洛沙坦对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及Fas和Fas-L表达的影响

目的：探讨血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂（AT1Ra）对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响。方法：单侧肾切除大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病模型,每日灌胃给予AT1Ra洛沙坦（40mg/kg),共12周。采用原位末端标记法检测肾脏细胞凋亡情况,流式细胞术和免疫组织化学检测肾皮质Fas和Fas-L表达。结果：糖尿病组较对照组肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多,Fas和Fas-L的表达亦显著增强;洛沙坦治疗组糖尿病组凋亡细胞数减少,Fas和Fas-L的表达减弱。结论：洛沙坦可能通过影响凋亡相关蛋白Fas和Fas-L的表达而抑制肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用。     

洛沙坦对糖尿病大鼠肾组织一氧化氮水平的影响

目的 研究洛沙坦对糖尿病大鼠肾组织一氧化氮（NO）水平的影响。方法 雄性Wistar大鼠分为3组,A组（11只）为正常对照组,B组（11只）为糖尿病未干预组,C组（9只）为糖尿病大鼠洛沙坦干预组。以链脲菌素制备糖尿病大鼠模型,大鼠饲养18周后取出肾脏检测诱导型NO合成酶（iNOS）mRNA的表达,电镜检测大鼠肾小球基底膜厚度及系膜基质密度（系膜基质面积/系膜面积）。收集24h尿测定尿白蛋白排泄（UAE）及肌酐,并心脏内取血检测血肌酐。mRNA表达采用RT-PCR,以β-actin作为内对照。UAE测定采用大鼠白蛋白特异的酶免疫分析试剂盒。结果 肾组织iNOSmRNA表达在B组大鼠（0.30±0.12）显著高于A组（0.12±0.04,P<0.01）,C组（0.25±0.14）与B组比较差异无显著性意义（P>0.05）。肾组织NO水平在B组大鼠[（0.56±0.20）μmol/mg肾组织]显著低于A组[（1.05±0.25）μmol/mg肾组织]和C组[（1.13±0.62）μmol/mg肾组织,P均<0.01]。UAE在B组大鼠[（2.18±1.98）mg/d]显著高于A组[（0.41±0.47）mg/d]和C组[（0.65±0.89）mg/d,P均<0.05]。肌酥清除率在B组大鼠[（19.75±9.60）ml/d]显著低于A组[（59.63±22.75）ml/d]和C组[（40.88±25.57）ml/d,P均<0.05]。基底膜厚度在B组大鼠[（531.6±107.6）nm]显著高于A组[（312.4±25     

血管紧张素Ⅱ和洛沙坦对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ及其Ⅰ型受体(AT1)拮抗剂洛沙坦(losartan)对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法体外分离培养增生性瘢痕成纤维细胞,在不同浓度的血管紧张素Ⅱ和洛沙坦作用下,采用MTT法和3H-脯氨酸掺入释放法分别检测成纤维细胞增殖和生成胶原的情况。结果血管紧张素Ⅱ在浓度为1×10-7~1×10-4mol/L时,成纤维细胞的增殖和合成胶原明显增多(P<0.05);血管紧张素Ⅱ浓度与胶原量呈正相关。洛沙坦在浓度为1×10-6~1×10-4mol/L时,成纤维细胞增殖和胶原生成量显著减少(P<0.05);且浓度与胶原生成量呈负相关。结论血管紧张素Ⅱ可以促使成纤维细胞增殖并产生大量的胶原;洛沙坦通过拮抗AT1后,抑制细胞增殖、胶原合成量显著减少,提示血管紧张素Ⅱ在促使增生性瘢痕的发展过程中起着重要的作用,AT1的拮抗剂有望在增生性瘢痕防治中发挥重要作用。     

血管紧张素Ⅱ和洛沙坦对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ及其Ⅰ型受体(AT1)拮抗剂洛沙坦(losartan)对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响.方法 体外分离培养增生性瘢痕成纤维细胞,在不同浓度的血管紧张素Ⅱ和洛沙坦作用下,采用MTT法和3H-脯氨酸掺入释放法分别检测成纤维细胞增殖和生成胶原的情况.结果 血管紧张素Ⅱ在浓度为1×10-7～1×10-4mol/L时,成纤维细胞的增殖和合成胶原明显增多(P＜0.05);血管紧张素Ⅱ浓度与胶原量呈正相关.洛沙坦在浓度为1×10-6～1×10-4mol/L时,成纤维细胞增殖和胶原生成量显著减少(P＜0.05);且浓度与胶原生成量呈负相关.结论 血管紧张素Ⅱ可以促使成纤维细胞增殖并产生大量的胶原;洛沙坦通过拮抗AT1后,抑制细胞增殖、胶原合成量显著减少,提示血管紧张素Ⅱ在促使增生性瘢痕的发展过程中起着重要的作用,AT1的拮抗剂有望在增生性瘢痕防治中发挥重要作用.     

氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠肾小管上皮细胞氧化应激反应的作用

目的 探讨血管紧张素I型受体阻断剂氯沙坦对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠肾小管上皮细胞氧化应激反应及转化生长因子β1(TGF-β1)产生的影响。 方法 以大鼠肾小管上皮细胞株（NRK-52E）为研究对象,分别给予氯沙坦（10-5 mol/L）和（或）NADPH氧化酶抑制剂联二亚苯碘锚（DPI,10-5 mol/L）预处理1 h后再加入AngⅡ（10-7 mol/L）刺激24 h,同时设立空白培养基作为对照组。实时定量PCR和Western印迹法分别检测4组细胞NADPH 氧化酶p22phox、p47phox、Nox-4 mRNA和蛋白水平及TGF-β1 mRNA水平。用2,7- 二氯荧光素双乙酸盐（H2DCF-DA）作为荧光探针,采用荧光分光光度仪检测细胞内活性氧（ROS）的水平。应用比色法测定细胞上清液中超氧化物歧化酶（SOD）水平。 结果 AngⅡ（10-7 mol/L）刺激细胞15 min后开始产生大量的ROS,至60 min达平台期。单纯AngⅡ刺激1 h后,NRK-52E细胞上清液中SOD水平显著低于对照组（27.31 μU/L 比48.29 μU/L,P < 0.01）;经氯沙坦预处理1 h后再加入AngⅡ刺激1 h细胞上清液中SOD水平升高至36.37 μU/L,与AngⅡ组差异有统计学意义（P < 0.01）。单纯AngⅡ刺激NRK-52E细胞24 h可显著上调NADPH氧化酶p22phox、p47phox和Nox-4 mRNA和蛋白水平,其mRNA水平分别为对照组的5.57倍、5.55倍和9.41倍（均P < 0.01）,蛋白水平分别为对照组的4.53倍、4.17倍和6.50倍（均P < 0.01）。经氯沙坦干预后,p22phox、p47phox和Nox-4 mRNA水平分别为对照组的2.71倍、2.18倍和5.23倍（均P < 0.01）,蛋白水平分别为对照组的3.20倍、2.30倍和4.30倍（均P < 0.01）。AngⅡ刺激细胞24 h后TGF-β1 mRNA表达也显著增多,为对照组的4.36倍（P < 0.01）,氯沙坦处理细胞后TGF-β1 mRNA水平为对照组的1.57倍。 结论 氯沙坦通过抑制NADPH氧化酶的表达和增加SOD的表达减少ROS的产生,并能通过减少ROS产生,抑制AngⅡ诱导的TGF-β1 mRNA水平增高。     

高盐饮食对自发性高血压大鼠肾髓质环氧化酶2表达的影响

目的观察自发性高血压大鼠（SHR）肾髓质环氧化酶2（COX2）的表达以及不同盐负荷状态下COX2的变化。方法6周龄SHR大鼠及其对照Wistar-Kyoto（WKY）大鼠各12只，随机分为低盐组和高盐组（WKY-LS组，WKY-HS组，SHR-LS组，SHR-HS组），分别给予高盐（含8％NaCl）或低盐（含O．04％NaCl）饮食3d。观察基础状态及不同盐负荷前后大鼠尾动脉血压、24h尿量（UV）、尿钠（UNa）以及COX2代谢物6k．PGFlα排泄情况。应用免疫组化和Western印迹的方法检测肾髓质COX2蛋白表达。结果给予不同盐负荷3d后，SHR-Hs组血压显著升高[（12．59±5．13）比（11．94±3．76）mmHg，P〈0．05]。基础状态及不同盐负荷状态下，SHR大鼠24hUV、UNa排泄与WKY大鼠相比均显著下降（P均〈O．05）。与各自基础状态相比，低盐饮食后两种大鼠的UV和UNa排泄显著降低；高盐饮食后则显著增加（P均〈O．05）。SHR和WKY大鼠尿COX2代谢物6k-PGFlα的排泄对盐负荷的反应也类似，高盐组均较低盐组显著增加（P〈0．05），但同样盐负荷状态下两组之间差异无统计学意义。基础状态下及低盐饮食SHR与WKY大鼠肾髓质COX2表达差异无统计学意义；给予高盐饮食后WKY大鼠肾髓质COX2表达增加2．06倍，SHR大鼠增加1．87倍，但两种大鼠之间差异无统计学意义。结论SHR大鼠肾脏水盐排泄功能受损，高盐饮食后血压进一步升高，水钠潴留，同时伴有肾髓质COX2表达升高，但不同盐负荷对SHR大鼠肾髓质COX2表达的影响与WKY大鼠相同。提示肾髓质COX2参与了水盐代谢的调节，且在SHR大鼠中表达正常，但并非该动物模型高血压形成及水钠潴留的关键因素。     

洛沙坦对环孢素A慢性肾毒性大鼠核因子κB的影响

目的 探讨洛沙坦对环孢素A(CsA)慢性肾毒性保护的分子机制。方法 雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为3组：对照组、肾毒性组、洛沙坦组。皮下注射 CsA 4周建立 CsA慢性肾毒性大鼠模型，洛沙坦治疗组同时给予CsA和洛沙坦(10 mg/kg)。凝胶电泳迁移率试验检测核因子（NF）κB的活性，免疫印迹法检测其抑制蛋白IκB和转化生长因子(TGF-β1)诱导基因βig-h3的表达。结果 与对照组比较，CsA慢性肾毒性组NF-κB的结合活性明显增加 [(201±15)％比（104±7）％，P < 0.01]；IκB的表达减少[(19±25)％比(105±10)％，P < 0.01)]；βig-h3 的表达上调 [(300±35)％比(105±15)％，P < 0.01]。洛沙坦治疗使上述指标均逆转。 结论 洛沙坦对环孢素A慢性肾毒性的保护作用与减少NF-κB的活性和致纤维化因子βig-h3的表达有关。     

苯那普利对糖尿病大鼠肾组织p27蛋白表达的影响

p27是一种细胞周期激酶抑制剂(cyclindependent-kinaseinhibitors,CKIs),糖尿病肾脏组织中p27蛋白表达明显增加并且与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导的肾脏肥大有关。血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)对糖尿病具有明显的肾脏保护作用犤1犦,我们通过观察ACEI对糖尿病大鼠肾组织p27蛋白表达的影响,探讨ACEI保护糖尿病肾脏的作用机制。一、材料和方法1.动物模型及分组:雄性Wistar大鼠18只,11～12周龄,适应性喂养1周后,随机分为正常对照组(C),糖尿病组(D),糖尿病苯那普利治疗组(DL),每组6只。D、DL两组大鼠按60mg/kg一次性腹腔注射STZ(Sigma…     

环氧化酶2 mRNA在前列腺癌组织中的表达

目的:探讨环氧化酶2(COX-2)mRNA在前列腺癌(PCa)组织中的表达及其意义。方法:采用RT-PCR方法检测32例PCa组织中COX-2 mRNA的表达并测定COX-2/GAPDH的比值,7例正常前列腺组织作为对照。结果:7例正常前列腺组织无COX-2 mRNA表达。COX-2/GAPDH与PCa G leason评分、分期呈正相关(P均<0.05)。结论:COX-2在PCa的发生发展中起重要的正性调节因子的作用。COX-2与PCa的恶性程度和进展有关,可作为判断PCa预后的指标。     

洛沙坦对肾大部分切除肾功能衰竭大鼠心脏的保护作用

目的探讨洛沙坦对肾大部分切除肾功能衰竭(肾衰)大鼠心脏的保护作用。方法肾大部切除制备肾衰模型(RF组),治疗组(RF Los组)洛沙坦剂量为10mg·kg-1·d-1灌胃,对照组(Sham组)用生理盐水灌喂。第12周观察实验动物心脏的有关变化。结果RF组大鼠动脉收缩压显著升高,心肌细胞肥大,心肌间质纤维化,而RF Los组收缩压得到控制,心肌细胞肥大和心肌间质纤维化程度明显减轻。RF Los组血管紧张素Ⅱ-1型受体(AT1R)mRNA的表达则较RF组显著下调(P<0.05)。结论洛沙坦通过阻断AT1R抑制肾素-血管紧张素系统(RAS)而具有明显的降压及防治肾大部分切除肾衰大鼠左心室肥厚和心肌间质纤维化的作用。     

雷帕霉素加重蛋白负荷肾病大鼠肾脏的损害及氯沙坦的保护作用

目的 观察雷帕霉素对蛋白负荷肾病大鼠肾脏组织和肾功能的影响及氯沙坦的保护作用，并探讨相关机制。 方法 采用牛血清蛋白（BSA）诱导Wistar雌性大鼠建立蛋白负荷的肾病大鼠模型，根据处理不同分成模型对照组、雷帕霉素组（单纯使用雷帕霉素，Rapa组）和氯沙坦组（同时使用雷帕霉素和氯沙坦）。检测不同时间点各组大鼠的尿蛋白量（24 h）和肾功能水平，并对肾组织进行光镜和电镜检查。 结果 实验第7 天，Rapa组和氯沙坦组大鼠尿蛋白量（24 h）均显著高于模型组（均P < 0.05），但氯沙坦组大鼠尿蛋白量（24 h）较Rapa组有明显缓解（P < 0.05）。实验第14天，Rapa组大鼠尿蛋白量（24 h）仍显著高于模型组（P <0.05），而氯沙坦组与模型对照组间的尿蛋白量（24 h）差异已无统计学意义。肾组织光镜检查显示Rapa组大鼠肾小管管腔中的蛋白管型明显增加；而氯沙坦组的蛋白尿和蛋白管型较Rapa组有明显减少；电镜结果显示Rapa组肾脏可见明显的肾小球局灶性足突融合。 结论 雷帕霉素增加蛋白负荷肾病大鼠的蛋白尿水平，其主要机制可能与雷帕霉素损伤肾小球足细胞后导致肾小球滤过屏障的改变有关；氯沙坦可以减轻雷帕霉素所致的大量蛋白尿。     

Effect of high salt diet on the renal medullary cyclooxygenase 2 expression

Objective To examine the effect and mechanism of high salt diet on the renal medullary cyclooxygenase 2 (COX2) expression and urinary sodium excretion. Methods Thirty male C57BL/6j mice were divided into four groups: (1) normal salt diet group (0.4%NaCl, n=5); (2) high salt diet group (8% NaCl, n=5); (3) Bortezomib+normal salt diet group (n=10); (4) Bortezomib+high salt diet group (n=10). The different groups were pre-treated with saline or bortezomib，followed by normal salt diet or high salt diet for three days. All the mice were maintained on metabolic cage at the last day and allowed free access to water. Twenty-four hours urine was collected. Body weight, urine volumes were documented. At the end of experiments, mice were sacrificed under anesthesia and the kidneys were harvested for Western blotting and immunohistochemistry. The transgenic mice carrying a luciferase reporter driven by an NF-κB response promoter, HIV long terminal repeat (LTR) (HLL mice) were used to explore the effect of high salt diet on renal medullary NF-κB activity. HLL mice were fed with normal salt diet or high salt diet for 3 days, after which renal medullary luciferase activity was determined using a commercial luciferase assay kit. Luciferase activity was quantified with a luminometer and adjusted for the total amount of proteins. The cellular location of NF-κB was examined using immunohistochemistry of NF-κB p65 staining. Results (1) Western blotting results showed high salt diet significantly increased the COX2 expression in the renal medulla of C57BL/6j mice (P﹤0.05). (2) High salt diet significantly increased NF-κB luciferase reporter activity in the HLL mice renal medullary tissues when compared to normal salt diet (P﹤0.05). The immunohistochemistry of NF-κB p65 showed the expression of NF-κB was mainly in the renal interstitial cells. (3) Western blotting results showed bortezomib inhibited the renal medullar COX2 expression induced by high salt diet (P﹤0.05). (4) Bortezomib decreased the urinary sodium excretion of high salt diet mice (P﹤0.05), but had no change on urine volume. Conclusions High salt diet induce renal medullary COX2 over-expression and activate the activation of NF-κB in renal medullary. Bortezmoib can inhibit the renal medullar COX2 expression induced by high salt diet. The NF-κB pathway activation may involve in the regulation of renal medullar COX2 expression by high salt diet.     

血管紧张素Ⅱ灌注诱导大鼠肾脏血管紧张素转换酶2表达改变

目的 研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)灌注后大鼠肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2)表达的改变及其意义。 方法 雄性SD大鼠随机分为AngⅡ灌注组(400 ng&#8226;kg-1&#8226;min-1)、生理盐水灌注组和健康对照组，每组6只。测定28 天内大鼠血压及尿蛋白量变化。于第28天处死动物取肾，观察组织学改变，并用免疫组化、RT-PCR及Western印迹法检测ACE2表达及分布变化；凝胶电泳迁移率分析法(EMSA)检测核因子(NF)-κB的DNA结合活性变化。 结果 (1) AngⅡ灌注组大鼠血压升高，并出现明显蛋白尿。AngⅡ灌注后第28天，部分肾小球出现轻中度系膜增生，少数有节段性硬化；部分肾小管上皮细胞变性、坏死或萎缩，间质灶性炎性细胞浸润。(2) 健康大鼠肾脏ACE2主要分布于肾小管，以近端肾小管刷状缘分布最多。AngⅡ灌注后第28天，肾皮质ACE2 mRNA及蛋白表达均明显下降(P均< 0.05)，NF-κB结合活性显著增加(P < 0.05)。相关分析表明，ACE2表达与NF-κB结合活性之间呈负相关(r = -0.64，P < 0.01)。 结论 AngⅡ灌注可致大鼠肾脏ACE2表达明显下降，后者与肾损害的程度密切相关。肾脏ACE2表达下降可能是AngⅡ引起肾损害的重要机制     

氯沙坦对自发性2型糖尿病KKAy小鼠肾小球蛋白表达谱的影响

目的 利用比较蛋白质组学双向电泳技术研究体系来观察血管紧张素受体拮抗剂(ARB)氯沙坦对自发性2型糖尿病KKAy小鼠肾小球蛋白表达谱的影响.方法 8周龄自发性2型糖尿病KKAy小鼠随机分为氯沙坦治疗组(饮用水中喂入氯沙坦粉末10 mg+kg-1·d-1)和非治疗组;8周龄C57BL/6小鼠作为正常对照组.饲养12周后,经胸主动脉磁珠灌流分离肾小球,提取肾小球蛋白.DIGE最小荧光标记法标记,行二维荧光差异凝胶电泳.应用Typhoon多功能成像系统扫描凝胶,DeCyder 2D差异分析软件进行图像分析.采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达蛋白质.结果 KKAy小鼠的体质量、血糖和尿白蛋白排泄率较正常对照C57BL/6小鼠显著升高(均P＜0.05),氯沙坦治疗显著改善2型糖尿病KKAy小鼠尿白蛋白肌酐比[(539.71±100.23)mg/g比(728±177.19) mg/g]、肾小球基底膜增厚和系膜基质增生等肾脏病理损害,而对血糖无影响.通过DeCyder 2D差异分析软件,发现KKAy氯沙坦治疗组与KKAy非治疗组肾小球内表达差异大于1.1倍的蛋白质斑点62个.经肽质量指纹图分析,鉴定出41种蛋白质.其中表达上调的蛋白28种,包括甘油激酶、亚硫酸盐氧化酶、甘氨酸脒基转移酶、腺苷高半胱氨酸酶等;表达下调的蛋白质13种,包括3-巯基丙酮酸硫基转移酶、ATP合酶亚单位d、60 000热休克蛋白、线粒体应激蛋白70(又名75 000葡萄糖调节蛋白,GRP75)等.有6种蛋白在20周龄KKAy小鼠和C57BL/6小鼠肾小球内存在差异表达,氯沙坦治疗抑制了其在糖尿病状态下的表达变化,包括丙酮酸脱氢酶复合物的二氢硫辛酰赖氨酸残基乙酰基转移酶组分、琥珀酰辅酶A连接酶[GDP-形成]亚单位β、ATP合酶亚单位d、GRP75、核苷二磷酸盐结合部分X模体19和硒结合蛋白1.结论 氯沙坦可明显减轻KKAy小鼠尿白蛋白排泄率和肾脏病理损害;可抑制糖尿病状态下肾小球ATP合酶亚单位d、GRP75、硒结合蛋白1等蛋白的表达变化;可能通过减少线粒体活性氧簇产生,抑制氧化应激反应发挥其肾脏保护作用.     

食管癌组织中环氧化酶2表达与微淋巴管密度的关系及其临床意义

目的 探讨食管癌组织中环氧化酶2（COX-2）表达与微淋巴管密度（MLD）的关系及其与食管癌临床病理特征和预后的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测100例食管鳞癌中COX-2的表达,同时以D2-40为标记物,检测食管鳞癌组织MLD.对患者进行随访,分析COX-2表达和MLD与食管癌预后的关系.结果 COX-2高表达的73例食管癌组织中MLD值为99.71±39.62,明显高于COX-2低表达（23例）和无表达（4例）者（80.22±30.36, P＜0.01）.COX-2的表达与本组食管癌患者临床病理特征无关（均P＞0.05）;MLD与肿瘤浸润深度和淋巴结转移有关（P＜0.05,P＜0.01）.本组患者中76例接受了随访,中位生存期为25.5个月（7～55个月）.多因素预后分析结果显示,COX-2表达、MLD、肿瘤组织学分级及淋巴结转移是影响本组食管癌患者预后的独立危险因素.结论 COX-2在食管癌中的表达与淋巴管生成有着密切的关系,其可通过促进食管癌淋巴管的生成,从而参与肿瘤的生长浸润和淋巴结转移.COX-2表达和MLD是食管癌患者的独立预后指标,其有可能成为食管癌治疗的新靶点.     

自发性2型糖尿病KKAy小鼠肾小球microRNA表达谱和氯沙坦治疗效应

目的 分析糖尿病肾病(DN)发病过程中肾小球miRNA表达谱的变化,观察血管紧张素受体拮抗剂(ARB)氯沙坦对DN肾小球miRNA表达谱的影响,确认在DN发病过程中发挥关键作用的miRNA.方法 8周龄KKAy小鼠随机分为氧沙坦治疗组(10 mg·kg-1·d-1)和非治疗组,C57BL/6小鼠作为正常对照组.于20周龄检测体质量、随机血糖、尿微量白蛋白、尿肌酐,观察肾脏形态改变.应用磁珠灌注法分离肾小球,提取总RNA,应用Affymetrix GeneChip miRNA芯片,分析KKAv小鼠肾小球microRNA表达谱的变化,以及氯沙坦对microRNA表达谱的影响.结果 KKAy小鼠的体质量和血糖较正常对照C57BL/6组小鼠显著升高(均P＜ 0.05),氯沙坦治疗显著改善2型糖尿病KKAy小鼠的尿白蛋白/肌酐比值[( 539.71±100.23) mg/g比(728.00±177.19) mg/g,P＜0.05]和肾脏病理损害,而对血糖无影响.miRNA芯片分析结果发现,与正常对照C57BL/6小鼠相比,20周龄KKAy小鼠肾小球内10个miRNA的表达上调;12个miRNA的表达下调.与KKAy非治疗组小鼠相比,20周龄氯沙坦治疗组KKAy小鼠肾小球内共有4个miRNA表达下调,其中miR-503和miR-181d在KKAy非治疗组小鼠肾小球内的表达显著上调,氯沙坦治疗可抑制其过表达.结论 miR-503和miR-181d在糖尿病KKAy小鼠肾小球内的表达显著上调,氯沙坦治疗可抑制其在糖尿病状态下的异常表达,可能为糖尿病肾病新的治疗靶点.     

洛沙坦对糖尿病小鼠机械通气相关肺损伤的影响

目的 评价洛沙坦对糖尿病小鼠机械通气相关肺损伤的影响.方法 SPF级雌性C57/BL6小鼠48只,10 ～ 12周龄,体重20 ～ 25 g,采用随机数字表法,将小鼠随机分为3组(n=16)∶对照组(C组)、糖尿病机械通气组(DM组)和洛沙坦组(L组).DM组和L组采用腹腔注射链脲佐菌素150mg/kg的方法制备糖尿病模型.取糖尿病模型制备成功的小鼠进行机械通气4h,吸入氧浓度50％,通气频率70次/min,潮气量15 ml/kg,PEEP 2 cm H2O.L组于机械通气前30 min腹腔注射洛沙坦30mg/kg.机械通气4h时采集颈动脉血样,测定PaO2,随后处死,取肺组织,测定湿/干重比(W/D比)、髓过氧化物酶(MPO)活性和肺微血管通透性;采用实时荧光定量RT-PCR法测定血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体AT1 mRNA的表达水平;ELISA法测定AngⅡ的含量;Western blot法测定细胞核内NF-κB p65的表达水平.结果 与C组比较,DM组和L组PaO2降低,肺组织W/D比、MPO活性、肺微血管通透性和AngⅡ含量升高,AT1 mRNA和NF-κB p65表达上调(P＜0.05);与DM组比较,L组PaO2升高,肺组织W/D比、MPO活性、肺微血管通透性和Ang Ⅱ含量降低,AT1 mRNA和NF-κB p65表达下调(P＜0.05).结论 洛沙坦通过抑制AT1受体和Ang Ⅱ水平,从而改善肺微血管通透性和抑制NF-κB活化,减轻糖尿病小鼠机械通气相关肺损伤.     

氯沙坦治疗肾移植后大量蛋白尿

目的 探讨氯沙坦对肾移植后大量蛋白尿的治疗作用.方法 接受尸体肾移植、术后时间达1年以上、24 h尿蛋白定量≥300 mg的患者82例,以计算器随机数法分为氯沙坦组和对照组,每组各41例.氯沙坦组患者连续服用氯沙坦达1年以上,剂量为50～100 mg/d;对照组患者连续服用氨氯地平达1年以上,剂量为5～10 mg/d.观察12个月,记录患者的血压、24 h尿蛋白定量、血肌酐等.结果 研究过程中,两组患者的血压均有所下降,但下降幅度的差异无统计学意义(P＞0.05).氯沙坦组研究开始时和研究结束时的24 h尿蛋白定量分别为(1.9±1.5)g和(1.1±0.8)g,二者的差异有统计学意义(P＜0.05),而对照组研究开始时和研究结束时24 h尿蛋白定量的差异无统计学意义(P＞0.05).与研究开始时相比较.氯沙坦组中血压控制者及血压未控制者的尿蛋白均有所减少,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.05).对照组中,仅血压控制者的尿蛋白较研究开始时有所减少(P＜0.05),血压未控制者的尿蛋白反而较研究开始时有所增加(P＜0.05).氯沙坦组和对照组中,治疗明显有效(尿蛋白下降≥50%)者分别占56.4%和15.8%,二者的差异有统计学意义(P＜0.01).结论 氯沙坦对肾移植后大量蛋白尿有一定的治疗作用,且该作用不依赖于患者血压的下降.     

洛沙坦对糖尿病大鼠肾脏炎症反应及足细胞损伤的影响

目的 探讨洛沙坦对糖尿病大鼠模型肾组织炎症反应及足细胞损伤的影响。方法 Wistar大鼠随机分为3组：对照组（NC）、糖尿病组（DM）、洛沙坦治疗组（DL）。链脲菌素（STZ）注射建立糖尿病动物模型，洛沙坦治疗组在大鼠建立糖尿病同时即开始以洛沙坦（20mg·kg·d^-1）灌胃治疗。分别于2周和12周杀鼠，观察体重、肾重、肾重／体重指数、尿蛋白量（24h）、Scr、Ccr以及肾组织病理改变；免疫组化染色观察肾小球细胞间黏附分子（ICAM-1）、白细胞共同抗原（CD45）、nephrin、血管内皮生长因子（VEGF）表达的改变；免疫印迹观察肾组织nephrin、VEGF表达的改变。结果 （1）DL组大鼠肾重／体重指数、尿蛋白量（24h）、Ccr则均低于DM组，差异均有统计学意义（P均〈0．05），其病理改变程度也比DM组轻。（2）免疫组化及免疫印迹显示，DM组和DL组肾小球ICAM-1、CD45、VEGF表达均高于对照组，而DL组ICAM-1、CD45、VEGF表达均低于DM组；DM组和DL组大鼠肾小球nephrin表达低于对照组；DL组肾小球nephrin表达高于DM组，差异均有统计学意义（P均〈0．01）。结论 洛沙坦可能通过抑制肾组织白细胞浸润、炎症反应及减轻足细胞损伤，达到肾脏保护作用。     

围手术期应用选择性环氧化酶-2抑制剂对胫腓骨中段骨折愈合的影响

目的 探讨围手术期短期应用选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂进行镇痛对胫腓骨中段骨折愈合的影响. 方法 采用前瞻性对照研究方法,将2008年10月至2009年10月收治的胫腓骨中段闭合性骨折患者分为对照组和研究组.对照组55例,男35例,女20例;平均年龄为(35.5±2.4)岁.研究组52例,男30例,女22例;平均年龄为(34.6±3.2)岁.研究组患者在围手术期短期(7～10 d)联合应用选择性COX-2抑制剂(塞来昔布胶囊和帕瑞昔布)进行镇痛,对照组未应用选择性COX-2抑制剂.观察两组患者术后1、2、3、4、6、8、12、18个月骨折端出现明显骨痂及骨折线消失的病例数,比较两组患者骨痂出现时间、骨折线消失时间及骨折愈合时间等的差异. 结果 107例患者术后获18 ～ 30个月(平均22个月)随访.对照组术后1、2、3、4个月骨折端可见明确骨痂生成的病例数分别为7、15、52、55例,研究组分别为6、13、49、52例;对照组术后6、8、12、18个月骨折端骨折线消失的病例数分别为3、42、53、55例,研究组分别为2、38、49、52例,以上项目两组间比较差异均无统计学意义(P＞0.05).对照组和研究组的骨折愈合时间平均分别为(10.0±2.3)、(10.2±2.5)周,差异无统计学意义(t=0.689,P=0.425).两组患者均无骨不愈合、感染、成角畸形等并发症发生.结论 围手术期短期应用选择性COX-2抑制剂进行镇痛对胫腓骨中段骨折愈合无明显影响.