HPLC/ECD 同时测定生物样品中的组织胺和去甲肾上腺素

目的：建立了高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）配合电化学检测器（ＥＣＤ）同时分析组织和体液中的组织胺（Ｈｉｓ）和去甲肾上腺素（ＮＡ）的方法。方法：用邻苯二甲醛（ＯＰＡ）和２ 巯基乙醇（２－ＭＥ）进行柱前衍生，衍生产物在离子对试剂辛基磺酸钠的作用下，采用ＰａｔｉｓｉｌＯＤＳ柱，乙酸等试剂组成缓冲溶液与乙腈按７∶３配成流动相，３ 甲基组织胺（３ Ｍ Ｈｉｓ）为内标，检测器电位０．７Ｖ，结果：用该方法对小鼠心脏组织和血液中的Ｈｉｓ和ＮＡ进行同时测定，得到了满意的分离和检测结果，最低检测量约为１５ｐｇ（Ｓ／Ｎ＝３）。结论：这个研究提示，用一些特殊试剂与样品产生衍生物，是得到满意的分离结果而不影响灵敏度的途径。     

生物样品中组织胺和去甲肾上腺素的同时测定

建立生物样本中组织胺和去甲肾上腺素的同时测定方法，探讨体内Ｈｉｓｔ和ＮＡ的代谢关系。方法用高效液相色谱－电化学检测器、柱前衍生定量分析生物样本中Ｈｓｔａ和ＮＡ。结论：ＨＰＬＣ／ＥＣＤ法具有灵敏，稳定，特异性高等特点。     

高效液相色谱法测定血清去甲肾上腺素及肾上腺素

本文报道用国产高效液相色谱仪联电化学检测器,反相内标法测定血清去甲肾上腺素(NA)及肾上腺素(AD)。研究了不同流动相条件下对血清NA及AD容量因子(K′)及响应值的影响,从而选择最佳测定条件。血清NA及AD浓度在0.2～10ng/ml内与色谱峰面积比值的线性关系良好(r>0.99);不同浓度的血清NA和AD绝对回收率及方法回收率分别为74.4～89.9％及95.1～107.6％;不同浓度的日内、日间变异系数分别为5.0～9.7％及5.3～11.9％。测定10名正常人及4例嗜铬细胞瘤患者的术前血清NA和AD值,二者有显著差异。提示本法对诊断嗜铬细胞瘤有一定的临床价值。     

高效液相色谱法同时测定血浆中的肾上腺素和去甲肾上腺素

为同时测定人血浆中肾上腺素和去甲肾上腺素浓度,建立了高效液相色谱－电化学检测方法,采用ＹＷＧ－Ｃ１８分析柱,３,４－二羟基苄胺作内标,以０．０５ｍ ｏｌ／Ｌ醋酸盐缓冲液（ｐＨ３．０）－甲醇－０．０５ｍ ｏｌ／ＬＥＤＴＡ－Ｎａ２（７８∶２０∶２）为流动相,每１Ｌ流动相含ＳＤＳ２００ｍ ｇ,流速为１．０ ｍ ｌ／ｍ ｉｎ。去甲肾上腺素和肾上腺素及内标的保留时间分别为７．３、８．３ 和１０．４ 分钟,线性范围均为３１．２５～４０００ｎｇ／Ｌ（ＮＥ：ｒ＝ ０．９９９９,Ｅ：ｒ＝ ０．９９９６）。去甲肾上腺素和肾上腺素日内ＲＳＤ分别低于１．８７％ 和２．０７％ ,日间ＲＳＤ分别小于８．９２％ 和９．６５％ ,平均萃取回收率分别为９３．５％ 和９１．３％ 。提示本方法快速简便,灵敏准确,适用于嗜铬细胞瘤的鉴别诊断和临床研究。     

高效液相色谱法同时测定血浆中的肾上腺素和去甲肾上腺素

为同时测定人血浆中肾上腺素和去甲肾上腺素浓度,建立了高效液相色谱－电化学检测方法,采用ＹＷＧ－Ｃ１８分析柱,３,４－二羟在苄胺作内标,以０．０５ｍｏｌ／Ｌ醋酸盐结冲液（ｐＨ３．０）－甲醇－０．０５ｍｏｌ／Ｌ ＥＤＴＡ－Ｎａ２（７８：２０：２）为流动相,每１Ｌ流动相含ＳＤＳ２００ｍｇ,流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ。去甲肾上腺素和肾上腺素及内标的保留时间分别为７．３、８．３和１０．４分钟,线性范围均为３１     

血浆儿茶酚胺的同时提取及反向高效液相测定法

目的建立一种操作简便、高效的测定血浆中去甲肾上腺素(NA)、肾上腺素(AD)、的方法,为有关药物作用机制的研究提供实验手段.方法以有机溶剂提取,高效液相色谱-电化学检测器(HPLC-EC)测定大鼠血浆NA、AD的含量.结果测得NA、AD的绝对回收率分别为:86.3±11.6%,88.5±16.3%.线性范围0.04～4ng,批内与批间变异系数分别小于6%及7%.结论该方法具有简便、迅速、回收率较高的特点,便于应用.     

样品固相萃取及高效液相色谱法测定血浆中去甲肾上腺素

去甲肾上腺素（noradrenaline,NE）是重要的单胺类递质,原发性高血压患者的血浆NE通常增高,故测定其血浆浓度可为高血压的诊治、嗜铬细胞瘤诊断定位提供依据.国内外有不少测定人血浆中去甲肾上腺素含量方法的报道,如气质联用、高效液相色谱-荧光检测器和放射酶标分析等,由于它们存在灵敏度低和选择范围窄、费时、成本高等问题,近年来,又出现了高效液相色谱-电化学检测法（HPLC-ECD）.该法对不同样品处理的方法各异,但大都步骤烦琐或特异性差,不够理想.本实验采用酸洗氧化铝吸附及高氯酸洗脱的方法萃取血浆中的NE,用HPLC-ECD法测定血浆NE的质量浓度.该方法与其他方法相比更加简便,而且灵敏度高、特异性强、数据重现性好、测定结果可靠,是临床诊断和基础研究较为实用的方法.     

高效液相色谱仪——电化学检测器测定血浆中去甲肾上腺素

本文报告高效液相色谱仪——电化学检测器测定血浆去甲肾上腺素的方法。2ml血浆在pH8.6环境中用活化的酸性氧化铝吸附,0.1M高氯酸洗脱后进样。流动相的循环利用可提高电化学检测器的稳定性。血浆去甲肾上腺素回收率为75％,检测限为25pg/ml。20例正常人及24例心力衰竭病人血浆去甲肾上腺素浓度分别为140±102pg/ml和814±377Pg/ml,该法稳定可靠、简单,快速易行,可以在临床上常规应用。     

小鼠脑组织中组胺含量的HPLC-UV检测

目的:建立一种测定小鼠脑组织匀浆中组胺含量的柱前衍生高效液相色谱-紫外检测法。方法:雄性昆明种小鼠8只,在乙醚麻醉下断头处死后,迅速取出脑组织,分离出皮层、海马和下丘脑,称重并制成匀浆。匀浆中组胺用高氯酸提取,经丹磺酰氯衍生后,用高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)检测法检测含量。结果:组胺在0.1～10μg/ml范围内线性关系良好,相关系数γ2=0.9993,最低检出限为0.1μg/ml,保留时间约6.1 min。小鼠下丘脑中组胺含量最高,约为0.21μg/g。结论:本实验所建立的HPLC-UV检测法快速简便,敏感实用,可用于脑组织中组胺含量的测定。     

高效液相色谱法同时测定降脂灵片中4种蒽醌类成分的含量

目的建立高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC）同时测定降脂灵片中橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄素和大黄素甲醚的含量。方法采用HPLC测定降脂灵片中橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄素和大黄素甲醚的含量,色谱柱为Kromasil C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇-0.1%磷酸为流动相梯度洗脱（0⁵ min,40:60⁷0:30;5¹0 min,70:30⁸0:20;10¹5 min,80:20⁹0:10;15²5 min,90:10）,检测波长286 nm,流速1.0 mL/min,进样量20μL,柱温25℃。结果在选定的色谱条件下橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚具有良好的分离度和稳定性。橙黄决明素在16.7¹34 ng范围内线性关系良好,样品回收率为98.7%,相对标准偏差值（relative standard deviation,RSD）为0.3%;芦荟大黄素在11.1⁸9.1 ng范围内线性关系良好,样品回收率为98.5%,RSD为1.0%;大黄素在90.3⁷22 ng范围内线性关系良好,样品回收率为98.5%,RSD值为0.7%;大黄素甲醚在59.2⁴73 ng范围内线性关系良好,样品回收率为102.0%,RSD值为0.3%。结论HPLC同时测定降脂灵片中橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄素和大黄素甲醚的含量,快速、简便、准确、专属性高,可以用于降脂灵片的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定人血浆中霉酚酸及其葡糖苷酸

目的:建立霉酚酸(MPA)及其葡糖苷酸(MPAG)血药浓度测定方法.方法:采用高效液相色谱(HPLC)-二极管阵列检测器测定血药浓度,检测波长254 nm.血样加乙腈沉淀蛋白.色谱柱:Hypersil ODS2(200 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:A相为25％ CH3CN+75％ 0.02 mol/L KH2PO4(pH 3.0),B相为70％ CH3CN +30％ 0.02 mol/L K2HPO4(pH 6.5),梯度洗脱;流速:1.0 ml/min.结果:MPA、MPAG血药浓度线性范围分别为1.0～50 μg/ml(r=0.999 4,n=6)和2.5～100 μg/ml(r=0.999 5,n=7),MPA、MPAG血浆最低检测浓度分别为0.5 μg/ml和1.0 μg/ml,高、中、低3种浓度MPA平均回收率分别为(95.75±2.31)％、(104.10±1.91)％和(98.11±4.24)％,MPAG则分别为(97.37±1.43)％、(101.10±5.41)％和(105.44±7.59)％.结论:本研究为MPA和MPAG的药代动力学研究及血药浓度监测提供了一种测定方法.     

高效液相色谱法测sGC-003片的含量及溶出度

目的：建立可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）-003片的含量及溶出度测定方法。方法采用高效液相色谱（HPLC）法测定。HPLC条件如下：色谱柱：Phenomenex Luna C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：乙腈-水（40∶60,V/V）;流速：1.0 ml/min;检测波长为：214 nm;柱温：40℃;进样量：20μl（溶出度检测进样量80μl）。溶出度方法采用《中国药典》2015版溶出度测定第二法（桨法）,以900 ml pH 4.5醋酸缓冲液、pH 6.8磷酸缓冲液及水为溶出介质,以50、75 r/min作为转速进行溶出条件的筛选。结果该法专属性良好;sGC-003在0.25～50μg/ml范围内线性关系良好（R2=1）;平均回收率为99.58%（RSD为0.75%,n=9）;供试品溶液在12 h内保持稳定（RSD=0.39%,n=8）。确立了以900 ml pH 6.8磷酸缓冲液为溶出介质,桨法转速为50 r/min的溶出方法,30 min时溶出度达80%。结论所选溶出条件适用于sGC-003片溶出度检测。所建HPLC方法简便,灵敏,精密度高,重现性好,专属性强,结果准确,可用于sGC-003片含量测定和溶出度检测。     

Simultaneous determination of three curcuminoids in Curcuma longa L. by high performance liquid chromatography coupled with electrochemical detection

A novel method for analysis of three active components curcumin, demethoxycurcumin and bisdemethoxycurcumin in Curcuma longa L. was developed by HPLC coupled with electrochemical detection. Three curcuminoids were well separated on a C₁₈ column and detected with high sensitivity. A mobile phase containing acetonitrile and 10 mM Na₂HPO₄–H₃PO₄ (pH 5.0) (50:50, v/v) was used. Good linearity was obtained in the range of 0.208–41.6, 0.197–39.4, and 0.227–114 μM for curcumin, demethoxycurcumin and bisdemethoxycurcumin respectively. The limit of detection reached up to 10⁻⁸ M, which was lower than that by UV detection. The relative standard deviations (RSDs) ranged from 1.06% to 1.88% for intra-day precision and from 4.30% to 5.79% for inter-day precision, respectively. The proposed method has been applied in real herb sample and recoveries ranging from 86.3% to 111% were obtained.     

邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法测定氨基酸类神经介质

目的：建立测定神经中枢氨基酸类介质的方法。方法：邻苯二甲醛柱前衍生,ODS（C18）柱分离,pH6．0醋酸盐缓冲溶液与甲醇二元梯度洗脱,荧光检测。结果：仅在9min内就分离测定了大鼠脑中5种氨基酸介质的含量。在一定浓度范围内,氨基酸的峰面积与其浓度呈现良好的线性关系,相关系数在0．9978－0．9999之间。结论：本方法适用于神经药理学的研究。     

高效液相色谱法同时测定中毒患者血清中5种精神活性物质的浓度

目的建立可同时测定人血清中利培酮、9-羟利培酮、氯氮平、去甲氯氮平和瑞波西汀5种药物浓度的高效液相色谱-紫外检测法,并将该方法用于临床急性精神药物中毒患者的血液样本分析。方法以乙醚为溶剂进行一步液液萃取,待测物与内标帕罗西汀在Inertsil ODS-3柱,乙腈∶甲醇∶正丁胺∶冰醋酸∶去离子水(20∶2.87∶1.07∶1∶34.29)条件下可以基线分离。线性范围100～1 600 ng/mL,最低检测限25μg/L(S/N=10)。结果本方法批内精密度为3.1%～15.6%,批间精密度为5.7%～18.4%;批内准确度为0.1%～8.7%,批间准确度为0.3%～13.3%。常见精神科药物不干扰待测药物和内标。结论本方法简单、特异性好,可应用于急诊患者药物中毒检测。     

反相高效液相色谱法测定巴洛沙星有关物质的方法学研究

目的:采用RP-HPLC法测定巴洛沙星的有关物质。方法:使用SMT C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈—0.4%十二烷基硫酸钠溶液(47:53)[用枸椽酸(1.5mol/L)调pH值至3.0],检测波长为295 nm,流速为1.0 mL/min。结果:巴洛沙星与各有关物质在上述色谱条件下能有效地分离。结论:该方法结果准确、操作简单、灵敏度高、专属性强,适用于巴洛沙星的有关物质测定。