冬凌草甲素抑制NF-KB、p65活化对糖尿病肾病幼龄大鼠肾损伤和免疫紊乱的影响

【摘要】目的 探讨冬凌草甲素(Ori)对糖尿病肾病(DN)幼龄大鼠的保护作用。方法 将50只SPF级大鼠随机分为对照组、模型组、DN+ Ori (5mg/kg)组、DN+ Ori (10mg/kg)组及DN+ Ori (20mg/kg)组5组,每组10只,采用高脂喂食结合化学诱导法建立糖尿病大鼠模型。留取24h尿液检测尿蛋白含量,取血检测血清肌酸酐(SCr)和尿素氮(UN);苏木精 伊红(HE)和末端标记法(TUNEL)染色观察肾脏病理情况;Western blot检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3)、Caspase 9、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl 2)和Bcl 2相关X蛋白(Bax)及核因子κB p65(NF κB p65)、巨噬细胞炎性蛋白2(MIP 2)的表达; ELISA检测血清中炎症相关因子白介素4(IL 4)、IL 6、IL 10和肿瘤坏死因子(TNF α)的表达水平。结果与对照组相比,冬凌草甲素能降低模型大鼠尿蛋白、血清肌酐和尿素氮的含量(P＜0.05);改善肾组织病理损伤、降低细胞凋亡率(P＜0.05);下调Caspase 3、Caspase 9和Bax表达,上调Bcl 2表达(P＜0.05);抑制促炎因子IL 6和TNF α表达,增强抗炎因子IL 4和IL 10表达(P＜0.05);抑制炎症通路蛋白NF κB p65和MIP 2的蛋白表达(P＜0.05)。结论 冬凌草甲素通过抑制NF κB p65的活化而缓解糖尿病肾病大鼠肾损伤和免疫紊乱。     

冬凌草甲素对雨蛙素诱导的重症急性胰腺炎大鼠免疫紊乱和组织损伤的影响

[目的]探讨冬凌草甲素（Ori）在重症急性胰腺炎（SAP）大鼠免疫紊乱和组织损伤中的调节作用。[方法]将50只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组（SAP组）、SAP+Ori 5 mg/kg组、SAP+Ori 10 mg/kg组、SAP+Ori 20 mg/kg组,每组10只。采用化学诱导法建立SAP大鼠模型,皮下注射雨蛙素（25μg/kg）诱导SAP;计算胰腺质量指数,酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清脂肪酶、淀粉酶水平,苏木精-伊红（HE）染色观察胰腺组织病理形态学变化;免疫组化观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达;蛋白免疫印记（Western Blot）法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白（Bax）/Bcl-2蛋白表达;ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、白细胞介素-10(IL-10)表达水平;实时定量荧光聚合酶链反应（RT-PCR）法检测胰腺组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)mRNA表达水平。[结果]与对照组比较,SAP组大鼠胰腺组织功能明显下降（P<0.05）,...     

冬凌草甲素对LPS诱导Raw264.7巨噬细胞炎症反应的抑制作用

目的 研究冬凌草甲素对脂多糖(LPS)诱导的Raw264.7巨噬细胞炎症反应的影响.方法 选用小鼠巨噬细胞Raw264.7,CCK-8法确定冬凌草甲素作用的最适浓度;设立正常对照组、模型对照组(LPS组)、实验组(冬凌草甲素预处理+LPS组)和阳性药组(地塞米松预处理+LPS组),实时定量PCR法检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和TLR4 mRNA表达水平的改变;Western blot法检测NF-κB p65、磷酸化p65(p-p65)蛋白表达水平的改变.结果 冬凌草甲素作用于Raw264.7细胞的最佳浓度为10 μmol/L;与LPS组比较,冬凌草甲素预处理实验组Raw264.7细胞内TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达水平明显下降,IL-10 mRNA表达水平明显升高,TLR4基因表达降低,NF-κB活化入核减少.结论 冬凌草甲素能下调LPS诱导的Raw264.7细胞促炎因子表达,其抗炎免疫作用机制与抑制TLR4-NF-κB信号通路的活化有关.     

冬凌草甲素调控miR-200c/EZH2轴抑制黑色素瘤细胞上皮-间质转化的机制研究

目的 探究冬凌草甲素调控微小RNA200c(miR-200c)/组蛋白甲基化转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)轴抑制黑色素瘤细胞(A375细胞)上皮-间质转化(EMT)的影响机制。方法 MTT法检测冬凌草甲素对A375细胞活力的影响;将A375细胞分为对照组、冬凌草甲素组、mimic control组、miR-200c mimics组、冬凌草甲素+inhibitor control组、冬凌草甲素+miR-200c inhibitor组,qRT-PCR检测miR-200c、EZH2 mRNA表达情况;免疫印迹法检测EZH2及EMT相关蛋白表达情况;黏附实验检测A375细胞黏附能力;Transwell实验检测A375细胞侵袭及迁移能力;荧光素酶报告基因实验检测miR-200c与EZH2的靶向关系;构建移植瘤裸鼠模型,检测肿瘤质量;免疫组化法分析EMT相关蛋白表达情况。结果 A375细胞存活率随冬凌草甲素浓度的增加以剂量依赖性显著降低(P<0.05),由于40μmol/L冬凌草甲素接近半数抑制浓度,因此选取40μmol/L冬凌草甲素进行后续实验;与对照组相比,冬凌草甲素...     

冬凌草甲素对骨质疏松大鼠骨折愈合的影响及其机制

目的 探讨冬凌草甲素对骨质疏松大鼠骨折愈合的影响及其机制。方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组、冬凌草甲素低剂量组、冬凌草甲素高剂量组、戊酸雌二醇组、冬凌草甲素高剂量+环巴胺组，每组12只。X射线检测评估大鼠骨折愈合情况；ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平；三点弯曲实验检测股骨最大载荷和最大位移；双能X线骨密度扫描仪检测股骨骨密度；HE-阿尔新蓝染色检测骨痂组织病理变化；Western blot检测碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、Shh、Gli1蛋白表达。结果 与对照组比较，模型组骨小梁结构紊乱，骨折线清晰，血清中TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05),股骨最大载荷、最大位移、骨密度及ALP、Runx2、Shh和Gli1蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较，冬凌草甲素低剂量组、冬凌草甲素高剂量组和戊酸雌二醇组骨小梁排列较密集，骨折线模糊不清，血清中TNF-α、IL-6水平降低(P<0.05),股骨最大载荷、最大位移、骨密度及ALP、Runx2、Shh、Gli1蛋白表达升高(P&l...     

冬凌草甲素对人软骨肉瘤SW-1353细胞的增殖和凋亡的影响及其机制探究

目的 探究冬凌草甲素对人软骨肉瘤细胞增殖、凋亡及p38 MAPK信号通路的调控作用。方法 体外培养人软骨肉瘤SW-1353细胞,分为对照组(等量体积DMSO溶剂),5、10、15μmol/L冬凌草甲素组(5、10、15μmol/L冬凌草甲素)、10μmol/L冬凌草甲素+抑制剂组(10μmol/L冬凌草甲素+20μmol/L p38 MAPK通路抑制剂SB203580)和阳性药物组(6μmol/L阿霉素)。用倒置显微镜、活细胞计数(CCK-8)、5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、Hoechst 33258染色、RT-qPCR及蛋白免疫印迹(WB)法对细胞形态、增殖活性、增殖率、凋亡情况、相关因子表达水平进行分析。结果 与对照组比较,实验组、10μmol/L冬凌草甲素+抑制剂组和阳性药物组SW-1353细胞增殖活性、增殖率、cyclin D1及p-p38 MAPK表达水平显著降低,而细胞凋亡数量和caspase-3表达水平增加,且浓度越高变化越显著(P<0.05),与10μmol/L冬凌草甲素组相比,抑制剂的加入使各指标变化更显著。结论 冬凌草甲素可通过抑制p38 MAPK通路抑制人软骨肉瘤SW-1353细胞的增殖诱其凋亡。     

冬凌草甲素对海水冲溺伤骨折愈合的影响及作用机制

目的　探究冬凌草甲素对冲溺伤骨折愈合的影响及作用机制。方法　6～8周齡雄性C57BL/6小鼠72只,构建冲溺伤骨折模型小鼠,并随机分为骨折组、骨折 +冬凌草甲素组、冲溺伤骨折组和冲溺伤骨折+冬凌草甲素组,每组18只。术后14 d拍摄股骨X线片并在术后21 d通过股骨机械强度试验观察冬凌草甲素对骨折愈合影响的表型变化。术后14 d取小鼠骨痂组织,采用qPCR和蛋白质印迹法检测M1型巨噬细胞标志分子诱导型一氧化氮合酶（iNOS） 、M2型巨噬细胞标志分子CD206、炎症因子环氧化酶(COX2) 和IL-1β、促凋亡因子半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase 3 )和BCL2-Associated X的蛋白质（Bax） 及抗凋亡因子Bcl-2 (B细胞淋巴瘤2)的表达水平。术后7 d,采用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察破骨细胞活化状况。结果　X线片及股骨机械强度试验结果显示冲溺伤骨折组小鼠骨折愈合减弱,而冬凌草甲素改善了冲溺伤骨折愈合并提高了股骨承受的扭转力（P均＜0.01）。qPCR和蛋白质印迹法检测结果显示,与冲溺伤骨折组相比,冲溺伤骨折+冬凌草甲素组小鼠骨痂组织中iNOS、COX2、IL-1β、cleaved caspase-3和Bax mRNA和蛋白质表达均降低,CD206和Bcl-2 mRNA和蛋白质表达升高（P均＜0.05）。TRAP染色结果显示,与冲溺伤骨折组相比,冲溺伤骨折+冬凌草甲素组小鼠软骨-骨边界附近破骨细胞数量减少（P均＜0.01）。结论　使用冬凌草甲素能够通过增强抗炎性的M2型巨噬细胞极化、抑制促炎性的M1型巨噬细胞极化,减轻骨折后的炎症反应,减少细胞凋亡,抑制破骨细胞过度激活,促进冲溺伤骨折愈合。     

冬凌草甲素脂质体的制备及体内药动学研究

目的 制备冬凌草甲素脂质体，延长冬凌草甲素体内循环时间，提高生物利用度。方法 采用薄膜分散法制备冬凌草甲素脂质体，测定其粒径、多分散指数、zeta电位及包封率。采用交叉实验法，以大鼠为模型动物分别经尾静脉单次注射(20 mg/kg)给予冬凌草甲素溶液和冬凌草甲素脂质体，利用超高效液相色谱法测定不同时间点的血浆冬凌草甲素质量浓度，PKSolver软件计算药动学参数。结果 制备得到的冬凌草甲素脂质体平均粒径为142 nm,多分散指数为0.246,zeta电位-24.3 mV,包封率84.2%。大鼠单次尾静脉注射冬凌草甲素溶液及脂质体，模型拟合均符合二室模型。冬凌草甲素溶液和冬凌草甲素脂质体在大鼠体内的消除半衰期分别为(3.14±0.61)h和(14.38±3.69)h,平均驻留时间分别为(3.57±0.89)h和(19.30±5.04)h,血药浓度曲线下面积分别为(2.36±0.27)μg·h/ml和(9.51±1.11)μg·h/ml,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 本研究制备的冬凌草甲素脂质体工艺简单可行，脂质体制剂通过延长半衰期和平均驻留时间，延长冬凌草甲素在大鼠体...     

冬凌草甲素对低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠肺动脉压的调控作用及机制研究

[目的]探讨冬凌草甲素对低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠肺动脉压的调控作用及机制研究.[方法]清洁SD大鼠随机分为3组,正常对照组、低氧高二氧化碳组、低氧高二氧化碳加冬凌草甲素组.低氧高二氧化碳时间为4周.测定各组的平均肺动脉压(mPAP)、右心室重量比(LV/RV S)、管壁面积/管总面积(WA%)、管壁厚度/血管外径(WT%)、门冬氨酸特异半胱氨酸蛋白酶(caspase)3及9的活力、细胞色素C(Cyt-c)的表达.[结果]低氧高二氧化碳组mPAP,LV/RV S,WA%,WT%均高于正常对照组(P<0.01),caspase3、9活性,细胞色素C表达均低于正常对照组(P<0.01);冬凌草甲素干预组mPAP,LV/RV S,WA%,WT%均低于低氧高二氧化碳组(P<0.01),caspase3、9活性,细胞色素C高于低氧高二氧化碳组(P<0.01).[结论]冬凌草甲素可以有效降低肺动脉压.其机制可能系通过诱导肺动脉平滑肌细胞线粒体途径凋亡,从而抑制肺动脉重构.     

大鼠创伤性脑损伤后创伤区CD34+细胞的聚集与脑水肿预后的关系

目的:初步探讨大鼠创伤性脑损伤(TBI)后创伤区CD34+细胞的聚集与血脑屏障通透性及脑水肿的关系。方法:成年健康雄性SD大鼠108只随机分为假手术组(18只)和TBI组(90只),其中TBI组随机分为伤后1、3、5、7、14 d 5个亚组(每组18只)。采用液压打击法(2.14 kPa)制作TBI模型。用干湿重法及伊文思蓝渗透法分别检测脑水肿及血脑屏障通透性改变情况;应用免疫组化法检测伤侧脑皮质CD34+细胞数。结果:与假手术组相比,伤侧伊文思蓝渗透量和脑水含量均于伤后1 d增加,3 d达高峰,随后逐渐下降;伤侧脑皮质CD34+细胞在伤后1 d下降,从第5天开始增加并超过假手术组;TBI后伤侧脑皮质CD34+细胞数与伊文思蓝渗透量呈负相关,与脑水含量呈负相关。结论:大鼠创伤性脑损伤后创伤区CD34+细胞的聚集与脑水含量的降低有关,有助于缓解脑水肿。     

红细胞对创伤性脑出血大鼠脑含水量与TNF-α表达的影响

目的:观察创伤性脑内出血(TICH)模型中红细胞对脑含水量和TNF-α表达的影响,探讨红细胞在TICH后脑水肿形成中的作用机制.方法:120只大鼠随机分为创伤性脑损伤组(TBI组),TBI加注全血组(WB组),TBI加注溶解红细胞组(LRBC组)和TBI加注压积红细胞组(PRBC组),每组30只.4组均采用自由落体打击法造成大鼠脑外伤.后3组借助立体定向仪分别向伤区脑皮质内注射全血、溶解红细胞和压积红细胞,造成TICH模型.于伤后1 d、3 d、5 d分别处死10只大鼠,5只用于测伤区脑组织含水量,5只用于免疫组化法检测TNF-α的表达.结果:伤后不同时点比较:TBI、WB和PRBC 3组第3 d的脑含水量最高,LRBC组第1 d的含水量最高;4组间比较:1 d时LRBC含水量最高,3 d时PRBC和WB组含水量均高于另2组.在WB、PRBC和LRBC组,TNF-α的阳性表达与脑含水量的变化相一致.结论:红细胞可使TICH大鼠的脑含水量增加,TNF-α表达增强,且2者的变化趋势一致,提示红细胞在TICH后迟发性脑水肿的形成中有重要作用,其机制与炎症反应关系密切.     

黄芪甲甙对香烟烟雾暴露大鼠肺组织Nrf2表达的影响

目的 探讨熏烟对大鼠肺组织Nrf2表达的影响以及黄芪甲甙(AS-IV)干预对Nrf2表达的调控作用.方法 将30只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(Ctrl),高剂量黄芪对照组(AH),熏烟模型组(CS),熏烟+低剂量黄芪组(CS+AL),熏烟+中剂量黄芪组(CS+AM),熏烟+高剂量黄芪组(CS+AH),每组5只大鼠.除Ctrl组和AH组外,其它各组大鼠接受染毒柜被动吸烟4周,建立熏烟模型.CS+AL组、CS+AM组和CS+AH组在熏烟前分别给予1.2 mg/(kg·d)、2.4 mg/(kg·d)、3.6 mg/(kg·d)黄芪甲甙灌胃.AH组给予3.6 mg/(kg·d)黄芪甲甙灌胃.造模结束后留取肺组织,采用HE染色观察肺部形态学改变,免疫组化、RT-PCR、Western blot方法检测Nrf2的表达.结果 吸烟诱导大鼠气道上皮Nrf2阳性表达升高,同时吸烟上调大鼠肺组织Nrf2基因和蛋白水平的表达.黄芪甲甙能剂量依赖性降低Nrf2在熏烟大鼠气道上皮和肺组织的表达.结论 吸烟可以引起大鼠肺组织Nrf2表达升高,黄芪甲甙可以下调吸烟诱导的Nrf2 的高表达.     

MNES对脑损伤后昏迷大鼠PFC去甲肾上腺素α1受体表达的影响

目的 探讨正中神经电刺激(MNES)对脑损伤(TBI)后昏迷大鼠的促醒作用及其对前额叶皮质(PFC)去甲肾上腺素α1受体(α1R)表达的影响.方法 将健康成年SD大鼠72只分为对照组、假刺激组、刺激组和拮抗剂组.对照组不做任何处理,其余3组均制作TBI昏迷大鼠模型,假刺激组不做治疗,拮抗剂组大鼠侧脑室注射食欲素受体1(OX1R)拮抗剂SB334867,刺激组和拮抗剂组均给予MNES治疗.观察各组大鼠行为学变化,并应用免疫组织化学技术检测各组大鼠PFC区α1R表达水平.结果 刺激组和拮抗剂组苏醒大鼠分别为13只和8只,而假刺激组仅有4只苏醒.α1R水平从低到高依次为对照组、假刺激组、拮抗剂组、刺激组,并呈依次递增趋势,且差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MNES可改善TBI后昏迷大鼠的意识状态水平,其机制可能与上调PFC区α1R表达水平有关,且食欲素A参与调节此过程.     

大鼠股骨骨折合并脑外伤骨折愈合过程中降钙素基因相关肽的表达

目的观察大鼠股骨骨折合并脑外伤时降钙素基因相关肽(CGRP)在骨痂中的表达,探讨骨折合并脑外伤骨折愈合加快的机制.方法12周雄性 SD 大鼠20只随机分成两组,每组10只,即:单纯骨折组(F)﹑骨折合并脑外伤组(F +TBI).建立大鼠脑外伤和骨折模型,分别于3周取材,拍 X 线片,骨痂分别做 HE 和 SP法免疫组化染色行形态学观察.结果 F +TBI 组骨折愈合好于 F 组,免疫组化分析平均阳性细胞百分数 F +TBI 组高于 F 组.结论脑外伤对骨折愈合有促进作用,CGRP 可能是脑外伤促进骨折愈合的原因.     

激活α7烟碱型乙酰胆碱受体对创伤性脑损伤模型大鼠学习记忆功能及小胶质细胞的影响

目的探讨激活α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor, α7nAChR)对创伤性脑损伤(traumatic brain injury, TBI)大鼠认知功能及海马小胶质细胞极化的影响。方法取36只6～8周雄性SD大鼠, 按照随机数字表法分为假手术对照组(Sham组)(n=12)、TBI组(n=12)、TBI+α7nAChR激动剂组(n=6)、TBI+α7nAChR拮抗剂组(n=6)。通过"自由落体撞击"建立TBI模型, 造模后第4～6天, TBI+α7nAChR激动剂组大鼠腹腔注射α7nAChR激动剂PNU-282987(3 mg/kg), TBI+α7nAChR拮抗剂组大鼠先腹腔注射α7nAChR拮抗剂甲基牛扁亭柠檬酸盐(5 mg/kg), 45 min后再注射α7nAChR激动剂PNU-282987 (3 mg/kg), TBI组和Sham组大鼠腹腔注射等体积0.9%氯化钠溶液。采用Morris水迷宫实验评估大鼠的学习记忆功能, 采用免疫荧光染色观察小胶质细胞标记蛋白离子钙结合接头蛋白1(ionized calcium bind...     

姜黄素在大鼠创伤性脑损伤模型中的抗氧化应激作用

目的探讨大鼠创伤性脑损伤模型中核因子E2转录相关因子2(Nrf2)及抗氧化应激相关因子的含量或活性的改变,研究姜黄素对大鼠脑损伤的保护作用及抗氧化应激机制。方法选取SPF级雄性SD大鼠20只,分为正常对照组、脑损伤模型组(TBI组)、脑损伤溶剂组(TBI+S组)、脑损伤姜黄素处理组(TBI+C组),每组各5只。其中正常对照组仅给予麻醉和生理盐水处理,TBI组、TBI+S组和TBI+C组均使用自由落体式脑外伤造模装置进行造模,随后分别给予等量生理盐水、DMSO溶剂(0.05%)和姜黄素(5 mg/kg)处理,1 d后处死所有大鼠并取脑组织,提取RNA和蛋白。定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)检测Nrf2的mRNA表达,Western Blot检测Nrf2蛋白的表达。化学比色法检测大鼠脑组织匀浆液中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力,酶联免疫吸附法(ELISA)检测诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和血红素氧合酶-1(HO-1)的含量。结果与正常对照组相比,TBI组、TBI+S组脑组织中Nrf2的mRNA和蛋白表达均显著增加,MDA含量、i NOS和HO-1的活力均增加,GSH含量、SOD和CAT的活性均降低,差异有显著性(P0.05)。与TBI组、TBI+S组相比,TBI+C组Nrf2的mRNA和蛋白表达水平显著降低,MDA含量、i NOS和HO-1的活力均降低,GSH含量、SOD和CAT的活性均增加,差异有显著性(P0.05),而TBI组与TBI+S组之间差异无显著性(P0.05)。结论姜黄素对脑损伤大鼠具有抗氧化应激的作用,它能够通过降低Nrf2的表达,改变机体抗氧损伤相关指标,由此可能起到对TBI脑组织的保护作用。     

冬凌草甲素衍生物的制备和评价

目的 为研究冬凌草甲素的构效关系,对冬凌草甲素进行结构修饰,合成其衍生物,并评价其细胞毒活性。方法 经常规提取分离得到冬凌草甲素(Ⅰ);通过氧化和酰基化,制备冬凌草甲素衍生物,所获产物采用NMR和MS确证结构;采用MTT法观察衍生物的细胞毒活性。结果 制备了6个冬凌草甲素的衍生物,分别为14-乙酰基冬凌草甲素(Ⅱ)、1,14-二乙酰基冬凌草甲素(Ⅲ)、14-对甲苯磺酰基冬凌草甲素(Ⅳ)、1-氧代冬凌草甲素(Ⅴ)、14-乙酰基-1-氧代冬凌草甲素(Ⅵ)、14-对甲苯磺酰基-1-氧代冬凌草甲素(Ⅶ),其中化合物Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ为3个新化合物。初步药理实验表明部分衍生物细胞毒活性高于冬凌草甲素。结论 首次评价了1-氧代冬凌草甲素衍生物的细胞毒活性,其活性高于冬凌草甲素。     

冬凌草甲素诱导结直肠癌细胞SW-1116凋亡与衰老的体内外实验研究

目的 探讨冬凌草甲素(Ori)在体内外抑制结直肠癌细胞的作用及机制.方法 应用不同浓度Ori(0、6.25、12.5、25、50和100 μmol/L)处理结直肠癌细胞SW-1116及其建立的裸鼠移植瘤模型,CCK-8法检测Ori对SW-1116细胞的抗增殖效应;流式细胞仪检测Ori处理SW-1116后细胞周期的改变及细胞的凋亡;β-半乳糖苷酶染色检测Ori诱导SW-1116细胞衰老;软琼脂细胞克隆形成实验检测Ori对SW-1116细胞克隆形成的影响;观察Ori对SW-1116细胞裸鼠移植瘤生长的影响及其机制.结果 Ori可诱导结直肠癌细胞SW-1116生长抑制、细胞周期阻滞、凋亡、衰老和克隆形成能力.Ori还显著抑制SW-1116裸鼠移植瘤的生长,随着Ori剂量的增加裸鼠移植瘤中的细胞凋亡与衰老增加.结论 体内外实验研究表明,Ori具有抗结直肠癌的活性,可能成为治疗结直肠癌的一个新的候选化合物.     

罗格列酮改善胰岛素抵抗大鼠心肌脂联素及受体表达的研究

目的 探讨罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠心肌脂联素(APN)及其受体表达的影响.方法 将30只雄性SD大鼠,随机分为3组:对照组10只,予普通饲料喂养8周;胰岛素抵抗组(IR组)10只,高果糖饮食喂养8周;罗格列酮组(RSG组)10只,高果糖饮食喂养8周+罗格列酮3 mg/(kg·d)灌胃4周.所有大鼠喂养第8周末采血测定空...     

冬凌草甲素对PC3细胞增殖及神经内分泌分化抑制作用研究

目的 研究冬凌草甲素(Oridonin,Ori)对前列腺癌细胞增殖及神经内分泌分化的影响.方法 用Ori处理PC3细胞,利用CCK8检测Ori的半抑制浓度IC50及对PC3细胞增殖的时间依赖性;然后用Ori和NF-κB抑制剂咖啡酸苯乙酯(CAPE)处理PC3细胞,通过Western blot检测神经内分泌分化标志物(NSE,CgA)的蛋白表达情况.结果 Ori作用PC3细胞48 h时IC50约为15 μmol/L,且随浓度和时间的增加,抑制作用越显著.Western blot检测结果显示,Ori能显著抑制PC3细胞pp65、pp50和神经内分泌分化标志物NSE、CgA的表达.给予NF-κB抑制剂CAPE处理PC3细胞,抑制pp65表达时,能显著下调神经内分泌分化标志物NSE、CgA的表达.结论 Ori可以抑制PC3细胞增殖,并能通过抑制NF-κB信号通路抑制PC3细胞神经内分泌分化,为临床治疗前列腺神经内分泌癌提供了理论依据.