微小RNA-21-5p促进梗死心肌纤维化加重心力衰竭的作用及机制

目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)在心肌梗死后心力衰竭中的作用及相关机制。方法构建小鼠心肌梗死模型,利用实时荧光定量PCR方法分析梗死心肌中miR-21-5p的表达变化;构建miR-21-5p过表达慢病毒,通过在体感染合并心肌梗死小鼠模型,采用超声心动图及免疫组化方法明确miR-21-5p对心肌梗死后心肌纤维化、心力衰竭的影响;体外进行miR-21-5p慢病毒感染,采用细胞划痕试验及细胞计数检测明确miR-21-5p对心脏成纤维细胞功能的影响。结果小鼠梗死心肌中miR-21-5p的表达是假手术组小鼠的1.75倍(t=8.633,P<0.01);与阴性对照组相比,miR-21-5p可导致心肌梗死后心功能进一步恶化(左室射血分数:31.62%±7.63%比42.69%±4.47%,t=2.800,P=0.02),并加重梗死心肌纤维化程度(42.61%±6.73%比23.23%±4.07%,t=3.470,P=0.01);miR-21-5p可下调Smad7表达(0.72倍,t=3.432,P=0.01),促进心脏成纤维细胞的增殖(1.42倍,t=5.855,P<0.01)和迁移能力(1.41倍,t=6.658,P<0.01)。结论 miR-21-5p通过下调Smad7表达,增强心脏成纤维细胞的增殖和迁移能力,加重心肌梗死后心肌纤维化和心力衰竭。     

微小RNA-155通过靶向缺氧诱导因子1α调控心肌纤维化

目的 探讨微小RNA（miR）-155对心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts, CFs）中纤维化相关基因表达的作用及其机制。 方法 实验分为对照组、血管紧张素(Ang)Ⅱ组、Scramble组、miR-155 mimic组、AngⅡ+ Scramble组、AngⅡ+ miR-155 mimic组、AngⅡ+ HIF-1α siRNA组。AngⅡ刺激原代分离培养的小鼠CFs,模拟心肌纤维化过程中CFs活化过程,采用PCR及Western blot检测各组miR-155、1型胶原（Col 1）、3型胶原（Col 3）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-155与缺氧诱导因子（HIF）-1α 3’端非编码区（3’-UTR）的结合作用。 结果 AngⅡ刺激可显著促进小鼠CFs中纤维化相关基因的表达,同时降低miR-155的水平(P <0.05);过表达miR-155可显著降低AngⅡ诱导的小鼠CFs中纤维化相关基因的表达（P <0.05）;HIF-1α受到了miR-155的负性调控,并能同miR-155结合;miR-155 mimic和HIF-1α siRNA能一致性的降低AngⅡ诱导的小鼠CFs中纤维化相关蛋白的表达。 结论 miR-155能抑制AngⅡ诱导的CFs纤维化,进而抑制心肌纤维化;HIF-1α是miR-155的靶基因,并介导了miR-155发挥抑制AngⅡ诱导的CFs纤维化的过程。     

SnoN蛋白对心肌纤维化的影响

心肌纤维化是心血管系统疾病发展到一定阶段的共同病理变化,是心脏功能减退、恶性心律失常发生发展的基础。转化生长因子-β1(TGF-β1)是促进心肌纤维化的重要细胞因子,而核转录共抑制因子SnoN能通过Smads蛋白抑制TGF-β1信号通路,从而抑制心肌纤维化的发生发展。     

慢性心力衰竭患者血清微小RNA-24、转化生长因子-β1表达水平及其与心肌重构和心功能的关系

目的 探讨慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)患者血清微小RNA-24(micro RNA-24,miR-24)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达水平及其与心肌重构和心功能的相关性.方法 选取2017年2月至2018年9月深...     

Smad7的表达对心肌梗死后大鼠心肌纤维化的影响

目的研究心肌梗死（MI）后大鼠心肌Smad7的表达及其与心肌纤维化的关系。方法结扎冠状动脉建立大鼠MI模型,并另设假手术组为对照组。8周后,测定心室的质量/体质量（HW/BW）。以多普勒超声评价心脏功能。以Mallory’s Trichrome染色法检测非梗死区胶原的含量。分别以RT-PCR和Western blot法检测非梗死区左室心肌转化生长因子（TGF）-β1、Smad7 mRNA及蛋白表达的水平。结果与假手术组比较,MI组的HW/BW（P<0.01）、左心室舒张末期内径（LVEDD,P<0.01）、E峰/A峰比值（E/A,P<0.01）、非梗死区胶原的含量（P<0.01）、非梗死区左室TGF-β1mRNA及蛋白的表达（P<0.01）均显著增加;Smad7 mRNA及蛋白的表达（P<0.01）、射血分数（EF,P<0.01）及短轴缩短率（FS,P<0.01）均显著降低。结论MI后大鼠心肌Smad7的表达降低,与MI后的心肌纤维化密切相关。     

洛沙坦对老龄大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨洛沙坦对老龄大鼠心肌纤维化的影响及其发生机制。方法W istar大鼠30只:青年组10只(3月龄);老年组20只(18月龄),其中非用药组10只,用药组10只(洛沙坦,20 mg.kg-1.d-1,用药8 w)。生化方法测定心肌羟脯氨酸浓度(HC),胶原VG染色法检测心肌胶原容积分数(CVF)、心肌血管周围胶原面积和管腔面积比例(PVCA);免疫组化法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)在大鼠心肌组织的表达。结果与青年组相比,老年非用药组HC、CVF和PVCA明显增高(P<0.01,P<0.001,P<0.01);与老年非用药组相比,老年用药组上述指标明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.05),TGF-β1表达在老年非用药组较青年组明显增强(P<0.05)。TGF-β1表达与HC、CVF和PVCA呈正相关(rs分别为0.462、0.391、0.416;P<0.01,P<0.05,P<0.05)。结论TGF-β1随增龄表达逐渐增加,可能参与了增龄过程中老龄大鼠心肌纤维化的形成。洛沙坦在一定程度上抑制了老龄大鼠心肌纤维化的形成。     

肾去交感支配对心肌梗死后大鼠心肌纤维化和转化生长因子-β1的影响

目的 探讨肾去交感神经术(Renal sympathetic denervation,RSD)对心肌梗死大鼠心肌纤维化和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达水平的影响。方法 52只雄性SD大鼠随机分为4组,正常组对照组（Control组）、肾去交感组（RSD组）、心肌梗死组(MI7d Sham组)、肾去交感干预组（MI7d RSD组）。MI7d Sham组和MI7d RSD组分别给予前降支冠脉结扎术制备心梗模型7天后行肾交感假手术或去交感术。心脏彩超评估大鼠左心室收缩末期直径（LVESD）,左心室射血分数（LVEF）和左心室短轴缩短率（LVFS）。Masson法检测大鼠左心室心肌胶原容积分数(CVF)。RT-PCR法和Western-blot法分别检测大鼠左室心肌TGF-β1 mRNA和TGF-β1蛋白的相对表达水平。结果 与MI7d Sham组相比,MI7d RSD组大鼠LVESD明显减小（LVESD: 3.13mm ± 0.25mm vs. 5.23mm ± 0.15mm, P<0．01）,而LVFS和LVEF均增高（LVFS: (38.2 ± 4.5)% vs. (23.1 ± 3.3)%,P<0．01; LVEF: (61.7 ± 1.3)% vs. (40.4 ± 2.7)%,P<0．01）。与MI7d Sham组相比,MI7d RSD组胶原容积分数减少((42.66 ± 7.55) % vs. (59.33±9.79)%,P<0．01),TGF-β1 mRNA(1.47±0.09 vs. 2.00±0.09,P<0.01)和TGF-β1蛋白(0.46±0.04 vs. 0.73±0.02,P<0．01)的相对表达量均减少。结论 肾去交感神经术能抑制心肌梗死大鼠心肌纤维化并改善心功能,可能与下调TGF-β1的表达有关。     

微小RNA-145-5p与脓毒症急性肺损伤的相关性研究

目的 探究微小RNA(miR)-145-5p与脓毒症急性肺损伤(ALI)的相关性.方法 将60只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组30只和ALI组30只,通过呼吸道滴注脂多糖(LPS)的方式建立小鼠脓毒症ALI模型.检测两组小鼠肺组织中miR-145-5p和AMP活化蛋白激酶(AMPK)蛋白水平并进行比较.采用Pear...     

结缔组织生长因子与心肌纤维化

结缔组织生长因子（CTGF）在纤维化组织中高表达,促进细胞增殖和细胞外基质的合成和积聚,从而参与纤维化的发生发展。本文对CTGF与心肌纤维化的关系进行论述。     

外源性硫化氢对阿霉素心肌病大鼠心肌纤维化影响的研究

目的:本实验以阿霉素(盐酸多柔比星ADR)诱导的心肌病大鼠为研究对象,探讨外源性硫化氢(H2S)供体硫氢化钠(Na HS)是否通过调控转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,从而减轻心肌纤维化。方法:40只,雄性,SD大鼠,随机分为四组:1ADR组(n=12);2 ADR+Na HS组(n=12);3Na HS组(n=8);4对照组(n=8);药物均腹腔注射,连续用药10周,用心脏超声心动仪检测大鼠心功能,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠心肌组织中H2S、TGF-β1以及I型和III型胶原的浓度;用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)检测大鼠心肌组织中TGF-β1mRNA的表达量。结果:阿霉素组大鼠心功能较对照组明显降低(P<0.05),心肌组织中TGF-β1以及I型和III型胶原的表达较对照组明显增多(P<0.05),另外H2S浓度较对照组明显减少(P<0.05)。补充外源性硫化氢后大鼠心功能明显好转,心肌组织中TGF-β1以及I型和III型胶原的表达较阿霉素组明显减少(P<0.05)。结论:补充外源性硫化氢可通过减少TGF-β1的表达,减轻心肌纤维化,改善大鼠心功能。     

阿尔茨海默病患者血清miR-98-5p和miR-142-5p水平变化及其意义

目的 探讨阿尔茨海默病（AD）患者血清微小RNA-98-5p(miR-98-5p)、微小RNA-142-5p(miR-142-5p)水平变化及其临床意义。方法 选择AD患者103例（观察组）、体检健康的志愿者50例（对照组）,采集两组清晨空腹外周静脉血,离心留取血清,采用RT-qPCR法检测血清miR-98-5p、miR-142-5p,采用ELISA法检测血清Aβ1-40、Aβ1-42,同期采用简易精神状态检查量表（MMSE）评分评估认知功能。采用Pearson/Spearman相关分析法分析AD患者血清miR-98-5p、miR-142-5p水平与血清Aβ1-40、Aβ1-42水平和MMSE评分的关系。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-98-5p、miR-142-5p水平对AD的诊断价值。结果 观察组血清miR-98-5p、miR-142-5p水平均显著高于对照组（t/Z分别为7.557、5.827,P均<0.01）。观察组血清Aβ1-40水平显著高于对照组（Z=7.519,P<0.01）,血清Aβ1-42水平和MMSE评分均显著低于对照组（t/Z分别为5....     

银杏叶提取物对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞纤维化的干预作用

目的研究银杏叶提取物对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞纤维化的干预作用。方法体外培养心肌成纤维细胞,加入10-7mol AngⅡ模拟大鼠心肌纤维化体外模型。ELISA检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子-β(TGF-β)含量。结果银杏叶提取物可明显降低AngⅡ引起的心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原分泌增加,并能降低CTGF、TGF-β表达。结论银杏叶提取物可改善AngⅡ引起的心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原分泌增加,其机制可能与CTGF、TGF-β有关。     

黄芪总皂苷对X线诱导的心肌成纤维细胞纤维化损伤的影响

目的观察黄芪总皂苷(AST)对X线照射诱导的心肌成纤维细胞(CFs)纤维化损伤的影响。方法利用小剂量(0.0,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0 Gy)X线照射CFs,通过MTT检测细胞增殖活性的改变,通过PCR和Western印迹检测转化生长因子(TGF)-β1和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)表达水平。结果 1.0 Gy X线照射CFs后48 h作为X线诱导CFs促纤维化损伤的建模条件。AST可剂量依赖性地抑制X线照射CFs产生的活性氧(ROS),降低Col-Ⅰ和TGF-β1、p-Smad2/3 mRNA和蛋白表达水平。结论 AST显著抑制X线诱导的CFs纤维化损伤效应,这种作用可能与其抗ROS作用有关。     

单核细胞趋化蛋白-1对高血压心肌纤维化的作用及其与转化生长因子-β的关系

目的研究单核细胞趋化蛋白-1(mononuclear chemotaxis protein-1,MCP-1)和转化生长因子-β(transforming growthfactor-β,TGF-β)对高血压心肌纤维化的影响,探讨炎性反应在高血压心肌纤维化发生发展中的作用.方法左旋硝基精氨酸甲酯(Nω-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)喂饲建立高血压模型.用组织学的方法评估心肌纤维化的程度.RT-PCR测定大鼠心脏组织内MCP-1和TGP-β的mRNA水平.结果(1)慢性阻断一氧化氮合酶活性显著升高大鼠尾动脉压.(2)慢性阻断一氧化氮合酶活性可引起心脏间质纤维化和血管周围纤维化.7 d组、14 d组和28d组的胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF)分别为4.45%±0.20%、5.42%±0.68%和7.02%±0.82%,与对照组3.12%±0.08%比较均有显著性差异(P＜0.05);7 d组、14 d组和28 d组的血管周围胶原面积(perivascular collagen area,PVCA)分别为0.85%±0.09%、1.18%±0.16%和1.52%±0.20%,与对照组(0.51%±0.05%)比较均有显著性差异(P＜0.05).(3)MCP-1 mRNA水平在给药后第3天即有明显升高,随后逐渐下降.3 d组、7 d组、14 d组和28d组的MCP-1 mRNA的水平分别为0.82±0.12、0.38±0.06、0.31±0.05和0.22±0.02,与对照组(0.11±0.01)比较均有显著性差异(P＜0.05).(4)TGF-β mRNA水平在给处理后7 d显著升高,随后维持于较高水平直至第28天.7 d组、14 d组和28 d组TGF-β mRNA的水平分别为1.13±0.08、1.52±0.17和1.46±0.12,与对照组(0.18±0.02)比较均有显著性差异(P＜0.05),3 d组TGF-β mRNA和水平为0.21±0.03,与对照组0.18±0.02比较无显著性差异(P＞0.05).结论(1)MCP-1和TGF-β均参与高血压心肌纤维化的发生发展.(2)MCP-1可能是高血压心肌纤维化的启动因素,TGF-β可能对促进和维持高血压心肌纤维化起重要作用.     

白细胞介素-17A调节转化生长因子β1对病毒性心肌炎小鼠心肌纤维化的影响

目的 在小鼠病毒性心肌炎（viral myocarditis,VMC）心肌纤维化的发展过程中,观察白细胞介素-17A（interleukin-17A,IL-17A）是否通过调节转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）参与心肌纤维化.方法 IL-17A基因敲除（IL-17A-deficient,IL-17A-/-）Balb/c小鼠和野生型（wild-type,WT） Balb/c小鼠分别按电脑随机数字表法分为4组,腹腔注射TCID50为10-5的柯萨奇病毒B3 （coxsackie virus B3,CVB3） 0.1 mL培养液建立小鼠VMC模型,于注射病毒后第0、14、28和42天处死小鼠,然后无菌取心脏组织,苏木素-伊红和Masson染色观察心肌组织形态学,并分别计算心肌病理积分和胶原容积积分（CVF）.实时荧光定量聚合酶链反应检测心肌组织TGF-β1mRNA的表达;酶联免疫吸附测定法检测心肌组织TGF-β1蛋白的表达水平.结果 WT小鼠的心肌纤维化随着VMC的病程发展不断加重,TGF-β1于14 d表达显著升高,28 d和42 d后逐渐下降,但仍高于正常水平,差异有统计学意义（P＜0.05）.与同时点WT小鼠相比,IL-17A-/-小鼠心肌组织的心肌纤维化程度明显减轻,TGF-β1mRNA和蛋白的表达水平明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 IL-17A参与VMC的心肌纤维化过程,并可能通过调节TGF-β1的表达而参与这一过程.     

微小RNA-17-5p通过靶向调控TP53INP1的表达对急性心肌梗死后心室重构的影响

目的：探讨微小RNA(miRNA)mi R-17-5p通过靶向调控肿瘤蛋白53诱导性核蛋白1(TP53INP1)的表达对急性心肌梗死(AMI)后心室重构的影响。方法：选取成年miR-17-5p^-/-、miR-17-5p^+/+和正常型SPF级昆明种小鼠各20只,采用随机数字表法分为假手术组、AMI组、miR-17-5p^-/-假手术组、miR-17-5p^-/-AMI组,miR-17-5p^+/+假手术组和miR-17-5p^+/+AMI组,每组10只,雌雄各半。构建小鼠AMI模型,采用超声心动图检测舒张末期容积指数(EDVI)、收缩末期容积指数(ESVI)和左室射血分数(LVEF),红四氮唑(TTC)染色法检测小鼠心肌梗死面积,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测小鼠心脏组织miR-17-5p和TP53INP1 mRNA表达水平,Western blot法检测小鼠心脏组织TP53INP1蛋白表达水平。结果：与假手术组比较,AMI组建模后7 d和14 d的ED...     

长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1调节微小RNA-155/转化生长因子β1信号轴减轻糖尿病大鼠心肌纤维化的研究

目的 探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)对微小RNA-155(miR-155)/TGF-β1信号轴的调控作用及对糖尿病心肌病（DCM）大鼠心肌纤维化的影响。方法 100只DCM大鼠随机分为正常对照（NC）组、模型组（Mod组）、LncRNA MALAT1低表达组（Sh-MALAT1组）、Sh-MALAT1阴性对照组（Sh-NC组）、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)抑制剂组（Tim-3 inhibitor组）,每组各20只。心肌细胞敲低miR-155或过表达Tim-3后,与MALAT1敲低质粒（Si-MALAT1）共转染,验证LncRNA MALAT1对miR-155及Tim-3调控作用。结果 与NC组比较,Mod组FPG升高,LncRNA MALAT1、Tim-3及TGF-β1/Smad2/3通路蛋白表达升高（P<0.05）,LVEF、FS、miR-155表达降低（P<0.05）。敲低LncRNA MALAT1或抑制Tim-3表达,均可抑制TGF-β1/-Smad2/3介导的炎症-纤维化通路活化,提高心功能指数（P<0....     

直肠癌患者血清miR-144-5p、miR-876-5p表达变化及其与临床病理特征和预后的关系

目的 探讨直肠癌患者血清微小RNA-144-5p(miR-144-5p)、miR-876-5p表达变化及其与临床病理特征和预后的关系。方法 选择直肠癌患者85例（观察组）、健康志愿者52例（对照组）,采集所有研究对象外周静脉血,离心留取血清,采用RT-q PCR法检测血清miR-144-5p、miR-876-5p表达。分析血清miR-144-5p、miR-876-5p表达与直肠癌患者临床病理特征和预后的关系。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-144-5p、miR-876-5p表达对直肠癌患者预后不良的预测价值。结果 观察组血清miR-144-5p、miR-876-5p表达均显著低于对照组（P均<0.05）。血清miR-144-5p、miR-876-5p表达与直肠癌浸润深度、TNM分期和淋巴结转移有关（P均<0.05）,与性别、年龄、肿瘤最大径、组织分化程度无关（P均>0.05）。随访3年,85例直肠癌患者3年生存率为76.47%(65/85)。miR-144-5p、miR-876-5p高表达者3年生存率均显著高于其低表达者（P均<0.05）。ROC...     

葛根素对心肌纤维化模型大鼠左室心肌组织中转化生长因子β_1和结缔组织生长因子表达的影响

目的:研究葛根素对心肌纤维化模型大鼠左室心肌组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:采用异丙肾上腺素(5mg·kg-1.d-1×10d)皮下注射诱导大鼠心肌纤维化,给予葛根素(100mg·kg-1.d-1)干预,实验共8周。32只雄性SD大鼠随机分成4组:模型组,空白对照组,葛根素早期干预组,葛根素后期干预组;每组于实验末,计算左室质量指数,取左室心肌组织进行VG染色、免疫组化染色,分别测算胶原容积积分(CVF)、CTGF蛋白和TGF-β1蛋白含量,取左室游离壁心肌组织检测羟脯氨酸浓度和运用RT-PCR半定量分析CTGFmRNA和TGF-β1mRNA水平。结果:葛根素减少模型组大鼠左室质量指数、左室心肌组织CVF及羟脯氨酸浓度(P0.01),模型组大鼠左室心肌组织CTGF和TGF-β1的过度表达(P0.05)。相关分析显示4组大鼠的左室心肌组织CTGF蛋白含量与左室心肌组织CVF和羟脯氨酸浓度呈正相关(P0.05)。结论:葛根素减少心肌纤维化大鼠的左室心肌间质胶原沉积,减轻和延缓大鼠心肌纤维化,这种作用机制可能是通过抑制左室心肌组织中CTGF、TGF-β1的过度表达来实现。