miR-335及ROCK1在骨肉瘤中表达及相互关系研究

目的：探讨miR‐335及rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1（ROCK1）在骨肉瘤组织及细胞系中表达的情况及两者的相关性。方法临床选取18例骨肉瘤组织标本及配对正常骨骼肌组织标本;设定人正常成骨细胞为对照组,骨肉瘤细胞系M G‐63和U2‐OS为实验组,RT‐PCR检测骨肉瘤组织与各组细胞中 miR‐335与 ROCK1 mRNA 的表达差异;miR‐335 mimic转染MG‐63和U2‐OS两细胞系,检测miR‐335过表达对 ROCK1 mRNA和蛋白表达的影响。结果 miR‐335在骨肉瘤组织及细胞系中特异性低表达,而ROCK1则呈高表达,两者呈负相关;转染miR‐335 mimic后,miR‐335 mRNA过表达,ROCK1 mRNA和蛋白表达在MG‐63和U2‐OS两细胞系中受到显著抑制。结论 miR‐335与ROCK1表达在骨肉瘤组织学水平和细胞学水平均成负相关;过表达miR‐335可降低ROCK1的表达。     

MicroRNA-335-5p对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞的影响*

目的 探讨microRNA-335-5p（miR-335-5p）对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞（RASFs）增殖、 侵袭和凋亡的影响。方法 选取2018年3月—2019年3月湖州市第三人民医院收治的50例类风湿性关节炎 （RA）患者和50例接受关节置换手术的关节外伤患者的滑膜组织标本,并分离培养RASFs。采用实时荧光定 量聚合酶链反应检测滑膜组织和RASFs中miR-335-5p和DKK1的表达,荧光素酶报告基因检测评估miR335-5p对DKK1荧光素酶活性的影响。将miR-335-5p模拟物、si-DKK1和pcDNA-DKK1转染RASFs,分别 通过ELISA比色法、Transwell法和流式细胞术检测细胞增殖、侵袭和凋亡情况。结果 与正常组织和RASFs相 比,miR-335-5p在RA组织和RASFs中下调（P <0.05）,而DKK1在RA组织和RASFs中上调（P <0.05）。荧光 素酶报告基因检测显示,miR-335-5p可特异性结合DKK1的3′UTR,抑制其荧光素酶活性（P <0.05）。此外, miR-335-5p 可降低 DKK1 的表达（P <0.05）。过表达 miR-335-5p 或敲除 DKK1 可抑制 RASFs 的增殖和 侵袭,诱导 RASFs 凋亡（P <0.05）。而过表达 DKK1 可逆转 miR-335-5p 对 RASFs 的影响（P <0.05）。结论 miR-335-5p可通过直接靶向DKK1的表达,抑制RASFs的增殖和侵袭,诱导其凋亡。     

金黄色葡萄球菌耐药性的研究

目的:监测金黄色葡萄球菌(SA)的耐药状况,为临床治疗SA感染提供依据。方法:对浙江省中医院2001年6月至2002年5月临床分离出的122例金黄色葡萄球菌进行药敏试验和临床资料分析。结果:临床分离的葡萄球菌在病区、标本分布方面以重症监护病房和痰标本多见。耐苯唑西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占70.5％(86/122);苯唑西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)占29.5％(36/122)。耐万古霉素金黄色葡萄球菌占3.3％(4/122)。结论:耐苯唑西林的金黄色葡萄球菌表现为多重耐药性,且对12种抗生素的耐药率明显高于苯唑西林敏感的葡萄球菌,P<0.01。发现4株耐万古霉素的金黄色葡萄球菌。     

microRNA-335对人非小细胞肺癌细胞迁移?侵袭及增殖能力的影响

目的:研究 microRNA-335(miR-335)在非小细胞肺癌中的表达及其对细胞迁移?侵袭能力与增殖能力的影响?方法:采用荧光实时定量PCR检测miR-335在12对非小细胞肺癌与癌旁正常组织中的表达差异,以及miR-335在非小细胞肺癌SPCA-1细胞与肺正常上皮细胞16HBE中的表达差异;应用Lipofectamine 2000瞬时转染anti-miR-335下调SPCA-1细胞中miR-335的表达,并通过荧光实时定量PCR验证;划痕实验检测 miR-335对SPCA-1细胞迁移能力的影响;Transwell侵袭实验检测miR-335对SPCA-1细胞侵袭能力的影响;MTT实验及克隆形成实验检测miR-335对SPCA-1细胞增殖能力的影响?结果:与癌旁正常组织比较,miR-335在非小细胞肺癌组织中显著高表达(P < 0.05);与16HBE细胞比较,miR-335在SPCA-1细胞中显著高表达(P < 0.05);利用Lipofectamine 2000瞬时转染anti-miR-335入SPCA-1细胞24 h时miR-335表达明显减弱(P < 0.01);抑制miR-335表达对SPCA-1细胞迁移和侵袭能力有显著的抑制作用,抑制率分别为(42.8 ± 2.7)%(P < 0.01)及(73.25 ± 4.4)%(P < 0.01);抑制miR-335表达对SPCA-1细胞的增殖能力无明显影响?结论:miR-335在非小细胞肺癌中呈高表达,miR-335低表达能显著抑制SPCA-1细胞的迁移和侵袭能力,但对SPCA-1细胞的增殖能力无明显影响?     

琥珀酸/GPR91轴在动脉粥样硬化中的研究进展

动脉粥样硬化(As)为慢性、炎症性病理过程,是多种心血管疾病的共同病理学基础,严重危害人类健康。近年研究表明,三羧酸循环中间体参与As的发生发展进程。琥珀酸是连接三羧酸循环和线粒体呼吸链之间的关键中间体,缺血、缺氧、中毒和高血糖等病理情况下,琥珀酸在线粒体、胞质和细胞外积蓄,激活其特异性受体GPR91,影响细胞代谢及细胞命运。近年研究发现,高脂血症和As小鼠的血清琥珀酸含量均显著升高。本文主要综述琥珀酸/GPR91轴在与As进程密切相关的血小板活化、免疫与炎症以及高血压中的作用,以期为As的有效防治提供新的参考。     

SA基因座与中国汉族人原发性高血压的连锁关系

目的：探讨中国汉族人群SA基因微卫生的频率分布特征,明确SA基因座是否与中国汉族人原发性高血压（EH）连锁,方法：选择上海地区汉族人96例随机个体和80对有EH家族史的EH同胞对,自外周静脉血白细胞中抽提DNA,应用荧光标记PCR－SSCP技术对SA基因微卫星的频率分布进行研究,以SA基因微卫星为遗传标记,通过状态一致性受累同胞对连锁分析确定SA基因座是否与中国汉族人EH连锁,结果：中国汉族人群SA基因微卫星的频率分布具有高度多态性（多态信息含量PIC＝0．86,杂合度H＝0．88）,但SA基因座与中国汉族人EH之间的连锁远未达到显著水平（连锁分析值T＝0．972,P＝0．3847）,结论：SA基因座不与中国汉族人EH连锁,在SA基因座或其附近可能不存在中国汉族人EH易感基因。     

肿瘤特异生长因子与总唾液酸联合检测对肿瘤诊断价值的评价

目的：探讨肿瘤特异生长因子（TSGF）与总唾液酸（SA）的联合检测对部分肿瘤诊断的意义。方法：采用福建新大陆生物技术有限公司提供的TSGF癌症快速诊断试剂盒与山东潍坊3V生物有限公司提供的总唾液酸试剂盒对临床诊断为恶性肿瘤的病人124例、良性肿瘤病人36例、正常健康人50例分别进行TSGF、SA检测。结果：恶性肿瘤TSGF平均阳性检出率为80．6％，SA平均阳性检出率为62．9％，双指标联合检测，灵敏度可达90．3％，特异性达92％。结论：TSGF、SA的检测对以下几类肿瘤的诊断及鉴别诊断有一定的意义，二者联合检测可以大大提高恶性肿瘤检测的灵敏度。     

九一升白口服液结合化疗治疗恶性肿瘤疗效观察

目的观察九一升白口服液结合化疗治疗恶性肿瘤患者的临床疗效。方法将32例恶性肿瘤患者随机分为两组,九一升白口服液组(治疗组)为化疗加九一升白口服液(口服每次10ml,每日3次);对照组为化疗加鲨肝醇(200mg,每日 3次)、维生素 B4(20 mg,每日 3次)和利血生(每次20 mg,每日 3次),两组均用药4周后,对外周血细胞进行血常规和免疫指标的观察。结果治疗组三系细胞降低幅度较对照组小而回升较对照组为快(P<0.05)。结论 九一升白口服液无毒副作用,是一种较理想的能增强抗肿瘤疗效、缓解骨髓抑制、能升高白细胞的治疗药物。     

鼻咽癌99mTc-HL91 SPECT乏氧显像的初步研究

目的 评价99mTc-HL91乏氧显像在鼻咽癌患者特点及其诊断中作用.方法 临床确诊的Ⅱ-Ⅳa期初发鼻咽癌患者34例放疗前1周进行系列99mTc-HL91显像,其中18例放疗前行辅助化疗.半定量分析鼻咽部原发灶及颈淋巴结转移的乏氧情况.结果 34病例中99mTc-HL91显像阳性30例,阴性4例,对鼻咽癌诊断的敏感性为88.2%,漏诊率为11.8%;阳性病灶的T/Mu、T/Ce值分别为1.39±0.33,3.80±0.88.其中弱阳性8例,直径为0.5～1.2cm,阳性～强阳性22例,直径0.96～3.53cm,平均1.62cm,肿物上下侵袭的范围从0.5～4.6cm.4例阴性的MR检查鼻咽未见明确肿物或可疑结节,25例患者28枚咽旁和颈部淋巴结乏氧显像剂异常浓集(阳性),直径1.857±1.419cm,与乏氧程度无明显相关.乏氧部位平均计数与直径呈正相关(r=0.87,P＜0.01);肿瘤病灶对乏氧显像剂的摄取呈浓集-消退趋势,15min乏氧显像已经能够对乏氧病灶定位,阳性病灶数与4h时相同,但周围本底和颈部肌肉摄取值也较高,影像清晰度相对差.结论 大多数鼻咽癌原发灶和部分转移淋巴结对99mTc-HL91特异性摄取,99mTc-HL91乏氧显像对鼻咽癌的诊断及放疗靶区定位有一定价值.     

槲皮素诱导Cloudman S91细胞凋亡的机制

目的：探讨槲皮素诱导小鼠黑色素瘤Cloudman S91细胞系凋亡的作用和机制。方法：采用噻唑蓝(MTT)比色法、吖啶橙／溴乙锭荧光染色、流式细胞仪及western blot分析技术对槲皮素诱导Cloudman S91细胞凋亡的作用及机制进行分析。结果：槲皮素对Cloudman S91细胞增殖有明显的抑制作用，其细胞存活率呈时间-剂量依赖性降低；用40～120μmol／L的槲皮素作用Cloudman S91细胞72h，可见明显的细胞凋亡形态学变化；流式细胞仪检测有亚G1峰出现，细胞被阻滞于G0／G1期；western blot分析提示槲皮素可抑制p53、bcl-2基因的表达，且呈显著的剂量依赖性。结论：槲皮素诱导Cloudman S91细胞的凋亡，其机制可能是通过阻滞细胞于G0／G1期、抑制p53、bcl-2基因的表达。