岩白菜素通过下调PI3K-AKT-mTOR通路抑制恶性胶质瘤的恶性生物学行为

目的 探究岩白菜素对恶性胶质瘤细胞的抑制作用及可能机制。方法 常规培养U251和U87细胞,以一定浓度梯度（0、0.5、1、2、4、8μM）的岩白菜素与U251和U87细胞共孵育,MTT法检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测集落形成能力,Transwell小室迁移和侵袭实验检测纵向迁移能力,划痕愈合实验检测横向迁移能力,Hoechst细胞凋亡检测试剂盒检测凋亡,免疫印迹检测PI3K-AKT-mTOR通路的变化,MTT检测与PI3K抑制剂共孵育后岩白菜素对U251细胞抑制作用的变化。同时利用MTT评估岩白菜素对正常人脑胶质HEB细胞的细胞毒性。结果 与一定浓度梯度的岩白菜素共孵育后,MTT法检测发现U251和U87细胞的增殖能力以时间依赖性和浓度依赖性下降,平板克隆形成实验检测发现U251和U87细胞的集落形成能力浓度依赖性下降,Transwell小室迁移和侵袭实验检测发现U251细胞的纵向迁移和侵袭能力浓度依赖性下降,划痕愈合实验发现U251细胞的横向迁移能力浓度依赖性下降,Hoechst细胞凋亡检测试剂盒检测发现与一定浓度的岩白菜素共孵育后凋亡细胞增多,免疫印迹检测发现,总PI3K...     

过表达迁移侵袭抑制蛋白基因对人巨细胞病毒转染U87细胞特性影响

目的探讨过表达迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)基因对人巨细胞病毒(HCMV)感染的神经胶质母细胞瘤U87细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法采用过表达的MIIP基因慢病毒转染HCMV感染的U87细胞,通过Western-blot检测其转染效率,并将细胞分为为实验组(U87+HCMV/MIIP)、对照组(U87+HCMV/CMV4)和空白组(U87+HCMV)。采用CCK-8检测过表达的MIIP基因对HCMV转染的U87细胞增殖情况的作用;采用Transwell迁移实验检测对细胞迁移情况的影响;采用Transwell体外侵袭实验检测对细胞侵袭能力的影响。结果实验组细胞的MIIP蛋白表达量与对照组和空白组比较,明显上调(P<0.05);细胞的增殖能力与对照组和空白组比较,明显降低(P<0.05);细胞的侵袭力与对照组和空白组比较,明显减弱,且细胞数显著下调(P<0.05);迁移能力与对照组和空白组比较,显著降低(P<0.05)。结论 HCMV感染的U87细胞在MIIP基因过表达后增殖、侵袭及迁移能力均受抑制。     

MMP-2-PEX原核表达纯化及其对黑色素瘤细胞与内皮细胞黏附的影响

目的探讨原核表达的人源基质金属蛋白酶2的C端结构域（MMP-2-PEX）对黑色素瘤细胞A375与内皮细胞黏附的影响。方法利用RT-PCR方法从人成纤维肉瘤细胞HT1080中克隆MMP-2 C端结构域,构建原核表达载体pET-His-PEX;转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达;盐酸胍裂解包涵体,经镍琼脂糖凝胶柱纯化,透析复性后获得MMP-2-PEX蛋白,随后对其进行Western印迹和质谱鉴定。采用明胶酶谱法检测MMP-2-PEX的活性;采用平行板流动小室系统检测在流动状态下MMP-2-PEX对A375细胞与脐静脉内皮细胞HUVEC黏附的影响,通过小鼠实验性肺转移模型检测MMP-2-PEX对A375细胞在小鼠肺内癌栓形成的影响。结果 Western印迹和质谱鉴定原核表达的MMP-2-PEX蛋白正确,明胶酶谱检测MMP-2-PEX能够明显抑制MMP-2的活性。表达的MMP-2-PEX蛋白能够在流动状态下抑制A375细胞与HUVEC细胞的黏附,其黏附抑制率与MMP-2-PEX蛋白浓度增加成正相关,MMP-2-PEX浓度为12.5,25和50μg/ml时抑制率分别为32.5%,41.4%和53.9%。用MMP-2-PEX处理后,A375细胞在小鼠肺内癌栓的形成与对照组相比降低了26.4%。结论原核表达的人MMP-2-PEX在体外流动状态下可抑制A375细胞与内皮细胞的黏附,并抑制A375细胞在小鼠肺内癌栓的形成。     

4 Gy X线照射通过上调MMP-2/9表达增强骨肉瘤细胞迁移能力

目的 研究4 Gy X线照射对骨肉瘤细胞迁移能力的影响及其机制.方法 将143B细胞和U2OS细胞分为对照组和4 Gy照射组,分别于照射后12、24、36和48 h,采用Transwell法检测细胞的迁移能力,Western印迹检测细胞MMP-2和MMP-9蛋白表达水平;siRNA法干扰细胞MMP-2/MMP-9表达.结果 与对照组相比,4 Gy X线照射后,143B细胞和U2OS细胞12和48 h的迁移能力未发生显著变化(P>0.05),24和36 h的迁移能力均显著增强(P<0.05);同时,两种细胞的MMP-2和MMP-9蛋白表达水平在12和48 h无显著变化(P>0.05),在24及36 h显著升高(P<0.05);干扰143B细胞和U2OS细胞中的MMP-2/MMP-9表达后,两种细胞的MMP-2/MMP-9蛋白表达水平及迁移能力均明显降低(P<0.05).结论 4 Gy X线照射可通过上调MMP-2/MMP-9表达水平增强143B细胞和U2OS细胞的迁移能力.     

异丙酚对胶质瘤U87细胞增殖、侵袭、迁移及JAK2/STAT3通路的影响

 目的 探讨异丙酚对胶质瘤U87细胞增殖、侵袭、迁移及Janus激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)通路的影响。方法 采用MTT法测定不同浓度的异丙酚对胶质瘤U87细胞和人正常星型胶质细胞HEB生长抑制作用,Transwell侵袭实验测定2、5、10 μM异丙酚对胶质瘤U87细胞体外侵袭能力的影响,划痕实验测定2、5、10 μM异丙酚对胶质瘤U87细胞体外迁移能力的影响,蛋白印迹法(WB)测定10 μM异丙酚对胶质瘤U87细胞JAK2/STAT3通路的影响。结果 与对照组相比,5、10、25、50、100 μM异丙酚均能显著抑制胶质瘤U87细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.05),后续选择2、5、10 μM异丙酚进行实验。与对照组相比,胶质瘤U87细胞经2、5、10 μM异丙酚处理后,侵袭能力显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕实验说明,胶质瘤U87细胞经2、5、10 μM异丙酚处理48 h后,迁移能力分别降低了(19.69±2.67)%、(41.41±3.28)%、(59.75±2.91)%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。且胶质瘤U87细胞中JAK2蛋白磷酸化水平、STAT3蛋白磷酸化水平明显下调,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 异丙酚可能通过下调JAK2/STAT3信号传导通路相关蛋白表达,抑制胶质瘤U87细胞增殖、侵袭、迁移能力。     

FAK/Paxillin信号通路参与调节乳腺癌细胞侵袭伪足形成

目的探讨FAK/Paxillin信号通路在体外培养乳腺癌细胞侵袭伪足形成中的作用。方法筛选P-FAK(Tyr397)抑制剂Y15适宜浓度,使之仅抑制FAK 397位酪氨酸磷酸化,不抑制FAK及细胞内其他基因表达;选用适宜浓度Y15抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞中FAK磷酸化,采用原位明胶酶谱法检测侵袭伪足形成及细胞外基质降解能力;采用细胞黏附实验和侵袭小室实验检测MDA-MB-231细胞对细胞外基质的黏附和侵袭能力。结果 1μM Y15能显著抑制MDA-MB-231细胞中FAK 397位酪氨酸磷酸化和paxillin 118位酪氨酸磷酸化且不影响FAK和paxillin表达量;抑制MDA-MB-231细胞中FAK磷酸化能显著抑制细胞侵袭伪足形成,并抑制其细胞外基质降解能力;抑制MDA-MB-231细胞中FAK活化能显著抑制乳腺癌细胞对细胞外基质的黏附及向周围侵袭的能力。结论 FAK/Paxillin信号通路参与调节乳腺癌细胞侵袭伪足形成,促进肿瘤侵袭、转移。     

雷帕霉素对内皮祖细胞数量与功能的影响

目的观察雷帕霉素对外周血内皮祖细胞（EPCs）数量与功能的影响。方法采用密度梯度离心法从外周血获得单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7天后收集贴壁细胞,加入不同浓度（1.0、2．0、5．0ug／m^3）雷帕霉素分别培养6、12、24、48h。激光共聚焦显微镜鉴定,FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs,流式细胞仪检测其表面标志以进一步鉴定EPCs,并在倒置荧光显微镜下计数。然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、黏附能力测定实验和体外血管生成试剂盒来观察EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力。结果EPCs数量随雷帕霉素浓度与作用时问增加而减少,其增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力亦随雷帕霉素浓度与作用时间增加而降低。结论雷帕霉素降低EPCs的数量、增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,并呈浓度和时间依赖性。     

6-姜烯酚对HPV阳性及阴性宫颈癌细胞侵袭及迁移的作用及其机制

目的观察6-姜烯酚对人乳头瘤病毒(HPV)阳性及阴性人宫颈癌细胞侵袭及迁移的抑制作用,并探讨其作用机制。方法培养HPV阳性人宫颈癌细胞(HeLa)及HPV阴性人宫颈癌细胞(C33A),分别加入0、5、10、20、50 μmol/L的6-姜烯酚,并以未处理组作为对照,继续培养24 h。确定6-姜烯酚的最佳浓度为10 μmol/L。后续实验以10 μmol/L的6-姜烯酚分别处理24、48及72 h,采用MTS法检测细胞增殖情况,以10 μmol/L 6-姜烯酚用于细胞划痕实验检测6-姜烯酚对细胞迁移能力的影响,采用Transwell小室法检测6-姜烯酚对细胞侵袭能力的影响,Western blotting检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达水平。结果 MTS检测结果表明,HeLa及C33A细胞的活力均随6-姜烯酚浓度及作用时间的增加而逐渐降低,在各浓度及作用时间点,HeLa细胞的活力降低较C33A细胞更明显;Transwell侵袭实验结果显示,6-姜烯酚对HeLa细胞作用24 h及48 h,对...     

纤维蛋白诱导活化系膜细胞表达明胶酶A、B的机制研究

为观察纤维蛋白对系膜细胞（HMC）表达明胶酶A（MMP-2）、明胶酶B（MMP-9）的作用并探讨其活化机制,应用RT-PCR、明胶酶谱分析法分别在基因转录水平与蛋白质活性水平上检测纤维蛋白对HMC表达MMP-2、MMP-9的作用,采用纤维蛋白酶谱法与平板法检测纤维蛋白对HMC表达纤溶酶原激活物（PA）活性的影响。结果发现,纤维蛋白呈剂量与时间依赖性促进HMC MMP-2与MMP-9表达的上调,并同时促进HMCtPA与uPA的表达;应用抑肽酶阻断纤溶酶活性后能够完全阻断pro-MMP-2与pro-MMP-9的活化。提示肾脏局部沉积的纤维蛋白可以促进HMC表达与活化MMP-2、MMP-9、而MMP-2与MMP-9的活化依赖于PA/纤溶酶系统的调控。     

热损伤对肝细胞肝癌细胞增殖及侵袭转移特性影响的实验研究

目的 体外实验评价热损伤对肝细胞肝癌(HCC)细胞增殖、侵袭转移能力及上皮-间质细胞转化(EMT)等特性的影响,探索热消融与HCC复发转移之间的关系.方法 通过体外加热构建McA-RH7777 HCC细胞热损伤模型.CCK-8法检测热损伤对HCC细胞增殖能力的影响,流式细胞技术检测细胞周期情况.Transwell实验研究热损伤对HCC细胞侵袭能力的影响.荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)分析热损伤对HCC细胞侵袭及EMT相关分子标志物VEGF、MMP-9、Nm23、E-cadherin、vimentin的mRNA和蛋白表达的影响.结果 McA-RH7777 HCC细胞热处理条件为43.5C水浴30 min.热处理后2～5 d细胞增殖能力显著高于对照组(P＜0.05).热处理48 h及72 h后处于G1期细胞比例降低,S+G2期细胞比例增加,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,热处理后24 h后HCC细胞侵袭能力差异不明显,而热处理72 h后细胞侵袭能力显著增加(22.3±2.46对14.2±1.82,P＜0.001).RT-PCR和蛋白印迹分析结果显示,热处理72 h后HCC细胞VEGF、MMP-9和vimentin表达水平显著增加,E-cadherin表达显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 亚致死量热损伤诱导McA-RH7777 HCC细胞发生EMT并增加其增殖和侵袭转移能力,表现出更高的恶性潜能.     

环指蛋白187过表达后对人脑胶质瘤细胞U87的影响

 目的 探究环指蛋白187(ring finger protein 187,RNF187)过表达后对人脑胶质瘤细胞U87的影响及其可能机制。方法 体外培养胶质瘤细胞系U87,转染过表达RNF187入U87细胞,对比分析RNF187 过表达对肿瘤细胞生长增殖能力、细胞干性和体外侵袭及转移能力;最后通过检测RNF187及焦亡标志物,即炎性小体3(inflammasome3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein,ASC)、GSDMD和GSDME的表达,明确RNF187与焦亡的关系。结果 CCK-8、细胞克隆和Transwell 实验证实,RNF187过表达后U87细胞形态上肿胀肿大,且细胞增殖和侵袭能力较对照组增强,RNF187过表达组细胞增殖率(2.24±0.16)高于其他两组;RT-PCR和Western blot实验表明,RNF187过表达后焦亡相关标志物(NLRP3、ASC、GSDMD、GSDME)表达水平较对照组升高(P＜0.05)。结论 RNF187在胶质瘤细胞表达增多,增加胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力,可能是通过促进焦亡实现的。     

白介素-1β对人牙周膜成纤维细胞MMP-13表达影响的研究

目的 探讨白介素-1β（IL-1β）对人牙周膜成纤维细胞（hPDLFs）中基质金属蛋白酶-13（MMP-13）表达影响的研究.方法 体外分离培养hPDLFs并随机分为对照组和实验组,对照组中加入等量无血清培养液,实验组加入不同浓度IL-1β（0 ng/ml、0.5 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml、20 ng/ml）作用hPDLFs 24 h.采用RT-PCR检测MMP-13 mRNA的表达情况,并选取最适浓度作用24 h,采用Western blot检测MMP-13蛋白表达的变化情况.结果实验组与对照组比较,MMP-13在IL-1β浓度为10 ng/ml和20 ng/ml时mRNA表达最为明显（P＜0.05）,10 ng/ml组和20 ng/ml组MMP-13 mRNA表达相比较,无明显差异（P＞0.05）.采用10 ng/ml IL-1β作为最适浓度进行刺激,并作用hPDLFs 24 h,与对照组比较,MMP-13蛋白表达显著增加,具有显著差异性（P＜0.05）.结论 在IL-1β调控下,hPDLFs中MMP-13的表达显著增加,并呈明显的浓度依赖性,而MMP-13表达的增加可能是引起正畸治疗过程中牙根吸收的重要机制之一.     

紫檀芪对人食管癌EC9706细胞生长的影响及其机制

目的探讨紫檀芪（PrIT）对人食管癌EC9706细胞生长影响及其抗凋亡的机制。方法EC9706细胞分为对照组（正常DMEM培养液孵育）和肿组（DMEM培养液中含PTT,分别为15、30、45、60trM）,各组细胞分别处理24、48、72h。MTr法检测各组细胞存活率;黏附实验测定各组细胞黏附率;Westernblot方法检测各组细胞抗凋亡相关蛋白Bcl-2和凋亡相关蛋白Caspase．3表达。结果MTY结果显示,Prr对EC9706细胞生长有抑制作用,其中60trM处理72h组抑制效果最明显,呈药物浓度及时间依赖效应;黏附实验结果显示,PrITll处理72h可以显著减弱EC9706细胞黏附能力,并呈浓度依赖效应;Westernblot结果显示（72h）：P1Tr处理72h可以显著降低EC9706细胞Bcl-2的表达,同时显著升高其Caspase-3的表达。结论紫檀芪可抑制EC9706细胞生长,促进其凋亡,其机制与激活Caspase-3并抑制Bcl-2表达有关。紫檀芪可能是食管癌治疗领域具有开发前景的新药。     

人参皂苷Rg3对人宫颈癌Hela细胞诱导凋亡作用

目的探讨人参皂苷Rg3对人宫颈癌Hela细胞的诱导凋亡作用。方法用浓度梯度Rg3处理Hela细胞,用流式细胞仪方法检测细胞凋亡及细胞周期的变化,用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2、bax表达。结果 10、20、40 mg/L Rg3作用Hela细胞24 h后的凋亡率分别为(5.6±1.4)%、(10.3±2.7)%、(21.2±4.9)%,均高于对照组(P<0.01);同时随着Rg3浓度的增加,G2/M期细胞比例升高,Bcl-2表达明显降低,bax基因表达明显升高(P<0.01)。结论 Rg3能将Hela细胞阻滞在G2/M期,通过上调bax和下调Bcl-2表达诱导肿瘤细胞凋亡。其作用呈浓度依赖性。     

人参皂苷对肺癌细胞增殖、凋亡影响及作用机制

目的探讨人参皂苷Rg3对非小细胞肺癌细胞系NCI-H292细胞增殖、凋亡的作用及其与相关信号通路的关系。方法用不同浓度(0、20、40、60μmol/L)人参皂苷Rg3处理NCI-H292细胞。CCK8法检测人参皂苷Rg3对NCI-H292细胞增殖的影响;流式细胞术检测人参皂苷Rg3对NCI-H292细胞凋亡的影响;Western blot检测caspase-3和Bcl-2蛋白表达;反转录聚合酶链反应检测Keap1 mRNA和Nrf2 mRNA表达,观察人参皂苷Rg3对Keap1-Nrf2/ARE信号通路的调节作用;通过检测活性氧水平评价细胞内氧化应激水平。结果与对照组(人参皂苷Rg3为0μmol/L)比较,随着人参皂苷Rg3浓度增加,细胞的增殖能力和Nrf2 mRNA表达下降,细胞的凋亡能力、caspase-3和Bcl-2蛋白表达量、Keap1 mRNA表达、活性氧水平上升,且均呈浓度依赖性(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3可能通过抑制Keap1-Nrf2/ARE信号通路而抑制非小细胞肺癌细胞增殖,并促进其凋亡。     

MIIP基因对人胶质瘤细胞U87增殖能力与放疗敏感性影响

目的探讨过表达迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)基因对人胶质母细胞瘤细胞系U87放疗敏感性的影响。方法采用过表达MIIP基因慢病毒转染U87细胞,通过Western blot实验检测转染效率;MTT实验检测MIIP基因对U87细胞活力的影响;应用平板克隆形成实验,评价放射线照射对MIIP过表达组与对照组克隆形成能力的影响;进一步应用Western blot实验检测RAD51蛋白与BCL2蛋白的表达情况。结果 MIIP基因过表达可以抑制神经胶质瘤细胞U87的增殖能力。上调MIIP基因,抑制U87细胞的克隆形成能力,并提高放疗敏感性。放疗前与放疗后,MIIP基因均抑制RAD51蛋白与BCL2蛋白的表达。结论过表达MIIP基因抑制U87细胞的增殖能力与克隆形成能力;MIIP基因可提高U87细胞放疗敏感性,其机制与RAD51、BCL2信号转导通路相关。     

蜂胶对成纤维细胞、单核巨噬细胞系基质金属蛋白酶MMP-9表达的抑制作用

目的探讨蜂胶对糖尿病伤口愈合的作用及其机制。方法采用荧光电泳法,检测不同葡萄糖浓度（5、25mmol／L）和不同蜂胶浓度（10、50、100、200μg／ml）处理的体外培养的人成纤维细胞及单核巨噬细胞系的基质金属蛋白酶MMP-9蛋白的表达。结果高浓度葡萄糖（25mmol／L）状态下,MMP-9表达增加,但与低浓度（5mmol／L）比较,差异无统计学意义。蜂胶可显著降低MMP-9的表达,并呈剂量依赖性（P〈．05）。结论高糖能增加单核巨噬细胞系及成纤维细胞MMP-9的表达,可能会影响糖尿病患者伤口的愈合。蜂胶可抑制这些细胞MMP-9的表达,有益于细胞基质的积聚,从而有益于糖尿病患者伤口的愈合。     

调控Cox-2基因表达与食管癌细胞放射敏感性机制的初步探讨

目的 通过调控环氧合酶-2(Cox-2)基因表达来探讨影响食管癌细胞放射敏感性的机制.方法 通过构建C ox-2特异性siRNA,转染EC9706细胞,调控细胞内Cox-2表达,检测不同辐射剂量后MMP-2 、Bcl-2 mRNA、AKT蛋白和磷酸化AKT的表达,以及观察集落形成、细胞增殖、细胞凋亡、体外细胞侵袭能力,结果采用单因素方差分析进行统计学处理.结果 2和4 Gy照射后,上调组Bcl-2 mRNA表达量升高(F=3.36、4.32,P＜0.05);下调组MMP-2 mRNA表达量降低(F=3.86、8.09,P＜0.05),Bcl-2 mRNA表达量降低(F=3.73、5.64,P＜0.05),Bax mRNA表达量升高(F=7.03、7.42,P＜0.05).而各组细胞总AKT蛋白和磷酸化AKT蛋白印迹呈现上调组最强印迹,下调组最浅印迹.下调组细胞随照射量的增加凋亡率上升陡度最大,且差异有统计学意义(F=317.40,P＜0.05).G0～G1期细胞比例逐渐升高,S和G2～M期细胞比例逐渐降低,细胞增殖抑制率明显升高,体外侵袭实验穿透细胞数下降陡度最大.结论 调控C ox-2基因表达影响食管癌细胞放射敏感性的机制可能是,下调细胞内Cox-2 mRNA表达继而下调MMP-2、Bcl-2 mRNA表达,上调Bax表达,导致肿瘤细胞的侵袭及转移能力的降低,促进其向G0 ～G1期细胞转换,诱导细胞凋亡.同时使AKT和磷酸化AKT(pAKT)水平下降,影响PI3 K/Akt信号转导途径降低其放疗抗拒的能力.     

诱生型一氧化氮合酶调节体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞中MMP的表达

目的 探讨在体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞(SMC)中，一氧化氮(NO)的产生及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的表达变化对基质金属蛋白酶MMP-2，MMP-9的调节。方法 酶消化法培养大鼠主动脉平滑肌细胞(SMC)，α—actin及电镜鉴定SMC后，取3～5代SMC用IL-10诱导iNOS表达，使用不同浓度的选择性iNOS抑制剂氨基胍，通过RT—PCR观察NO调节MMP-2，MMP-9的表达情况。结果 氨基胍抑制IL-1β诱导的SMC表达iNOS后，在一定范围内降低MMP-2 mRNA表达，但对MMP-9的表达无明显影响。结论 用不同浓度的氨基胍抑制IL-1β诱导体外培养的SMC表达iNOS，MMP-2 mRNA的表达在一定范围内呈浓度依赖性增加，提示NO对MMP-2表达的抑制作用可能在NO介导的以血管重构为特征的一系列血管疾病如腹主动脉瘤，经皮血管腔内成形术后再狭窄的病理生理机制中有重要作用，并可能为这些疾病的治疗提供新思路。     

siRNA干扰明胶酶对人肾小管细胞ICAM-1表达的影响

目的 利用小干扰RNA(siRNA)抑制人肾小管上皮细胞(HKC)的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9,即明胶酶A和B的表达,观察其对胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响.方法 培养人肾小管上皮细胞,以100nmol/L佛波醇酯(PMA)刺激18h,脂质体转染抑制MMP-2或MMP-9表达的siRNA或无关siRNA.提取细胞总RNA或胞浆蛋白,利用Real-Time PCR、Western blot或免疫荧光结合激光共聚焦显微镜技术检测MMP-2、MMP-9或ICAM-1的表达情况.结果 特异性的siRNA能有效抑制HKC中MMP-2、MMP-9的mRNA和蛋白表达;免疫荧光结果显示经PMA刺激后HKC的ICAM-1表达上调,同时MMP-9-siRNA转染组人肾小管细胞的ICAM-1蛋白表达水比其他实验组高(P＜0.05).结论 抑制肾小管上皮细胞MMP-9的表达可使ICAM-1表达上调,提示除了细胞外基质降解途径外,MMP-9还可通过炎症途径影响肾脏纤维化进程.