一氧化氮合酶和鸟苷酸环化酶在人眼睫状体和小梁网中的表达

目的：研究神经元型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase , nNOS）,诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase , iNOS）,内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase , eNOS）及鸟苷酸环化酶（guanylyl cyclase , GC）在正常人眼睫状体小梁网和Schlemm’s管上的表达及其分布。 方法：收集12例角膜移植后残余的眼球组织（排除其它眼部异常）,10例眼球组织常规石蜡包埋切片,2例眼球取睫状体组织行Western blot分析。切片脱色素后以免疫组织化学EnVision/HRP二步法检测nNOS﹑iNOS﹑eNOS及GC在睫状体上皮细胞中的表达,以磷酸缓冲液代替上述各种一抗作为阴性对照。睫状体组织提取蛋白质后Western blot法检测nNOS﹑iNOS﹑eNOS及GC的表达。 结果：三种一氧化氮合酶及GC在睫状体上皮细胞、睫状肌、小梁网以及Schlemm’s管内皮细胞中均有表达。在睫状体上皮细胞中,nNOS主要表达在色素上皮和非色素上皮细胞胞浆的交界处。Western blot法证实nNOS﹑iNOS﹑eNOS及GC蛋白在睫状体中的表达。 结论：正常人眼睫状突上皮细胞、小梁网和Schlemm’s管内皮细胞中,三种NOS及GC均有表达,提示一氧化氮/环鸟苷酸（NO/cGMP）信号通路可能参与人眼房水生成和排出过程。     

涎腺腺样囊性癌VEGF和NOS的表达及其相关性

目的研究血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、诱导型一氧化氮合酶（induciblenitric oxide synthase,iNOS）和内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）在涎腺腺样囊性癌中（sal-ivary adenoid eystic carcinoma,SACC）的表达及其相关性;研究一氧化氮（nitric oxide,NO）和VEGF的相互作用及在促肿瘤生长中的作用机制。方法应用免疫组化方法检测32例涎腺腺样囊性癌标本VEGF、iNOS和eNOS的表达及分布。结果 32例涎腺腺样囊性癌组织中,表达iNOS的为68.75%,表达eNOS的为78.13%,表达VEGF的占62.5%;VEGF与iNOS的表达具有明显相关性（P〈0.05）,VEGF与eNOS的表达无明显相关性（P〉0.05）。结论VEGF与iNOS的表达具有明显相关性,iNOS在VEGF的生成和发挥过程中起重要作用。     

不同浓度氧暴露不同时间对新生鼠肺组织一氧化氮生成的影响

目的研究新生鼠暴露于不同浓度氧不同时间肺组织一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的变化.方法四组新生鼠分别暴露于>95%O2、60%O2、40%O2和正常空气(21%O2)中,取暴露12、24、48和72h的肺组织,硝酸还原酶法检测肺组织匀浆中NO含量,免疫组化研究eNOS和iNOS的表达,并采用MIG2000图像分析测量系统进行半定量分析.结果各时相点新生鼠肺组织NO含量、eNOS和iNOS表达与吸氧浓度呈显著正相关(P<0.01),3个高氧组和正常空气对照组NO含量、eNOS和iNOS的表达在部分或全部时相点有显著差异(P<0.05,P<0.01).结论新生鼠暴露于不同浓度氧不同时间对肺组织NO含量、eNOS和iNOS表达均有影响,过量的内源性NO可能与高氧肺损伤有关.     

涎腺粘液表皮样癌VEGF和NOS的表达及其相关性

目的研究血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、诱导型一氧化氮合酶（induciblenitric oxide synthasei,NOS）和内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）在涎腺粘液表皮样癌的表达及其相关性;研究一氧化氮（nitric oxide,NO）和VEGF的相互作用及在促肿瘤生长中的作用机制。方法应用免疫组化方法检测30例涎腺粘液表皮样癌标本VEGFi、NOS和eNOS的表达及分布。结果 30例涎腺粘液表皮样癌组织中,表达iNOS的为70%,表达eNOS的为80%,表达VEGF的占66.67%;VEGF与iNOS的表达具有明显相关性（P〈0.05）,VEGF与eNOS的表达无明显相关性（P〉0.05）。结论 VEGF与iNOS在涎腺粘液表皮样癌中的表达具有明显相关性i,NOS在VEGF促血管生成过程中起重要作用。     

黄芩茎叶黄酮对大鼠缺血性记忆障碍的改善作用及对胆碱乙酰转移酶和一氧化氮合酶蛋白表达的影响

目的探讨黄芩茎叶黄酮(flavonoids from stem and leaf ofscutellaria baicalensis georgi,SSF)对大鼠永久性慢性脑缺血引起记忆障碍的改善作用及对胆碱乙酰转移酶和一氧化氮合酶蛋白表达的影响。方法雌性sprague-dawley(SD)大鼠双侧颈总动脉永久结扎2个月制备慢性脑缺血记忆障碍模型,通过Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,免疫组化测定海马细胞中胆碱乙酰转移酶(chloine acetyltransferase,ChAT)、神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达来探讨黄芩茎叶黄酮对大鼠缺血性记忆障碍的改善作用及对胆碱乙酰转移酶和一氧化氮合酶蛋白表达的影响。结果与假手术组相比,脑缺血模型组大鼠的学习记忆能力显著降低,找到平台的游泳路程显著延长;海马细胞中ChAT和eNOS蛋白表达显著降低;nNOS和iNOS蛋白表达显著增加。然而,17.5、35.0和70.0 mg/kg SSF灌胃给脑缺血大鼠38 d均能不同程度地改善学习记忆能力障碍,明显缩短大鼠找到平台的游泳路程;增加海马细胞中ChAT和eNOS蛋白的表达;抑制海马细胞中nNOS和iNOS蛋白的表达。结论 SSF对大鼠脑缺血性记忆障碍具有明显的改善作用,其作用机制可能与调节脑内ChAT和一氧化氮合酶的异常变化有关。     

卡托普利对SHR大鼠eNOS、iNOS表达的影响

目的 探讨自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)在高血压发展进程中,卡托普利对SHR内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,...     

电针对大鼠不稳定膀胱逼尿肌及膀胱颈氮能神经递质的影响

目的:观察电针治疗对大鼠不稳定膀胱模型下尿路组织氮能神经递质的影响。方法:制作大鼠不稳定膀胱模型,电针会阳、中膂俞7d后,采用免疫组织化学法检测大鼠膀胱逼尿肌、膀胱颈平滑肌神经源性一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide syn-thase,eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)阳性细胞并计数。结果:不稳定膀胱模型其膀胱逼尿肌、膀胱颈平滑肌中氮能神经递质明显下降,而电针治疗则可促进氮能神经递质的生成和分泌。结论:电针促进膀胱组织中氮能神经递质的生成和分泌可能是电针治疗改善不稳定膀胱功能的主要机制之一。     

iNOS和VEGF的表达与腺样囊性癌临床病理类型关系

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在腺样囊性癌中的表达.方法 检测37例腺样囊性癌、35例多形性腺瘤和40例正常唾液腺组织中iNOS和VEGF的相关表...     

诱导型一氧化氮合酶与胶质瘤

一氧化氮(nitri oxide,NO)是人体内一种生物活性分子.近年的研究表明,它与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关.肿瘤组织中的NO主要由诱导型一氧化氮合酶(iducible nitric oxide synthase,iNOS)催化合成,本文仅就iNOS与脑胶质瘤的关系作一综述.     

大鼠脑缺血再灌注中iNOS源性NO/ONOO-对Caspase-1蛋白表达的影响

目的探讨大鼠局灶性脑缺血2 h再灌注48 h诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)来源的一氧化氮(nitric oxide,NO)和过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO-)对Caspase-1蛋白表达的影响.方法闭塞大鼠左侧大脑中动脉造成局灶性脑缺血模型.给予选择性iNOS抑制剂氨基胍,采用硝酸还原酶法检测脑组织NO含量、流式细胞术检测硝基酪氨酸表达、免疫组织化学法检测Caspase-1蛋白表达的变化.结果与单纯缺血/再灌注组比较,腹腔注入氨基胍抑制iNOS活性可使Caspase-1蛋白表达降低.结论大鼠局灶脑缺血再灌注过程中,iNOS来源的NO/ONOO-可促进Caspase-1蛋白表达,这可能是iNOS活性增加促进细胞凋亡的机制之一.     

青光眼患者小梁网中ONOO^-的表达及与眼压升高关系的研究

目的检测正常人和原发性急性闭角型青光眼(primary acute angle closure glaucoma,PAACG)及原发性慢性闭角型青光眼(primary chronic angle closure glaucoma,PCACG)患者小梁网组织标本中过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO-)的表达,探讨小梁网中ONOO-的变化、分布及与青光眼的关系。方法取正常眼6例及PAACG患者14例18只眼及PCACG患者12例15只眼小梁网组织标本,应用形态学观察,免疫组织化学方法检测小梁细胞ONOO-的标志物硝基酪氨酸(nitrotyrosine,NT)的表达,并采用计算机图像分析系统对检测结果进行分析。结果正常人的小梁网组织标本NT的表达呈弱阳性或不表达,PAACG组小梁网组织中NT呈强阳性表达,PCACG组小梁网组织中NT呈阳性表达,3组间的差异均具有统计学意义(F=25.32,P<0.01),眼压与小梁网NT着色强度呈相关关系(P<0.01)。结论正常人的小梁网细胞ONOO-微弱表达而PAACG与PCACG患者小梁网细胞ONOO-大量表达且其表达量随眼压的升高而增多,表明眼压升高可导致ONOO-过量生成,从而损伤小梁网细胞,进一步加重青光眼眼压升高。     

精神分裂症患者一氧化氮合酶基因表达水平与临床症状的关系

目的 检测精神分裂症患者免疫型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的基因表达水平,探讨其与临床症状之间的关系.方法 采用逆转录-聚核酶链反应(RT-PCR)和半定量技术.分别检测63例精神分裂症患者,54例同胞对照和51例正常对照外周血单个核细胞iNOS、eNOS的基因表达水平,同时应用阳性与阴性症状量表(PANSS)评定精神分裂症患者的临床症状.结果 精神分裂症患者组、同胞对照组和正常对照组的iNOS基因表达水平分别为(1.61±0.10),0.00和0.00,eNOS基因表达水平分别为(1.61±0.11),(1.59±0.11)和(0.60±0.17).其中iNOS基因在对照组(包括同胞对照和正常对照)未见表达;患者组和同胞对照组的eNOS基因表达水平均显著高于正常对照组(P<0.05).同时发现iNOS的基因表达水平与PANSS量表的阳性症状总分显著相关(r=0.462,P<0.01).结论 1.精神分裂症患者存在iNOS的过度表达,而iNOS可能通过产生大量的NO,参与精神分裂症阳性症状的形成.2.遗传背景在精神分裂症的eNOS基因表达方面可能发挥着重要作用.     

子宫内膜异位症中上皮型及诱生型一氧化氮合成酶的表达和意义

目的：检测上皮型一氧化氮合成酶（eNOS)及诱生型一氧化氮合成酶（iNOS)在异位子宫内膜腺上皮细胞中的表达,探讨NO／NOS卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌病中的作用。方法：应用免疫组织化学SP法检测异eNOS和iNOS71例异位子宫内膜和32例正常子宫内膜中的表达。结果：eNOS在子宫内膜腺上皮细胞的增生期表达较低,分泌期较高。iNOS在正常子宫内膜中的表达未见明显变化;异位子宫 内膜中的eNOS和iNOS的表达在增生期和分泌期均明显高于正常对照组;eNOS在子宫腺肌病组的表达高于卵巢子宫内膜异位位组,而iNOS的表达无差异;痛经组iNOS的表达明显高于无痛经组,而eNOS的表达无差异性。结论：eNOS和iNOS在异位子宫内膜中呈持续性过强表达,提示NO／NOS可能与卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌病的发病及进展有关。     

电压门控性氯通道3在高眼压模型大鼠小梁网中的表达

目的: 检测电压门控性氯离子通道3(ClC-3)在大鼠小梁网中的表达情况,探讨其在青光眼发病机制中的可能作用。方法: 30只健康雄性大鼠。左眼作为正常对照,右眼前房内注射玻璃酸钠,每周1次,连续10周,制备高眼压模型,每次全麻后玻璃酸钠注射前采用Tono-Pen XL眼压计测量双眼眼压并记录。实验分为正常对照组、玻璃酸钠注射3周组和10周组。分别取3组大鼠的小梁网组织,采用RT-PCR法检测ClC-3mRNA表达水平,免疫组织化学法检测ClC-3蛋白的表达。结果: 玻璃酸钠注射后1、3和10周,大鼠右眼眼压均较注射前增高(P<0.01),注射后1周眼压值较注射前轻微增高,注射后3周眼压较注射前明显增高,但眼压值未达到高眼压成模标准,注射后10周眼压值较注射前明显增高,达到高眼压成模标准。RT-PCR法检测,与正常对照组比较,玻璃酸钠注射3周组大鼠小梁网组织中ClC-3 mRNA表达水平明显增高(t=7.88,P<0.05);玻璃酸钠注射10周组大鼠小梁网组织中ClC-3 mRNA表达水平明显降低(t=15.93,P<0.05)。免疫组织化学检测,3组大鼠小梁网组织中ClC-3蛋白表达均为阳性,玻璃酸钠注射3周组大鼠小梁网组织中ClC-3蛋白表达强度较正常对照组大鼠增强,玻璃酸钠注射10周组大鼠小梁网组织中ClC-3蛋白表达强度较正常对照组大鼠减弱。结论: 大鼠小梁组织中存在ClC-3的表达,ClC-3可能与小梁网的病理调节有关联,进而参与青光眼的发病。     

鼻粘膜中一氧化氮合酶表达及其意义

目的了解正常鼻粘膜中一氧化氮合酶(NOS)的分布特点及活性并分析其在鼻腔中的生理作用。方法用免疫组化法对eNOS、iNOS在20例正常鼻粘膜中表达情况进行对比研究,并用分光光度计法检测NOS活性。结果正常鼻粘膜组中eNOS有表达并分布在粘膜上皮、腺体和血管内皮细胞中,iNOS偶见细胞表达,二者之间差异有显著性(P<0.01)。NOS活性1.526±0.310U/mgPro。结论鼻粘膜中主要表达eNOS,分布在粘膜上皮、腺体和血管内皮细胞中,由其产生的一氧化氮(NO)在鼻腔的正常生理功能中可能起着重要的作用。     

妊娠合并肝内胆汁淤积症患者血一氧化氮变化及胎盘一氧化氮合酶的表达

目的测定妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)孕妇血清、脐血清一氧化氮(NO)水平及胎盘一氧化氮合酶(NOS)的表达强度,探讨NO在ICP围生儿不良结局中的作用。方法以31例ICP患者为研究组,正常孕妇30例为对照组,测定孕妇静脉血、脐血NO水平,免疫组化法检测胎盘内皮型一氧化氮合酶(iNOS)和诱生型一氧化氮合酶(eNOS)表达强度,对染色强度进行图像分析。结果研究组患者脐血NO水平,胎盘iNOS和eNOS表达强度均显著低于对照组(P<0.01),两组孕妇血清NO水平间差别无显著性意义(P>0.05)。结论ICP孕妇胎盘绒毛组织iN-OS和eNOS表达降低,可能导致胎儿-胎盘循环阻力升高,是ICP孕妇发生胎儿宫内窘迫和早产的原因之一。     

原发性开角型青光眼小梁网内皮细胞凋亡的探讨

目的对比观察原发性开角型青光眼小梁网内皮细胞凋亡数目与正常尸眼小梁网内皮细胞凋亡数目的变化,并探讨其可能的发病机制。方法对16例20眼原发性开角型青光眼（观察组）手术中所切取的小梁组织与17例30眼正常尸眼（对照组）所切除的小梁组织,分别采用流式细胞术进行小梁网内皮细胞凋亡数目的测定,比较原发性开角型青光眼小梁网内皮细胞凋亡情况。结果通过实验发现原发性开角型青光眼小梁网内皮细胞凋亡比例（16％）明显高于正常尸眼小梁网内皮细胞凋亡（5％）。二者相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论原发性开角型青光眼小梁网对房水的滤过率下降,可能与小梁网内皮细胞凋亡数目的增多导致小梁网组织滤过功能的下降有一定的关系．     

唇癌VEGF和NOS的表达及其相关性

目的　研究VEGF、iNOS和eNOS在唇癌的表达及其相关性 ;研究NO和VEGF的相互作用及在促肿瘤生长中的作用机制。方法　应用免疫组化方法检测 4 2例唇癌标本VEGF、iNOS和eNOS的表达及分布。结果　4 2例唇癌组织中 ,表达iNOS的为 6 6 6 7% ,表达eNOS的为 73 81% ,表达VEGF的占 6 1 90 %。VEGF与iNOS的表达具有明显相关性 (P <0 0 1) ,VEGF与eNOS的表达无明显相关性 (P >0 0 5 )。结论　VEGF与iNOS的表达具有明显相关性 ,iNOS在VEGF的生成和发挥过程中起重要作用。     

Expression of nitric oxide synthase and guanylate cyclase in the human ciliary body and trabecular meshwork

Background  The role played by the nitric oxide (NO) signaling pathway in the aqueous humor dynamics is still unclear. This study was designed to investigate the expression and distribution of NO synthase (NOS) isoforms and guanylate cyclase (GC) in human ciliary body, trabecular meshwork and the Schlemm’s canal.

Methods  Twelve eyes after corneal transplantation were used. Expression of three NOS isoforms (i.e. neuronal NOS (nNOS), inducible NOS (iNOS) and endothelial NOS (eNOS)) and GC were assessed in 10 eyes by immunohistochemical staining using monoclonal or polyclonal antibody of NOS and GC. Ciliary bodies were dissected free and the total proteins were extracted. Western blotting was performed to confirm the protein expression of 3 NOS isoforms and GC.

Results  Expression of 3 NOS isoforms and GC were observed in the ciliary epithelium, ciliary muscle, trabecular meshwork and the endothelium of the Schlemm’s canal. Immunoreactivity of nNOS was detected mainly along the apical cytoplasmic junction of the non-pigmented epithelium (NPE) and pigmented epithelial (PE) cells. Protein expressions of 3 NOS isoforms and GC were confirmed in isolated human ciliary body by Western blotting.

Conclusions  The expression of NOS isoforms and GC in human ciliary body suggest the possible involvement of NO and cyclic guanosine monophosphate (cyclic GMP, cGMP) signaling pathway in the ciliary body, and may play a role in both processes of aqueous humor formation and drainage.