丙咪嗪对人血小板胞浆游离钙的影响

目的：观察丙咪嗪体外对人血小板胞浆游离钙的影响。方法：用Ｆｕｒａ２－ＡＭ荧光钙离子指示剂在体外测定人血小板胞浆游离钙离子浓度。结果：丙咪嗪明显抑制凝血酶诱导的血小板胞浆游离钙的升高，ＩＣ５０（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ５０％）为２０．０μｍｏｌ／Ｌ。丙咪嗪对凝血酶诱导的内钙释放亦有明显抑制作用（Ｐ＜０．０１）。结论：丙咪嗪不仅明显抑制人血小板胞外Ｃａ２＋跨膜内流而且抑制胞内储存Ｃａ２＋释放     

槲皮素对血小板聚集和胞浆游离钙的影响

研究槲皮素对凝血酶诱导的血小板聚集和胞浆游离钙浓度的影响及钙对槲皮素的血小板聚集抑制效应的作用,本实验应用荧光钙离子指示剂观察槲皮素对血小板胞浆游离钙的影响。表明,槲皮素明显抑制凝血酶诱导的血小板聚集和游离钙的升高。IC50和95％可信区间分别为146.2(92.4～231.3)和78.5(49.5～124.4)μmol·L~(-1),槲皮素对凝血酶诱导的钙释放无影响,抑制钙内流是槲皮素抑制血小板聚集和〔ca~(2+)〕i升高的机制。     

槲皮素对血小板聚集和胞浆游离钙的影响

研究槲皮素对凝血酶诱导的血小板聚集和胞浆游离钙浓度的影响及钙对槲皮素的血小板聚集制剂效应的作用。本实验荧光钙离子指示剂观察槲皮素对血小权胞浆游离钙的影响。表明，槲皮素明显抑制凝血酶诱因小板聚集和游离钙的升高。ＩＣ５０和９５％可信区间分别为１４６．２（９２．４－２３１．３）和７８．５（４９．５－１２４．４）μｍｏｌ．Ｌ＾－１，槲皮素对凝血酶诱导的钙释放无影响，抑制钙内流是槲皮素抑制血波板聚集和「Ｃdi     

槲皮素对血小板激活时胞浆游离钙的影响

采用钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２定量测试法观察了槲皮素对血小板胞浆内游离钙浓度的影响。结果发现，槲皮素２５￣４００μｍｏｌ／Ｌ能剂量依赖性地抑制凝血酶引起的血小板胞浆游离钙［Ｃａ＾２＋］ｉ的升高（ＩＣ５０和９５％可信区间为７８．５（４９．５￣１２４．４）μｍｏｌ／Ｌ）；但不能抑制同等剂量凝血酶所引起的胞内贮存钙的释放；抑制钙内流可能是槲皮素抑制血小板聚集和［Ｃａ＾２＋］ｉ升高的机制。     

槲皮素对血小板激活时胞浆游离钙的影响

采用钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ—２定量测试法观察了槲皮素对血小板胞浆内游离钙浓度的影响。结果发现，槲皮素２５～４０μｍｏｌ／Ｌ能剂量依赖性地抑制凝血酶引起的血小板胞浆游离钙［Ｃａ２＋］；的升高（ＩＣ５０和９５％可信区间为７８．５（４９．５～１２４．４μｍｏｌ／Ｌ）；但不能抑制同等剂量凝血酶所引起的胞内贮存钙的释放；抑制钙内流可能是槲皮素抑制血小板聚集和［Ｃａ２＋］１升高的机制。     

苯海索对凝血酶诱导的人血小板聚集和胞浆游离钙浓度的影响

目的:观察苯海索体外对人血小板聚集和胞浆游离钙的影响。方法:用比浊度法及钙离子荧光指示剂Fura2AM测定法,分别体外测定苯海索对凝血酶诱导的人血小板聚集及胞浆游离钙浓度的影响。结果:苯海索0.001～1.000mmol·L-1浓度可明显抑制凝血酶诱导的血小板聚集(P<0.05)和胞浆游离钙的升高(P<0.01),均呈剂量依赖性(r=-0.9230,P<0.01;r=-0.9348,P<0.01),其抑制作用可以被钙减弱,而被依他酸增强。苯海索对凝血酶诱导的钙释放无明显影响(P>0.05)。结论:苯海索可抑制人血小板聚集和[Ca2+]i升高,其主要机制可能是抑制细胞外钙离子的内流。     

ADP和CPA诱导的高血压病人血小板胞浆游离钙的变化

[目的]探讨高血压病人血小板胞浆游离钙浓度(cytoplasmicfreeCa2 concentration,[Ca2 ]i)的变化.[方法]采用Fura-2/Am荧光双波长测定[Ca2 ]i技术,动态观察激动剂二磷酸腺苷(adenosinediphosphate,ADP)和环匹阿尼酸(cyclopiazonicacid,CPA)对高血压病人血小板[Ca2 ]i的影响.[结果]高血压病人静息血小板[Ca2 ]i与正常人比较明显增高(P<0.05);ADP和CPA激动的高血压病人的血小板平台钙与静息钙比较有统计学意义(P<0.05);峰位钙-平台钙的差(既钙释放)与正常人比较明显增高(P分别<0.05和<0.01);平台钙-静息钙的差(既钙内流)与正常人比较无明显差异(P>0.05).[结论]高血压病人静息血小板[Ca2 ]i增高,平台钙水平明显增高,血小板呈高反应状态;高血压病人的血小板被ADP和CPA激活不能恢复至静息动状态;ADP和CPA激动的高血压病人的血小板钙释放增多,钙内流正常.     

应用Fura-2/AM荧光双波长法研究抑肽酶对血小板活化的保护作用

目的探讨抑肽酶对血小板活化的保护机制.方法用钙荧光指示剂Fura-2/AM负载人洗涤血小板,用荧光双波长分光光度计比值法测定静息血小板胞浆游离钙浓度([Ca2 ]i)及凝血酶、抑肽酶对[Ca2 ]i的影响.结果在生理胞外Ca2 浓度时,正常人血小板[Ca2 ]i静息水平为(151.840±28.719)nmol/L,凝血酶可引起血小板[Ca2 ]i的明显增加(P＜0.01),抑肽酶呈剂量依赖性地抑制由凝血酶引起的[Ca2 ]i的增加(P＜0.01).结论抑肽酶的保护血小板机制与其抑制血小板内[Ca2 ]i动员等信息传递过程有关.     

用Fluo3-AM测定2型糖尿病患者淋巴细胞内Ca~(2 )浓度及药物对患者胞内Ca~(2 )浓度的影响

用 Fluo 3- AM为荧光探针 ,测定 2型糖尿病患者淋巴细胞内 Ca2 浓度 ,观察了肾上腺素、多巴酚丁胺、Bay K 864 4、胰岛素等药物对胞内 Ca2 的作用机制。实验表明患者胞浆内 Ca2 浓度与正常人相比显著升高 ;药物对胞内 Ca2 的刺激表明 ,病人对外界钙激动剂更敏感。胰岛素能刺激胞内 Ca2 浓度升高 ,其作用机制是激活钙离子通道。肾上腺素不仅能激活钙离子通道 ,也能促使钙从钙池中释放。上述研究也表明 Fluo- 3是有效的研究胞内 Ca2 变化的荧光探针。 2型糖尿病的发生可能与 Ca2 浓度升高有关 ,患者对外界钙激动剂更敏感     

白花蛇舌草对宫颈癌细胞钙信号的影响

为探讨白花蛇舌草对宫颈癌细胞胞内游离钙浓度的影响及其抗癌作用机理。利用荧光染料Fura-2在细胞内能与游离钙结合，在一定波长光的激发下可发出荧光的特性，根据荧光的强度来检测游离钙的变化。结果显示：白花蛇舌草通过促进细胞内储藏钙的释放和胞外钙离子的内流，显著提高宫颈癌细胞内游离钙的浓度。     

三七皂甙单体2A-1-1对高血压患者血小板钙内流的影响

目的　观察三七皂甙单体2A - 1 - 1对高血压患者血小板钙内流的影响,并探讨其对血小板受体操纵性钙通道(ROC)的作用。方法　采用Fura - 2 Am荧光探针双波长测定细胞胞浆游离钙离子浓度( [Ca2 + ]i)技术,以Nifedipine为对照观察2A - 1 - 1体外对环匹阿尼酸(CPA)介导的高血压患者血小板钙内流变化。结果　高血压患者血小板静息钙和钙内流均高于正常人(P <0 .0 5 ) ;2A - 1 - 1 ( 5、1 0、2 0 μmol L)可抑制CPA介导的高血压患者血小板钙内流(P <0 .0 5或0 .0 1 ) ;Nifedipine( 2 0 μmol L)不能抑制CPA介导的高血压患者或正常人血小板钙内流(P >0 .0 5 )。结论　2A - 1 - 1可能通过抑制高血压患者血小板ROC ,减少钙内流,从而降低其血小板活性。     

PDGF-BB引起系膜细胞内游离钙浓度变化的机制探讨

目的研究血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)引起的肾小球系膜细胞内游离钙浓度变化及其离子流动机制.方法以体外培养的系膜细胞为研究对象,激光共聚焦显微术结合Fura-3染色法动态测定细胞内游离钙浓度.结果PDGF-BB可浓度依赖性地引起肾小球系膜细胞内游离钙浓度的升高,细胞内钙库释放抑制剂TMB-8、无钙缓冲液和钙通道阻滞剂硝苯地平均可抑制PDGF-BB引起的细胞内钙浓度变化,但其抑制作用发挥的时间和程度均有显著不同.结论PDGF-BB引起肾小球系膜细胞内游离钙浓度的升高在初期是通过细胞内钙释放与细胞外钙内流共同参与,而在其后的维持升高阶段主要是通过细胞外钙内流,特别是通过电压依赖式钙通道内流引起.     

PDGF-BB引起系膜细胞内游离钙浓度变化的机制探讨

目的 研究血小板衍生生长因子BB(PDGF—BB)引起的肾小球系膜细胞内游离钙浓度变化及其离子流动机制。方法 以体外培养的系膜细胞为研究对象，激光共聚焦显微术结合Fura-3染色法动态测定细胞内游离钙浓度。结果 PDGF-BB可浓度依赖性地引起肾小球系膜细胞内游离钙浓度的升高，细胞内钙库释放抑制剂TMB-8、无钙缓冲液和钙通道阻滞剂硝苯地平均可抑制PDGF—BB引起的细胞内钙浓度变化，但其抑制作用发挥的时间和程度均有显著不同。结论 PDGF—BB引起肾小球系膜细胞内游离钙浓度的升高在初期是通过细胞内钙释放与细胞外钙内流共同参与，而在其后的维持升高阶段主要是通过细胞外钙内流，特别是通过电压依赖式钙通道内流引起。     

细菌脂多糖对骨髓瘤细胞胞浆游离钙的影响

以钙离子荧光指示剂Quin 2测定胞浆游离钙,研究细菌脂多糖对骨髓瘤细胞胞浆游离钙浓度的影响。骨髓瘤细胞与脂多糖孵育后,胞浆游离钙浓度显著增高,植物血凝素升高胞浆游离钙浓度的作用受到明显抑制。十四脂酰佛波乙酸酯对骨髓瘤细胞胞浆游离钙浓度无影响,但对植物血凝素升高胞浆游离钙浓度的作用有明显抑制。提示脂多糖引起细胞钙平衡失调,并干扰细胞钙信号的产生。     

用Fluo3—AM测定2型糖尿病患者淋巴细胞内Ca^2＋浓度及药物对 …

用Ｆｌｕｏ ３－ＡＭ为荧光控针,测定２型糖尿病患者淋巴细胞内Ｃａ＾２＋浓度,观察了肾上腺素、多巴酚丁胺、Ｂａｙ Ｋ８６４４、胰岛素等药物对胞内Ｃａ＾２＋的作用机制。实验表明患者胞浆内Ｃａ＾２＋浓度与正常人相比显著升高;药物对胞内Ｃａ＾２＋的刺激表明,病人地外界钙激动剂更敏感。胰岛素能刺激胞内Ｃａ＾２＋浓度升高,其作用机制是激活钙离子通道。肾上腺素不仅能激活钙离子通道,也能促进钙从钙池中释放。上述研     

钙离子拮抗剂用于降血压治疗的新进展

钙离子拮抗剂是20世纪末最重要的心血管病治疗学进展成果之一,现就其降压作用、对危险因子及并发症控制的新进展作一综述。1.钙离子拮抗剂作用机理 高血压病人细胞膜对Ca~(2+)通透性增高,膜电位敏感性钙通道和受体敏感性钙通道大量开放,细胞内钙离子浓度升高,最终导致血管平滑肌功能异常是血压升高的主要原因。钙离子拮抗剂的降压作用就是通过阻滞钙通道,影响Ca~(2+)内流和细胞内Ca~(2+)移动从而影响心肌和平滑肌细胞兴奋-收缩耦连,使心肌收缩性降低,外周血管扩张,阻力降低来实现的。目前人们发现在细胞膜表面存在通过介导胞浆游离钙升高而起作用的钙动员受体,钙离子拮抗剂可与此受体结合而降低胞浆游离钙。现有临床研究提示钙离子拮抗剂的降压机制除了钙通道阻滞以外,还可能与细胞膜钙泵活性下降使胞浆内钙离子浓度增高有关。高血压病发生机制复杂,神经末梢分泌的激素与旁分泌因子也有重要作用。其中血     

Y-909对血小板功能的影响

Y-909是已知磷酸二酯酶抑制剂CI-930的类似物。本实验发现Y-909(1O~(-)～10~(-5)M)明显抑制凝血酶诱导的血小板聚集。IC_(50)为1.1×10~(-7)M.用钙的荧光指示剂quin-z标记血小板测胞浆游离钙水平,发现该药(10~(-7)～10~(-4))也抑制凝血酶诱导的胞浆游离钙水平的增加。IC50为1.2×10~(-6)M。抑制钙释放以及钙内流的IG_(50)分别为1.1×10~(-7)和1.4×10~(-6)M。本实验提示Y-909是一种新的血小板功能抑制剂,其抑制血小板聚集的机理与降低血小板胞浆游离钙水平有关。     

肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度与室间隔缺损合并肺动脉高压的关系

目的：研究肺动脉平滑肌细胞胞质内游离钙离子浓度与肺动脉高压的关系,分析两者是否具有相关性。 方法：采用流式细胞仪测定37例左向右分流先天性心脏病患儿（18例肺动脉高压,19例非肺动脉高压）动脉平滑肌细胞胞质内游离钙离子浓度,比较两组数据是否不同。 结果：肺动脉高压组中肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度较非肺动脉高压组明显增加（P<0.01）,差异有显著性。 结论：持续的胞浆钙离子浓度升高可导致肺动脉高压。     

Ghrelin对大鼠主动脉血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响

目的：研究Ghrelin对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）内游离钙离子浓度的影响,并揭示Ghrelin血管活性的调节机制。方法：组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMCs,Western blot验证生长激素促泌素受体（GHS-R1a）在VSMCs中的表达。钙荧光染料furo-2AM标记VSMCs,高速钙离子成像分析系统检测Ghrelin对静息状态胞内钙荧光强度（FI）的影响,并观察Ghrelin对KCl和AngII增强胞内钙FI作用的影响,以及腺苷酸环化酶抑制剂Sq22536和GHS-R1a拮抗剂（D-Lys3）-GHRP-6对Ghrelin作用的影响。结果：GHS-R1a在VSMCs内有表达。Ghrelin本身对VSMCs内钙FI无作用,也不能抑制KCl引起的VSMCs内钙FI升高,但可抑制AngII引起的VSMCs内钙FI升高,而这种抑制作用可被Sq22536和GHS-R1a逆转。结论：Ghrelin可抑制由AngII引起的大鼠主动脉VSMCs胞内钙离子的升高,机制可能和激活cAMP/PKA信号通路有关。     

尼氟灭酸对糖尿病人血小板胞浆游离钙及聚集功能的影响

【目的】探讨糖尿病人血小板胞浆游离钙([Ca2+]i)、血小板聚集率变化及氯通道阻断剂尼氟灭酸对其的影响。【方法】用Fura-2荧光测钙技术检测血小板[Ca2+]i,血小板聚集仪检测血小板聚集率,观察氯通道阻断剂尼氟灭酸、钙通道阻断剂硝苯地平及两者联合对糖尿病人的血小板[Ca2+]i、血小板聚集率的作用。【结果】①糖尿病人血小板聚集率为(74.9±13.7)%,高于正常人(P<0.05);糖尿病人的静息血小板[Ca2+]i值、钙释放、钙內流分别为(124．5±38．1)nmol／L、(497．1±95．1)nmol/L、(354.3±75.0)nmol/L,均高于正常人(P均<0.05);②尼氟灭酸及硝苯地平抑制血小板钙内流呈浓度依赖性,半数抑制浓度(IC50)的尼氟灭酸(50μmol/L)对糖尿病人血小板钙内流的抑制率为(54.7±14.5)%,对血小板聚集率的抑制率为(32.3±21.4)%;IC50的硝苯地平(7.5μmol/L)对糖尿病人血小板钙内流的抑制率为(17.9±11.9)%,对血小板聚集率的抑制率为(32.3±20.4)%;③尼氟灭酸联合硝苯地平对糖尿病人血小板钙有抑制作用,联合作用时尼氟灭酸对钙内流抑制率为(51.9±12.8)%;硝苯地平对钙内流抑制率为(12.4±8.5)%(P均<0.05),两者间不存在交互效应。【结论】糖尿病人血小板聚集率、静息血小板[Ca2+]i及钙运动均高于正常人,血小板呈高反应状态。尼氟灭酸可抑制糖尿病人血小板聚集和钙内流,可能与血小板膜存在对尼氟灭酸敏感的氯通道有关。尼氟灭酸与硝苯地平联合对糖尿病患者的血小板钙运动无协同及遏制作用。