侧柏叶HPLC指纹图谱的方法学研究

目的:建立侧柏叶的指纹图谱分析方法,评价侧柏叶药材质量,同时为双柏制剂质量控制提供参考。方法:采用HPLC法测定,色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-C18柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸(梯度洗脱);检测波长为254nm;流速为1mL/min;柱温为40℃。结果:14批侧柏叶共标示出11个共有峰与对照品比较,共有峰中检出槲皮苷和槲皮素。结论:方法准确可靠,重复性好,为侧柏叶药材及其制剂质量控制提供了依据。     

HPLC法同时测定侧柏叶、侧柏炭中的7种成分

目的建立HPLC法同时测定侧柏叶、侧柏炭中杨梅苷、槲皮苷、杨梅素、槲皮素、山柰酚、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮的含有量。方法侧柏叶、侧柏炭提取液的分析采用Welch Ultimate LP-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长330 nm;体积流量1 m L/min。结果杨梅苷、槲皮苷、杨梅素、槲皮素、山柰酚、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮的标准曲线均呈良好的线性关系(r0.999 5),平均回收率为97.6%~101.1%,RSD1.14%(n=6)。结论该方法简便易行,可用于侧柏叶、侧柏炭的含有量测定。     

侧柏叶HPLC指纹图谱建立及4种成分测定

目的建立侧柏叶HPLC指纹图谱,并测定4种成分的含有量。方法采用二次展开法对侧柏叶中异槲皮苷、槲皮苷和穗花双黄酮进行TLC鉴别。侧柏叶甲醇提取物的分析采用Waters Symmetry C_(18)色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm);乙腈-0. 1%磷酸为流动相,梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1 mL/min;检测波长355 nm。结果 10批侧柏叶中在与异槲皮苷、槲皮苷和穗花双黄酮的相应位置上均显相同颜色的荧光斑点,其指纹图谱中有18个共有峰,相似度在0. 987以上。杨梅苷、异槲皮苷、槲皮苷、穗花双黄酮分别在0～1. 461 0 ng (R~2=0. 999 7)、0～150. 45 ng(R~2=0. 995 3)、0～1 800 ng (R~2=0. 999 8)、0～50. 1 ng (R~2=0. 999 9)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为101. 77%、107. 73%、101. 75%、105. 95%,RSD分别为2. 93%、1. 50%、2. 74%、1. 35%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于侧柏叶的质量控制。     

UPLC-MS分析侧柏叶中黄酮类化合物

目的:采用超高效液相色谱-质谱仪联用技术(UPLC-MS)对侧柏叶中黄酮类成分进行分析和鉴别.方法:用Waters BEH C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm).流动相为0.2%甲酸水溶液-甲醇梯度洗脱,使用ESI离子源,在负离子模式下采集数据.结果:推断出侧柏叶中11个黄酮类化合物,并探讨了黄酮类化合物的电喷雾/串联质谱(ESI-MS-MS)的裂解方式.结论:经过超高效液相色谱的分离,利用质谱测定提供的准确质量数,结合紫外光谱的信息可以鉴定侧柏叶中主要的黄酮类成分.探讨了黄酮类化合物的电喷雾/串联质谱(ESI-MS/MS)的裂解方式,为其成分鉴定提供了准确有效的方法.     

山柰及其伪品苦山柰的紫外光谱鉴别

山柰为姜科植物山柰KKaempferia galanga L.的根茎,苦山柰为共同属植物苦山柰K.marginata Y.H.Chen.的根茎。据文献记载苦山柰有毒,不能药用。由于二者性状极为相似,采用《中国药典》一九九○年版及文献方法鉴别较为繁琐,所以我们应用紫外光谱法进行鉴别。 1 材料及仪器 材料:来源于自贡市中药材公司、部分医疗单位以及由市场购得,经鉴定为山柰及苦山柰。     

超高效液相色谱法测定侧柏炭中5个黄酮类成分

目的建立同时测定侧柏炭中杨梅素、槲皮苷、槲皮素、山柰酚和穗花杉双黄酮5种黄酮类化合物的超高效液相色谱(UPLC)分析方法。方法采用Waters Acquity UPLC系统,Waters BEH C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7 mm);流动相为0.05%甲酸水溶液-甲醇,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;柱温30℃;进样量2μL;检测波长360 nm。结果杨梅素、槲皮苷、槲皮素、山柰酚和穗花杉双黄酮在线性范围内均具有良好的线性关系(r≥0.999 5);平均回收率在96.85%～99.01%,RSD≤4.00%。结论 UPLC分离效果及重复性好,且快速、简便,可作为侧柏炭的质量控制方法。     

兜唇石斛HPLC特征图谱研究

目的 建立兜唇石斛HPLC特征图谱.方法 采用Zorbax SB C18色谱柱;流动相为乙腈-0.1％甲酸溶液(梯度洗脱);检测波长为270 nm;柱温为35℃;流速为1.0 mL·min-1.结果 兜唇石斛标示出42个共有峰;10批样品的相似度为0.901～0.961;兜唇石斛鲜品与兜唇石斛干品(水草枫斗)特征峰基本一致.结论 此方法准确可靠,重复性好,为兜唇石斛的质量控制提供了方法依据.     

侧柏炭止血作用活性部位筛选

目的：考察侧柏炭各极性部位对干酵母致血热复合出血模型大鼠的止血作用。 方法：以云南白药为阳性药,对照组及模型组ig羧甲基纤维素钠（CMC-Na）,阳性组、侧柏炭石油醚组、乙酸乙酯组、正丁醇组和水部位组分别ig相应的治疗药物,连续给药7 d,第7天复制血热复合出血模型,以全血及血浆黏度、红细胞计数（RBC）、血红蛋白（HGB）的量、红细胞压积（HCT）、血浆凝血酶时间（TT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）的量、血小板计数（PLT）、血小板压积（PCT）、平均血小板体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）、ADP诱导的血小板聚集率等评价指标为导向,考查侧柏炭各极性部位的止血作用。 结果：与对照组比较,模型组大鼠各切变率下全血及血浆黏度明显增加,RBC,HGB,HCT明显升高,TT,APTT显著延长,PT显著缩短,FIB的量显著增加,PLT,PCT,MPV,PDW明显增加,ADP诱导的血小板聚集率显著降低;乙酸乙酯部位可明显降低模型大鼠全血低切黏度和血浆黏度,明显缩短TT,APTT,明显降低FIB的量,明显降低PDW,显著提高ADP诱导的血小板聚集率,改善肺组织病理性出血现象。正丁醇部位可明显增加ADP诱导的血小板聚集率;水部位可明显降低血浆黏度,明显缩短TT。但正丁醇和水部位作用程度均不及乙酸乙酯部位。石油醚部位对模型大鼠各环节的作用较弱。 结论：侧柏炭乙酸乙酯部位主要通过降低血浆和全血低切黏度、改善内源性凝血功能及促进血小板聚集功能发挥其止血作用,为侧柏炭止血有效部位。     

侧柏叶炮制前后总黄酮的含量变化

目的建立侧柏叶总黄酮的含量测定方法,对侧柏叶、侧柏炭的总黄酮进行定量研究。方法采用紫外分光光度法对侧柏叶总黄酮含量测定方法进行研究。结果采用石油醚脱脂,乙醇加热回流提取侧柏叶中的总黄酮,NaNO2-Al(NO3)3-NaOH为显色系统的含量测定方法,线性范围0.205～3.28mg,r=0.9997,平均加样回收率为98.96%,RSD=0.85%(n=6),侧柏叶总黄酮含量为4.29%,侧柏炭总黄酮含量为3.15%。结论该含量测定方法操作简便,重现性好。侧柏叶炒炭后总黄酮含量降低。     

正交试验法筛选侧柏叶总黄酮的提取工艺

目的:研究侧柏叶总黄酮最佳提取工艺。方法:以总黄酮及槲皮苷的提取率为考察指标,采用L₉(3⁴)正交试验,考察提取溶媒、提取次数、提取时间、料液比因素对提取的影响,确定侧柏叶最佳提取工艺。结果:用70%乙醇为溶媒,以1∶8的料液比,回流3次,每次1.5h为最佳提取条件。结论:该提取工艺方法简单、合理,是侧柏叶黄酮类化合物的最佳提取工艺。