促血小板生成素对小鼠药物性心肌损伤的保护作用

目的研究促血小板生成素（thrombopoietin,TPO）的心肌保护作用。方法小鼠分为对照组、多柔比星组、TPO组。多柔比星组及TPO组小鼠第1天予多柔比星20 mg/kg经腹腔注射;TPO组小鼠予TPO 15μg/kg,共3次经腹腔注射。第1天（多柔比星注射前）和第5天予小鼠做超声心动图检查;第5天取小鼠心肌组织行苏木素伊红染色,显微镜下评价心肌组织损伤程度。比较第1～8天内多柔比星组和TPO组存活率。结果与第0天相比,第5天多柔比星组的心率、每分钟心输出量、左心室短轴缩短率明显下降,差异有统计学意义（P〈0.05）;镜下见小鼠心肌组织明显损伤,说明药物性心肌损伤的模型能成功建立。相对多柔比星组,TPO组心率、每分钟心输出量、左心室短轴缩短率明显改善,差异有统计学意义（P〈0.05）。TPO组镜下评分示心肌损伤显著降低,8 d内的生存率明显高于多柔比星组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 TPO对损伤心肌有保护作用。     

硫辛酸对阿霉素所致小鼠心肌损伤的保护作用

目的 观察硫辛酸对阿霉素所致小鼠心肌损伤的保护效应.方法 把75只小鼠随机分成5组:正常对照组,阿霉素损伤组和低、中、高剂量硫辛酸组.正常对照组腹腔注射生理盐水10 ml/kg;阿霉素损伤组腹腔注射阿霉素3 mg/kg,隔日1次.连用7次;低、中、高剂量硫辛酸组腹腔注射阿霉素3 mg/kg,隔日1次,连用7次,于实验第4天每天腹腔注射硫辛酸10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg,连用10 d,实验结束后检测相关指标.观察小鼠精神状况和存活率,心肌超氧化物歧化酶活力,心肌丙二醛含量,血清诱导型一氧化氮合酶含量和还原型谷胱甘肽含量.结果 ①存活率:阿霉素损伤组低于阿霉素 高、中、低剂量硫辛酸组.②心肌丙二醛含量和血清诱导型一氧化氮合酶含量:阿霉素损伤组明显高于正常对照组(P<0.01),高、中、低剂量硫辛酸组明显低于阿霉素损伤组(P<0.01).③心肌超氧化物歧化酶活性和血清还原型谷胱甘肽含量:阿霉素损伤组明显低于正常对照组(P<0.01),高、中、低剂量硫辛酸组明显高于阿霉素损伤组(P<0.01).结论 硫辛酸可明显减轻由阿霉素所致小鼠心肌损伤的程度.硫辛酸的作用机制可能与其清除氧自由基及抗脂质过氧化等作用有关.     

内质网应激相关蛋白在阿霉素诱导的急性心肌损伤中的表达及意义

目的探讨内质网应激(ERS)相关葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和增强子结合蛋白环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)在阿霉素诱导的急性心肌损伤中的表达及意义。方法将8~10周雄性野生型C57BL/6J小鼠随机分为对照组与阿霉素组,每组20只,阿霉素组小鼠腹腔注射大剂量阿霉素(20mg/kg)诱导急性心肌损伤模型,对照组小鼠给予腹腔注射等量生理盐水。检测2组小鼠LVEF以及左心室短轴缩短率(LVFS)等心功能指标,记录体质量、心质量,心肌组织行苏木精-伊红染色。采用Real time-PCR和Western blotting法检测小鼠心肌组织GRP78、CHOP、Bax及Bcl-2mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,阿霉素组小鼠体质量、心脏质量、LVEF及LVFS明显降低,差异有统计学意义[(19.92±0.80)g vs(24.34±1.29)g,(96.58±8.37)mg vs(122.37±6.72)mg,(68.67±3.39)%vs(84.20±2.91)%,(27.10±1.24)%vs(39.96±3.53)%,P0.01]。组织病理结果显示阿霉素组小鼠心肌细胞排列紊乱,细胞质空泡化,心肌纤维扭曲,断裂。与对照组比较,阿霉素组小鼠心肌组织中GRP78、CHOP及Bax表达明显上调(P0.05),Bcl-2表达明显降低(P0.05),Bax/Bcl-2显著升高(P0.05)。结论 ERS可能通过调控心肌细胞凋亡,参与阿霉素诱导的急性心肌损伤过程。     

川芎嗪通过激活Akt/eNOS通路预防阿霉素致小鼠心脏毒性

目的研究川芎嗪对阿霉素诱导的小鼠心脏毒性的预防作用及其机制。方法建立阿霉素诱导的心脏毒性小鼠模型,将小鼠随机分为3组:对照组、阿霉素组(阿霉素15 mg/kg)、川芎嗪组[川芎嗪60 mg/(kg·d)+阿霉素15 mg/kg],心脏超声检测川芎嗪干预后阿霉素对小鼠心脏功能的影响,HE染色及Masson三色染色检测小鼠心脏组织学及胶原蛋白的变化,TUNEL染色检测小鼠心肌细胞凋亡情况,Western blot检测p-Akt、Akt、p-eNOS、eNOS及cleaved Caspase-3蛋白的表达。结果与阿霉素组相比,川芎嗪组左心室短轴缩短率(FS)和左心室射血分数(EF)显著升高(P0.01);川芎嗪显著降低小鼠心肌细胞凋亡(P0.01),明显抑制小鼠心肌纤维化和炎症细胞浸润(P0.01);与阿霉素组相比,川芎嗪组显著上调p-Akt和p-eNOS的表达(P0.05),显著下调cleaved Caspase-3的表达(P0.01)。结论川芎嗪通过激活Akt/eNOS通路抑制心肌细胞凋亡保护阿霉素诱导损伤心肌可能是川芎嗪预防阿霉素致心脏毒性的一个潜在机制。     

中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂对小鼠实验性结肠炎的作用研究

目的 观察中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)抑制剂西维来司他对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠实验性结肠炎的作用.方法 26只健康雄性BALB/C小鼠分为正常对照组(6只)、实验对照组(6只,腹腔注射磷酸盐缓冲液,9 d)、低剂量组(7只,腹腔注射西维来司他50 mg/kg,9 d)、高剂量组(7只,腹腔注射西维来司他100 mg/kg,9 d).除正常对照组外,其余小鼠均予5%DSS溶液自由饮用以制备实验性结肠炎模型.实验第10天时处死全部小鼠并取结肠组织,行组织学损伤评分.酶联免疫吸附法检测小鼠血浆及结肠组织培养上清中NE含量.Western印迹法检测远端结肠组织中NE表达水平.结果 实验对照组小鼠结肠组织学损伤评分(12.00±2.45)显著高于正常对照组(1.88±0.83,P＜0.01).低剂量组和高剂量组的结肠组织学损伤评分差异有统计学意义(分别为10.17±1.17和5.00±1.15,P＜0.05),均显著低于实验对照组(P值均＜0.05),但均显著高于正常对照组(P值均＜0.05).实验对照组血浆NE浓度、结肠组织培养上清NE含量、结肠组织中NE表达水平均较正常对照组明显升高(P值均＜0.05);与实验对照组相比,低剂量组稍有降低(P值均＞0.05),但仍高于正常对照组(P值均＜0.05);高剂量组则显著降低(P值均＜0.05),与正常对照组无差异(P值均＞0.05);高剂量组较实验组和低剂量组显著降低(P值均＜0.05).结论 NE抑制剂西维来司他可改善DSS诱导的小鼠实验性结肠炎病理损伤,高剂量应用效果优于低剂量.NE可能参与溃疡性结肠炎的发病.     

中药方对阿霉素所致大鼠心肌损伤的保护作用研究

目的 研究中药方对阿霉素(ADR)所致大鼠心肌毒性的保护作用,并探讨其机制.方法 将33只大鼠随机分为正常对照组、ADR模型组、中药治疗组,观察比较血清肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、一氧化氮(NO)、超敏C-反应蛋白(hsCRP),血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、B型利钠肤(BNP)水平,以及心电图、心肌病理和超微结构的改变.结果 模型组cTnI、BNP、MDA、NO、hsCRP含量明显增高,SOD活性显著降低,与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.05),并见心肌组织、超微结构的损伤;中药组与模型组比较,cTnI、BNP、MDA、NO、hsCRP水平明显下降(P＜0.05),SOD活性显著升高(P＜0.05),而与正常组比较,各值差异均无统计学意义(P＞0.05),且心肌组织与正常组几乎接近,超微结构的损伤较模型组明显减轻.结论 中药方可以预防和减轻阿霉素对心肌的毒性损伤,其机制可能与保护心肌SOD活性及清除自由基,防止脂质过氧化损伤有关.     

NADPH氧化酶在阿霉素心脏毒性的表达及意义

目的探讨NADPH氧化酶(Nox)在阿霉素心脏毒性中的表达及意义。方法选择40只SPF级雄性C57BL/6J小鼠,随机分成为对照组和模型组,每组各20只,模型组小鼠通过一次性腹腔注射20mg/kg阿霉素诱导心脏毒性,对照组小鼠给予等量生理盐水。2组小鼠均观察5 d后处死,测量并记录体重、心重和胫骨长度,计算心重胫骨长度比,同时行心肌组织荧光TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况。应用Real time-PCR和Western blots法检测小鼠心肌组织Nox2和Nox4 mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,模型组小鼠体重、心重和心重胫骨长度比明显下降(P均0.05);TUNEL染色结果显示模型组小鼠心肌组织凋亡指数明显升高(P0.05);模型组小鼠心肌组织中Nox2和Nox4 mRNA和蛋白质表达均较对照组明显上调(P均0.05)。结论在阿霉素心脏毒性模型,小鼠心肌组织中Nox2和Nox4表达增高,提示Nox通过调控氧化应激参与阿霉素心脏毒性作用,且可能是阿霉素心脏毒性的潜在治疗靶点。     

线粒体自噬相关蛋白在阿霉素诱导的心脏毒性中的表达及意义

目的探讨线粒体自噬相关蛋白在阿霉素诱导的急性心肌损伤中的表达及意义。方法将40只8～10周龄的雄性野生型C57小鼠随机分为对照组和阿霉素组,每组各20只,阿霉素组小鼠腹腔注射大剂量阿霉素(15mg/kg)诱导急性心肌损伤模型,对照组小鼠给予腹腔注射等量生理盐水。各组于第6天进行心功能检测并取材。分别采用RT-PCR和免疫印迹法检测PTEN诱导性激酶蛋白1(PINK1)、Parkin、自噬标记轻链3(LC3)、Bax、Bcl-2、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(C-caspase3)mRNA和蛋白表达水平。苏木精-伊红染色检测各组心肌损伤,TUNEL染色检测各组凋亡心肌细胞数量。结果与对照组比较,阿霉素组左心室舒张末期内径[(4.32±0.50)mmvs (3.85±0.30)mm]、左心室收缩末期内径[(3.34±0.40)mmvs (2.56±0.19)mm]和舒张末期室间隔厚度增加[(0.76±0.12)mmvs (0.48±0.09)mm,P0.05],左心室短轴缩短率降低[(26.0±2.7)%vs (37.0±4.0)%,P0.05]。阿霉素组小鼠心肌PINK1、LC3、Bax和C-caspase3mRNA和蛋白表达水平均增加(P0.05),Parkin和Bcl-2mRNA和蛋白表达水平均降低(P0.05)。苏木精-伊红染色显示,阿霉素组心肌细胞排列紊乱,并出现细胞质空泡化现象。TUNEL染色显示,阿霉素组细胞核呈致密浓染、凋亡心肌细胞较对照组明显增多(P0.05)。结论线粒体自噬介导细胞凋亡参与阿霉素诱导的急性心肌损伤的过程。     

姜黄素及谷胱甘肽对阿霉素所致大鼠急性心肌损伤的保护作用

目的探讨姜黄素谷胱甘肽对阿霉素所致急性大鼠心肌损伤的保护作用及机制。方法 60只Wistar大鼠随机分为空白对照组、阿霉素组、姜黄素谷胱甘肽干预组,观察大鼠的一般情况,检测血清心肌酶、心肌组织电镜检查,光镜检查、免疫组化法检测核转录因子(NF)-κB及IκB。结果急性阿霉素组心肌酶显著升高、心肌细胞发生明显肥大、水肿变性,并可见线粒体肿胀、排列紊乱,NF-κB表达显著增加及IκB表达明显减少,与空白对照组及姜黄素谷胱甘肽干预组比较有显著意义(P0.05)。结论姜黄素谷胱甘肽对阿霉素所致的心肌损伤具有保护作用,能够抑制阿霉素引起的心肌细胞变性及线粒体损伤,其机制可能与抑制炎症反应,保护受损伤心肌有关。     

罗氟司特对压力超负荷诱导的小鼠心肌重构的影响及其机制

探讨罗氟司特(RM)对压力负荷诱导的小鼠心肌重构的作用及机制。方法 利用主动脉缩窄术(AB)构建小鼠心肌重构模型,采用随机数表法,将40只雄性C57/B6小鼠(8~10周)随机分为假手术组(Sham组),AB组,AB+RM(1mg/kg)组及AB+RM(3mg/kg)组,每组10只。AB术后第2天给予小鼠RM灌胃处理,连续灌胃至术后6周。随后行超声心动图检测各组小鼠心脏功能,包括左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室收缩末期内径(LVESD)及左室舒张末期内径(LVEDD);采用HE及天狼猩红染色观察各组心脏组织肥厚及纤维化状况;采用qPCR 法检测心肌肥厚,纤维化及炎症相关基因的mRNA 的表达,包括心钠素、脑利钠肽、β-MHC、结缔组织生长因子、fibronectin、collagen1、collagan3、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α);采用免疫组织化学染色标记CD45及CD68检测心肌组织白细胞和巨噬细胞浸润水平;采用蛋白免疫印迹法检测心肌组织中磷酸化的p38(P-p38)及总p38(T-p38)的蛋白表达水平。采用 SPSS 22.0 统计学软件进行数据分析。结果 术后6周,与Sham组相比,AB组小鼠LVEF及LVFS水平显著降低,LVESD及LVEDD水平明显升高,心肌肥厚及心肌纤维化水平明显升高,心肌组织中CD45、CD68、IL-6及TNF-α的蛋白表达水平明显增高(P＜0.05);与AB组相比,AB+RM(1mg/kg)组及AB+RM(3mg/kg)组小鼠心功能明显改善,心肌肥厚及纤维化水平明显被抑制,心肌组织炎症水平明显降低(P＜0.05);免疫印迹结果显示,RM(1及3mg/kg)能够明显抑制AB诱导的小鼠心肌组织p38的磷酸化(P＜0.05)。结论 罗氟司特可减轻压力负荷诱导的小鼠心肌肥厚及纤维化,主要通过调节p38丝裂原激活的蛋白激酶信号通路及炎症反应发挥上述作用。