重组干扰素对慢性丙型肝炎抗病毒疗效5年随访观察

目的观察重组干扰素α－２ａ，α－２ｂ抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的近、远期疗效。方法重组干扰素α－２ａ治疗组７０例，重组干扰素α－２ｂ４６例对照组２８例，治疗后随访５年。结果治疗结束时，ＨＣＶＲＮＡ阴转率和血清ＡＬＴ复常率α－２ａ组分别为６７１４％和７０００％，α－２ｂ组分别为６９５６％和７１７３％，随访５年后，α－２ａ组ＨＣＶＲＮＡ阴转率和血清ＡＬＴ复常率分别为３５７１％和４７１４％，α－２ｂ组分别为３９１３％和５２１７％，均显著高于对照组（Ｐ＜００１和Ｐ＜００５）。基因分型以ＨＣＶⅠ组感染为主（７５８６％），干扰素对ＨＣＶⅡ组感染的疗效优于ＨＣＶⅠ组。结论重组干扰素α－２ａ与α－２ｂ均为有效的抗丙型肝炎病毒药物，慢性丙型肝炎患者干扰素治疗的早期疗效较好。ＨＣＶ基因型有预测干扰素疗效的意义     

新技术·新方法

新技术·新方法α－２ｂ干扰素治疗慢性乙型肝炎的前瞻性对照研究湖南医科大学湘雅医院传染科在６２例慢性乙型肝炎（乙肝）患者中，３８例（治疗组）接受重组α－２ｂ干扰素治疗，２４例（对照组）接受抗乙肝免疫核糖核酸治疗．结果表明，治疗组ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ...     

α－2b干扰素治疗慢性乙型肝炎的前瞻性对照研究

α－２ｂ干扰素治疗慢性乙型肝炎的前瞻性对照研究湖南医科大学湘雅医院传染科在６２例慢性乙型肝炎（乙肝）患者中，３８例（治疗组）接受重组α－２ｂ干扰素治疗，２４例（对照组）接受抗乙肝免疫核糖核酸治疗。结果表明，治疗组ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ清除率明显高于...     

生物免疫制剂对鼠枯否细胞释放过氧化氢的影响

从正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝中分离出大量高纯度的枯否细胞（ＫＣ），体外培养并以干扰素（ＩＦＮａ－２ｂ）、卡介苗（ＢＣＧ）或二者联用处理枯否细胞，用荧光法检测免疫制剂对枯否细胞释放Ｈ２Ｏ２的影响。结果显示，ＩＦＮａ－２ｂ或ＢＣＧ均可增强枯否细胞释放Ｈ２Ｏ２量，分别使释放量提高约１．６倍和１倍；ＩＦＮａ－２ｂ和ＢＣＧ协同作用的效果更强，使枯否细胞释放Ｈ２Ｏ２量提高２倍以上。文章讨论了免疫制剂增强枯否细胞的     

细胞因子调节人肝癌细胞ICAM—1分子的表达及其对CD3AK杀伤功能…

应用基因重组人干扰素α（ＩＦＮ－α）、干扰素γ（ＩＦＮ－γ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）体外处理人肝癌细胞系Ｈ－７４０２，ＡＢＣ－ＣＥＬＩＳＡ法检测各处理组和对照组细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的表达水平，用ＬＤＨ释放法观察ＣＤ３单克隆缺本活化的杀伤细胞对各处理条件下Ｈ－７４０２细胞的杀伤活性。     

重组α－干扰素治疗老年丙型病毒性肝炎疗效观察

重组α－干扰素治疗老年丙型病毒性肝炎疗效观察楼敏，薛琪近年来，住院的老年病毒性肝炎患者中近４０％系丙型肝炎病变（ＨＣＶ）或重叠了ＨＣＶ感染〔１〕。重组α－干扰素是目前较为有效的抗病毒药物之一〔２〕。然而对老年期急慢性丙型肝炎患者治疗效果迄今尚无报告。...     

重组白细胞介素-2对小鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的：研究重组白细胞介素２（ｒＩＬ－ ２） 对下丘脑－ 垂体－ 肾上腺轴的作用。方法：采用ｒＩＬ－ ２ 静脉注入（Ｂ组注入前用抗－ ＣＲＨ 血清预处理） ,测定注入ｒＩＬ－ ２ 后不同时间ＣＲＨ,ＡＣＴＨ 及ＣＯＲＴ 血浆含量变化。结果：ｒＩＬ－ ２ 可使不同水平的ＣＲＨ,ＡＣＴＨ,ＣＯＲＴ 血浆含量升高（Ａ 组）（ Ｐ＜ ０－０１） ,当预先注入抗－ ＣＲＨ 血清后ＡＣＴＨ、ＣＯＲＴ 的升高不被阻断（Ｂ 组） 。结论：ｒＩＬ－ ２ 对ＨＰＡＡ 的激活作用不是通过ＣＲＨ 介导的     

丙型肝炎病毒DNA核酸免疫的初步探讨

目的：探索ＨＣＶ－ＤＮＡ核酸免疫效应。方法：将构建的重组体ｐＣＤ－ＨＣＶｓ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,用ＥＬＩＳＡ和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测了免疫鼠血清抗体、脾细胞和ＰＢＭＣ对ＨＣＶ抗原的增殖反应。结果：重组体ｐＣＤ－ＨＣＶ１、ｐＣＤ－ＨＣＶ２和ｐＣＤ－ＨＣＶ３均可诱导小鼠（ｎ＝６）产生抗体（０．６６５￣０．７０７,ＯＤ值）和脾细胞对ＨＣＶ抗原增殖反应（ｎ＝６,ＳＩ为３．８９￣４．４７）,但各重组体间的     

STUDY ON PERIPHERAL BLOOD MONONUCLEAR CELL(PBMC) PROLIFERATIVE RESPONSES TO DIFFERENT HCV ANTIGENS IN PATIENTS WITH HEPATITIS C

为探讨丙型肝炎（ＨＣ）病人细胞免疫功能和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的致病机制及机体对其免疫保护作用,收集２４例ＨＣ病人（急性３例,慢性２１例）,用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法研究病人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）对不同ＨＣＶ抗原增殖反应,并用流式细胞仪（ＦＡＣＳ）检测了ＰＢＭＣ中ＣＤ４＋、ＣＤ８＋淋巴细胞亚群在ＨＣＶ抗原刺激后的变化。结果：ＨＣ病人ＰＢＭＣ对ＨＣＶ合成肽ＣＰ９,ＮＳ４和基因重组抗原Ｃ,Ｅ１,Ｅ２,ＮＳ３刺激后出现不同程度增殖反应,刺激指数（ＳＩ）分别为１．６９±０．５１,１．６１±０．５４,１．６８±０．５８,１．４９±０．４４,１．４４±０．４４和１．３３±０．３３。３例急性ＨＣ中２例病人的ＰＢＭＣ对ＨＣＶ抗原呈有效增殖反应（ＳＩ≥２．１）,且血清ＨＣＶＲＮＡ阴转伴ＡＬＴ正常。细胞表型分析显示：增殖的细胞表型是ＣＤ４＋淋巴细胞,而ＣＤ８＋淋巴细胞增殖反应较弱。结论：ＨＣ病人ＰＢＭＣ确实存在对ＨＣＶ抗原的增殖反应;ＣＤ４＋淋巴细胞比ＣＤ８＋淋巴细胞增殖反应要强,急性ＨＣ病人ＰＢＭＣ对ＨＣＶ抗原有效的增殖反应预示可能有良好的临床愈合     

α—干扰素治疗对慢性乙型肝炎病人免疫的影响

α－干扰素治疗对慢性乙型肝炎病人免疫的影响邵春忠赵英仁鹿明诚１９９０年１０月～１９９２年２月我们观察了小剂量重组α－干扰素对慢性乙型肝炎病人治疗前后外周血Ｔ淋巴细胞亚群、外周血单个核细胞白细胞介素２受体表达（ＰＢＭＣＩＬ２Ｒ）、白细胞介素２（ＩＬ２）...     

含有丙型肝炎病毒核心基因表达质粒的构建及其基因免疫

目的：研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心（Ｃ）基因免疫诱生特异性免疫应答的可行性。方法：将ＨＣＶ Ｃ基因片段插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３质粒ＣＭＶ启动子的下游,构建真核表达载体ｐｃＤＮＡＨＣＶ－Ｃ,分别转染小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０和人肝癌细胞７７２１进行瞬时表达,用免疫荧光法和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测表达产物,将重组质粒注射,ＢＡＬＢ／ｃ（Ｈ－２＾ｄ）小鼠股四头肌,ＥＬＩＳＡ法检测血清中抗体产生水     

丙型肝炎病毒基因分型及其与干扰素治疗应答的关系

目的为了解山西省丙型肝炎病毒的基因型和基因型对干扰素疗效的预示价值。方法用ＨＣＶ５’ＮＣ区酶切分型方法对９４例丙型肝炎病人进行基因分型，并观察其中４５例患者对干扰素α１ｂ治疗的应答。结果显示ＨＣＶⅠ组（Ⅰ、Ⅱ型）感染８０例（８５１％），ＨＣＶⅡ组（Ⅲ、Ⅳ型）感染１２例（１２８％），ＨＣＶⅠ／Ⅱ组混合感染２例（２１％）。在接受干扰素治疗的病例中，ＨＣＶⅠ组感染（３５例）的应答率为３７１％，持续应答率为１７１％，而Ⅱ组感染（１０例）的应答率为８０％，持续应答率为６０％，两组相比，有显著性差异（Ｐ＜００５，Ｐ＜００２５）。结论表明山西省以ＨＣＶⅠ组感染为主，干扰素对ＨＣＶⅡ组感染的疗效优于ＨＣＶⅠ组感染，ＨＣＶ基因型有预测干扰素疗效的意义。     

五种丙型肝炎病毒(HCV)基因重组抗原斑点酶免疫反应检测血清抗-HCV

五种丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因重组抗原斑点酶免疫反应检测血清抗－ＨＣＶ谭德明刘双虎胡国龄刘安国刘国珍应用五种丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因重组抗原，包括ＨＣＶ核心蛋白（Ｃｏｒｅ），包膜蛋白１（Ｅ１）、包膜蛋白２（Ｅ２／ＮＳ１）、ＮＳ３和ＮＳ５抗原〔１，２...     

丙型肝炎病毒1b型NS5 A区基因结构变异与α干扰？…

目的 观察丙型肝炎患者丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）１ｂ型基因组部分ＮＳ５ Ａ区核苷酸,氨基酸的变异情况并探讨其与α干扰素疗效的相关性。方法 患者干扰素治疗前,中,后留血标本,用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ＨＣＶ病毒ＮＳ５ Ａ区部分基因片段并用直接测序法测序。与ＨＣＶ－Ｊ株及ＨＣＶ－河北株（ＨＣＶ－ＨＢ）比较核苷酸及氨基酸序列的同源性,根据α干扰素疗效分析ＨＣＶ１ｂ是否存在干扰素敏感决定区。     

人α—干扰素与乙型肝炎病毒前S2嵌合蛋白的表达？…

目的 重组表达人α－干扰素与乙型肝炎病毒前Ｓ２融合蛋白（ＩＦＮ－Ｐｒｅ Ｓ２）,探索治疗ＨＢＶ感染的特异性免疫药物。方法 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ０技术扩增出人ＩＦＮ－α２ｂ和ＨＢＶ Ｐｒｅ Ｓ２基因片段,分步克隆获取融合基因,构建ｐＢＶ－ＩＦＮ－Ｐｒｅ Ｓ２重组表达载体,转化Ｅ．ｃｏｌｉ后诱导表达ＩＦＮ－Ｐｒｅ Ｓ２融合蛋白。结果 在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达了相对分子质量为２７０００的目标蛋白,后者以     

乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及其表达

目的　为探讨 Ｈ Ｂ Ｖ Ｘ 基因在肝细胞癌（ Ｈ Ｃ Ｃ） 中的致瘤机理提供实验模型。方法　用限制性内切酶从ｐ Ｅｃｏｂ６ 上切下 Ｘ 基因读码框,克隆到ｐ Ｂ Ｋ Ｓ＋ 上,再将 Ｘ 片段插入ｐ Ｃ Ｅ Ｐ４ 的 Ｈｉｎｄ Ⅲ和 ＮｏｔⅠ位点间。将重组载体（ｐ Ｃ Ｅ Ｐ４ Ｘ） 和空载体（ｐ Ｃ Ｅ Ｐ４） 导入肝癌细胞株 Ｈｅｐ Ｇ２ 中,潮霉素选择培养, Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 鉴定其稳定表达。结果　构建的ｐ Ｃ Ｅ Ｐ４ Ｘ 质粒在 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞中有稳定表达。结论　本实验为进一步探讨 Ｈ Ｂ Ｖ Ｘ 基因在 Ｈ Ｃ Ｃ 中的致瘤机理提供了理想的实验细胞株。     

T细胞疫苗抗同种移植排斥反应的研究

应用Ｔ细胞疫苗于同种心脏移植的研究，用Ｃｏｎ Ａ和ＣＤ３单抗诱导受同种特异性抗原（Ｃ５７ＢＬ／６（Ｈ－２＾ｂ）小鼠脾细胞）免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ（Ｈ－２＾ｄ）小鼠，取后者脾细胞所制备的Ｔ细胞疫苗具有延长同种心脏移植物的存活期。受Ｔ细胞疫苗接种的ＢＡＬＢ／Ｃ（Ｈ－２＾ｄ）鼠脾细胞对经Ｃｏｎ Ａ激活或未激活的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠脾细胞皆表现出特异的强烈的增殖反应，而对同系脾细胞呈低的反应。Ｔ细胞疫苗表型分析     

c－erbB－2蛋白和表皮生长因子受体在肝脏病变中的表达

对１８４例乙型肝炎、肝硬变和肝细胞癌（ＨＣＣ）及２９例正常肝组织的标本作了ＡＢＣ法染色，观察其ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达情况。３６％（４８／１３４）的慢性肝炎、肝硬变和ＨＣＣ组织中有ＥＧＦＲ表达，主要定位于血窦内皮。良、恶性病变肝组织之间在ＥＧＦＲ表达强度上无显著差别，提示ＥＧＦＲ可能与慢性肝脏病变中血窦内皮的增生有关。在正常肝，仅少数标本（５／２９）中见到ｃ－ｅｒｂＢ－２微弱表达；在ＨＢＶ相关的慢性肝脏病变，所有标本中均检测到ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白，主要定位于肝小多角细胞（ＳＰＬＣ）、小细胞性不典型增生（ＳＣＤ）及小管状化生（ＤＭ）的肝细胞；ＨＣＣ细胞中ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白阳性较弱。这提示ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的活化与人ＨＣＣ发生有关。其作用机制可能是促进ＳＰＬＣ向ＳＣＤ的转化及促进ＳＣＤ的进展。ｃ－ｅｒｂＢ－２与ＨＢｘＡｇ表达的密切关联提示这种原癌基因的活化可能也与ＨＢＶＸ基因有关。     

ABC—ELISA检测人天然及重组γ—干扰素

采用生物素－亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附分析技术（ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ）检测人天然及重组γ－干扰素。以固相化兔多抗ＩｇＧ捕获待检样品中γ－干扰素，以具有中和γ－干扰素抗病毒活性的生物素化单抗作为检测抗体，再加ＡＢＣ复合物，用邻苯二胺显色。据已知不同浓度标准γ－干扰素显色后的ＯＤ值的标准曲线，判定待检品中γ－干扰素蛋白含量。所检γ－干扰素与抗病毒活性一致，与肿瘤坏死因子、白细胞介素－２（ＩＬ－２），α     

ABC－ELISA检测人天然及重组γ－干扰素

采用生物素－亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附分析技术（ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ）检测人天然及重组γ－干扰素。以固相化兔多抗ＩｇＧ捕获待检样品中γ－干扰素，以具有中和γ－干扰素抗病毒活性的生物素化单抗作为检测抗体，再加ＡＢＣ复合物，用邻苯二胺显色。据已知不同浓度标准γ－干扰素显色后的ＯＤ值的标准曲线，判定待检品中γ－干扰素蛋白含量。所检γ－干扰素与抗病毒活性一致，与肿瘤坏死因子、白细胞介素－２（ＩＬ－２），α、β－干扰素等无交叉显色反应；最低检测值为１００ｐｇ／ｍｌ（相当于抗病毒效价１～２Ｕ／ｍｌ）；可用于重组人γ－干扰素生产、纯化过程中的定性、定量分析以及血清γ－干扰素水平、人淋巴细胞γ－干扰素分泌量及ＬＡＫ和ＴＩＬ细胞等产生γ－干扰素水平的测定。