冰香散对鼠流感Toll样受体及Th1/Th2免疫的影响

目的通过检测鼠流感的肺病理变化及脾细胞Th1/Th2免疫因子及气管粘膜TLR2/4 mRNA的表达变化,初步探讨冰香散挥发油制剂对流感病毒的防治作用及其免疫调节机制。方法选用BALB/c小鼠,随机分为正常组、病毒对照组、利巴韦林组、冰香散挥发油制剂滴鼻组、雾化组,采用不同的给药方式预防性给药7d,第8天以15LD50攻毒,再持续给药5天后取材。肺组织经HE染色后观察其病变程度;脾脏研碎制得脾细胞悬浮液,以RT-PCR法检测细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-5的分泌情况;RT-PCR检测气管粘膜上TLR2/4基因表达的水平。结果小鼠经H1N1感染后肺部出现严重的炎性细胞浸润,与正常组相比TLR2/4 mRNA、IFN-γmRNA表达水平上升(P0.01),IL-4、L-5 mRNA表达水平下降(P0.01)。与病毒对照组相比利巴韦林组可显著增加IL-4 mRNA的表达(P0.01),降低IFN-γmRNA表达(P0.05);冰香散挥发油制剂滴鼻、雾化组能显著增加IL-4 mRNA、IL-5 mRNA的表达水平(P0.01或P0.05),但在降低IFN-γmRNA的表达上冰香散挥发油制剂滴鼻组的效果比较显著(P0.05)。各给药组都有降低TLR2/4基因表达的趋势,但只有冰香散挥发油制剂滴鼻组的作用比较显著(P0.01)。结论冰香散挥发油制剂对流感病毒性肺炎病变有一定的防治作用,调控炎性细胞因子及TLR2/4基因的表达水平可能是其抗流感所致肺炎的重要作用机制之一。     

芍药苷对小鼠脾细胞增殖及分泌细胞因子的影响及机制

目的:研究芍药苷对体外小鼠脾细胞增殖及细胞因子的作用,探讨其对细胞免疫功能的影响及机制。方法:昆明种小鼠颈椎脱臼处死,体外培养小鼠脾细胞,不同质量浓度的芍药苷溶液(62.5,12.5,250,500,1 000 mg·L-1),另设空白组,分别于培养3,6,9 d时取出细胞培养板,采用血球计数板计数细胞数法测定不同浓度芍药苷对小鼠脾细胞增殖活性的影响,酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清中白细胞介素-2(IL-2),干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;作用9 d后取细胞,Western blot方法测定IL-2,IFN-γ,TNF-α和核因子-κB(NF-κB)蛋白表达;500 mg·L-1芍药苷溶液作用5 d后,流式细胞仪(FCM)检测细胞表型变化。结果:在3,6,9 d,不同浓度芍药苷给药组的脾淋巴细胞增殖活性均高于空白组(P0.01);各给药组IL-2,IFN-γ,TNF-α的含量较空白组明显升高(P0.05,P0.01),并随芍药苷浓度的增加而增加;淋巴细胞表型分析显示,芍药苷能够刺激T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖;不同质量浓度芍药苷能够升高IL-2,IFN-γ,TNF-α和NF-κB蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:芍药苷可通过激活NF-κB表达,促进细胞因子IL-2,IFN-γ和TNF-α的分泌和表达,促进细胞增殖,提高机体免疫功能。     

补肾固表颗粒对免疫低下小鼠血清IL-2、IFN-γ及NK细胞活性、脾淋巴细胞增殖的影响

目的探究补肾固表颗粒对免疫低下小鼠血清IL-2、IFN-γ、TNF-α、NK细胞及脾淋巴细胞增殖的影响。方法将60只ICR雄性小鼠随机分成6组,即空白对照组,模型组,玉屏风组,补肾固表颗粒高、中、低剂量组。除空白对照组外,其余各组腹腔注射环磷酰胺50 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续3 d,建立免疫抑制动物模型。各组给予相应药物灌胃,连续28 d。采用MTT比色法检测脾淋巴细胞增殖情况,LDH法检测NK细胞杀伤活性,ELISA法检测血清IL-2和IFN-γ水平。结果与模型组比较,补肾固表颗粒可增强免疫低下小鼠脾淋巴细胞增殖能力(P0.05),提高脾淋巴细胞杀伤率(P0.001),使血清IL-2、IFN-γ和TNF-α含量显著升高(P0.01)。结论补肾固表颗粒可以增强免疫低下小鼠脾淋巴细胞转化和杀伤能力,提高血清IL-2、IFN-γ和TNF-α分泌水平,从而改善机体的免疫功能。     

阿里红多糖体外免疫活性的研究

目的:探讨阿里红多糖(FoP)对小鼠体外免疫的调节作用。方法:采用体外淋巴细胞增殖实验考察FoP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测不同浓度FoP单独作用及其与有丝分裂原ConA、LPS共同作用对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;采用酶联免疫吸附实验(ELSA)法检测不同浓度FoP体外刺激对小鼠脾淋巴细胞诱生白介素2(IL-2)、白介素13(IL-13)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子的影响。结果:Fop在25~100μg/m L浓度范围内能显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖,并与Con A、LPS协同促进T、B淋巴细胞增殖,还能诱导脾淋巴细胞分泌IL-2、TNF-α。结论:FoP具有免疫促进作用。     

补肾固表颗粒对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的观察补肾固表颗粒对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响,探讨其作用机制。方法将60只ICR雄性小鼠随机分为空白对照组、模型组、玉屏风组和补肾固表高、中、低剂量组,除空白对照组外,其余各组小鼠腹腔注射环磷酰胺50 mg/(kg2d),连续3 d,建立免疫抑制动物模型,各给药组给予相应药物,连续28 d。末次给药后眼球取血,脱颈处死小鼠后无菌取出脾脏,MTT法检测脾淋巴细胞增殖,LDH法检测NK细胞活力,ELISA检测血清白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果与空白对照组比较,模型组小鼠脾淋巴细胞增殖能力、NK细胞活力、IL-2和IFN-γ水平均明显降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,补肾固表各剂量组小鼠脾淋巴细胞增殖能力、NK细胞活力、IL-2和IFN-γ水平均明显增强(P0.05,P0.01,P0.001),脾脏质量及营养状况亦有改善。结论补肾固表颗粒通过增强免疫低下小鼠脾淋巴细胞转化和杀伤能力,提高血清IL-2和IFN-γ分泌水平,从而改善机体的免疫功能。     

五味健体口服液对免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的:考察五味健体口服液对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法:采用环磷酰胺制备小鼠免疫低下模型,通过检测小鼠脾淋巴细胞转化能力、碳粒廓清指数、胸腺指数、脾脏指数、血常规及血清中IgG、TNF-α、IL-2、IFN-γ含量等指标,探讨五味健体口服液对小鼠免疫功能的调节作用。结果:在小鼠免疫低下模型中,与模型组比较,五味健体口服液可显著提高免疫低下小鼠淋巴细胞增殖能力、胸腺指数、脾脏指数、碳粒廓清指数(P0.05);并能提高血清IgG、TNF-α、IL-2、IFN-γ含量及外周血中WBC、RBC、HGB、PLT含量(P0.05)。结论:五味健体口服液能显著增强免疫低下小鼠特异性和非特异性免疫功能。     

知母各化学拆分组分的抗炎及免疫调节活性

目的:研究知母及其各化学拆分组分的抗炎免疫活性及其物质基础的对应关系。方法:C57小鼠除正常对照组外均采用2,4二硝基氟苯诱发超敏反应模型,观察小鼠免疫器官指数、耳肿胀度、耳组织IL-4及IFN-γ含量,体外实验观察刀豆蛋白(Con A)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖力、脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症因子分泌量。结果:知母煎液组、皂苷组及多糖组小鼠耳肿胀度及免疫器官指数显著降低(P0.05),免疫细胞增殖能力显著降低(P0.01),小鼠巨噬细胞炎症因子NO、TNF-α分泌显著减少(P0.05)。结论:知母具有显著的抗炎及免疫调节活性,其物质基础为皂苷组分和多糖组分。     

胀果甘草多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响

目的:研究胀果甘草多糖Gi P-B1对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IL-2、IL-13、TNF-α等细胞因子的影响。方法:采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测不同浓度Gi P-B1单独作用及其与有丝分裂原Con A、LPS共同作用对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;采用酶联免疫吸附实验(ELSA)法检测不同浓度Gi P-B1体外刺激对小鼠脾淋巴细胞诱生白介素-2(IL-2)、白介素-13(IL-13)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等细胞因子的影响。结果:Gi P-B1在25~100μg/m L浓度范围内能显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖,并与Con A、LPS协同促进T、B淋巴细胞增殖,还能诱导脾淋巴细胞分泌l L-2、TNF-α。结论:Gi P-B1具有免疫增强作用。     

玄参水提物在生理和病理状态下对小鼠免疫功能的影响

目的:本实验对玄参水提物在正常生理状态和环磷酰胺所致免疫功能低下状态的小鼠免疫作用进行研究。方法:观察正常生理状态和环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠碳廓清试验指数,并计算其胸腺和脾腺指数;应用二硝基氟苯法诱导小鼠迟发型变态反应测定其免疫功能,并测定血清溶血素及IL-2、IL-4、IFN-γ的含量;体外测定脾细胞增殖反应及诱导小鼠RAW 264.7炎症因子的分泌量。结果:玄参水提物高剂量在两种状态下均可促进小鼠免疫器官及碳廓清指数的增长(P0.05);增强小鼠迟发型变态反应的强度(P0.05)及改善小鼠血清溶血素含量的降低(P0.05);促进脾细胞增殖(P0.05)及显著性升高IL-2、IFN-γ、TNF-α及NO的含量(P0.05)。结论:说明玄参可增强在正常生理和环磷酰胺所致免疫低下两种状态下小鼠的免疫功能。     

预防性中药防治流感病毒作用及其免疫调节机制探讨

目的:研究预防性中药抗流感病毒及其黏膜免疫调节机制。方法:56只雌性SPF级BALB/C小鼠,随机分为造模组(48只)和正常组(8只),建立小鼠流感病毒H1N1/FM/1感染模型,造模成功后随机分为模型组、病毒唑组(0.1 g·kg-1),银翘散组(40 g·kg-1),玉屏风散组(60 g·kg-1),冰香散雾化组(0.6 g·kg-1),冰香散滴鼻组(0.03 g·kg-1),ig给药,5 d后处死小鼠,测定病毒载量,同时进行肺组织病理学检查;检测对气管黏膜树突状细胞(DC)数量(OX-62),成熟度:以CD80,趋化因子激素受体7(CCR7)阳性表达面积表示及抗原识别受体Toll样受体2(TLR2)和TLR4的影响;对鼻通道淋巴组织细胞CD4+,CD8+进行相应的检查。结果:与模型组比较,预防性中药对病毒载量及肺组织病理学有显著的抑制作用,流感病毒感染小鼠气管黏膜OX-62增加,冰香散(雾化)能使流感病毒感染鼠DC数降低,CD80和CCR7明显下降,而病毒唑和银翘散制剂能提升CCR7阳性表达面积,流感病毒感染鼠黏膜TLR2,TLR4表达增强,冰香散能抑制流感病毒感染鼠TLR2的表达,冰香散滴鼻给药能提高CD4+,CD8+的水平,均具有明显的统计学差异(P0.05,P0.01)。结论:三类防治流感的中药均有较好的抑制流感病毒作用,其作用可能与其调节呼吸道黏膜免疫作用有关。