大鼠二次脑损伤模型的建立

目的　建立弥漫性脑损伤 (diffusebrianinjury ,DBI)合并缺血性二次脑损伤 (secondarybrianinsult ,SBI)大鼠模型。　方法　在Marmarou模型基础上结扎双侧颈总动脉 30min ,制成缺血性SBI模型 ,观察大鼠神经损伤严重程度评分 (NSS)、脑组织含水量及室上区皮层损伤神经元数改变。　结果　合并SBI组大鼠死亡率 ( 4 8.1 % )约为单纯DBI组 ( 2 6 .2 % )的 2倍 (P <0 .0 5) ;合并SBI组在损伤 2 4h后NSS明显高于单纯DBI组 (P <0 .0 5) ;单纯DBI 1h后脑含水量明显升高 ,于 2 4h达高峰 ,随后逐渐下降 ,1 6 8h降至正常 ,而合并SBI后除 1h组外 ,其余时间组脑含水量均明显高于同时间单纯DBI组 (P <0 .0 5) ,且峰值提前至 1 2h ,1 6 8h仍未恢复正常 ;单纯DBI 6h后皮层神经元明显损伤 (P <0 .0 5) ,1 2h达高峰 ,1 6 8h恢复正常 ,而合并SBI组神经元损伤数 1 2h后还增加 ,2 4h达高峰 ,1 6 8h仍未恢复正常 (P <0 .0 5)。　结论　此模型可以复制SBI的重要临床特征 ,对SBI的基础研究有重要价值。     

二次脑损伤后鼠脑皮层代谢性谷氨酸受体5mRNA表达改变及α-甲基-4-羧基苯丙氨酸的治疗作用

目的 研究二次脑损伤后鼠脑皮层代谢性谷氨酸受体5(mGluR5)mRNA的变化及I类mGluR5拮抗剂α－甲基－4－羟基苯丙氨酸（MCPG）的作用。方法 90只SD大鼠随机分为原位杂交组（60只）和MCPG作用组（30只）,每组又分为不同的亚组。在Marmarou大鼠加速性弥漫性脑损伤模型基础上,采用血造成低血压。在伤后不同时间进行原位杂交和病理学研究。结果 单纯脑损伤后脑皮层mGR5mRNA于伤后1d开始降低,7d最低（P＜0．05）;而脑损伤合并二次脑损伤后脑皮层mGluR5mRNA水平在伤后变化更明显。I类mGluRs拮抗剂MCPG可减少二次脑损伤后的损伤神经元的数目。结论 脑损伤可以抑制mGluR5的表达和生成,其作用可能与mGluR1、mGluR1α不同,对神经元具有保护作用。     

纳洛酮对弥漫性脑损伤合并二次脑损伤大鼠c-fos表达及β内啡肽水平的影响

目的 观察应用纳洛酮干预后,弥漫性脑损伤(DBI)合并二次脑损伤(SBI)大鼠脑内c-fos蛋白及血浆β内啡肽(β -EP)的表达变化,以进一步探讨β-EP与c-fos在SBI中的作用.方法 健康雄性SD大鼠70只,随机分为DBI合并SBI组(A组)、DBI合并SBI后盐酸纳洛酮(1mg/kg,腹腔注射)治疗组(B组)、DBI后SBI前盐酸纳洛酮治疗组(C组),于伤后3、24、48h处死大鼠,采用免疫组化及放射免疫分析法测定脑内c-fos蛋白和血浆β-EP的含量,并进行脑组织病理形态学观察.结果 B、C两组在各时间点的各检测指标比较差异均无统计学意义(P＞0.05).与B、C两组比较,A组3h及24h时的脑组织含水量明显升高(P＜0.05),24h及48h时的神经元损伤数量明显减少(P＜0.05),3h、24h及48h时的c-fos蛋白表达明显升高,3h及24h时的血浆β -EP含量也明显升高(P＜0.05).结论 盐酸纳洛酮可降低DBI合并SBI大鼠脑内c-fos蛋白及血浆β-EP的含量,减轻神经损伤程度,具有一定的神经保护作用;DBI合并SBI后与DBI后SBI前使用盐酸纳洛酮对SBI的疗效相仿.     

次声作用后脑组织环核苷酸与TXA_2、PGI_2代谢改变及意义

本研究探讨次声作用后脑皮层组织环核甘酸与花生四烯酸代谢产物血栓素A2 (TXA2 )和前列环素(PGI2 )代谢改变及意义。将 40只SD大鼠随机分为正常对照、次声作用 1次、7次、1 4次及代谢性谷氨酸受体拮抗剂α 甲基 4 羧基苯氨基乙酸 (MCPG)治疗 5组。采用本校研制的次声压力仓。次声作用组用 8Hz、1 2 0dB的次声按规定次数 ,每次作用 2h。各组到预定时间后 ,取脑组织匀浆 ,用放免进行环磷酸腺苷 (cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)与TXB2 及 6 酮 (TXA2 、PGI2 稳定代谢产物 )含量测定 ,并对脑组织匀浆进行蛋白定量。结果 :cAMP、cGMP与TXB2 及 6 酮含量 ,在次声作用 1次组 ,无显著改变 ;在 7次与 1 4次组 ,cAMP与TXB2 含量显著升高 (P<0 .0 1 ) ,6 酮含量明显降低 (P <0 .0 1 )。TXB2 /6 酮比值呈递增趋势 ;治疗组 :cAMP、TXB2 及 6 酮含量与TXA2 /PGI2 比值有明显恢复。提示次声可以通过引起脑cAMP、cGMP与TXA2 、PGI2 代谢改变造成脑损害 ,这是次声导致脑损害的重要因素之一。在相同强度的次声的作用下 ,作用次数的多少与脑cAMP、cGMP与TXA2 、PGI2 代谢改变程度呈直接相关关系。MCPG可能通过影响脑cAMP与TXA2 、PGI2 代谢改变而起脑保护作用。     

次声作用后鼠脑CA_1区mGluR1α表达改变及其拮抗剂MCPG的作用研究

为探讨次声作用后鼠脑CA1区mGluR1α表达改变规律 ,并观察mGluR1α拮抗剂MCPG的作用。将 12 0只SD大鼠随机分为次声作用组及MCPG治疗组 ,两组再分为对照组及次声作用 1、7、14次组 ,每组 15只。用 8Hz 130dB的次声按规定次数 ,每次作用 2h。免疫细胞化学染色 ,光镜、透射电镜观察形态改变。结果显示 :次声作用 1次组mGluR1α阳性细胞数即出现变化 (P <0 0 5 ) ;7次组表达最为显著 (P <0 0 1) ;14次组减少至正常水平。MCPG治疗组mGluR1α阳性值与等数次声组之间无差异 (P >0 0 5 )。形态学研究证实 ,MCPG对神经元有明显保护作用。提示次声作用可通过mGluR1α介导兴奋性神经毒作用 ,mGluR1α活性改变是导致次声性脑损害的因素之一。     

代谢型谷氨酸受体拮抗或激动剂对大鼠脑损伤的治疗作用

目的：探讨三组代谢型谷氨酸受体（mGluRs）特异性拮抗或激动剂对弥漫性脑损伤（DBI）后损伤脑组织的神经保护作用。方法：SD大鼠随机分为四组，在单纯DBI 1h后，脑室分别注射10μl第I组mGluRs拮抗剂（MCPG）、第Ⅱ组mGluRs激动剂（DCG－Ⅳ）、第Ⅲ组mGluRs激动剂（L－AP4)或等渗盐水，观察大鼠行为、皮层损伤神经元数及脑组织含水量变化。结果：MCPG、DCG－Ⅳ及L－AP4均对大鼠DBI后死亡率无明显影响（P＜0．05）。MCPG和DCG－Ⅳ可明显改善大鼠DBI后行为学改变、降低皮层损伤神经元数量及脑组织含水量，以MCPG降低效果最为显著（P＜0．05）；而L－AP4则没有明显上述作用（P＞0．05）。结论：第I组mGluRs拮抗剂MCPG和第Ⅱ组mGluRs激动剂DCG－Ⅳ有一定的神经保护作用，其中MCPG作用最强。     

次声作用后鼠脑CA1区mGluR1α表达改变及其拮抗剂MCPG的作用研究

为探讨次声作用后鼠脑CA1区mGluR1α表达改变规律,并观察mGluR1α拮抗剂MCPG的作用。将120只SD大鼠随机分为次声作用组及MCPG治疗组,两组再分为对照组及次声作用1、7、14次组,每组15只。用8Hz130dB的次声按规定次数,每次作品2h。免疫细胞化学染色,光镜、透射电镜观察形态改变。结果显示：次声作用1次组mGluR1α阳性细胞数即出现变化（P＜0.05）;7次组表达最为显著（P＜0.01）;14次组 减少至正常水平。MCPG治疗组mGluR1α阳性值与等数次声组之间无差异（P＞0.05）。形态学研究证实,MCPG对神经元有明显保护作用。提示次声作用可通过mRluR1α介导兴奋性神经经毒作用,mGluR1α活性改变是导致次声性脑损害的因素之一。     

皮层神经元机械性损伤后代谢型谷氨酸受体表达及其拮抗剂的保护作用

目的研究体外培养小鼠脑皮层神经元机械性损伤后代谢型谷氨酸受体1a(metat-ropicglutamatereceptor1a,mGluR1a)的表达规律及其选择性拮抗剂1-氨基茚-1,5-二羧酸(1-aminoindan-1,5-dicarboxylicacid,AIDA)的保护作用。方法孕15-16d昆明种小鼠胚胎脑皮层神经元体外培养7d,以微量移液器塑料滴头在培养孔内划割,造成机械性损伤,伤后不同时间点(10,30min、1,3,6,12,24,72h)行神经元免疫组化染色,并留取培养液上清,检测乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)活性;对照组除不划伤神经元,其他处理同损伤组。AIDA处理组在损伤前30min,每孔加入AIDA使其终浓度为20μmol/L,其余步骤同前,激光扫描共聚焦显微镜检测AIDA处理前后神经元细胞内Ca2+含量变化。结果mGluR1a在正常神经元中表达呈弱阳性,染色颗粒分布于胞浆、胞膜及突起;机械性损伤后10min起,mGluR1a表达明显增强,胞核周围胞浆内染色明显加深,持续至伤后24h,神经元突起中也有明显表达,伤后72h,存活神经元数量明显减少,mGluR1a染色呈弱阳性。对照组LDH活性为(80.5±21.9)U/L,损伤后30min,LDH活性较对照组明显增加(P<0.05),3,6h时与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),伤后12-72h,LDH活性较对照组明显增强(P<0.05)。伤后12-72h,AIDA处理组LDH活性较单纯损伤     

大鼠弥漫性轴索损伤后Fos蛋白表达的研究

目的观察大鼠弥漫性轴索损伤(DAI)后不同时间Fos蛋白在脑皮质、脑干的表达,进一步阐明脑损伤后弥漫轴索损伤的发生机制。方法45只大鼠随机分为两组,正常对照组(5只)和损伤组(40只)。损伤组复制Marmarou DAI模型,通过免疫组织化学方法,观察伤后不同时间脑皮质、脑干神经元Fos蛋白表达。结果外伤后0.5 h Fos蛋白表达开始增加,1d达到高峰,以后逐渐下降,12 d后基本消失。与正常对照组相比,损伤组伤后0.5、1、4、12 h、1、4 d Fos阳性神经元数明显增多(P<0.01)。结论DAI的形成和发展与伤后的时间存在明显相关关系。     

亚低温对大鼠脑损伤后神经元特异性烯醇化酶的影响

目的　观察脑损伤后亚低温对大鼠血清神经元特异性烯醇化酶 (NSE)动态变化以及伤灶周边脑皮层损伤神经元数和脑组织含水量的影响 ,为评价亚低温脑保护作用提供量化指标。　方法　 4 5只SD大鼠利用自由落体打击器造成一侧脑外伤模型 ,随机分成三组 :(1)假手术对照组 ;(2 )常温创伤组 ;(3)亚低温创伤组。每组分别在术后 3,6 ,2 4h三个时相点收取标本 ,采用病理形态学方法检测伤灶周边脑皮层损伤神经元数 ;应用放射免疫双抗体夹心法测定血清NSE水平以及测量脑组织含水量。　结果　大鼠脑损伤后血清NSE水平显著增高 (P <0 .0 5 ) ,且与神经元损伤程度呈正相关关系 (r =0 .8344 ,P <0 .0 1) ;与常温创伤组比较 ,亚低温创伤组伤后 6 ,2 4h血清NSE水平显著降低 (P <0 .0 5 ) ,脑组织含水量 (P <0 .0 5 )和伤灶周边脑皮层损伤神经元数 (P<0 .0 1)也比常温创伤组减少。　结论　亚低温治疗可以显著抑制NSE释放 ,减轻神经元损伤和脑水肿 ,增强神经元对脑外伤的耐受性 ,进而在外伤早期具有脑保护作用。     

脑损伤早期神经细胞c－fos基因表达变化与脑水肿

采用免疫细胞化学方法（ＡＢＣ）研究大鼠脑损伤早期神经细胞ｃ－ｆｏｓ基因表达变化，探讨脑损伤时神经细胞ｃ－ｆｏｓ基因表达变化与脑水肿的关系。结果发现，脑损伤后仅０．５ｈ，脑损伤区周围神经细胞中ｃ－ｆｏｓ基因表达已明显，伤后３～６ｈ更为显著。同时伴有相应部位脑灰质及脑白质水含量增加。初步研究结果提示，脑损伤早期神经细胞ｃ－ｆｏｓ基因表达变化与脑水肿的发生有密切关系。     

发展我国的脑科学研究

近１０年来国际脑研究有非常迅猛的发展。神经科学家们从细胞和分子生物学和整合的角度研究神经科学。发育神经生物学的研究发展很快。我国发展脑科学研究既有必要，也有可能。我们应当利用各种最先进的技术手段，集中力量从分子细胞、神经回路到整体脑功能等一系列水平上展开深入的、开创性的研究。我们的战略应当是：有限目标，重点迎头赶上，补上重要缺门，发挥中国特点。     

脑神经生长素治疗脑外伤临床观察

本文经５２例临床观察，治愈率为５０％，有效率为９０．３％，可考虑推广应用。按蒋氏分级标准Ⅰ和Ⅱ级脑外伤效果更好。     

地塞米松治疗创伤性脑水肿时测定其在血及脑组织中含量

测定了大剂量（５ｍｇ／ｋｇ体重）地塞米松（Ｄｅｘ）与小剂量（０．５ｍｇ／ｋｇ）Ｄｅｘ治疗创伤性脑水肿血及脑组织中Ｄｅｘ浓度的变化。结果提示，大鼠创伤性脑水肿后应用大剂量Ｄｅｘ，血中最高汲工为１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ，而应用小剂量Ｄｅｘ后血中最高浓度为１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ。应用大剂量Ｄｅｘ治疗颅脑外伤病人时，血中最高浓度为１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ。由于糖皮质激素存在高亲和力结合位点（１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ）和     

兔颌面部撞击伤致颅脑损伤后内皮素含量和脑水肿的变化

了解颌面部撞击伤与颅脑损伤的关系,内皮素（ＥＴ）与在颅脑损伤发展过程中的作用。实验兔２５只,分别以平均速度８ｍ／ｓ和３ｍ／ｓ的撞击头致颌面部２,伤后早期观察颌面部和颅脑伤情,分析脑损伤发生条件。取脑组织标本光镜及电镜观察,研究颅脑损伤特点,测定血浆和脑组织中ＥＴ含量及脑含水量。颌面部撞击作国后脑组织病理改变明显,伤后血浆和脑组织匀浆中ＥＴ含量显著提高,出现脑水肿,高速组变化更显著。内皮素含量变化与     

脑损伤后脑和血清5－HT及5－HIAA含量与免疫组化研究

采用荧光分光仪检测了脑损伤后不同时间脑皮质及血清中５－羟色胺（５－ＨＴ）及５－羟吸哚醋酸（５－ＨＩＡＡ）含量，并应用免疫组化（ＡＢＣ）方法对脑内５－ＨＴ代谢变化进行定位和定性研究。结果：脑损伤后６ｈ，脑皮质中５－ＨＴ和５－ＨＩＡＡ含量上升（１．９９±０．３５和２．８４±０．７５μｇ／ｇ）。伤后４８ｈ，５－ＨＴ含量达高峰（４．２９±０．４４）；而５－ＨＩＡＡ含量于伤后２４ｈ即达高峰（５．４８±０．４１）。血清中５－ＨＴ含量变化不明显；５－ＨＡＡ含量升高较明显。免疫组化观察发现，脑损伤后６～２４ｈ，脑干中缝核群５－ＨＴ能神经元中５－ＨＴ变化不明显，伤后７２ｈ开始减少。脑损伤后，脑微血管壁中５－ＨＴ明显增多，血管周围间隙扩大，脑水肿加剧。提示脑内５－ＨＴ代谢紊乱是导致外伤性脑水肿，加剧脑继发性损害的重要因素之一。     

脑瘤患者同种胸腺移植方式的比较

本文报道脑瘤病人胸腺移植的治疗效应。以观察患者的临床表现。测定患者的细胞免疫和体液免疫的常规指标。两组病人移植前后的免疫指标测定结果,经自身配对t检验,淋巴细胞计数(Lym),淋巴细胞转化率(LTT>6)、及E—玫瑰花环形成率(E—RFC％)、呈现极显著性差异(P<0.001),血清中IgG和C_3也呈现显著性差异(P<0.05),而IgA.IgM.IgD及C_4则未呈现显著性差异(P>0.05)。用两组移植后的测定值比较,只有Lym呈现差异有显著性(P<0.05),其它均未呈现显著性差异(P>0.05)。部分患者在植后接受放射治疗时,还表现出抗辐射损伤效应,值得进一步深入研究。     

牛脑烯醇化酶的提取和性质

烯醇化酶具有同工酶的性质。用硫酸铵分级沉淀,DEAE-纤维素及DEAE-Sephadex柱层析的方法,可以从牛脑中提取烯醇化酶同工酶。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱显示牛烯醇化酶3在还原前后的分子量都是55,000。用此简单方法所得的牛烯醇化酶3的提纯倍数为44.9倍。如进一步用第二次DEAE-Sephadex及羟基磷灰石柱层析纯化,提纯倍数逐渐升高至103.7倍。     

脑损伤后脑与血中钙和钙调素含量变化及氢溴酸山莨菪碱对其影响

采用大鼠脑落体损伤模型,分别检测脑损伤后不同时间脑组织水含量、脑皮质和血中钙及钙调素(CaM)含量,并应用氢溴酸山莨菪碱治疗。结果:(1)脑损伤后脑及血中钙含量均有增高,以脑皮质钙含量增高较为明显,伤后48h达24.12±10.22mmol/kg干脑,约为对照值的2倍;(2)脑皮质及血中CaM含量均有较明显升高,伤后48h达峰值,分别为对照值的2.6倍和2.8倍;(3)脑损伤后脑白质水含量显著增加,其变化规律与脑组织中钙及CaM相一致;(4)应用氢溴酸山莨菪碱后钙及CaM含量显著降低,脑水肿明显减轻。