肝细胞癌p21蛋白与增殖细胞核抗原的表达

应用免疫且化的方法对59例肝细胞癌p21蛋白及增殖细胞核抗原的表达进行研究，并对两者在肝细胞癌中的表达关系进行比较。结果显示：p21在癌周肝组织的表达水平高于癌组织，在癌组织中的表达与肝细胞癌的分化程度有关，癌组织的分化降低，p21表达水平也随之降低p21的表达与PCNA的表达呈负相关关系（r＝－0．327，P＜0．01）。提示：p21的缺失表达可能促进PCNA合成的增加，对肝癌的发生发展起重要作用。     

p16、p53和rasp21蛋白在子宫内膜癌组织中表达的研究

目的研究p16、p53和rasp21蛋白在子宫内膜癌中的表达及与雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）表达的关系，探讨子宫内膜癌发生、发展过程中多因素、多阶段的异常改变。方法应用免疫组化SABC法检测21例正常子宫内膜、19例子宫内膜上皮内瘤样病变（EIN）及45例子宫内膜癌中p16、p53、rasp21蛋白、ER和PR的表达情况。结果子宫内膜癌中p16蛋白的阳性表达率低于正常子宫内膜（P〈0．01）；正常子宫内膜中p53和rasp21蛋白阳性表达率低于子宫内膜癌（P〈0．05，P〈0．01）和EIN（P〈0．05），其表达与子宫内膜癌的临床分期、肌层浸润及组织分级有关（P〈0．05）。子宫内膜癌中，rasp21蛋白与ER、PR的表达呈负相关（r=-0．4575，r=-0．4240）。结论p16、p53和rasp21基因均参与子宫内膜癌的发生，rasp21蛋白的异常改变是子宫内膜癌发生的早期事件，并与ER和PR有协同作用，为子宫内膜癌恶性进展和预后的不利因素。     

p53蛋白和p53 mRNA在牙源性囊肿和成釉细胞瘤中表达的意义

目的：探讨成釉细胞瘤(AB)和牙源性角化囊肿(OKC)中p53蛋白及p53 mRNA表达的生物学意义。方法：采用免疫组化S—P法和原位杂交方法分别对p53蛋白和p53 mRNA进行检测。结果：p53蛋白在AB、OKC及正常口腔粘膜上皮细胞核中表达阳性率分别为85．7％、44．0％和33．3％，组间差异显著(P＜0．01)。伴随AB的复发与恶变，p53蛋白阳性表达强度增加，核表达数目增多，组间差异显著(P＜0．01)。角化细胞颗粒细胞p53蛋白表达减少或缺失，但却有p53 mRNA的阳性产物。p53 mRNA与p53蛋白之间存在高度负相关(r＝-0．957，P＜0．01)。结论：p53蛋白和p53 mRNA的表达是判断成釉细胞瘤预后的指标。     

特发性矮小患儿血中 p53及 p21 waf／cip1的表达

目的：观察特发性矮小（ISS）患儿血中p53及细胞周期调节基因p21waf／cip1的表达,探讨二者与ISS发病机制之间的关系。方法：采用实时荧光定量PCR及ELISA法检测30例ISS患儿（ ISS组）和30名正常儿童（对照组）外周血中p53和p21 waf／cip1 mRNA的表达水平及血清中P53和P21 waf／cip1蛋白的含量。结果：ISS组患儿外周血中p53 mRNA的表达水平及血清P53的浓度与对照组相比,差异无统计学意义（ t＝1．044和0．701,P均＞0．05）,ISS组p21waf／cip1 mRNA的表达水平较对照组升高（t＝4．606,P＜0．001）。结论：p21waf／cip1可能通过非依赖p53途径参与ISS的发生。     

p16 CyclinD1 C-erbB2在乳腺癌中的表达及临床意义

目的：探讨乳腺癌组织分型、分级等临床病理特征和ER、PR与p16、CyclinD1、C-erbB2蛋白表达的关系。方法：进行免疫组化S-P染色法，检测58例术前均未做放、化疗的乳腺癌组织中p16、CyclinD1、C-erbB2蛋白的表达。结果：p16蛋白表达阳性率为67．24％(39／58)，在乳腺癌Ⅱ级与Ⅲ级之间p16蛋白阳性率分别为76．7％(23／30)和33．33％(4／12)，差异有显著性(P＜0．05)；原发癌伴淋巴结转移组p16的阳性表达率55．17％(16／29)，低于不伴淋巴结转移组p16的阳性率79．32％(23／29)，差异有显著性(P＜0．05)，p16表达与肿瘤大小、ER、PR无相关性。CyclinD1蛋白表达阳性为63．79％(37／58)，乳腺癌Ⅱ、Ⅲ级之间CyclinD1蛋白表达差异有显著性(P＜0．015)；CyclinD1与病理分型、肿瘤大小、淋巴结转移、PR未见相关，与ER正相关。C-erbB2蛋白表达阳性率37．92％(22／58)，C-erbB2癌基因表达与腋淋巴结转移和乳腺癌组织分级相关(P＜0．01)，与ER、PR肿瘤大小、分型无相关。结论：①p16、CyclinD1、C—erbB2基因蛋白异常与乳腺癌发生有关；②p16、C—erbB2与淋巴结转移有关；③p16、CyclinD，、C-erbB2蛋白可作为判断乳腺癌预后的参数；④p16、cyclinD1、C-erbB2无相关，各自发挥作用。     

曲古菌素A对大鼠自体移植静脉p16及PCNA表达的影响

目的观察曲古菌素A对大鼠自体移植静脉p16及PCNA表达的影响。方法30只Wistar大鼠随机分为3组：曲古菌素A（TSA）组（11只）、空凝胶组（11只）和假手术组（8只）。前2组建立大鼠自体静脉移植模型。TSA组在移植血管外膜涂抹含曲古菌素A的F-127多聚凝胶;空凝胶组,在移植静脉血管外膜涂抹不含TSA的F-127凝胶;假手术组,不行自体静脉血管移植,暴露颈外静脉后关闭切口。术后2周取出移植血管,HE染色进行血管壁形态学分析,观察静脉内膜增生情况。免疫组化染色（S—P法）观察血管壁p16及PCNA的表达情况。结果自体静脉移植后,静脉桥内膜易增生狭窄,TSA组移植静脉内膜增生较空凝胶组减弱,血管平滑肌细胞（VSMC）表达增殖细胞核抗原（PCNA）较空凝胶组减弱（P〈0．05）,而p16蛋白表达较空凝胶组升高（P〈0．05）。假手术组静脉内膜无增生,p16及PCNA无表达。结论TSA能抑制大鼠自体移植静脉内膜增生,使活跃的血管平滑肌细胞增殖受抑,PCNA表达降低,具有抑制静脉桥血管再狭窄的作用,为治疗血管重建术后再狭窄探索了一条新的方法。     

乳腺癌中p16,Cyclin D1基因蛋白的表达及意义

目的：探讨细胞周期调控因子p16及Cyclin D1蛋白的表达与乳腺癌发生发展的关系。方法：采用免疫组织化学染色检测49例乳腺癌及14例癌旁组织中p16及CyclinD1蛋白表达。结果：Cyclin D1在乳腺癌中有较高表达，过表达率为49％（24／49），明显高于癌旁正常组织（P＜0．05）；p16在乳腺癌中过表达率（40．8％）低于癌旁正常组织（阳性率为92．8％，P＜0．05）；淋巴结转移组的p16蛋白表达明显低于淋巴结无转移组（P＜0．05）；p16的低表达与CyclinD1的高表达有关。结论：Cyclin D1过表达及p16蛋白的失表达参与乳腺癌的发生；p16蛋白的表达异常可能参与乳腺癌的转移。     

大鼠自体移植静脉PDGF及受体基因表达的实验研究

内膜增生是移植静脉失败的主要原因．发病机理尚不清楚。本研究取Wistar大鼠80只建立自体颈静脉移植于肾下腹主动脉动物模型．通过电镜和组织切片原位杂交分期于术后2h、24h及术后1周观察移植静脉超微结构和血小板源生长因子（PDGF）及受体基因表达动态变化。结果显示：（1）术后2h．内膜破裂翻卷，SMC线粒体轻度肿胀；PDGF－A及PDGFR－βmRNA表达增加．但PDGF－BmRNA表达量较大；（2）术后24h．大部分内皮细胞脱落，内膜被覆以丝状血栓；PDGF－A与PDGFR－β较术后2h表达明显增加；（3）术后1周，内皮开始重新再生；PDGF－AmRNA表达开始减少．PDGFR－β持续表达。结果表明PDGF在自体静脉移植中与SMC增殖及内膜增生有关。     

p16基因甲基化及P16、Cyclin D1、pRb与皮肤鳞状细胞癌相关性研究

目的 探讨P16、CyclinD1和pRb蛋白在皮肤鳞状细胞癌（简称皮肤鳞癌）中的表达及他们的相互关系和意义；研究p16基因甲基化是否与原发性皮肤鳞癌的发生有关。方法 采用PCR为基础的限制性内切酶甲基化法及免疫组化S-P法检测40例原发性皮肤鳞癌组织中p16基因甲基化状态及P16、Cyclin D1和pRb蛋白的表达，并以10例正常皮肤组织作对照。结果 皮肤鳞癌组织P16蛋白iCyclin D1阳性表达率分别为37．5％和57．5％；P16蛋白表达与CyclinD1的表达呈显著负相关（r=-0．3162，P=0．008）。皮肤鳞癌中P16蛋白和pRb表达呈显著负相关（r=-0．4007，P〈0．05）。p16基因的甲基化阳性率为42．5％。2级皮肤鳞癌组织中P16蛋白及p16基因甲基化阳性表达率比1级鳞癌组织显著增高（P〈0．05），而Cyclin D1和pRb阳性率表达则显著降低（P〈0．05）。在有淋巴结转移组中P16蛋白及p16基因甲基化阳性率与元淋巴结转移组相比显著降低（P〈0．05），而Cyclin D1和pRb阳性率则显著增加（P〈0．05）。结论 在原发性皮肤鳞状细胞癌中存在P16蛋白低表达、Cyclin D1高表达的异常表达现象，两者的表达相互抑制，呈显著负相关；P16蛋白和pRb蛋白的表达呈负相关；p16基因甲基化与皮肤鳞癌病理分级、淋巴结转移之间有显著关系。提示p16基因甲基化在皮肤鳞癌的发生发展过程中起重要作用。     

联合转染p21基因及反义C-Fos核酸对自体移植静脉内膜增生的影响

①目的　探讨联合转染p2 1基因及反义C Fos核酸对自体移植静脉内膜增生的影响 ,探索一种理想的预防血管再狭窄的基因疗法。②方法　选用 2 0只新西兰家兔 ,实验组 10只 ,对照组 10只 ,均行自体颈静脉、颈总动脉移植手术 ,实验组行腺病毒介导的p2 1cDNA溶液浸泡和反义C Fos寡聚核酸凝胶涂布 ;对照组仅行空载腺病毒溶液浸泡和凝胶涂布。术后 2周取出移植血管 ,分别检测移植血管内膜厚度、内膜平滑肌细胞数 (VSMC)及内膜平滑肌细胞增殖细胞抗原 (PCNA)阳性表达情况。③结果　实验组移植血管内膜厚度、管腔狭窄度、VSMC数及PCNA阳性表达情况较对照组均有明显差异 (t=2 8.30～ 38.5 2 ,P <0 .0 1)。④结论　联合转染p2 1基因及反义C Fos核酸可有效地抑制移植静脉内膜的增生 ,是一种有效防治移植静脉再狭窄的基因疗法。     

氧化应激及p16和p53/p21与细胞衰老关系的研究进展

细胞衰老的机制主要包括外在的氧化应激理论和内在的基因调控理论。近年来,活性氧簇引发细胞衰老的途径以及p16、p53/p21等衰老相关基因的表达调节的研究取得了突出进展,进一步阐述了细胞衰老的机制。随着对细胞衰老认识的加深,细胞衰老与个体衰老、肿瘤发生的关系及细胞衰老更深刻的意义等课题,也引起了越来越多的科学研究的注意。     

骨肉瘤p21、p16基因表达及相关性初步研究

目的检测p21、p16基因在骨肉瘤中的表达,并探讨其相关性。方法选择骨肉瘤标本37例,用免疫组化SP法检测标本中p21、p16基因的表达情况,并分析其相关性。结果37例骨肉瘤中p21、p16基因的阳性表达率分别为64．9％、40．5％,两者的阳性表达率和阳性程度在骨肉瘤中均较高;骨肉瘤中p21、p16基因表达呈正相关（r=0．4924,P（O．05）。结论骨肉瘤组织中p21、p16基因异常表达,两者同时缺失可能是影响瘤细胞恶性行为的重要因素之一。     

胃癌组织中p15、p16、nm23蛋白的表达及其相关性研究

目的探讨胃癌组织中p15、p16和nm23蛋白的表达及其相关性。方法应用免疫组织化学SP方法检测52例患者手术切除胃癌组织中p15、p16和nm23蛋白的表达水平。结果p15、p16和nm23蛋白在胃癌组织中的阳性率分别为42.3%、44.2%、40.4%;p16蛋白表达与胃癌的分化程度、淋巴结转移、肿瘤分期和患者生存期在统计学上均差异显著(P<0.05),而与胃癌的组织学类型无关(P>0.05);nm23蛋白表达与淋巴结转移、肿瘤分期和患者生存期有显著性差异(P<0.05),与胃癌的组织学类型和胃癌的分化程度无关(P>0.05);p15蛋白表达与胃癌临床病理特征无相关性(P>0.05);p15、p16和nm23蛋白在胃癌中的阳性表达两者间呈正相关(P<0.05)。结论联合检测P15、P16和nm23蛋白的表达可为临床判断胃癌生物学行为及评估预后提供客观的参考指标。     

p53及p16基因在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的:探讨p53及p16基因在甲状腺乳头状癌(papilliary thyroid carcinoma,PTC)中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化方法检测157例PTC和30例甲状腺瘤组织中p53及p16基因的表达,并进行统计学分析。结果:PTC中p53的阳性表达率明显高于良性肿瘤(P<0.005),并随着PTC病理分级增高而显著增加(P<0.01),而且颈部淋巴结有转移者高于无转移者(P<0.05);而PTC中p16的阳性表达率明显低于良性肿瘤(P<0.005),且阳性表达率随着PTC病理分级增高而显著降低(P<0.01),p16在发生颈部淋巴结转移的乳头状癌中阳性表达率与未发生转移的乳头状癌中阳性表达率差异有统计学意义(P<0.01)。结论:p53基因的突变及p16基因的失表达都可能促进PTC的发生、发展及其转移,且p16基因可能在PTC的中晚期发挥重要作用,可作为判断PTC恶性程度的参考指标,具有重要临床参考价值。     

p21和p16基因在早期食管癌中的表达

目的探讨p21和p16基因在食管癌发生中的作用及其相关性。方法应用免疫组织化学S-P法检测p21和p16基因在19例食管早期癌、20例异型增生以及10例正常食管黏膜标本中的表达。结果 p21和p16基因在早期癌中的表达均低于正常食管黏膜（P〈0.05）。结论 p21和p16基因与食管癌的发生有关,他们的变化是食管癌发生中的早期事件。     

P63和P73基因在神经胶质瘤中的表达

目的探讨p53家族新成员p63及p73在脑胶质瘤中的表达情况,以及在不同病理分级的表达变化.方法采用免疫组化S-P方法检测66例不同病理分级胶质瘤p63及p73蛋白的表达情况,与置换-抗的蛋白对照组比较,并同时进行组间对照.结果p63及p73在66例脑胶质瘤病人中明显表达,p63表达阳性率为42.42%,p73表达阳性率为31.82%.组间对照p63组Ⅱ～Ⅳ级与Ⅰ～Ⅱ级比较P＜0.01;p73组Ⅲ～Ⅳ级与Ⅰ～Ⅱ级比较P＜0.05,Ⅱ～Ⅲ级与Ⅰ～Ⅱ级比较x2=2.268,P＞0.05.结论p63及p73作为p53家族的新成员可能是候选的抑癌基因.     

HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒检测SIV p27抗原的比较

目的 由于检测SIV p27抗原试剂盒来源困难,有时不稳定,鉴于HIV-1 p24与SIVp27有较强的交叉抗原,本研究比较HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒检测SIV p27抗原得出的结果是否存在一定的相关性.方法 HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒定性和定量检测样品中SIV p27抗原,并对检测结果进行回归和相关分析.结果 HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒检测SIV p27抗原的灵敏度分别是150 pg/mL和62.5 pg/mL.两种试剂盒检测病毒液和血浆中SIV p27抗原的定性结果一致.定量结果的统计分析得出病毒液的直线回归决定系数R2=0.857,直线相关系数r=0.926,P＜0.01,直线正相关程度较高;血浆的直线回归决定系数R2=0.512,直线相关系数r=0.716,P＜0.05,直线正相关程度较低.结论 HIV-1 p24 ELISA试剂盒能够替代SIV p27 ELISA试剂盒定性检测病毒液和血浆中SIV p27抗原,但只能定量检测病毒液中SIV p27抗原.     

p53 p63及 p73在鼻咽癌患者组织中的表达及临床意义

目的：研究 P53、P63和 P73在鼻咽癌患者组织中的表达情况及临床意义。方法：选择2012年8月至2014年8月在我院确诊的鼻咽癌患者89例为观察组。并选择同期在我院接受治疗的鼻咽黏膜慢性炎症患者50例为对照组。对比两组组织中 P53、P63和 P73表达情况,并分析其不同临床病例特征的意义。结果：观察组 P53、P63和 P73阳性率为67．4％（60／89）、87．6％（78／89）以及53．0％（48／89）,均高于对照组的28．0％（14／50）、36．0％（18／50）、20．0％（10／50）,差异均具有统计学意义（P＜0．05）。不同性别、年龄中 p53、p63和 p73表达阳性率差异均无统计学意义。在具有颈淋巴转移的鼻咽癌患者中 p53、p63表达阳性率更高、在 TNM 分期为Ⅲ～Ⅳ期的鼻咽癌患者中 p63、p73表达阳性率更高以及病理类型为非角化癌鼻咽癌患者中 p63表达阳性率更高。差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论：鼻咽癌患者组织中 P53、P63和 P73基因高表达,并且对临床分期、淋巴转移以及病理分型有显著的相关性。通过对 P53、P63和 P73在两种基因的监测,对鼻咽癌临床治疗和预后都有较好的指导作用。     

p14ARF、p53蛋白与脑胶质瘤发生发展的相关性研究

目的探讨脑胶质瘤中p14ARF、p53蛋白表达与不同病理级别脑胶质瘤的相关性。方法应用免疫组织化学技术检测39例不同病理分级脑胶质瘤中p14ARF、p53蛋白表达,另8例正常脑组织作为正常对照。结果p14ARF、p53蛋白表达阳性率在低级别(Ⅰ级、Ⅱ级)分别为84.6%、61.5%,在高级别(Ⅲ级、Ⅳ级)脑胶质瘤中分别为38.5%、88.5%。p14ARF蛋白表达水平与脑胶质瘤病理分级之间呈显著负相关性(r=-0.512,P<0.01),p53蛋白表达水平与病理分级关系呈正相关性(r=0.447,P<0.01),p53与p14ARF的表达存在负相关性(P<0.05)。结论p14ARF、p53蛋白表达异常可导致细胞周期调控失常和细胞异常增殖,加速脑胶质瘤恶化,联合检测两者的协同表达可作为脑胶质瘤辅助诊断的参考指标。     

猪白细胞介素12 p35、p40亚基基因的克隆和序列分析

目的:克隆猪白细胞介素(IL)-12p35、p40亚基基因,为制备猪囊尾蚴的复合基因疫苗奠定基础。方法:分别分离成年猪的外周血单个核细胞和脾细胞,培养10h后用IFN-γ(100ng/ml)刺激增殖12h,随后加入细菌脂多糖(1μg/ml)刺激培养3h,分别收集细胞并提取细胞总RNA,用RT-PCR方法扩增猪IL-12p35、p40cDNA编码基因,克隆至pMD18-T载体,经PCR和双酶切鉴定后进行序列测定。结果:猪IL-12p35、p40cDNAPCR产物电泳结果证明所克隆的基因分别为616bp和1011bp,基因测序结果与GenBank报道的基因序列各有一个碱基差异,但编码氨基酸无差异,证实分别为猪IL-12p35、p40cDNA编码基因。结论:成功克隆了猪IL-12p35、p40cDNA编码基因。