基质金属蛋白酶3及其抑制剂3在子痫前期患者胎盘中的表达

目的:通过检测子痫前期患者胎盘组织中基质金属蛋白酶3(MMP-3)及其抑制剂3(TIMP-3)的表达,以探讨两者的关系及其在子痫前期发病中的作用。方法:收集34例子痫前期患者(子痫前期组)及32例正常晚期妊娠妇女(正常对照组)的胎盘组织,用免疫组化法检测MMP-3及TIMP-3在胎盘组织中的表达。同时进行HE染色,选取5个高倍视野,计数绒毛血管数。结果:①MMP-3和TIMP-3在胎盘组织的蜕膜细胞和绒毛滋养细胞均有表达。②子痫前期组胎盘蜕膜细胞和绒毛滋养细胞中MMP-3的表达均显著低于对照组(P<0.01)。TIMP-3在子痫前期组胎盘蜕膜细胞和绒毛滋养细胞中的表达量均显著高于对照组(P<0.01)。③子痫前期组胎盘绒毛血管密度明显低于对照组(P<0.01)。结论:子痫前期患者胎盘中MMP-3与TIMP-3的表达情况与正常晚期妊娠妇女存在差异,提示妊娠妇女胎盘组织中MMP-3和TIMP-3的表达水平变化可能与子痫前期的发生、发展相关。     

子痫前期患者滋养细胞中KiSS-1基因及基质金属蛋白酶9表达的临床意义

目的探讨胎盘滋养细胞中KiSS-1基因及基质金属蛋白酶(MMP)9在子痫前期发病中的作用及其与新生儿预后的相关性。方法采用RT-PCR和western blot(蛋白印迹法)检测40例子痫前期患者(其中轻度15例、重度25例,子痫前期组)和20例正常足月正常妊娠妇女(正常妊娠组)胎盘滋养细胞中KiSS-1mRNA和MMP-9mRNA及其蛋白的表达,并与其临床症状及其新生儿围产结局进行相关性分析。结果(1)子痫前期组滋养细胞中KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平分别为1.73±0.24和(78.4±8.0)μg/100μg总蛋白,其中轻度患者为1.50±0.15和(72.4±6.9)μg/100μg总蛋白,重度患者为1.87±0.20和(83.5±3.6)μg/100μg总蛋白;均显著高于正常妊娠组的1.24±0.25和(63.4±2.7)μg/100μg总蛋白(P<0.01)。(2)子痫前期组MMP-9mRNA及其蛋白表达水平分别为0.09±0.06和(9.6±4.3)μg/100μg总蛋白,其中轻度患者为0.11±0.08和(10.0±3.2)μg/100μg总蛋白,重度患者为0.07±0.05和(7.8±2.0)μg/100μg总蛋白;均显著低于正常妊娠组的0.17±0.10和(17.9±7.3)μg/100μg总蛋白(P<0.01)。(3)子痫前期组KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平与中心动脉压(MAP)和24h尿蛋白定量呈正相关,r分别为0.610(P=0.023)、0.713(P=0.011)和0.397(P=0.003)、0.638(P=0.002);与有、无眼底动脉痉挛呈显著正相关,r分别为0.499(P=0.000)和0.511(P=0.000)。子痫前期组MMP-9mRNA及其蛋白表达水平则与MAP、24h尿蛋白定量及有、无眼底动脉痉挛呈显著负相关,r分别为0.561(P=0.042)、0.571(P=0.022)、0.275(P=0.039)、0.375(P=0.048)、0.346(P=0.001)、0.543(P=0.000)。(4)子痫前期组MMP-9mRNA及其蛋白表达水平与新生儿体重呈显著正相关,r分别为0.651(P=0.000)和0.544(P=0.004);KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平与其呈显著负相关,r分别为0.759(P=0.000)和0.865(P=0.000)。(5)随着新生儿窒息程度加重,MMP-9mRNA及其蛋白表达水平呈降低趋势,KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平呈升高趋势(P均<0.05)。结论MMP-9和KiSS-1表达失衡在子痫前期发病中起重要作用,且与新生儿预后密切相关。     

解整合素金属蛋白酶10在重度子痫前期胎盘中的表达及其意义

目的通过对孕妇胎盘组织中解整合素金属蛋白酶10（a disintegrin and metalloproteinase 10,ADAM10）的检测,探讨ADAM10与子痫前期发病的关系。方法选择2009年9月至2012年3月在北京大学人民医院产科住院分娩的30例重度子痫前期（子痫前期组）和30例正常孕妇（正常妊娠组）,采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测两组孕妇胎盘组织中ADAM10 mRNA的表达,并采用免疫组化二步法和蛋白质印迹法（Western Blot）检测胎盘组织中ADAM10蛋白的表达。结果ADAM10表达于胎盘组织的细胞滋养细胞和合体滋养细胞的细胞浆和细胞核中。子痫前期组中ADAM10 mRNA及蛋白的表达均明显高于正常妊娠组（P〈0．05）。结论重度子痫前期胎盘组织中ADAM10的过度表达可能与子痫前期的发生和发展有关。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与妇科肿瘤

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）又称CDl47，广泛地存在于人类各种肿瘤细胞，刺激与肿瘤有关的成纤维细胞和肿瘤细胞自身的基质金属蛋白酶合成增加，在恶性肿瘤的发生、浸润和转移中起重要作用。近年来其在肿瘤的早期发生和浸润及肿瘤抗药性方面的作用已受到重视。EMMPRIN与妇科肿瘤的发展关系密切，现就其与妇科肿瘤的关系及其结构和功能作一综述。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与妇科肿瘤

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)又称CD147,广泛地存在于人类各种肿瘤细胞,刺激与肿瘤有关的成纤维细胞和肿瘤细胞自身的基质金属蛋白酶合成增加,在恶性肿瘤的发生、浸润和转移中起重要作用.近年来其在肿瘤的早期发生和浸润及肿瘤抗药性方面的作用已受到重视.EMMPRIN与妇科肿瘤的发展关系密切,现就其与妇科肿瘤的关系及其结构和功能作一综述.     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在绒毛和胎盘组织中的表达

目的 探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在绒毛及胎盘组织中的表达以及表达部位。方法 分别取36例妊娠6～9周妇女的早孕绒毛组织、7例因病理指征行中期引产妇女的胎盘组织和11例足月妊娠妇女的胎盘组织,免疫组化方法检测绒毛组织和胎盘组织中EMMPRIN的表达部位变化特点。结果 (1)表达部位：EMMPRIN在早孕绒毛组织、中期和足月妊娠的胎盘组织中均有高度表达。在早孕绒毛组织中的表达部位主要集中在绒毛内细胞滋养细胞、合体滋养细胞及细胞滋养层柱细胞;在中期和足月妊娠的胎盘组织中,主要表达于底蜕膜的绒毛外细胞滋养细胞。(2)表达特点：在早孕绒毛组织中细胞滋养细胞、合体滋养细胞和细胞滋养层柱细胞的。EMMPRIN阳性率随妊娠进展逐渐下降。在妊娠中期的胎盘组织中,细胞滋养细胞、合体滋养细胞和细胞滋养层柱细胞的EMMPRIN阳性率分别为5／7、3／7、5／7;在足月妊娠的胎盘组织中,细胞滋养细胞、合体滋养细胞和细胞滋养层柱细胞的EMMPRIN阳性率分别为73％、18％和82％。在中期和足月妊娠的底蜕膜中的EMMPRIN阳性率较弱,且趋于稳定。而早期妊娠阶段,侵入到底蜕膜的绒毛外细胞滋养细胞中。EMMPRIN阳性表达则随孕周进展逐渐增强。结论 EMMPRIN在妊娠早期与胚胎植入有关,在妊娠的中晚期则可能参与妊娠维持。     

膜型基质金属蛋白酶表达与妊娠疾病的关系

目的 :研究葡萄胎和先兆子痫等与滋养层细胞密切相关的妊娠疾病在病理发生机制上与膜型基质金属蛋白酶表达的关系。方法 :采用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)检测方法 ,比较葡萄胎组织、早孕绒毛、先兆子痫足月胎盘和正常足月胎盘 (自然分娩和剖宫产 )组织中膜型基质金属蛋白酶 (MT MMP)的表达情况。结果 :5种胎盘绒毛组织均表达MT2 MMP和MT5 MMP。在相对表达量上 ,MT2 MMP及MT3 MMP在正常早孕绒毛组织中的表达强于葡萄胎组织 ,正常足月胎盘组织中MT2 MMP和MT5 MMP的表达也强于先兆子痫患者胎盘组织中 (P <0 .0 5 )。而自然分娩和剖宫产足月胎盘绒毛组织中MT2 MMP、MT3 MMP和MT5 MMP的表达差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :MT2 MMP、MT3 MMP和MT5 MMP等膜型MMP在胎盘绒毛组织中的表达差异 ,与葡萄胎、先兆子痫等和滋养层密切相关的妊娠疾病的病理发生有关     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子对细胞滋养细胞分泌基质金属蛋白酶的调节

胎盘植入和胎盘形成过程中，滋养细胞向母体子宫内膜有节制的浸润是细胞外基质降解和重建的关键步骤，基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMP）在这一过程中发挥重要作用。细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（extracellular matrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN）是免疫球蛋白超家族的成员之一，能刺激与肿瘤有关的成纤维细胞和肿瘤细胞自身的MMP显著增加。最新的研究发现，在足月妊娠妇女的胎盘和胎膜组织中有高水平的EMMPRIN表达，推测与维持妊娠和发动分娩有关。作为MMP的上调因子EMMPRIN，在妊娠早期胎盘绒毛组织中的表达未见报道。本研究采用高纯度的原代细胞滋养细胞体外培养模型，探讨EMMPRIN在胎盘绒毛组织中的表达变化及其对细胞滋养细胞分泌MMP的调节作用。     

基质金属蛋白酶与子痫前期发病关系的研究

目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP)2、9在子痫前期患者胎盘绒毛中的表达及其与子痫前期发病的关系.方法 采用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测20例子痫前期患者(病例组)和20例正常孕妇(对照组)胎盘绒毛MMP-2、9的表达,实时荧光定量RT-PCR检测两组孕妇胎盘绒毛MMP-2、9 mRNA的表达水平.因提取后的mRNA部分降解,用于RT-PCR检测的胎盘绒毛病例组13份,对照组10份.采用2-△△Ct相对定量表示PCR结果.结果 对照组孕妇胎盘绒毛MMP-2、9的染色强度均高于病例组,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);对照组胎盘绒毛MMP-2 mRNA的平均表达水平为7.6±2.8,病例组胎盘绒毛MMP-2 mRNA的平均表达水平为5.6±1.5,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组胎盘绒毛MMP-9 mRNA的平均表达水平为2.2±2.6,高于病例组的-0.9±2.0,两组比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).对照组胎盘绒毛MMP-2的平均表达水平高于MMP-9,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MMP-2、9表达降低导致的滋养细胞侵袭能力的下降,可能与子痫前期的发病相关.     

基质金属蛋白酶9及组织抑制因子1在妊娠高血压综合征胎盘滋养细胞中表达及作用

妊娠高血压综合征 (简称妊高征 )是导致孕产妇和围产儿死亡的主要原因之一。对妊高征的病因和发病机理的研究 ,一直是产科的重要课题。近年来研究发现基质金属蛋白酶 9(Matrix Metalloproteinase- 9,MMP- 9)与滋养细胞的浸润行为关系十分密切 ,而组织抑制因子 1(Tissue Inhibitor ofMetalloproteinases- 1,TIMP- 1)可以通过与 MMP- 9的结合抑制其活性 [1 ]。本研究拟通过检测 MMP- 9及其 TIMP- 1在妊高征患者胎盘中的表达 ,探讨二者在妊高征发病机制中的作用。一、资料与方法1.研究对象 :胎盘组织取自大连医科大学附属第一医院妇产…     

脂联素在子痫前期患者胎盘组织中的表达与其发病的关系

目的 探讨脂联素在子痫前期患者胎盘组织中的表达与其发病的关系.方法 采用免疫组化链霉菌抗生物蛋白-过氧化物连接(SP)法及RT-PCR技术,检测20例正常足月妊娠孕妇(正常妊娠组)、12例轻度子痫前期(轻度子痫前期组)及22例重度子痫前期(重度子痫前期组)患者胎盘组织中脂联素蛋白及其mRNA的表达,并分析其与子痫前期发病的关系.结果 (1)3组孕妇胎盘绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞胞质内脂联素蛋白均呈阳性表达,且各组内胎盘母面及子面脂联素蛋白的表达水平相互比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(2)重度子痫前期组胎盘组织中脂联素蛋白的表达水平(30 984±14 604)低于轻度子痫前期组(58 360±8910)及正常妊娠组(53 246±17 554),差异均有统计学意义(P＜0.01).重度子痫前期组中妊娠足月者胎盘组织中脂联素蛋白的表达水平(38 890±20 386)与未足月者(29 319±8997)比较,差异无统计学意义(P＞0.05);但与正常妊娠组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)3组孕妇胎盘组织中均有脂联素mRNA的表达.其中重度子痫前期组胎盘组织中脂联素mRNA表达水平(1.0±0.2)低于轻度子痫前期组(2.9±0.8)及正常妊娠组(3.3±1.1),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 重度子痫前期患者胎盘组织中脂联素mRNA表达水平下降导致其蛋白表达水平也下降,提示脂联素的异常表达参与了子痫前期的发病.     

Elevated hyaluronan and extracellular matrix metalloproteinase inducer levels in women with preeclampsia

Purpose

Preeclampsia (PE) is a specific syndrome of pregnancy clinically identified by hypertension and proteinuria from the 20th week of gestation associated with a systemic inflammatory response and oxidative stress. While pro-inflammatory cytokines have been extensively studied in PE, other factors in the circulation that also influence the magnitude of inflammation have received much less attention. The present study compared serum concentrations of five immune-regulatory compounds in normotensive pregnant women and in women with gestational hypertension (GH) or PE.

Methods

Sixty women with PE, 53 with GH and 40 normotensive women paired by gestational age were evaluated. Sera were evaluated for concentrations of extracellular matrix metalloproteinase inducer (EMMPRIN), hyaluronan, gelsolin, visfatin and histone 2B by ELISA. Differences between groups were analyzed by nonparametric tests, with a significance level of 5 %.

Results

Increased levels of EMMPRIN and hyaluronan were present in preeclamptic women as compared to the GH and normotensive groups. There was no difference between groups in gelsolin, visfatin or histone 2B.

Conclusion

Increased release of EMMPRIN and hyaluronan may contribute to an elevated pro-inflammatory response and tissue damage in women with PE.     

血小板源性生长因子-C在子痫前期、子痫患者胎盘的表达

目的:通过比较正常妊娠和子痫前期、子痫患者胎盘组织的血小板源性生长因子-C(PDGF-C)mRNA表达,探讨PDGF-C与子痫前期、子痫发病的关系。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测43例子痫前期、子痫患者和20例正常孕妇胎盘绒毛组织PDGF-C mRNA的表达。结果:PDGF-C mRNA在正常妊娠胎盘组织母体面中仅有少量表达,在子痫前期、子痫患者胎盘母体面中表达则明显增多(P<0.01),且表达量与疾病的严重程度呈正相关。结论:PDGF-C在子痫前期、子痫患者胎盘高度表达,可能在子痫前期、子痫患者胎盘血管病变中起着重要作用,并参与子痫前期、子痫的发生和发展。     

孕妇血清及其新生儿脐血、胎盘组织中脂肪型脂肪酸结合蛋白表达变化与子痫前期发病的关系

目的 探讨孕妇血清及其新生儿脐血中脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)水平、胎盘组织中FABP4 mRNA的表达变化在子痫前期发病中的作用.方法 选择2008年12月-2009年10月在福建省妇幼保健院产科住院分娩的60例重度子痫前期孕妇,按发病时孕周不同分为早发型子痫前期组(发病时孕周≤34周)和晚发型子痫前期组(发病时孕周>34周)各30例;另选同期正常晚期孕妇60例,根据孕周不同分为早发型对照组(孕周≤34周)和晚发型对照组(孕周>34周)各30例.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测孕妇血清FABP4、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)及新生儿脐血FABP4水平;采用稳态模型评估法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用逆转录(RT)PCR技术检测胎盘组织中FABP4 mRNA的表达;记录临床相关指标,包括孕妇入院时体质指数(BMI)、收缩压(SP)、舒张压(DP)及平均动脉压(MAP)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、肾小球滤过率(GFR)、24 h尿蛋白定量和新生儿出生体质量.结果 (1)早发型及晚发型子痫前期组孕妇血清中FABP4水平分别为(176±9)及(170±9)ng/L,早发型及晚发型对照组分别为(81±13)及(94±15)ng/L,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)早发型及晚发型子痫前期组孕妇血清FINS、HOMA-IR水平分别为(21.9±4.3)mU/L、5.1±1.7及(22.6±4.0)mU/L、4.9±1.5,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(3)早发型及晚发型子痫前期组孕妇胎盘组织中FABP4 mRNA的表达水平分别为3.17±0.89及2.97±0.72,均高于晚发型对照组的1.00±0.28,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);但早发型子痫前期组与晚发型子痫前期组比较,差异无统计学意义(P>0.05).(4)早发型及晚发型子痫前期组新生儿脐血中FABP4水平分别为(92±10)及(100±8)ng/L,均低于晚发型对照组的(141±18)ng/L,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).早发型子痫前期组、晚发型子痫前期组及晚发型对照组新生儿出生体质量两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05).相关性分析结果显示,脐血FABP4水平与孕妇血清FABP4及胎盘组织中FABP4 mRNA表达水平均呈明显负相关(r分别为-0.882、-0.678,P<0.05),与新生儿出生体质量呈明显正相关(r=0.728,P<0.05).(5)早发型及晚发型子痫前期组孕妇血清中FABP4水平与胎盘组织中FABP4 mRNA表达水平均呈明显正相关(r分别为0.609、0.403,P<0.05),与血TG(r分别为0.702、0.562),FINS(r分别为0.528、0.423),HOMA-IR(r分别为0.566、0.519),Cr(r分别为0.443、0.523),UA(r分别为0.438、0.413)均呈明显正相关(P<0.05),而与血HDL(r分别为-0.539、-0.498),GFR(r分别为-0.717、-0.778)均呈明显负相关(P<0.05).结论 子痫前期孕妇血清FABP4水平及胎盘组织中FABP4 mRNA表达水平均明显升高,且两者呈明显正相关.提示FABP4水平升高可能是子痫的期发病的重要因素之一,而胎盘组织中FABP4 mRNA表达水平升高可能是导致子痫的期孕妇血清FABP4水平升高的主要原因.     

印迹基因H19在子痫前期孕妇胎盘组织中的印迹状态

目的 探讨印迹基因H19印迹状态在子痫前期发病中的作用.方法 2007年8月-2008年3月第三军医大学附属大坪医院、西南医院、新桥医院妇产科行剖宫产分娩的子痫前期孕妇24例为子痫前期组(其中轻度子痫前期3例、重度子痫前期21例);同期行择期剖宫产的正常足月孕妇50例为正常晚孕组.采用PCR-RFLP法检测两组孕妇胎盘组织中H19基因的印迹状态,并对子痫前期组H19基因组DNA杂合子小同印迹状态孕妇的血压进行分析.结果 (1)正常晚孕组胎盘组织中有H19基因组DNA杂合子20例(40%),纯合子30例(60%);子痫前期组胎盘组织中有H19基因组DNA杂合子11例(46%),纯合子13例(57%).两组孕妇H19基因组DNA杂合子比较,差异无统计学意义(P>0.05).(2)正常晚孕组20例H19基因组DNA杂合子孕妇全部为单等位基因表达;子痫前期组11例H19基因DNA杂合子孕妇中,有5例(45%)为双等位基因表达,单等位基因表达6例(55%),子痫前期组存在印迹丢失,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).(3)子痫前期组H19基因DNA杂合子中双等位基因表达孕妇的收缩压为(194±21)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),舒张压为(124±18)mm Hg;单等位基因表达孕妇的收缩压为(171±9)mm Hg,舒张压为(104±8)mm Hg,两者血压比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 子痫前期患者胎盘组织中H19基因存在印迹丢失,且印迹丢失与血压水平变化有关.提示H19基因印迹丢失可能参与子痫前期的发病,并与疾病的严重程度密切相关.