益寿永真合剂对D-半乳糖致衰老模型大鼠睾丸增殖细胞核抗原表达的影响研究

目的:研究益寿永真合剂(YSYZ)对D-半乳糖致衰老模型大鼠睾丸增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法:48只SD大鼠(♂)随机分为4组,每组12只,即空白对照(生理盐水)、衰老模型(1g.kg-1.d-1)及YSYZ高、低剂量(12.5、6.25g.kg-1.d-1)组,连续5周sc给药,比较各组大鼠睾丸PCNA阳性细胞率及血清睾酮含量。结果:与衰老模型组比较,YSYZ高、低剂量组PCNA阳性细胞率显著增高(P<0.01);YSYZ高、低剂量组血清睾酮含量显著增加(P<0.05)。结论:YSYZ可延缓衰老大鼠生殖功能的退化,具有一定的延缓衰老作用。     

玉米胚芽提取物干预对雄性大鼠生殖系统衰老影响的研究

目的研究采用氯化铝和D-半乳糖建立大鼠衰老模型,观察玉米胚芽提取物延缓雄性生殖系统衰老的作用,探讨其作用机制,为玉米胚芽提取物改善生殖系统衰老的研究提供理论依据。方法 SPF级雄性成年Wistar大鼠90只,体重180～220 g。D-半乳糖溶液(60 mg/kg·bw)腹腔注射,氯化铝溶液(200 mg/kg·bw)灌胃,连续8周,建立大鼠联合染毒衰老模型,设立空白对照组,玉米胚芽提取物(胚元胶囊)对照组,衰老模型组与低、中和高剂量的胚元胶囊干预组。采用苏木素-伊红(HE)染色观察睾丸形态学变化;免疫组化测定睾丸Bax和Bcl-2蛋白表达水平;生化法测定谷胱甘肽-S转移酶等氧化应激相关指标;ELISA方法测定睾酮等血清激素水平;实时定量PCR检测睾丸中Nrf2 mRNA表达量。结果与空白对照组相比,衰老模型组睾丸间质细胞,管腔内细胞少且分布紊乱;而低、中和高剂干预量组脱落溶解现象减少。衰老模型组Bax蛋白表达上调而Bcl-2蛋白表达下调,低、中和高剂量干预组Bax表达下调,Bcl-2表达上调。与空白对照组相比,衰老模型组的Nrf2 mRNA表达下调;低、中和高剂量干预组Nrf2基因表达上调。结论玉米胚芽提取物可改善复合衰老模型所致雄性大鼠睾丸细胞稀疏脱落的现象。复合衰老模型导致雄性大鼠睾丸组织细胞凋亡增加,玉米胚芽提取物干预降低细胞凋亡水平。玉米胚芽提取物干预影响生殖系统氧化应激水平。     

羟基积雪草苷对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠学习记忆的影响及机制研究

目的探讨天胡荽羟基积雪草苷(madecassoside from hydrocotyle sibthorpioides,MHS)对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠学习记忆功能的影响及其作用机制研究。方法SPF级昆明♂小鼠75只,随机分为正常组、模型组、MHS低、中、高剂量治疗组。采用D-半乳糖皮下注射建立亚急性衰老模型,利用Morris水迷宫观察小鼠的学习记忆能力;Western blot法测定小鼠海马组织中Aβ1-42蛋白及突触可塑性相关蛋白的水平;RT-PCR法检测Aβ相关基因的表达。结果与模型组比较,MHS能明显降低Aβ1-42蛋白的含量(P<0.05);抑制APP、BACE1和Cat B,同时提高NEP和IDE的表达(P<0.05);增强突触可塑性相关蛋白PSD-95、pNMDAR1、p-Ca MKII、p-PKACβ、PKCγ、p-CREB和BDNF的表达(P<0.05)。结论 MHS能改善小鼠的学习记忆功能,其机制可能与抑制Aβ生成与沉积、增强突触可塑性相关蛋白表达有关。     

大蒜提取物对亚急性衰老大鼠的抗衰老作用

目的探讨大蒜提取物对D-半乳糖所致衰老大鼠的保护作用。方法大鼠腹腔注射D-半乳糖和生理盐水建立亚急性衰老模型组。同时,对实验组大鼠腹腔注射大蒜提取物,连续培养2个月,测定大鼠肝及脑组织中MDA和SOD含量、血清IL-2水平、腹腔巨噬细胞吞噬能力等指标。结果大蒜提取物能显著提高D-半乳糖所致衰老大鼠肝及脑组织中SOD的活力、降低肝及脑组织中MDA含量;提高衰老大鼠血中IL-2含量和腹腔巨噬细胞的吞噬功能。结论大蒜提取物可以有效对抗D-半乳糖所致的大鼠亚急性衰老和免疫功能降低。     

补肾填精方对D-半乳糖衰老模型大鼠脑细胞周期相关蛋白表达的影响

目的探讨抗衰老中药方剂补肾填精方对D-半乳糖衰老模型大鼠脑细胞周期相关p53、p21和p16蛋白表达的影响。方法采用D半乳糖法诱导衰老大鼠模型。随机分为正常组、模型组、天保宁组、补肾填精方（低剂量组、中剂量组、高剂量组）。免疫组化法检测各组大鼠脑海马CA1区细胞周期相关p53、p21和p16蛋白表达。结果补肾填精方能抑制海马CA1区细胞周期相关p53、p21和p16阳性蛋白的表达（P〈0．05）。结论补肾填精方可降低衰老大鼠海马CA1区p53、p21和p16蛋白表达,提示补肾填精方延缓脑细胞衰老可能与细胞周期相关蛋白表达相关。     

何首乌饮对亚急性衰老大鼠的抗氧化和调血脂作用

目的:探讨何首乌饮对亚急性衰老大鼠的抗氧化和调血脂作用。方法:D-半乳糖连续腹腔注射致亚急性衰老大鼠模型,造模同时灌胃何首乌饮10,20,40 g.kg-1.d-1,qd,连续给药60 d后测大鼠血清中丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并检测血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)的含量。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清MDA,TG和TC含量明显升高,SOD,GSH-PX,TAOC和HDL-C明显下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,何首乌饮组血清MDA含量显著下降,血清SOD,GSH-PX活性,TAOC和HDL-C含量显著上升(P<0.05),呈现一定的剂量依赖性。结论:何首乌饮延缓D-半乳糖诱发的大鼠亚急性衰老的作用机制可能与其抗氧化和调血脂作用有关。     

果糖二磷酸锶盐对D-半乳糖致小鼠睾丸退行性病变的改善

目的:研究果糖二磷酸锶盐(FDP-Sr)对D-半乳糖致雄性小鼠睾丸退行性病变的影响。方法:昆明种雄性小鼠皮下注射D-半乳糖200 mg·kg-1连续30 d造成睾丸退行性病变。同时分别灌胃给予FDP-Sr 50,100,200 mg·kg-1及阳性对照药物生力雄丸853 mg(生药)·kg-1,qd,连续30 d。观察各组小鼠的扑提性行为(扑捉潜伏期和20 min内雄鼠扑捉雌鼠的次数),检测血清睾酮、睾丸组织特异性酶类及病理学变化。结果:与正常对照组比较,D-半乳糖模型组小鼠扑捉潜伏期延长,扑捉次数减少;睾丸、附睾、精囊腺、包皮腺重量指数下降;血清睾酮下降,睾丸中琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)及谷氨酰转肽酶(γ-GT)活力降低;病理学检测可见生精上皮层变薄,各级生精细胞减少。FDP-Sr 100和200 mg·kg-1组上述现象明显改善(P<0．05),其中FDP-Sr 200 mg·kg-1组与生力雄丸组(853 mg·kg-1)效果相当。结论:FDP-Sr对D-半乳糖致雄性小鼠睾丸退行性病变有明显的改善作用,且呈剂量依赖关系。     

D-半乳糖过氧化肝损伤动物模型的改进

目前,我国对保健食品抗氧化功能评价的依据是卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中“抗氧化功能检验方法”[1]。D-半乳糖亚急性损伤模型是研究衰老机制、筛选抗衰老药物常用的动物模型[2-3],但在保健食品抗氧化功能评价中,该模型的复制存在D-半乳糖染毒剂量、染毒     

D-半乳糖致衰大鼠牙髓组织形态及SOD活性变化的实验研究

目的:观察D-半乳糖对大鼠牙髓组织的形态及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性的影响,探讨其可能机制.方法:采用D-半乳糖(0.075g·kg-1·d-1)连续皮下注射造成大鼠亚急性衰老模型,从形态学角度观察此模型牙髓的组织病理学变化,同时测定SOD的活性来研究D-半乳糖对牙髓组织的影响.结果:与青年对照组相比,模型组牙髓组织中SOD活性明显降低,差异有显著性(P＜0.01).电镜下模型组成牙本质细胞核凹陷,出现大量异染色质,线粒体和粗面内质网水肿、空泡性变;成纤维细胞变成长梭形,细胞器如线粒体、粗面内质网变小,高尔基复合体少见.结论: D-半乳糖致衰大鼠牙髓组织出现了类似衰老时的退行性变,其发生机制可能与自由基代谢变化及抗氧化酶活性降低有关.     

沙苑子黄酮对D-半乳糖所致亚急性衰老模型小鼠的抗衰老作用研究

目的:研究沙苑子黄酮(FAC)对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的作用。方法:制备小鼠D-半乳糖亚急性衰老模型,检测FAC对模型小鼠衰老相关酶、免疫器官指数、耐缺氧时间、游泳时间等指标的影响。结果:FAC能明显提高衰老小鼠血中SOD活性,降低MDA含量,明显提高脾指数和胸腺指数,延长衰老模型小鼠缺氧条件下的存活时间和游泳时间。结论:FAC具有抗衰老作用,且能增强小鼠耐缺氧和耐疲劳能力,其作用可能与其增强小鼠非特异性免疫功能有关。     

山茱萸活性成分对D-半乳糖致衰星形胶质细胞影响的实验研究

目的研究山茱萸活性成分马钱苷、莫诺苷对D-半乳糖致衰大鼠星形胶质细胞的保护作用。方法常规方法体外培养乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞,采用免疫荧光方法进行星形胶质细胞鉴定;MTT法对比不同浓度D-半乳糖对星形胶质细胞的增殖抑制作用,以及马钱苷、莫诺苷对D-半乳糖致衰星形胶质细胞活力的影响;以超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)为观察指标,观察马钱苷、莫诺苷对D-半乳糖致衰星形胶质细胞的影响;ELISA法检测胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量变化;Western blot法检测Bax、caspase-3、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶/ERK激酶(p-MEK1/2)的表达水平,以做进一步机制研究。结果马钱苷、莫诺苷组与模型组比较,细胞的增殖能力提高,SOD含量增加,MDA活性降低,且差异有显著性(P<0.05);马钱苷、莫诺苷组生长因子(GDNF、bFGF)的分泌高于模型组;Western blot结果表明,D-半乳糖致衰老的星形胶质细胞中Bax、caspase-3蛋白表达无明显变化,模型组pERK1/2、p-MEK1/2蛋白表达降低,马钱苷、莫诺苷增加pERK1/2、p-MEK1/2蛋白的表达。结论山茱萸活性成分马钱苷、莫诺苷可通过提高D-半乳糖致衰星形胶质细胞的增殖能力,提高衰老细胞的抗氧化能力,发挥抗衰老作用,其机制可能与MEK/ERK介导的信号通路调控有关。     

保护蛋白对D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠保护作用的初步研究

目的:初步研究保护蛋白对D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠的保护作用并探讨其机制。方法:昆明鼠随机分成三组,模型组和保护组腹腔注射D-半乳糖120 mg/(Kg·d)诱导小鼠亚急性衰老,保护组同时注射保护蛋白6mg/(Kg·d) ,对照组注射等量生理盐水。40 d后,处死小鼠,分别测定各组小鼠血清总SOD活性,脑组织MDA及脂褐素含量,并电镜观察小鼠大脑皮层神经元的超微结构。结果:对照组、保护组小鼠的血清总SOD活性明显高于模型组(P<0.05) ,脑组织MDA和脂褐素含量显著低于模型组(P<0.05) ,而保护组与对照组的各项指标无显著性差异(P>0.05)。电镜观察可见模型组小鼠次级溶酶体增多并有脂褐素沉积,线粒体有轻度肿胀;PRP保护组次级溶酶体增多但无脂褐素沉积,其它细胞器基本正常。结论:保护蛋白对D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠有一定的保护作用     

松花粉预防和延缓腮腺组织衰老EGFR在导管细胞中的表达

目的观察松花粉预防和延缓腮腺组织衰老EGFR在腮腺导管细胞中的表达。方法D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老雄性大鼠模型,采用免疫组织化学方法(SP法)观察不同剂量的松花粉对衰老的腮腺组织EGFR表达的影响。结果EGFR在腮腺组织广泛表达,D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠模型组EGFR的表达明显下降,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0·01);而经松花粉给药后EGFR的表达明显上升,其中预防中剂量组效果明显。结论松花粉具有改善衰老雄性大鼠腮腺功能紊乱,预防和延缓腮腺组织衰老的作用。     

姜黄素对D-半乳糖致衰老大鼠氧化应激及Nrf2/ARE通路的影响

目的 研究姜黄素对D-半乳糖致衰老模型大鼠氧化应激及Nrf2/ARE通路的影响.方法 将大鼠随机均分为空白组、模型组和姜黄素组于模型组和姜黄素组大鼠每日sc 125 mg· kg-1D-半乳糖造模,姜黄素组大鼠同时ip 10 mg·kg-1姜黄素,空白组大鼠给予生理盐水,连续7周.测定各组大鼠血清中丙二醛(MDA)、肝组织中蛋白质糖基、谷胱甘肽过氧化物(GSH)的含量和血清超氧化物歧化酶(SOD)、全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;用Western blot法分析肝组织中Nrf2蛋白和HO-1蛋白的表达水平.结果 与模型组比较,姜黄素组大鼠血清中SOD的活性和MDA、肝中GSH、蛋白质羰基的含量均降低,全血中GSH-Px的活性显著升高,Nfr2和HO-1蛋白的表达水平也明显升高.结论 姜黄素能够缓解D-半乳糖导致的大鼠氧化应激,Nrf2/ARE通路参与了姜黄素的抗氧化活性.     

机械敏感离子通道Piezo1通过激活β-catenin诱导心房成纤维细胞衰老北大核心CSCD

目的 衰老心房成纤维细胞中新型机械敏感离子通道Piezo1的基因表达明显升高,观察其是否通过激活β-catenin参与心房成纤维细胞的衰老进程。方法 通过酶消化法分离培养3~4周龄雄性C57BL/6小鼠原代心房成纤维细胞,给予叔丁基过氧化氢(TBHP)刺激建立衰老模型,检测衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)活性。Western blot检测TBHP(100μmol·L^(-1))处理的细胞中Piezo1、β-catenin/p-β-catenin及衰老相关蛋白p53和p21的表达水平。衰老的小鼠心房成纤维细胞(MAFs)分别给予Piezo1通道抑制剂GsMTx4(3、10μmol·L^(-1))或Piezo1 siRNA,以及β-catenin抑制剂XAV939(3、10μmol·L^(-1));年轻的MAFs给予Piezo1特异性激动剂Yoda1(1、10μmol·L^(-1)),观察对细胞中β-catenin和衰老相关蛋白表达和活性的影响。结果 TBHP处理后,MAFs的SA-β-Gal染色阳性率明显增加,提示细胞发生衰老;且细胞中Piezo1、β-catenin/p-β-catenin和p53/p21的蛋白表达明显增加(P<0.05)。分别抑制Piezo1(GsMTx4/Piezo1 siRNA)或β-catenin(XAV939),可明显降低TBHP诱导的MAFs衰老率,以及减少β-catenin/p-β-catenin,p53/p21等蛋白表达和活性的增加(P<0.05)。而Yoda1可促进年轻细胞衰老,且β-catenin活性和衰老相关蛋白表达升高(P<0.05)。结论 机械敏感离子通道Piezo1通过激活β-catenin诱导心房成纤维细胞衰老的病理过程。     

菟丝子醇提液对D-半乳糖致衰大鼠脑组织抗氧化作用研究

目的:研究菟丝子醇提液对D-半乳糖致衰大鼠脑组织抗氧化作用。方法:以D-半乳糖侧腹部注射大鼠,6周后连续灌服菟丝子醇提液30d,分别检测大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;大脑皮质神经细胞丙二醛(MDA)的含量。结果:与D-半乳糖致衰老模型大鼠相比菟丝子醇提液给药组大鼠脑组织SOD,GSH-Px活性显著提高(P<0.05;P<0.01),MDA含量显著下降。结论:菟丝子醇提液可以提高致衰大鼠神经细胞抗氧化物酶的活性,降低自由基代谢产物的含量,具有一定的抗衰老作用。     

当归芍药散二氯甲烷提取部位对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的影响

目的研究当归芍药散二氯甲烷提取部位(DSP)对D-半乳糖(D-gal)致小鼠学习记忆能力障碍及神经毒性的改善作用。方法 ICR小鼠随机分为空白组,模型组,维生素E组,当归芍药散二氯甲烷提取部位低、高剂量组。空白组以外各组皮下注射D-半乳糖(50mg.kg-1.d-1)50d制备小鼠亚急性衰老模型。用跳台法和Morris水迷宫法评价小鼠的学习记忆能力,测定小鼠血清中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性和脑组织匀浆中谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)比值、Na+-K+-ATPase活性和淀粉样蛋白β(Aβ)含量。结果当归芍药散二氯甲烷提取部位能够显著提高衰老小鼠的学习记忆能力(P<0.05或P<0.01),提高衰老模型小鼠血清SOD、GSH-Px及脑组织Na+-K+-ATP酶活性,并升高GSH/GSSG比值,减少血清MDA(P<0.05或P<0.01);减少脑内Aβ含量(P<0.05)。结论当归芍药散二氯甲烷提取部位能够改善D-半乳糖衰老模型小鼠的学习记忆障碍,其作用可能与提高脑组织的抗氧化能力、降低中枢神经毒性有关。     

麦芪口服液对D-半乳糖所致衰老模型大鼠的抗氧化作用

目的 研究麦芪口服液对D-半乳糖所致衰老模型大鼠的抗氧化作用。方法 采用腹腔注射D-半乳糖的方法,制作衰老动物模型。60只大鼠随机分成正常对照组、模型组、维生素C阳性对照组和高、中、低3个剂量的麦芪口服液组。测定各组大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。结果 与模型对照组比较,麦芪口服液能明显升高衰老模型大鼠的血清中SOD(P<0.01)和GSH-Px(P<0.05)的活性,减少MDA的含量(P<0.01)。结论 麦芪口服液具有抗氧化作用。     

动态浊度法测定注射用阿奇霉素中细菌内毒素的含量

目的研究麦芪口服液对D-半乳糖所致衰老模型大鼠的抗氧化作用。方法采用腹腔注射D-半乳糖的方法,制作衰老动物模型。60只大鼠随机分成正常对照组、模型组、维生素C阳性对照组和高、中、低3个剂量的麦芪口服液组。测定各组大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。结果与模型对照组比较,麦芪口服液能明显升高衰老模型大鼠的血清中SOD(P<0.01)和GSH-Px(P<0.05)的活性,减少MDA的含量(P<0.01)。结论麦芪口服液具有抗氧化作用。     

紫斑牡丹花粉对D-半乳糖致衰老模型小鼠的影响

目的 探究紫斑牡丹花粉对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆力及氧化应激损伤的影响。方法 60只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、紫斑牡丹花粉组(750、1 500、3 000 mg·kg^-1),采用颈背部皮下注射D-半乳糖(500 mg·kg^-1),制备亚急性衰老模型。Morris水迷宫评估小鼠学习记忆力;HE、DAPI染色评估肝、脑组织细胞损伤情况;ELISA法检测小鼠血清、肝脑组织内MDA、T-AOC、GSH-Px、SOD、CAT及γ-H2AX、SA-β-Gal水平。结果 水迷宫实验结果表明,紫斑牡丹花粉能明显提高衰老小鼠的学习记忆力。组织染色结果表明,紫斑牡丹花粉对D-半乳糖致衰老小鼠肝脑组织细胞损伤具有保护作用,且高剂量组作用最为明显。ELISA结果显示,与模型组比较,紫斑牡丹花粉各剂量组的MDA、γ-H2AX、SA-β-Gal水平降低,T-AOC、GSH-Px、SOD、CAT水平升高。结论 紫斑牡丹花粉能改善D-半乳糖致衰老模型小鼠的学习记忆力,提高衰老小鼠体内抗氧化酶活性和清除自由基、脂质过氧化物的能力,保护肝脑脏器组织...