流式细胞术检测表达FoxP3的CD4+CD25+调节性T细胞

目的 探讨转录因子FoxP3在外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)内的表达特性.方法 取正常人外周血单个核细胞(PBMC),经固定/透膜处理进行细胞内染色,用流式细胞术(FCM)检测T细胞内FoxP3.以抗人CD3/CD28诱导T细胞活化,再用定量PCR及FCM术分别检测FoxP3 mRNA及蛋白质表达水平.结果 FoxP3主要表达于CD4 T细胞,尤其是CD25高表达的CD4 T细胞,达97%左右;中等程度表达CD25的细胞中也含有少量FoxP3阳性细胞.T细胞活化后,表达FoxP3的CD4 CD25 T细胞比例显著增高,FCM检测结果与定量PCR结果一致.结论 FoxP3不仅参与维持Treg细胞的功能,也与T细胞的活化有关.FCM检测细胞核内表达的FoxP3分子为研究Treg细胞提供了一种快速、简便的方法.     

急性冠脉综合征患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其临床意义

目的 探讨急性冠脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）患者的外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）和CD4^＋CD25^＋曲T细胞（CD4^＋CD25^＋^high Treg）的水平及其临床意义。方法 采用流式细胞术检测15例急性心肌梗死患者、20例不稳定性心绞痛、11例稳定性心绞痛和16例健康体检者（对照组）的外周血CD4^＋CD25^＋Treg和CD4^＋CD25^＋^high Treg的水平。结果 ACS患者CD4^＋CD25^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例较稳定性心绞jjl;和对照组显著减少,CD4^＋CD25^＋high Treg占CD4^＋T细胞比例的差异无显著性。结论 ACS患者外周血具有免疫负调节作用的CD4^＋CD25^＋Treg水平减低,可能促进了动脉粥样硬化的进展。     

外周血CD4~+CD25~+CD127~(low)调节性T细胞在恶性肿瘤患者免疫功能评估中的作用

目的观察恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(CD4+CD25+CD127lowTreg)的数量变化,探讨外周血CD4+CD25+CD127lowTreg检测在恶性肿瘤患者免疫功能评估中的作用。方法以35例正常人作为对照组,采用流式细胞术检测74例肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg在CD4+T细胞的比例,分析不同TNM分期恶性肿瘤患者外周血中CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T细胞的百分比,采用实时荧光定量RT-PCR技术检测PBMC转录因子Foxp3表达水平。结果肿瘤患者外周血中CD4+CD25+CD127low Treg占CD4+T细胞百分比为(6.19±1.82)%,明显高于对照组(3.12±1.16)%,差异具有统计学意义(P0.05)。其中Ⅲ、Ⅳ期患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg百分比分别为(6.08±2.14)%、(6.88±2.65)%,明显高于Ⅰ-Ⅱ期患者(5.65±1.86)%,P0.05;病理分型为低分化者CD4+CD25+CD127lowTreg百分比为(6.72±2.60)%,明显高于高分化者(5.94±2.11)%,P0.05;有淋巴结转移者CD4+CD25+CD127lowTreg百分比为(6.95±3.12)%,明显高于无淋巴结转移者(5.02±2.09)%,P0.05。结论恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T细胞的比例明显升高,监测CD4+CD25+CD127lowTreg有利于评估肿瘤患者的免疫功能和辅助判断肿瘤患者的病情进展及预后。     

胃癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化

目的:探讨胃癌患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞的变化及临床意义。方法:应用流式细胞仪检测52例胃癌患者(胃癌组)和24例健康对照者(健康组)的CD4 CD25 调节性T细胞水平。结果:胃癌组外周血CD4 CD25 调节性T细胞较健康组明显升高,胃癌Ⅲ Ⅳ期患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞水平比Ⅰ Ⅱ患者明显升高。结论:胃癌患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞水平明显升高,可能是机体免疫功能受抑制的重要机制,并可成为胃癌患者机体免疫状态临床监测的指标。     

强直性脊柱炎患者CD3^＋T细胞HLA-B27表达水平

强直性脊柱炎（ankylosingspondylitis,AS）是一种致残率高的结缔组织疾病,它与HLA-B27抗原呈强相关。本文对43例临床确诊的强直性脊柱炎患者和对照组26例进行了临床、CT及HLA-B27抗原检查,现将结果报告如下。     

卵巢癌患者外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞的检测及其临床意义

目的探讨卵巢癌患者CD4+CD25+调节性T细胞的比例变化及其可能的机制。方法利用流式细胞仪检测20例卵巢癌患者外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBLs)、肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TILs)及肿瘤相关淋巴细胞(tumor associated lymphocytes,TALs)中CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tcells,Tregs)所占的比例。10例健康人外周血PBLs中Tregs所占的比例。同时检测卵巢癌患者CD4+外周血淋巴细胞中CD69+细胞的比例。健康人PBLs在含有卵巢癌细胞株SKOV3培养上清的RPMI1640培养液(有或没有血清植物血凝素)中培养72小时后,检测Tregs所占的比例。结果卵巢癌患者外周血淋巴细胞中CD4+CD25+调节性T细胞所占比例与健康人相比明显增加.卵巢癌患者外周血肿瘤浸润淋巴细胞中CD4+CD25+调节性T细胞所占比例高于在外周血淋巴细胞和肿瘤相关淋巴细胞中的比例,但是没有统计学意义。卵巢癌患者CD4+外周血淋巴细胞中无CD69表达。结论卵巢癌患者外周血淋巴细胞中、肿瘤浸润淋巴细胞及肿瘤相关淋巴细胞中CD4+CD25+调节性T细胞所占的比例增加,这可能与卵巢癌细胞分泌的可溶性分子上调有关。     

CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞异常表达与多发性骨髓瘤的关联性分析

目的 检测多发性骨髓瘤(MM)患者和良性单克隆丙种球蛋白血症(MGUS)患者外周血及骨髓组织中CD4+CD25+CD127low/-调节性T(Treg)细胞表达水平,初探MM中调节性T细胞免疫功能状态以及与疾病发生、发展的关联性.方法 采用流式细胞术分别检测33例MM患者、44例MGUS患者和30例健康者外周血以及6例MM患者骨髓CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞水平.分别采用溴甲酚绿法、免疫散射比浊法检测MM患者血清清蛋白(Alb)、β2-微球蛋白(β2-MG)水平.结果 MM组外周血中CD4+CD25+CD127low/-细胞表达高于MGUS组及健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MM中稳定期患者组外周血细胞水平较初诊患者组和复发、难治患者组升高,差异有统计学意义(P<0.05);但不同ISS分期的MM患者外周血细胞表达差异无统计学意义(P>0.05);而进展期MM患者中,CD4+CD25+CD127low/-T细胞表达在Ⅲ期高于Ⅰ期+Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05);进一步研究发现,同一初诊MM患者骨髓CD4+CD25+CD127low/-T细胞水平低于其外周血T细胞水平,差异有统计学意义(P<0.05).结论 外周血CD4+CD25+CD127low/-T细胞表达异常可辅助鉴别良、恶性单克隆丙种球蛋白血症;监测MM的进展以及疾病的活跃程度,并为进展期MM患者及时进行临床干预提供实验依据.     

急性白血病患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞检测及其对细胞凋亡的作用

目的研究CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞在急性白血病患者外周血中的检测,并探讨其对细胞凋亡的作用。方法将65例急性白血病患者(包括急性淋巴细胞性白血病33例和急性髓系白血病32例)分为未缓解组(28例)和缓解组(37例),25例健康志愿者作为对照组。根据是否合并感染又分为合并感染组(39例)和未合并感染组(26例)。采用细胞内染色的流式细胞术及荧光定量PCR的方法,分别在蛋白质和mRNA水平检测Foxp3表达,并与正常对照组进行比较。同时,利用荧光定量PCR的方法的检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53的表达。结果与正常对照相比,急性白血病患者(未缓解组和缓解组)外周血中CD4~+CD25~+Foxp3~+比例明显提高,且治疗缓解后CD4~+CD25~+Foxp3~+表达下调(P0.05)。凋亡相关基因Bcl-2表达上调,Bax、P53表达下调。结论急性白血病患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞明显升高,并且,影响凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53的表达,提示CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞可能通过细胞凋亡信号通路影响急性白血病的发展。     

外周血CD4+CD25+调节性T细胞在妊娠合并ITP患者中的表达及意义

目的 初步探讨外周血CD4+CD25+调节性T(T reg)细胞在妊娠合并原发免疫性血小板减少症(I T P)中的作用.方法 选取2020年1-12月在北部战区总医院就诊的妊娠合并I T P患者100例作为试验组,其中急性I T P患者36例、慢性I T P患者64例,对照组为100例年龄、孕周相仿的正常产检孕妇.采用...     

人类白细胞抗原B27表达及免疫学指标的分析在强直性脊柱炎的临床意义

目的探讨人类白细胞抗原B27(HLA-B27)与强直性脊柱炎(AS)患者机体免疫功能的关系。方法以ECD标记的抗CD3单克隆抗体和PE-Cy5标记的CD4、CD8单克隆抗体作双色流式细胞术分析AS患者的CD3+ CD4+、CD3+ CD8+ T细胞百分率,免疫球蛋白、C-反应蛋白的检测采用速率散射比浊法法,抗链球菌溶血素O(ASO)采用乳胶凝集法测定。结果 HLA-B27抗原阳性患者各项免疫指标显著低于健康者,差异有统计学意义(P0.01);HLA-B27阴性的患者各项免疫指标也显著低于健康者,差异有统计学意义(P0.05)。结论 HLA-B27抗原在AS发病过程中起了重要作用,并对机体的免疫功能产生了一定影响。     

HLA-B27早期诊断强直性脊柱炎的探讨

强直性脊柱炎 (ankylosingspondylitis ,AS)是一种病因不明的疾病 ,在临床上长期以来被划为类风湿关节炎的一个亚型。随着免疫学、遗传学的发展 ,目前认为AS是一种不同于类风湿关节炎的独立疾病[1] 。白种人的AS发病率为 0 .4 % ,B2 7阳性者AS的发病率为 8%。正常白种人B2 7阳性率为 6 %～ 8% ,AS患者B2 7阳性率为 6 7%～ 96 %。国内人群AS发病率为 0 .3% ,正常人B 2 7阳性率为4 .0 %～ 5 .3% ,而AS患者的B2 7阳性率为 82 %～90 % [2 ,3] 。强直性脊柱炎早期以慢性双侧骶髂关节炎为特征 ,晚期骨突关节融合 ,韧带赘形成 ,脊柱韧带钙…     

流式细胞术检测HLA-B27临界值的设置对强直性脊柱炎诊断的影响

目的通过流式细胞术检测外周血白细胞HLA-B27的表达强度并根据临床诊断,探讨HLA-B27临界值的设置对强直性脊柱炎（Ankylosing spondylitis,AS）诊断的影响。方法利用美国BD公司流式细胞仪检测148例AS患者、296例非AS（包括骶髂关节炎68例,反应性关节炎124例,其他关节病104例）患者及40例健康体检者的外周血HLA-B27表达强度。结果以美国Becton Dickinson公司设定的界值≥荧光强度146道数为准,AS组中,HLA-B27阳性仅87例（58.78%）,其中有24例检测值在140-145道数之间;非AS组中,HLA-B27阳性13例（4.40%）;健康对照组中,HLA-B27阳性2例（5.00%）。结论AS组阳性率过低,与临床不符。进口试剂盒设置的临界值过高,会漏诊相当一部分AS患者。如降低其临界值,可提高流式细胞术检测HLA-B27抗原的阳性率,在AS的临床诊断及鉴别诊断中发挥重要的作用。     

强直性脊柱炎867例HLA-B27的表达及意义

目的：通过检测临床疑为强直性脊柱炎（AS）患者的HIA-B27表达，探讨HIA-B27抗原的检测在AS早期诊断中的意义。方法：采用流式细胞术对1807例疑为AS患者外周血进行HLA-B27表达的检测。结果：在867例诊断为AS的患者中，HLA-B27阳性758例，HIA-B27检测AS的敏感性为87．4％（758／867），特异性为91．9％（864／940），诊断正确率为89．8％。结论：AS与HIA-B27阳性高度相关，临床疑为AS的患者若加上流式HLA-B27抗原检测结果将对AS的早期诊断起到重要作用。[著者文摘]     

内蒙古地区疑似强直性脊柱炎患者HLA-B27抗原阳性率观察

目的通过检测998例疑似强直性脊柱炎（Ankylosing spondylitis,AS）患者HLA-B27抗原阳性率和表达强度,了解内蒙古地区AS与HLA-B27抗原的相关性,并初步探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测患者外周血T淋巴细胞膜上的HLA-B27抗原和其平均荧光强度（mean fuorescence intensity,MFI）。结果 998例疑似AS患者以21~50岁青壮年为主,占77.35%;男女比例为1.4∶1;998例疑似AS患者的HLA-B27抗原阳性率28.86%;男女患者HLA-B27抗原阳性率分别为33.05%和23.02%（P〈0.05）;男女阳性患者的MFI有明显差异（P〈0.05）。结论内蒙古地区AS患者与HLA-B27抗原有着很强的相关性。采用流式细胞技术检测临床疑似AS患者T淋巴细胞HLA-B27表达强度有助于诊断和鉴别诊断AS。     

南通地区HLA—B27基因亚型分布及其与AS相关性分析

目的 通过检测南通地区强直性脊柱炎( AS )患者HLA-B27基因的亚型,来了解各亚型的分布及其与AS的相关性.方法 用流式细胞术检测HLA-B27抗原,其基因亚型检测采用序列特异性引物聚合酶链式反应( PCR-SSR)技术.结果 AS患者中HLA-B27阳性者占92.3%(48/52),正常人群中HLA-B27阳性为8.3%(30/360).AS患者中发现四种亚型,分别是B2705占47.9%(23/48),B2704占43.8%(21/48),B2702占6.3%(3/48)和B2707占2.1%(1/48),正常人群中发现三种亚型,分别是B2705占50.0%(15/30),B2704占43.3%(13/30)和B2702占6.7%(2/30).结论 南通地区人群AS患者与HLA-27基因高度相关,其亚型有B2702,B2704,B2705和B2707,以B2705和B2704亚型为主,但各亚型分布在正常人群和AS患者中并没有明显差异.     

强直性脊柱炎患者HLA-B27抗原表达与骨损害关系的临床研究

目的探讨HLA-B27表达与强直性脊柱炎患者骨代谢功能损伤的关系.方法检测HLA-B27不同型别的强直性脊柱炎患者和对照群体骨代谢功能指标.结果研究显示各组间各项指标存在着不同程度的统计学差异,具体表现为:CK检测水平B27 AS＞B27-AS和B27-对照(P＜0.05),而B27 AS和B27-对照之间无显著差异(P＞0.05);AKP检测水平B27 AS＞B27-AS＞B27 对照和B27-对照(P＜0.05),而B27 对照和B27对照之间无显著差异(P＞0.05);CT检测水平B27 AS＞B27-AS＞B27 对照＞B27-对照(P＜0.05):BGP检测水平B27 AS＞B27-AS＞B27 对照＞B27-对照(P＜0.01).结论强直性脊柱炎患者HLA-B27的表达与骨质损害具有一定的关联性,为临床深入研究提供了有益的线索.     

强直性脊柱炎患者HLA-B27及基因亚型检测分析

目的通过对强直性脊柱炎患者(AS)HLA-B27阳性的标本进行基因亚型检测,了解各亚型的分布情况。方法应用流式细胞术检测HLA-B27抗原表达,荧光定量PCR检测基因亚型。结果正常人群中HLA-B27阳性率为7.1%(9/126),强直性脊柱炎患者HLA-B27阳性率为91.4%(53/58)。正常人群中基因亚型4种,分别为HLA-B2703、2704、2705、2706。强直性脊柱炎患者基因亚型3种,分别为HLA-B2702、2704、2705。结论 HLA-B27与强直性脊柱炎高度相关,基因亚型以B2704和B2705为主。