鸡血藤提取物的抗肿瘤作用研究

目的：研究鸡血藤提取物的体内与体外抗肿瘤作用。方法：采用mT法检测鸡血藤提取物对体外培养的5种肿瘤细胞增殖的抑制作用;体内试验采用小鼠实体瘤S180细胞株接种小鼠,建立实体瘤与腹水瘤模型。计算抑瘤率与生命延长率。结果：鸡血藤提取物在5μg／ml-80μg/ml剂量的范围内对5种肿瘤细胞均有抑制作用。体内试验小鼠分另吐灌胃给予20mg/kg、50mg／kg、100mg／kg,能抑制小鼠体内肿瘤增长。也能明显提高腹水瘤小鼠的生命延长率。结论：鸡血藤提取物在体外对不同组织来源的肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用;在体内能抑制小鼠体内瘤体生长,明显延长小鼠的生存期。     

鸦胆子提取物对S180 小鼠抗肿瘤作用的实验研究

目的研究鸦胆子提取物对小鼠移植性肿瘤S180的抑制作用。方法建立小鼠腋下S180实体瘤模型,观察不同剂量鸦胆子提取物对小鼠抑瘤率及对免疫器官的影响;建立小鼠S180腹水瘤模型,观察不同剂量鸦胆子提取物对小鼠生存期的影响。结果鸦胆子提取物中、高剂量能明显抑制S180实体瘤的生长（P〈O．05）;抑瘤率分别为20．4％和24．6％。鸦胆子提取物低、中剂量可以延长S180腹水瘤小鼠的生存期（P〈O．05）,延长率为21％和18．5％。结论鸦胆子提取物有一定抗肿瘤的作用。     

桔梗多糖对U-14宫颈癌抗肿瘤作用的研究

目的研究桔梗多糖抑制U14宫颈癌实体瘤小鼠肿瘤生长的作用及相关机制。方法建立小鼠宫颈癌(U14)实体瘤模型,观察小鼠桔梗多糖(20,40和60mg·kg-1)灌胃给药15d后,对肿瘤生长抑制作用的影响;用原位末端标记(TUNEL)法检测肿瘤细胞的凋亡情况;利用免疫组织化学法分析与细胞凋亡密切相关的基因(突变型p53,p19ARF,Bax)蛋白表达的情况。结果桔梗多糖体内有显著抑制小鼠宫颈癌U14实体瘤生长的作用,桔梗多糖上调了p19ARF和Bax蛋白表达量,诱导突变型p53蛋白表达显著下降。结论桔梗多糖具有抑制实体瘤U14生长的作用,推测该多糖可能是通过调节细胞凋亡相关基因的表达,进而促进肿瘤细胞的凋亡而发挥其抗肿瘤作用。     

极大螺旋藻胞内多糖IPSⅡA对小鼠移植性肿瘤抑制作用的初步研究

目的研究极大螺旋藻胞内多糖IPSⅡA对小鼠S180肉瘤的生长抑制作用。方法建立S180腹水瘤、实体瘤模型，通过不同途径给予IPSⅡA，测定腹水瘤小鼠的生命延长率以及实体瘤小鼠的瘤重、白细胞数、胸腺指数和脾指数。结果IPSⅡA对S180肉瘤有一定的抑制作用，提前给药，抑制作用更显著，而且腹腔注射比灌胃效果更好。结论提前腹腔注射IPSⅡA，能显著延长荷S180腹水瘤小鼠的生存时间，并且抑制S180实体瘤的生长。     

地鳖纤溶活性蛋白对S180和H22荷瘤小鼠肿瘤的抑制及诱导细胞凋亡作用

目的研究地鳖虫纤溶活性蛋白(fibrinolytic proteinsof Eupolyphaga sinensis,EFP)对肿瘤细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法采用纤溶平板法检测了EFP纤溶活性;采用流式细胞术检测了EFP高、中、低浓度对小鼠S180和H22实体瘤组织细胞凋亡的诱导作用;采用免疫组织化学法检测了Caspase-3的表达;采用TRAP-PCR银染法检测了腹水瘤组织端粒酶活性。结果 EFP对S180和H22实体瘤有一定的抑瘤作用,对H22和S180腹水瘤细胞端粒酶活性有一定降低作用,可提高Caspase-3表达水平,诱导细胞凋亡。结论 EFP具有诱导S180和H22肿瘤细胞凋亡作用。     

2,3-吲哚醌抗肿瘤作用研究

目的研究2,3-吲哚醌的抗肿瘤作用及机制。方法观察2,3-吲哚醌对小鼠肉瘤(S180)、小鼠肝癌(H22)、小鼠艾氏腹水瘤实体型(EC)和腹水型(EAC)的抗肿瘤作用;免疫组化法测定药物对S180肿瘤组织中PCNA、Bcl-2蛋白表达的影响;核染色法(Hoechst33258染色)和MTT法观察2,3-吲哚醌对人神经母瘤(SH-SY5Y)细胞体外促凋亡和抗增殖作用。结果2,3-吲哚醌对3种小鼠移植性肿瘤有抑制作用,对荷瘤鼠血液白细胞水平无影响;2,3-吲哚醌可抑制S180肿瘤组织中PCNA,Bcl-2蛋白表达;2,3-吲哚醌可促进人神经母瘤细胞凋亡并抑制其增殖。结论2,3-吲哚醌有抗肿瘤作用,其机制与抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

灵芝三萜组分GLE的体内外抗肿瘤作用

目的:评价灵芝三萜组分GLE的体内外抗肿瘤作用。方法:建立小鼠S180实体瘤和腹水瘤两种模型,观察GLE对实体瘤抑瘤率和腹水瘤生命延长率的影响;采用MTT法检测GLE对人鼻咽癌细胞CNE1和CNE2的体外抗肿瘤活性。结果:3个剂量(125,250,500 mg.kg-1)GLE对S180实体瘤小鼠均具有一定的抑制作用(P<0.05),500 mg.kg-1组的瘤重抑制百分率达51.4%;对S180腹水瘤小鼠具有明显的延长存活期作用,500 mg.kg-1组的生命延长率为52.0%(P<0.05);体外对人鼻咽癌低分化细胞CNE2有一定的抑制作用。结论:GLE对小鼠肉瘤S180及人鼻咽癌低分化细胞CNE2的生长有一定的抑制作用。     

熊果酸的抗肿瘤作用

目的 研究熊果酸的抗肿瘤活性.方法 体外用MTT比色法测定熊果酸对肿瘤细胞HepG2和S180的增殖抑制作用,再用DNA凝胶电泳法测定熊果酸对HepG2细胞凋亡的诱导作用;体内采用小鼠实体瘤模型,观察熊果酸对HepG2和S180实体瘤的抑制作用.结果 熊果酸对HepG2和S180的增殖有良好的抑制作用,48h内对细胞半数生长的抑制剂量(IC50)分别为12.5μg/ml和13.9μg/ml.同时熊果酸能够诱导HepG2发生凋亡.20.0μg/ml熊果酸对HepG2和S180实体瘤抑制率分别达到52.98%和44.41%.结论 熊果酸通过抑制增殖和诱导凋亡对肿瘤细胞株HepG2和S180表现出良好的抗肿瘤活性.     

rhIL-18对核辐射诱导小鼠脾细胞凋亡的抑制机制研究

为了探讨重组人白细胞介素18（rhIL-18）对核辐射所致小鼠脾细胞凋亡的抑制作用机制,对32只C57小鼠分4组进行核辐射损伤,2周后取小鼠脾淋巴细胞体外培养,用细胞凋亡ELISA试剂盒测定胞质中核小体含量,用DNA琼脂糖电泳检测凋亡细胞DNA片段;用原位杂交方法测定脾细胞凋亡相关基因bax与bcl-2的表达,观察rhIL-18对其表达的调节作用。结果表明,与对照组比较,rhIL-18能够明显降低核辐射所致的小鼠脾细胞凋亡;促进bcl-2的表达,下调bax基因的表达。结论：rhIL-18可能通过促进bcl-2的表达、下调bax基因的表达方式抑制核辐射诱导的小鼠脾细胞凋亡。     

鬼臼毒素衍生物CIP-36抗肿瘤多药耐药的机制

研究鬼臼毒素衍生物CIP-36对耐药人口腔鳞状上皮癌细胞KBV200的抗肿瘤活性及其作用机制。采用MTT法观察CIP-36对多种肿瘤细胞和正常细胞的体外抑制作用以及对KB和KBV200细胞生长曲线的作用,Hoechst荧光染色进行细胞凋亡检测,RT-PCR检测CIP-36对KB及KBV200细胞p53、p21、caspase-3、bax、mdr-1和bcl-2的mRNA表达的影响,免疫组织化学检测观察CIP-36对KBV200细胞P-gp表达的影响。结果表明,CIP-36对多种肿瘤细胞均有较好的抑制作用,且对耐药株细胞均有明显抑制作用。荧光染色结果显示,CIP-36可诱导KBV200细胞凋亡。同时CIP-36可剂量依赖性地增加KBV200及KB细胞的p53、p21、caspase-3及bax的mRNA表达,同时降低mdr-1和bcl-2的mRNA表达,与对照组比较差异均有统计学意义。免疫组织化学检测结果显示,CIP-36显著降低KBV200的P-gp表达。提示CIP-36可能通过影响多个与肿瘤耐药相关基因和蛋白的表达来克服肿瘤细胞株的多药耐药性。     

AKT体内外抗肝癌作用及机理的初步研究

目的：观察AKT对人肝癌细胞SMMC-7721及小鼠H22肝癌移植性肿瘤的抑制作用，并探讨以紫草总色素为主要成分，制备而成的AKT的抗肿瘤作用机制。方法：用MTT法分析AKT对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用绘制作用生长曲线；建立小鼠H22肝癌移植性实体瘤模型，通过绘制瘤块生长曲线及计算肿瘤抑制百分率评价体内抑瘤效果，流式细胞术检测不同剂量AKT作用SMMC-7721细胞48h后细胞凋亡率及细胞周期变化，并检测Bax及Bcl-2蛋白的表达情况；RT-PCR检测AKT作用SMMC-7721细胞24h后，bcl-2 mRNA及baxmRNA的表达情况。结果：（1）MTT提示AKT对SMMC-7721细胞具有显著抑制作用；（2）体内实验表明，AKT对小鼠H22肝癌移植性肿瘤有一定的抑制作用。（3）Giemsa染色后在光镜下可见AKT给药组多数细胞出现形态改变，胞体变小，胞质浓缩拉长，呈拉丝状，核质比增大，核膜完整，核固缩，染色质不均一或边集，胞浆内较多空泡的典型凋亡特征；Hoechst 33258染色后细胞核出现细胞核固缩，出现凋亡小体等明显的凋亡形态学变化；流式细胞术检测显示AKT作用SMMC-7721细胞后，中、高剂量组均检测到明显亚G1凋亡峰；给药组S期细胞明显降低，G2／M期细胞明显增多，细胞周期阻滞于G2／M期；药物处理后Bcl-2及Bax的表达均下调，且Bcl-2／Bax值降低；RT-PCR检测结果显示给药组bcl-2 mRNA及bax mRNA表达水平均出现下调，bcl-2／bax比值降低；体内实验瘤组织免疫组化结果显示给药组Bcl-2表达下调，Bax及Caspase-3表达均出现上调。结论：AKT对人肝癌SMMC-7721细胞具有明显体外抗增殖作用，对小鼠移植性肿瘤H22也呈现了明显的抑制作用。其效应机制可能与阻滞细胞周期于G2／M期，下调bcl-2 mRNA及Bcl-2蛋白表达，上调Caspase-3表达，从而诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞增殖有关。     

番茄红素对荷肝癌裸小鼠移植瘤生长的作用及机制研究

目的研究番茄红素(Lycopene,LP)对荷肝癌裸小鼠移植瘤生长的影响及其机制。方法通过背部皮下注射接种肝癌Hep G2细胞的方法建立荷肝癌裸小鼠模型,并分别腹腔注射5、10、20 mg/(kg·d)的LP和2 mg/(kg·d)的顺铂进行干预治疗,疗程为14 d。治疗后,观察各组裸小鼠的一般生存状态及肿瘤生长状况,称取瘤体质量并计算抑瘤率;通过苏木精-尹红(HE)染色观察肿瘤组织形态结构改变,末端标记法(TUNEL)检测肿瘤组织细胞凋亡状况,免疫组织化学法(IHC)观察肿瘤组织凋亡相关蛋白(caspase-3、Bax、bcl-2)表达。结果经LP治疗14 d,荷肝癌裸小鼠饮食状况和精神状态明显改善,瘤体减小,活动度和硬度降低,肿瘤组织呈现细胞皱缩、片状坏死等病理性改变,凋亡细胞数量明显增多;瘤体质量显著减轻、抑瘤率显著升高;肿瘤组织中caspase-3和Bax表达显著上调,而bcl-2显著下调,Bax/bcl-2比值显著升高;LP上述作用均具有一定的剂量依赖性。结论番茄红素对荷肝癌裸小鼠移植瘤生长具有一定的抑制作用,其机制可能与番茄红素调节凋亡相关基因蛋白表达而促进肿瘤组织细胞凋亡有关。     

小檗碱改善高糖高脂诱导的胰岛NIT-1细胞凋亡的分子机制

目的观察小檗碱对高脂高糖诱导后NIT-1胰岛β细胞凋亡的改善情况,探讨小檗碱抗凋亡的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,在培养基中加入高糖高脂及小檗碱共同培养24h后,比较不同浓度的小檗碱对体外培养及高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞活力的影响;AnnexinV/PI双标记法流式细胞术检测细胞凋亡情况;RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2、bax和caspase-3mRNA表达水平;免疫荧光法检测caspase-3表达。结果与正常对照组相比,模型组NIT-1细胞凋亡率明显升高(P<0.01),bcl-2mRNA表达明显降低(P<0.01),而bax和caspase-3mRNA表达明显增高(P<0.01),且胞质caspase-3表达增加;与模型组相比,小檗碱组NIT-1细胞凋亡率明显降低(P<0.01),bcl-2mRNA表达增高(P<0.01),而bax和caspase-3mRNA表达降低(P<0.01),小檗碱组胞质caspase-3表达亦降低。结论小檗碱抑制高糖高脂诱导NIT-1细胞的凋亡可能与其激活bcl-2和抑制bax和caspase-3的表达有关。     

半夏多糖抗肿瘤作用研究

目的探讨半夏多糖抗肿瘤作用及机制。方法观察半夏多糖对小鼠肉瘤(S180),小鼠肝癌(H22),小鼠艾氏腹水瘤(EAC)的抑瘤作用;分别采用核染色(Hoechst染色)、MTT法、细胞计数法、DNA琼脂糖凝胶电泳图谱观察半夏多糖对人神经母瘤细胞(SH-SY5Y)、鼠肾上腺嗜铬细胞(PC12)细胞凋亡及对PC12细胞生长和增殖的影响。结果半夏多糖对S180、H22、EAC有抑制作用(P<0.05);半夏多糖可诱导SH-SY5Y、PC12细胞凋亡、对PC12有抑制生长及增殖作用(P<0.01)。结论半夏多糖具有抗肿瘤作用,其机制与抑制PC12生长及增殖,诱导SH-SY5Y、PC12细胞凋亡有关。     

基于caspase-3/bcl-2/bax信号通路的槐定碱诱导胰腺癌细胞株capan-1凋亡机制研究

目的 探讨槐定碱对人胰腺癌细胞株capan-1作用及机制。方法 MTT法检测细胞增殖;Hoechst33342染色法观察细胞凋亡;流式检测细胞凋亡和细胞周期百分率;Western blot法检测caspase-3/bcl-2/bax表达。结果 槐定碱可以成浓度依赖性诱导capan-1细胞增殖抑制和凋亡,增加S/G2期细胞比例,下调bcl-2和pro-caspase-3表达水平,上调bax蛋白的表达。结论 槐定碱能通过调节caspase-3/bcl-2/bax信号通路而诱导细胞凋亡。     

蜈蚣提取物体外抗肿瘤活性比较及体内活性评价

目的：比较蜈蚣干品和鲜品不同提取物的体外抗肿瘤活性，并评价其体内抗肿瘤活性。方法：蜈蚣干品和鲜品的水、30%、50%、70%及95%乙醇提取物分别处理MGC803细胞，采用MTT法检测细胞生长抑制率，计算半数抑制浓度（IC₅₀）；观察蜈蚣提取物对H22腹水瘤小鼠的生存期和实体瘤小鼠的抑瘤率的影响。结果：蜈蚣干品和鲜品不同提取物对肿瘤细胞的IC₅₀值相近，而蜈蚣水提取物的IC₅₀值相对最小。蜈蚣水提取物能延长腹水瘤小鼠的生存期；对实体瘤小鼠瘤重有明显的抑制作用，但中剂量和高剂量组有部分动物加速死亡。结论：多种提取方法得到的蜈蚣提取物均具有体外抗肿瘤活性，蜈蚣水提取物有一定的体内抗肿瘤活性，但超剂量使用有一定的毒性。     

肿节风总黄酮对小鼠肉瘤S_(180)的抑瘤作用

目的观察肿节风总黄酮对小鼠肉瘤S180实体瘤和腹水瘤的作用,为开发高效低毒的抗肿瘤新药提供依据。方法采用动物整体实验方法,观察肿节风总黄酮对S180荷瘤小鼠实体瘤及腹水瘤的抑瘤作用及生命延长率。结果肿节风总黄酮对S180实体瘤的抑瘤率为20.7%～60.1%,对S180腹水瘤的延长率为36.8%。结论肿节风总黄酮有一定的抗肿瘤作用及生命延长率。     

新疆软紫草多糖体内抗肿瘤作用研究

目的 研究新疆软紫草多糖对小鼠宫颈癌U14生长的抑制作用。方法 建立小鼠宫颈癌U14实体瘤与腹水瘤两种模型,观察软紫草多糖对实体瘤抑瘤率、胸腺和脾脏免疫器官重量和腹水瘤生命延长率的影响。结果 软紫草多糖3个剂量组对U14实体瘤小鼠均具有明显的抑制作用(P<0.05),对U14腹水瘤小鼠具有明显的延长存活期作用(P<0.05),中剂量组能明显增加U14实体瘤小鼠的脾指数,高、中剂量组能明显降低胸腺指数。结论 软紫草多糖对小鼠宫颈癌U14的生长有一定的抑制作用。     

野苋菜提取物抗肿瘤作用及诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制

目的研究野苋菜提取物的抗肿瘤作用及诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的可能机制。方法采用Alamar blue法检测野苋菜提取物对肿瘤细胞的抑制作用;光学显微镜和Hoechst 33258荧光染色观察HepG2细胞的形态变化;流式细胞术检测该提取物对HepG2细胞凋亡的影响;Western blot和caspase-3活性检测试剂盒分析野苋菜提取物诱导HepG2细胞凋亡的作用机制;caspase-9、caspase-3抑制剂(Z-LEHDFMK和Ac-DEVD-CHO)验证相关的调控信号转导通路。结果野苋菜提取物对多种肿瘤细胞均有抑制作用,其中HepG2细胞最敏感;经提取物处理过的HepG2细胞出现明显的凋亡特征,流式细胞术进一步证实野苋菜提取物能够诱导HepG2细胞的凋亡;野苋菜提取物处理48h后的HepG2细胞中Bcl-2、survivin表达下调,Bax、PARP、Apaf-1、caspase-9表达量增加,并且caspase-3、caspase-9酶活性明显提高;caspase-9和caspase-3的抑制剂能够逆转野苋菜提取物对HepG2细胞的抑制活性。结论野苋菜提取物具有抗肿瘤作用,并且能够激活caspase-9内源性凋亡信号通路,发挥其促进HepG2细胞凋亡的作用。     

新型Topo Ⅰ抑制剂CPUY013对胃腺癌细胞BGC823的体内外作用

探讨CPUY013在体内外对人胃腺癌BGC823细胞的抗肿瘤活性及其机制.采用MTT法、克隆原形成法检测CPUY013对BGC823细胞增殖的抑制作用;体外实验以pBR322 DNA为底物,依据质粒的松弛和超螺旋形式在琼脂糖电泳上泳动度对药物抑制解旋的作用进行定性分析.用AO/EB荧光染色技术、DNA凝胶电泳及JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测细胞凋亡.口服给药CPUY013后观察其对裸鼠移植瘤的生长抑制作用;用流式细胞术观察CPUY013对BGC823细胞周期的影响;采用Western blotting分别检测CPUY013处理后的BGC823细胞中Topo Ⅰ及凋亡相关蛋白表达的改变.结果表明,CPUY013呈明显的剂量依赖性抑制BGC823细胞的增殖.随着剂量的增加,CPUY013对Topo Ⅰ松弛活性的抑制趋势增强.100 μmol·L-1 CPUY013和拓扑替康(TPT)对Topo Ⅰ松弛活性的抑制呈现相似的变化趋势.CPUY013可使大部分BGC823细胞阻滞在S期,并诱导细胞凋亡;出现DNA片段化,亚G1峰显著增加,线粒体膜电位降低,荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等.同时,CPUY013能明显抑制BGC823裸鼠移植瘤的生长,150 mg·kg-1剂量组的瘤重抑制率为62.1%.CPUYOl3使BGC823细胞内Topo Ⅰ和bel-2蛋白表达均有所下调,p53和bax蛋白表达有明显上调趋势,bcl-2/bax比值明显降低,caspase-3蛋白表达增高.新型Topo Ⅰ抑制剂CPUY013在体内明显抑制移植瘤的生长,体外可诱导细胞凋亡从而抑制BGC823细胞增殖,其机制可能与抑制Topo Ⅰ,从而下调bcl-2,上调bax和p53蛋白的表达有关.