灵芝孢子油对肺腺癌癌性胸水中原代肿瘤细胞的抗肿瘤作用

目的：研究灵芝孢子油对肺腺癌的癌性胸水中原代肿瘤细胞的抗癌作用。方法：体外培养肺腺癌细胞系A549,用CCK-8法检测灵芝孢子油对A549细胞的体外抗肿瘤作用。收集12例经病理确诊的肺腺癌患者的癌性胸水分离原代肿瘤细胞,用CCK-8法检测灵芝孢子油及临床常用化疗药物对原代肿瘤细胞的药物敏感性;流式细胞仪检测灵芝孢子油对原代肿瘤细胞的凋亡诱导作用,RT-PCR检测灵芝孢子油对凋亡相关蛋白基因bax及bc l-2 mRNA表达的影响。结果：灵芝孢子油对5例癌性胸水中原代肿瘤细胞的IC50平均值为0.28±0.04μl/m l,与对A549细胞的IC500.46±0.08μl/m l无显著差异（P〉0.05）。在各测试药物浓度（TDC）下,灵芝孢子油、多西紫杉醇、顺铂和健择对原代肿瘤细胞的抑制率分别为48.7%±3.3%,31.6%±14.1%,30.2%±11.6%,51.4%±5.6%,灵芝孢子油与这些化疗药物的抗肿瘤作用无显著差异（P〉0.05）。灵芝孢子油显著促进原代肿瘤细胞凋亡,对原代肿瘤细胞中凋亡相关蛋白bax mRNA有明显上调作用,对bc l-2 mRNA有明显下调作用。结论：灵芝孢子油对肺腺癌的癌性胸水原代肿瘤细胞有较好的抗癌作用。     

癌性胸水LAK细胞的特性和抗肿瘤作用的观察

１７例癌性胸水经不连续密度梯度离心分离淋巴细胞，在ｒＩＬ－２诱导下体外培养，观察不同时期的ＬＡＫ细胞增殖速度、细胞表型和细胞毒活性，结果显示，胸水ＬＡＫ细胞在培养第１４天细胞扩增至原代的２０倍～８０倍，２１天后生长速度逐渐减慢。培养７天时对Ｋ５６２细胞和Ｒａｊｉ细胞的杀伤活性分别为７２％和６５％，以后随培养天数增加均呈逐渐下降趋势，但均高于同期培养的外周血ＬＡＫ细胞杀伤活性。培养７天～２１天间的细胞表型分析提示，ＣＤ＋３细胞百分率无明显改变，ＣＤ＋４细胞略增加，ＣＤ＋８细胞略有下降。ｒＩＬ－２／ＬＡＫ联合治疗肺癌胸水和肾癌胸水总有效率分别为５０％和６７％。     

胸水唾液酸测定对癌性胸水的诊断价值

 本文对29例癌性胸水和36例结核性胸水病人胸水中总唾液酸、脂结合唾液酸浓度进行了测定,并与胸水细胞学检查、癌胚抗原测定进行了比较。实验结果表明,胸水中总唾液酸浓度测定对癌性胸水的诊断意义最大,但它不能鉴别引起恶性胸水的原因。     

胸腔内灌注化疗癌性胸水

目的探讨胸腔内准注化疗治疗癌性胸水的临床效果。方法对56例癌性胸水患者（其中原发肿瘤为肺癌32例,乳癌17例,胃癌3例,大肠癌2例,恶性胸膜间皮瘤2例采用针吸法和胸腔内置管引流法使恶性胸水大部分排出。胸腔内注入化疗药：DDP70—100mg,ADM50-70mg,MMC15-20mg,5-Fu1000-1500mg。结果本组总有效率96.4％。随访时间均超过12个月。胸水缓解期超过6个月以上者为73.2％（41／56）。毒性反应食欲减退、恶心、呕吐者占72％,白细胞、血小板降低者19.8％。结论胸腔内灌注化疗治疗癌性胸水具有疗效好、毒性低、费用少、是值得推广的治疗方法。     

无花果提取液治疗癌性胸水的临床研究

无花果提取液治疗癌性胸水２１例，本品５００ｍｇ由胸腔注入，每周１次，共２￣３次，结果总有效率５２．３％，有效者中位生存期７月，无效者中位生存期２．７月（Ｐ〈０．０５）。本品无胃肠道副反应和骨髓抑制，适合于年老，体弱，化疗不能耐受和（或）白细胞低下不能胸腔内化疗的癌性胸水患者。     

榄香烯乳对晚期肺癌癌性胸水的治疗作用

榄香烯乳对晚期肺癌癌性胸水的治疗作用茅国新，高志兰，翟明之，王靖南，周治平南通医学院附属医院（江苏省南通市２２６００１）编者按：由大连金港制药有限公司研制、生产的国家二类抗肿瘤新药──榄香烯乳注射液经卫生部批准已试用２年，Ⅲ期临床工作已告结束并通过了...     

闭式引流并注入顺铂治疗癌性胸水

恶性肿瘤并发恶性胸水常见,约占各种原因所致胸腔积液的25％～39％,尚无满意疗法,预后较差。我们1988年9月至1991年12月采用胸腔闭式引流并注入顺铂的方法,治疗了9例晚期恶性肿瘤并发恶性胸水的病人,效果较为满意。方法与结果一、治疗对象:为经病理证实的恶性肿瘤。在9例患者中,男性6例,女性3例,年龄28岁～66岁,平均47岁。其中肺癌3例,消化道肿瘤2例,胸膜间皮瘤、恶性黑色素瘤、乳腺癌、横纹肌肉瘤各1例。所有患者均并发大量血性胸水(3例胸水中找到癌细胞),在接受闭式引流前反复抽过胸水3～6次,胸片仍提示有大量积液。二、方法:患者坐位,经常规消毒局麻后在患侧腋中线第8肋间胸穿,见胸水后换套管针穿入胸     

Anticancer effect of tetrandrine on primary cancer cells isolated from ascites and pleural fluids

Objective

The present study was designed to examine the effect of tetrandrine on primary cancer cells isolated from the ascites or pleural fluids of patients with metastatic cancers.

Methods

Primary cancer cells were isolated from the pleural fluids (n = 13) or ascites (n = 21) of patients. Compared with culture cell lines, the response of these cancer cells to tetrandrine and chemotherapeutic agents commonly used in clinical practice were determined by WST-8 assay. Tetrandrine-induced apoptosis in primary cancer cells was determined by Annexin V-FITC assay. Quantitative RT-PCR was used to examine the role of apoptotic associated genes in the anticancer effect of tetrandrine.

Results

The primary cancer cells isolated from effusions showed sensitivity to tetrandrine with IC₅₀ values of 38.23 ± 25.77 μM, similar to the IC₅₀ in established cell lines. Patients with gastric cancers were more sensitive to tetrandrine than patients with lung cancers (P = 0.04). Four cancer cells isolated from effusions were resistant to tetrandrine, which also had increased tolerance to docetaxel, cisplatin and 5-fluorouracil. We also observed a weak but significant correlation between sensitivity to tetrandrine and cellular expression of bcl-2 (P = 0.035, r = −0.364).

Conclusions

Using cancer cells isolated from the ascites or pleural fluids, this study shows the potential anticancer effect of tetrandrine against primary cancer cells.     

内皮抑素对宫颈癌细胞生长抑制作用的初步研究

目的:探讨内皮抑素对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法:用MTT法检测细胞生长;用透射电镜观察细胞凋亡;用免疫细胞化学、RT-PCR及Western blot法检测细胞中bcl-2和bax蛋白及mRNA的表达。结果:内皮抑素抑制Hela细胞增殖;能诱导Hela细胞凋亡;而对细胞中bcl-2和bax蛋白及mRNA的表达无明显影响。结论:人内皮抑素具有抑制宫颈癌Hela细胞生长的作用,其作用机制可能与诱发细胞凋亡相关。     

胃癌细胞MKN28(p53-/-)对NSAIDs诱导凋亡敏感性的研究

目的1.明确非甾体消炎药(NSAIDs)能否诱导p53基因突变的胃癌细胞MKN28凋亡.2.明确NSAIDs对MKN28细胞凋亡相关基因bcl-2、bax表达的调控.方法1.通过MTT比色法检测NSAIDs对细胞生长活力的影响.2.应用丫啶橙染色、Annexin-Ⅴ/PI双染色、共聚焦显微镜、流式细胞术检测细胞凋亡.3.应用RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)方法检测bcl-2、bax基因水平的改变.结果1.NSAIDs药物吲哚美辛(Indo)和阿斯匹林(Asp)对胃癌细胞株MKN28均有生长抑制作用,且呈时间/浓度依赖性增强.2.在Indo 800μmol/L、Asp8 mmol/L作用48～96 h后,MKN28细胞凋亡数量稍有增多,但不具有统计学意义.3.随着药物作用时间的延长,MKN28细胞的bcl-2基因mRNA表达逐渐减弱,bax基因表达逐渐增强.结论1.NSAIDs可抑制MKN28胃癌细胞株增殖.2.NSAIDs不能诱导p53基因突变的MKN28胃癌细胞株发生显著的凋亡,提示p53基因突变可能阻断了NSAIDs诱导的细胞凋亡.3.NSAIDs可使MKN28细胞凋亡相关基因bcl-2和bax的水平呈现促进凋亡倾向的改变.     

Bcl-2和Bax的表达与乳腺癌组织学分级及预后的关系

目的：探讨bcl-2和bax基因在乳腺癌中的表达与乳腺癌组织学分级及预后的关系。方法：应用SP免疫组化染色方法，检测40例乳腺癌组织中bcl-2、bax的表达情况。结果：组织学I级＋Ⅱ级乳腺癌中bcl-2蛋白阳性表达率与组织学Ⅲ级乳腺癌中bcl-2蛋白阳性表达率有显著差异（P〈0．01），Ⅰ＋Ⅱ级组bax蛋白阳性表达率与Ⅲ级组bax蛋白阳性率表达无显著差异（P〉0．05），Ⅰ级＋Ⅱ级组bcl-2高表达和bax低表达（bcl-2／bax≥1）与Ⅲ级组bcl-2高表达和bax低表达（bcl-2／bax≥1）有显著差异（P〈0．01）。10年以上存活组中bcl-2阳性表达率与10年以下存活组有显著差异（P〈0．01）；10年以上存活组bax阳性表达率与10年以下存活组有显著差异（P〈0．05）；10年以上存活组bcl-2高表达和bax低表达（bcl-2／bax≥1）与10年以下存活组bcl-2高表达和bax低表达（bcl-2／bax≥1）有显著差异（P〈0．05）。结论：bcl-2和bax比值与乳腺癌组织学分级、预后关系密切，bcl-2高表达和bax低表达的乳腺癌患者组织学分级好，预后好。     

熊果酸诱导人胃癌BGC823细胞凋亡及其作用机制初探

背景与目的：熊果酸（ursolic acid,UA）广泛存在于夏枯草、白花蛇舌草等清热解毒药中,可抑制多种肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡,具有广泛生物学活性。本研究将UA作用于人胃癌BGC823细胞,观察其对细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：MTT法检测UA对BGC823细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期与凋亡的变化;Realtime-PCR检测细胞bax、bcl-2mRNA表达的变化。结果：UA呈时间-剂量依赖性抑制BGC823细胞增殖,分别作用24、48、72h后半数抑制浓度依次为36.88、34.72、32.18μmol/L;UA能诱导BGC823细胞凋亡,并阻滞细胞于G2/M期;此外,其还可上调BGC823细胞bax及下调bc1-2mRNA表达,且作用随剂量的增加而加强。结论：UA呈时间-剂量依赖性抑制BGC823细胞增殖,并诱导其凋亡,阻滞细胞于G2/M期;其凋亡机制可能与上调bax及下调bcl-2基因的表达有关。     

丹皮酚对人大肠癌H T-29细胞bcl-2和bax基因表达的影响

 引言 化疗药物的耐药及其毒副作用一直是大肠癌治疗的两大难题，因此在植物中寻找有效且副作用小的抗肿瘤药物已成为国内外重要的研究课题。研究表明，丹皮酚（Paeonol，Pae）具有一定的抗肿瘤活性，灌胃给药有抗小鼠肝肿瘤作用。我们已报道Pae在体外能显著抑制人大肠癌HT-29细胞的增殖。为进一步探索这种抑制作用的可能机制，我们进行了以下研究，为Pae的临床应用提供理论和实验依据。     

紫杉醇对人骨肉瘤细胞凋亡及对bcl-2 、bax基因表达的影响

 目的 了解紫杉醇诱导人骨肉瘤细胞的凋亡效果,以及凋亡与bcl-2和bax表达之间的关系。方法 用不同浓度的紫杉醇作用于骨肉瘤细胞MG63。采用胎盼蓝染色法,于细胞记数板进行活细胞率检测计算。采用光镜和电子显微镜对细胞形态改变进行观测,采用原位缺口末端标记凋亡检测法（TUNEL）和流式细胞术（Annexin-V-FITC＆PI）对细胞凋亡进行检测。采用免疫组织化学法对凋亡调节基因bcl-2和bax表达进行检测。结果 骨肉瘤活细胞率随着紫杉醇作用时间延长和浓度增高而降低。紫杉醇诱导骨肉瘤细胞MG63凋亡表现为典型的凋亡特征,包括：细胞形态学改变,细胞染色质浓聚,染色质新月形变,胞核碎裂等。TUNEL法检测到了细胞DNA片段的断裂。随着细胞凋亡的发生,开始出现G2/M期阻滞。紫杉醇可以降低凋亡相关基因bcl-2的表达和增加bax基因的表达。结论 紫杉醇可以通过时间依赖性和剂量依赖性方式,促使细胞G2/M期阻滞和抑制细胞有丝分裂,从而诱导人骨肉瘤细胞凋亡。这种凋亡可能受到凋亡相关基因bcl-2低表达和bax高表达的调控。     

前列腺癌中BAG-1、bcl-2及bax的表达及意义

目的：检测凋亡抑制因子BAG-1在前列腺癌组织（PCa）中的表达，探讨其与前列腺癌发生发展的关系及其与bcl-2和bax表达的关系。方法：采用免疫组织化学染色法检测BAG-1、bcl-2、bax在10例前列腺增生组织（BPH）、45例PCa组织中的表达。结果：BAG-1在BPH、PCa中的阳性表达率分别为20％（2／10）、91．1％（41／45）。PCa中BAG-1表达水平明显高于BPH（P〈0．05），且在癌组织中与肿瘤临床分期（P〈0．01）、病理分级（P〈0．01）呈正相关。BAG-1与bcl-2在PCa中的表达正相关（P〈0．05）。BAG-1与bax在PCa中的表达也呈正相关（P〈0．05）。结论：BAG-1基因可能通过抑制凋亡在PCa的发生发展中发挥重要作用，且其表达与bcl-2、bag的异常表达密切相关