三氧化二砷对胃癌BGC-823细胞增殖及细胞周期的影响

[目的]探讨三氧化二砷（AS2O3）对胃癌BGC-823细胞增殖的抑制作用及对细胞周期的影响。[方法]应用MTT方法检测三氧化二砷对胃癌BGC-823细胞增殖的抑制作用，流式细胞仪进行细胞周期解析及凋亡检测．[结果]三氧化二砷对胃癌BGC823细胞具有杀伤作用，且呈时间-浓度依赖性抑制肿瘤细胞的增殖．72h抑制细胞50％增殖的药物浓度约为3．3μmol／L，与对照组比差异显著（P=0．0048）；5μmol／LAs2O3作用24h，细胞形态学可见典型的凋亡细胞及M期阻滞；流式细胞仪进行细胞周期解析结果提示，G2/M期细胞由正常对照的25％增加到46．3％，出现了明显的G2/M期阻滞，亚二倍体凋亡细胞由4％增加到18％。[结论]三氧化二砷抑制胃癌细胞的增殖．诱导细胞周期阻滞及凋亡。     

三氧化二砷对胃癌BGC-823细胞增殖及细胞周期的影响

[目的]探讨三氧化二砷（AS2O3）对胃癌BGC-823细胞增殖的抑制作用及对细胞周期的影响。[方法]应用MTT方法检测三氧化二砷对胃癌BGC-823细胞增殖的抑制作用，流式细胞仪进行细胞周期解析及凋亡检测．[结果]三氧化二砷对胃癌BGC823细胞具有杀伤作用，且呈时间-浓度依赖性抑制肿瘤细胞的增殖．72h抑制细胞50％增殖的药物浓度约为3．3μmol／L，与对照组比差异显著（P=0．0048）；5μmol／LAs2O3作用24h，细胞形态学可见典型的凋亡细胞及M期阻滞；流式细胞仪进行细胞周期解析结果提示，G2/M期细胞由正常对照的25％增加到46．3％，出现了明显的G2/M期阻滞，亚二倍体凋亡细胞由4％增加到18％。[结论]三氧化二砷抑制胃癌细胞的增殖．诱导细胞周期阻滞及凋亡。     

三氧化二砷对涎腺导管癌抑制作用的初步观察

目的观察三氧化二砷（As2O3）对人涎腺导管癌（Salivaryductcarcinoma）细胞的抑制作用,探索治疗人涎腺导管细胞癌的新途径。方法建立人涎腺导管癌细胞系,应用不同浓度As2O3在不同时间点作用人涎腺导管癌细胞株,以MTT和形态学分析法观察细胞的变化。结果不同浓度三氧化二砷在不同时间点对人涎腺导管癌细胞均有明娃抑制作用,并呈时间剂量依赖关系,癌细胞异形性逐渐消失,细胞凋亡现象明显,可见凋亡小体。结论As2O3对人涎腺导管癌细胞株具有显著的抑制增殖、诱导分化和促进凋亡作用。     

干扰素及三氧化二砷诱导淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞的研究

目的；分析梯度浓度的干扰素（IFN－α）及三氧化二砷（As2O3）对EB病毒感染的Burkitt淋巴瘤Raji细胞株和EB病毒阴性Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株直接作用。方法：以MTT法测定梯度浓度的IFN－α／As2O3对淋巴瘤细胞株增殖作用的影响，以膜联蛋白V（Annexin-V)法，DNA末端标记法，流式细胞术，电镜观察测定IFN－α对Raji,Daudi细胞株增殖周期的影响及凋亡诱导作用。结果：低浓度IFN－α对Raji,Daudi细胞增殖无明显抑制作用，高浓度IFN－α（10000U/mL)可 显著抑制2种细胞增殖，且有时间相关性。IFN－α作用细胞24－48h,G0/G1期细胞显著增多，S期细胞减少，72－96h细胞凋亡细胞明显增多，IFN－α和As2O3有显著协同作用，EB病毒感染的Raji细胞对IFN－α／As2O3的敏感性强于Daudi细胞。结论：IFN－α／As2O3可抑制淋巴瘤细胞增殖，使细胞阻滞在G0／G1期，进一步诱导凋亡坏死，IFN－α／As2O3作用有显著时间，剂量依赖性，对EB病毒感染的Raji细胞作用强于Daudi细胞。     

三氧化二砷诱导卵巢癌OVCAR-3细胞周期阻滞及凋亡

目的探讨As2O3对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响.方法采用MTT法及集落形成实验测定细胞的增殖活力,通过细胞形态学观察细胞分裂及凋亡,应用流式细胞仪进行细胞周期解析、凋亡及bcl-2蛋白表达的检测.结果As2O3呈剂量依赖性抑制OVCAR-3细胞增殖,抑制50%细胞生长的药物浓度(IC50)为2μmol/L.0.5～5μmol/L的As2O3作用7天,集落抑制率均在40%以上(P＜0.01).2μmol/L与5μmol/L的As2O3作用12 h后,细胞周期出现了G2/M期阻滞及亚二倍体凋亡峰,随着作用时间的延长,凋亡细胞随G2/M期细胞减少而逐渐增多.细胞形态学观察可见分裂期细胞及凋亡细胞明显增加.0.5～5μmol/L的As2O3均能下调bcl-2蛋白的表达.结论As2O3能够抑制卵巢癌OVCAR-3细胞的增殖,诱导M期阻滞及细胞凋亡.     

不同给药方式下三氧化二砷对T细胞淋巴瘤EL4细胞体内及体外抑制作用

背景与目的：体外实验证明,三氧化二砷（arsenictrioxide,As2O3）单药可抑制多种恶性淋巴瘤细胞的增殖,并呈时间依赖性和浓度依赖性。临床研究也提示,As2O3单药治疗多种病理亚型淋巴瘤有效。但目前As2O3的剂量、具体用法仍未确定。本实验研究不同给药方式As2O3对鼠源性T细胞淋巴瘤EIA细胞体内外的抗瘤作用,旨在了解As2O3不同给药方法对T细胞淋巴瘤疗效及不良反应。方法：MTT法检测8种浓度As2O3对EL4细胞的抑制作用,流式细胞仪分析、AnnexinV—FITC／PI双标记检测细胞凋亡,电镜观察凋亡形态变化。建立EIA细胞裸鼠移植瘤模型,观察不同方案腹腔注射As2O3对EIA裸鼠移植瘤的抑制作用及裸鼠的耐受情况。结果：与对照组相比,不同浓度As2O3对EL4细胞均存在直接抑制作用（P〈0．05）,作用72h时的IC50为1．28μmol／L。体内实验显示,4mg·（kg·d）^-1×7d与2mg·（kg·d）^-1×14d给药对裸鼠移植瘤的抑制作用相近,抑瘤率分别为58．8％和55．6％（P〈0．351）。移植瘤组织凋亡细胞增多并可见凋亡小体生成。毒性表现主要为急性肝损害的病理学变化。结论：As20,体外可抑制EIA细胞增殖并可以诱导细胞凋亡,在总剂量相同的情况下,4mg·（kg·d）^-1×7d与2mg·（kg·d）^-1×14d的给药方式对裸鼠移植瘤生长的抑制作用近似。     

三氧化二砷对大肠癌LoVo细胞的影响及其与5-Fu的协同作用

目的：观察三氧化二砷(Arsenic Trioxide，As2O3)对大肠癌LoVo细胞的体外杀伤作用，并研究其和5-氟脲嘧啶(5-FU)的协同作用。方法：用MTT法检测细胞的体外生长抑制情况。用光镜、电镜观察细胞的形态学变化，流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果：As2O3对LoVo细胞的抑制作用随着浓度和作用时间的增加而增大，通过光镜、电镜可观察到细胞的凋亡。经流式细胞仪检测As2O3作用后的肿瘤细胞，G0/G1细胞从42．3％下降到31．3％，S期细胞从39％上升到62％。药物作用48h，As2O3(0．3mg／L)组抑制率为30．38％，而联合治疗组抑制率增至73．75％。结论：As2O3对LoVo细胞具有杀伤作用，其对LoVo细胞生长抑制的影响主要作用于G0／G1期细胞。As2O3与5-FU对大肠癌LoVo细胞具有协同作用。     

三氧化二砷对喉癌Hep-2细胞增殖的影响

目的 观察三氧化二砷（As2O3）对喉癌Hep-2细胞株增殖的影响及细胞周期的改变。方法 体外培养的Hep-2细胞与不同浓度的As2O3作用24、48、72小时，通过MTT还原法检测细胞的生长抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率并进行细胞周期分析。结果 As2O3可有效抑制Hep-2细胞的生长，呈时间和浓度依赖性特点。2μmol/L As2O3作用24h时，S期细胞比例增高，72小时后，S期细胞明显下降，细胞大量凋亡。As2O3 在低浓度时，阻滞细胞通过S期，高浓度时诱导S期细胞凋亡。结论 As2O3可抑制Hep-2细胞的增殖，与细胞周期阻滞有关。     

三氧化二砷对人肝癌细胞生长增殖的影响

目的观察三氧化二砷（As2O3）对人BEL7402肝癌细胞株的作用及其机制。方法采用MTF法检测As2O3对BEL7402细胞的生长抑制率;流式细胞仪测定经不同浓度As2O3处理后的BEL7402细胞周期及增殖细胞核抗原（PCNA）变化,同时Annexin V—FITC／PI双染法检测细胞凋亡。结果三氧化二砷可显著抑制BEL7402细胞生长,且剂量-效应关系显著（r=0．9650,P〈0．01）,半数抑制浓度（IC50）为4．93μmol／L;BEL7402经As2O3处理后可发生凋亡。As2O3能显著下调PCNA蛋白表达（P〈0．01）,并使细胞周期阻滞在G2／M期。结论三氧化二砷可有效抑制人肝癌BEL7402细胞生长增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡、下调PCNA表达及阻滞细胞周期有关。     

三氧化二砷对人肝癌HepG2细胞内活性氧水平的影响

[目的]探讨三氧化二砷（As2O3）对人肝癌细胞生长抑制和诱导凋亡作用及其对细胞内活性氧（ROS）水平的影响。[方法]用MTT法、DNALadder检测及流式细胞术等观察As2O3对人肝癌细胞株HepG2的生长抑制和诱导凋亡作用及细胞内ROS的变化。[结果]As2O3能明显抑制HepG2细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性。DNALadder检测示,121μmol／L As2O3处理HepG2细胞48h开始出现DNALadder条带。流式细胞仪分析显示As2O3处理人肝癌细胞HepG2 12、24、36h后细胞内ROS水平较对照组明显升高（P〈0．01）,且呈时间依赖性。[结论]As20,可通过抑制人肝癌细胞HepG2增殖和提高细胞内ROS水平诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。     

雄黄抑制卵巢癌细胞株SKOV3增殖和诱导凋亡的体外研究

目的 研究中药雄黄主要成分As₄S₄对卵巢癌细胞株SKOV3细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法 不同浓度As₄S₄(20 μmol/L、40 μmol/L、60 μmol/L、80 μmol/L),处理SKOV3细胞24 h,48 h,72 h后,透射电镜观察细胞形态变化;MTT法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化;RT-PCR法和Westernblot法检测As₄S₄对卵巢癌细胞株SKOV3细胞Bcl-2和Bax mRNA和蛋白的表达影响。结果 不同浓度As₄S₄处理的卵巢癌细胞株SKOV3,细胞增殖受到抑制,作用呈明显的浓度、时间依赖性,差异有统计学意义(P＜0.01);流式细胞仪进行细胞周期DNA成分分析结果显示,随着As₄S₄浓度的增加SKOV3细胞G₀/G₁期细胞百分比明显降低,S期细胞百分比上升;Bcl-2的表达随药物作用浓度的增加而递减,Bax的表达随药物作用浓度的增加而增强。结论 四硫化四砷具有抑制SKOV3细胞生长增殖的作用,其作用机制与诱发细胞凋亡和调节Bcl-2与Bax表达有关。     

藤梨根提取物对人胃癌MKN－45细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨太白山藤梨根提取物（Radix Actinidiae extractive,RAE）在体外对胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响。方法：用0．01—100μg／ml浓度范围内的RAE和胃癌MKN-45细胞共培养24、48、72、96小时,采用MTF法检测RAE对MKN-45细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测其对MKN-45细胞凋亡及细胞周期分布的影响;DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果：RAE在体外能够显著抑制胃癌MKN-45细胞的增殖,且呈现浓度和时间依赖性;RAE对胃癌细胞的作用表现为周期特异性,使细胞阻滞于Go／G1期,进一步诱导细胞凋亡。对照组凋亡率为0．53％,1μg／ml、10μg／ml、100μg／ml浓度的RAE干预胃癌细胞48小时后均出现凋亡峰,细胞凋亡率分别为3．27％、8．97％、12．6％。DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,不同浓度RAE处理的细胞样品中均可看到梯形凋亡条带,并呈现浓度依赖性。结论：RAE在体外对人胃癌MKN-45细胞有显著的抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡作用,其作用机制可能是使胃癌细胞周期阻滞于G0／G1期。     

三氧化二砷对膀胱癌细胞BIU-87耐药相关基因的影响

目的：探讨三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3）对耐羟基喜树碱的膀胱癌细胞株BIU-87/HCPT耐药性逆转的机制。方法：用As2O3与羟基喜树碱联合处理BIU-87/HCPT细胞后,用四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡、P-gp、MRP1、GST-π和生存素（survivin）表达的变化。结果：As2O3与羟基喜树碱联合处理耐药膀胱移行细胞癌株BIU-87/HCPT细胞后,细胞生长受到明显抑制。单独应用As2O3的凋亡率为11.07%,As2O3联合羟基喜树碱后的凋亡率为18.23%,凋亡细胞百分比较对照组明显增多,As2O3明显增加羟基喜树碱的作用（P〈0.05）。As2O3使P-gp、MRP 1、GST-π和sur-vivin的表达明显减少,且均具有浓度依赖性（P〈0.05）。结论：As2 O3可减少耐药相关基因的表达,部分逆转膀胱癌细胞的耐药性,促进凋亡,且呈现浓度依赖性。     

PTEN在三氧化二砷诱导肝癌细胞(SMMC-7721)凋亡中的作用

目的 研究PTEN在三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导肝癌细胞凋亡中的作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测As2O3对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪定量检测各组细胞的凋亡率;Western blot方法检测各组细胞中PTEN蛋白的表达情况;用PTEN siRNA转染SMMC-7721细胞,观察其对As2O3诱导细胞凋亡作用的影响.结果 As2O3能显著抑制SMMC-7721细胞存活率,其抑制率呈剂量依赖关系;As2O3剂量依赖性诱导肝癌细胞凋亡;Western blot检测显示As2O3明显增加细胞中PTEN蛋白的表达;PTEN siRNA转染可减弱As2O3对SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用.结论 As2O3诱导SMMC-7721细胞凋亡可能与其诱导PTEN表达有关.     

亚砷酸诱导人鼻咽癌细胞中p16基因表达的研究

目的 研究亚砷酸( As2O3)诱导鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)CNE- 2Z细胞株中抑癌基因p16的表达.方法 体外培养的CNE-2Z细胞分别加入不同浓度的亚砷酸,并作用于不同时间.用终浓度为2μmol/L、1 μmol/L、0.5μmol/L的As2O3加入鼻咽癌CNE-2...     

川芎嗪联合三氧化二砷逆转K562/ADM细胞多药耐药的实验研究

目的探讨川芎嗪与三氧化二砷联合逆转耐药人红白血病细胞株K562/ADM多药耐药的效果。方法采用WST-8法测定细胞的药敏性及抗药性逆转,应用流式细胞术检测细胞凋亡、细胞内ADM浓度、P-gp蛋白的表达,采用免疫细胞化学二步法检测细胞GST-π表达。结果非细胞毒性浓度的TMP（20μg/ml）及As2O3（0.5μmol/L）可降低ADM对K562/ADM细胞的IC50（P〈0.05）,2种药物联合应用对ADM的逆转倍数明显高于两者单独应用（P〈0.05）,而且也高于两者单独应用之和;两者以非细胞毒性浓度联合应用提高K562/ADM细胞内ADM浓度和细胞凋亡百分率,作用大于两药单独应用,并且明显下调细胞P-gp和GST-π表达（P〈0.05,P〈0.01）。结论非细胞毒性剂量的TMP和As2O3,均可部分逆转有多药耐药表型的细胞株K562/ADM对阿霉素的耐药性,两者联合应用效果优于单独应用,具有协同作用,其机制可能与下调P-gp和GST-π表达有关。     

三氧化二砷对骨肉瘤细胞株MG63/dox多药耐药的逆转作用及其机制

目的 探讨三氧化二砷（As2O3）对骨肉瘤阿霉素（ADM）耐药细胞株MG63/dox的逆转作用及其机制。方法 采用不同浓度ADM（1～1000 ng／ml）和As2O3（0.25～16 μmol／L）分别单独作用于MG63和MG63/dox细胞48 h,并选取2 μmol／L As2O3联合不同浓度ADM（1～1000 ng／ml）作用于MG63/dox细胞24、48、72 h,同时设不加任何药物处理的对照组。应用CCK-8法检测两种药物对MG63和MG63／dox细胞增殖的影响,流式细胞术检测2 μmol／L As2O3、200 ng／ml ADM单独或联合处理48 h后MG63／dox细胞的周期分布和凋亡率,蛋白免疫印迹法检测2 μmol／L As2O3、200 ng／ml ADM单独或联合处理48 h后MG63／dox细胞中P-gp、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果 As2O3和ADM单药作用于MG63/dox细胞48 h,细胞增殖均未受到影响;4、8、16 μmol/L As2O3和100、200、400、500、1000 ng/ml ADM分别作用于MG63细胞48 h,细胞增殖明显受到抑制（P＜0.05）。As2O3联合ADM抑制MG63／dox细胞增殖的作用明显高于ADM单药组和对照组（P＜0.05）,且抑制作用呈时间依赖性。与对照组相比,两药联合处理组的细胞凋亡率升高,G0／G1期细胞比例降低,G2／M期细胞比例升高,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）。两药联合处理组MG63／dox细胞中Bax蛋白表达水平明显升高,而P-gp和Bcl-2蛋白表达水平明显降低,与对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 As2O3联合ADM能够抑制骨肉瘤耐药细胞MG63／dox的增殖,这一作用可能与诱导细胞凋亡、上调Bax表达以及下调P-gp和Bcl-2表达有关。     

TFPI-2基因对Panc-1细胞凋亡的影响

[目的]研究TFPI-2基因对胰腺癌细胞系Panc-1细胞增殖及凋亡的影响。[方法]测定Panc-1-TFPI-2、Panc-1-V和Panc-1-P三组细胞的生长曲线．DNA片段化实验检测细胞凋亡，并用流式细胞仪分析三组细胞的细胞增殖、细胞周期情况。[结果]Panc-1-TFPI-2细胞同Panc-1-V和Panc-1-P细胞相比，细胞生长缓慢，细胞生长受到抑制，被阻滞于G0～G1期；DNA片段化实验显示Panc-1-TFPI-2细胞呈现凋亡细胞特有的“梯状”条带．而Panc-1-V和Panc-1-P细胞无明显“梯状”条带：流式细胞仪分析显示早期Panc-1-TFPI-2细胞凋亡率（6．93％± 0．53％）较Panc-1-V（3．01％± 0．39％）和Panc-1-P细胞凋亡率（3．52％±0．41％）增加，有显著性差异（P〈0．05）。[结论]TFPI-2能够抑制胰腺癌细胞生长、诱导胰腺癌细胞凋亡．可能具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。     

三氧化二砷对尤文肉瘤细胞迁移和侵袭能力抑制作用的体外研究

 目的　研究三氧化二砷在体外对尤文肉瘤细胞系迁移和侵袭能力的抑制作用 。方法　通过噻唑蓝（MTT）实验选择对尤文肉瘤细胞系（A-673、RD-ES）无毒性的三氧化二砷浓度（＜2 μmol／L）后,Transwell迁移和侵袭实验检测三氧化二砷作用下尤文肉瘤细胞的迁移和侵袭能力。Western blot实验及明胶酶谱实验检测PI3K-AKT通路相关作用蛋白及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达变化。结果　迁移和侵袭穿过Transwell基底膜的尤文肉瘤细胞的数量随着三氧化二砷浓度的增加而逐渐降低,经不同浓度三氧化二砷处理过的A-673迁移平均数量分别占未处理组的54.3 %、49.0 %和17.0 %,差异有统计学意义（F＝112.78,P＜0.01）,在侵袭实验中分别为52.7 %、32.3 %和10.3 %,差异有统计学意义（F＝183.76,P＜0.01）;经过不同浓度三氧化二砷处理后的RD-ES细胞迁移平均数量分别占未处理组的46.0 %、39.0 %和8.0 %,差异有统计学意义（F＝408.25,P＜0.01）,在侵袭实验中分别为58.7 %、22.3 %和9.0 %,差异有统计学意义（F＝373.25,P＜0.01）。PI3K-AKT通路相关蛋白和MMP-9表达水平下降。结论　低浓度三氧化二砷可以通过下调PI3K-AKT信号通路的表达来抑制尤文肉瘤细胞系的转移能力。