发育期实验动物腭裂的可行性。方法 12只杂种犬被随机分为实验组和对照组，每组6只。采用自行设计、制作的表面处理的NiTiSMA牵张器，对发育期的腭裂实验动物（杂种犬）模型进行腭上颌缝牵张成骨，修复腭部裂隙区的全层组织缺损。观察裂隙关闭的过程。通过石膏模型，观察缝牵张成骨对上颌牙弓宽度发育的影响。结果 实验组动物腭部裂隙于牵张器植入14d后在腭中线处闭合。缝牵张成骨过程未对实验组动物牙弓宽度的发育造成明显影响。结论 表面处理的NiTiSMA牵张器运用牵张成骨原理，能有效地修复杂种犬腭裂动物模型的腭裂骨质缺损。     

牵张成骨矫治腭裂动物模型新骨Ca、P元素能谱分析

目的应用牵张成骨术整复腭裂实验动物（猫）模型硬腭部骨质缺损的基础上，观察研究不同时间间期牵张区新生骨质的Ca、P元素含量的动态变化，并探讨新骨生成与改建的发展变化规律。方法家猫20只为实验对象。其中18只动物建立人工腭裂实验模型。实验组（动物15只）：应用牵张成骨术，以每；P-0.4mm的速度，每日两次的频率和恒定的方向整复其腭部软硬组织缺损，至裂隙完全封闭。于牵张术后第2、4、6、8及12周分别对3只动物施以安乐死，取标本测定Ca、P元素能量谱曲线并计算Ca、P元素质量比及原子计数比。结果与实验对照组（动物3只）及空白对照组（动物2只）对比。结果通过对新骨的Ca、P元素能量谱、Ca／P质量比及原子计数比的分析可将DO后的固定期分为三个阶段，即2周左右为新骨形成早期，4-6周为中期，8-12周时为后期，显示了新骨不断钙化成熟的趋势。结论牵张推移骨运送盘至健侧裂隙缘后，牵张间隙有规律地为新骨组织完全修复，最终恢复骨连续性且结构正常。DO新生骨组织显示了不断钙化成熟的趋势，证明D0的成骨活动未经过软骨中介体。     

牵张成骨腭裂整复术新骨组织骨形成蛋白的表达分布与X线影像特征

目的:观察牵张成骨术矫治腭裂新骨形成的X线影像学特征,骨形成蛋白(BMP)的表达与分布。方法:以家猫14只为实验对象,其中12只建立人工腭裂实验模型。实验组(10只):造裂手术同时安置口内腭裂牵张装置。4 周后,二期手术形成骨运送盘,术后第6日起,以每次014 mm,每日两次的频率和恒定方向进行牵张,至腭部软硬组织裂隙封闭。固定期第2、4、6、8及12周安乐处死动物各2只,切取标本行X线摄片及以Anti-BMP单抗免疫组化方法染色观察;另2只动物为实验对照组。结果:免疫组化结果显示,术后BMP广泛于牵开间隙的成骨细胞内表达, 至术后4~6周成骨活跃,骨连续性恢复。8周及12周组BMP表达渐趋减弱。X线影像亦显示新骨组织的钙化成熟是沿牵张方向由两侧向中央区域逐渐发展,二者具有时相相关性。实验对照组未见修复影像。结论:牵张成骨过程经历了一个由无到有,由弱变强至整复骨缺损,而后趋于减弱至相对静止的动态变化规律。X线影像学研究手段亦证明,牵张间隙有规律地为新骨组织完全修复,最终恢复骨连续性且结构正常。     

牵张成骨修复犬腭裂愈合过程的观察

目的:探索截骨牵张联合缝牵张修复犬腭裂中两侧骨岛在中线区愈合的机理。方法: 健康杂种幼犬6只,建立人工Ⅱ°腭裂模型3～4周后沿腭外侧缝内侧1mm纵行切开腭骨水平板,腭横缝区不截骨,立即以250～280g力持续向内侧和后方牵张至硬腭裂隙关闭,裂隙关闭1周后进入保持期。分别于牵张结束即刻、1、2、4、8、12周处死,采用直接观察、X线片和组织学方法评价中线区愈合情况。结果: 牵张5～7d后人工裂隙逐渐关闭,两侧骨岛后移,硬腭平均延长4.78mm。两侧骨岛后份在5～8mm长腭中线上呈叠瓦状重叠,表面粘膜受压凹陷,逐渐融合,4周时出现新生骨桥连结;其前方15～18mm的裂缘粘膜变薄,于正中相互接触,但并未发生组织融合。结论:截骨牵张联合缝牵张可使两侧腭裂裂缘在中线区后分发生骨性融合。