肾阳虚证发生与免疫功能类基因的关联性研究

目的：利用基因表达谱芯片技术探讨肾阳虚证的发生与免疫功能类基因的关联性。方法：筛选肾阳虚证患者2名和正常对照2名,采用美国Affymetrix公司的HG—u133Plus 2．0基因表达谱芯片,筛选肾阳虚患者差异表达基因。结果：芯片数据两两比较分析后获得20条共同基因,基因功能注释后3个GO（基因本体）术语具有显著性,最富显著性的为GO：0002504（经由MHC-Ⅱ类分子的肽或多糖抗原的加工及提呈）。2条基因HLA—DQA1和HLA—DRB4被注释到其中的2个GO类。结论：免疫系统反应特别是MHC-Ⅱ类分子介导的抗原加工及提呈过程的异常可能是肾阳虚证发生的主要免疫机制。     

老龄肾阳虚证的差异表达基因谱分析

目的 采用基因表达谱芯片技术,分析老龄肾阳虚证的发生与基因表达异常间的联系.方法 筛选肾阳虚证患者3名和正常对照者3名,采用美国Affymetrix公司的HG-u133Plus 2.0基因表达谱芯片,通过组间比较,筛选出老龄肾阳虚患者差异表达基因.结果 芯片数据组间比较分析后获得34条差异表达基因,聚类分析得到6条有特征性地差异表达基因,主要涉及细胞周期和凋亡,肿瘤发生以及免疫.结论 老龄肾阳虚证的发生涉及一系列免疫紊乱的复杂的过程,可能与个体的衰老存在密切关联.     

老龄肾阳虚证差异表达基因的筛选与鉴定

目的:筛选并鉴定与老龄肾阳虚证相关的差异表达基因。方法:从前期基因表达谱芯片初步获得的差异表达基因中筛选出25个基因,选取18例肾阳虚证患者和6例正常对照者,采用半定量RT-PCR检测其血液中这25个基因的表达情况,从中鉴定出与老龄肾阳虚证相关的差异表达基因。结果:有8个基因在18例老龄肾阳虚证患者和6例正常人间的表达水平存在明显差异,这8个基因主要涉及细胞周期和凋亡,肿瘤发生以及免疫。结论:老龄肾阳虚证的发生涉及一系列免疫紊乱的复杂过程,推测肾阳虚可能与肿瘤的发生存在某种程度的关联。     

肾阳虚证患者外周血差异表达microRNAs筛选及功能预测

目的利用microRNA(miRNA)芯片筛选肾阳虚证差异表达的miRNAs。方法选择肾阳虚证患者14例作为肾阳虚证组,健康对照者14例作为正常对照组,分别抽取2组受检者外周静脉血5 m L,提取总RNA分离miRNA,应用miRCURYTM LNA Array(v.18.0)(Exiqon)芯片技术筛选2组间差异表达的miRNAs并进行分析,应用Gene ontology(GO)分析差异miRNA生物功能。结果共筛选出48条有统计学意义的差异表达miRNAs,其中29条表达上调,19条表达下调,这些差异miRNAs主要参与了免疫、信号通路、蛋白翻译合成等调节。结论肾阳虚证患者和健康对照者存在差异表达的miRNAs。     

老龄冠心病心肾阳虚证的差异表达基因谱分析

目的:采用双通道基因表达谱芯片技术,分析老龄冠心病心肾阳虚证基因表达水平的异常。方法:采用病证结合的诊断标准,筛选老龄冠心病心肾阳虚证患者6名和同龄健康对照者6名,采血,分离白细胞,提取总RNA,做基因芯片检测。结果:经Microsoft excel和Microsoft office Access软件筛选,老龄冠心病心肾阳虚证与健康对照者比较,获得44条差异表达基因,主要涉及脂代谢、免疫、心血管病变的基因。结论:老龄冠心病心肾阳虚证的发生涉及一系列免疫和脂代谢紊乱的复杂的过程,与动脉硬化存在密切关联。     

脾肾阳虚证红细胞免疫功能改变的初步探讨

本文随机选择了２０例脾肾阳虚证患者，以及２０例正常人作对照组，进行了红细胞免疫功能测定，实验结果表明：脾肾阳虚证患者红细胞免疫功能较正常人为低，两组间比较，Ｐ〈０．０１，差异有显著性意义，脾肾阳虚证呈现所谓“阴盛阳衰”的病理状态，分析其病理机制，可能是由于脾肾阳虚，气血生化不足，主胄生髓功能减退，圬致红细胞免疫功能低下，表面一红细胞免疫指标是ｃ３ｂ受体数目与活性下降，ｃ３ｂ受体结合的ＣＩＣ不能有时     

慢性前列腺炎患者免疫功能与肾阳虚证的关系研究

慢性前列腺炎(Chronic Prostatitis,CP)是泌尿外科常见病、多发病,约占门诊就诊人数的1／4。由于本病特别是肾阳虚型凹病程较长,缠绵难愈,且易反复发作,临床医生颇感棘手。凹的发病可能与自身免疫反应有关,而凹一旦发病,更往往伴有免疫功能的进一步改变。为了研究凹患者的免疫功能与肾阳虚证之间的关系,我们对50例凹患者及20例正常人的T淋巴细胞亚群进行了测定。现报告如下。     

肾阳虚证免疫相关基因CPG岛调控机制研究

目的探讨FHIT、MAP2K6、WNT5B、CSNK1D、FRAT2基因CpG岛甲基化水平与肾阳虚证的相关性。方法同质纳入符合前一自然基金肾阳虚评定标准[1]的典型肾阳虚患者和健康正常人各4例,采用结合重亚硫酸盐测序(BSP)法测定受试者血浆中上述五种基因的启动子区CpG岛甲基化水平。结果 WNT5B、FRAT2基因的甲基化程度较高,且健康组高于阳虚组;FHIT、MAP2K6、CSNK1D基因的甲基化程度较低,其中,CSNK1D基因的甲基化程度仍为健康组高于阳虚组,FHIT、MAP2K6基因的甲基化程度健康组略低于阳虚组。结论受试血浆中FHIT、MAP2K6、WNT5B、CSNK1D、FRAT2基因启动子区甲基化状态与是否患有肾阳虚证相关,可能在肾阳虚的发生发展进程中起作用,WNT5B、CSNK1D、FRAT2的启动子区甲基化可能表现为对基因本身的负调控,FHIT、MAP2K6的启动子区甲基化可能表现为对基因本身的正调控。     

肾阴虚证和肾阳虚证血浆蛋白质表达谱的比较研究

目的 本研究通过对肾阴虚证和肾阳虚证共同的血浆蛋白差异表达进行研究,挖掘肾虚证的本质。方法 对肾阴虚证、肾阳虚证和健康正常人进行蛋白芯片表达谱的比较研究。结果 选取典型肾阴虚证5例、肾阳虚证5例、正常健康人6例进行蛋白芯片检测,与正常健康人对比,获得2组间共同表达上调的差异蛋白BMP-5。结论 肾阴虚、肾阳虚证之间存在着共同的差异蛋白,这可能是2者均有肾虚的表现有关,这为探讨肾虚证的发生机制,特别是在蛋白水平的改变提供了依据。     

骨关节炎肾阳虚证个案的温针疗效及基因表达谱研究

目的　观察温针治疗骨关节炎肾阳虚证患者的临床疗效 ,并以基因芯片研究温针疗效的基因表达谱。方法　筛选出符合西医骨关节炎和中医肾阳虚证诊断标准的患者 1例 ,温针治疗 2周 ,治疗前后取血、提取mRNA ,经标记、杂交、清洗、芯片扫描、图像的采集与数据分析等过程 ,获得差异基因表达谱。结果　温针对此例患者的治疗作用达到显效 ,对基因表达的影响涉及免疫、基础代谢、肌肉运动、生长发育和信息传导等多个方面。结论　温针治疗肾阳虚型骨关节炎疗效确切 ;应用基因芯片技术能够同时半定量地研究数千条基因的表达状态 ,可以从微观基因水平研究针刺的整体机制 ,并从分子水平判定其疗效 ,为探讨针灸的作用机制开辟新途径。     

右归丸治疗肾阳虚型慢性肾脏病2～3期的临床疗效研究

[目的]观察右归丸治疗肾阳虚型慢性肾脏病2~3期的临床疗效。[方法]选取80例肾阳虚型慢性肾脏病2~3期患者,随机分为治疗组和对照组,对照组(40例)予西医一体化治疗,治疗组(40例)在西医一体化治疗的基础上加用右归丸,观察两组患者在治疗前、治疗后的血清肌酐(Scr)、估算肾小球滤过率(e GFR)、24 h尿蛋白定量及中医证候积分的变化情况,观察周期为24周。[结果]在血清Scr、24 h尿蛋白定量、e GFR及中医证候改善方面,治疗组均优于对照组(P0.05)。[结论]右归丸可有效改善肾阳虚型慢性肾脏病2~3期患者的中医证候积分及其肾功能,降低24 h尿蛋白定量,具有一定的肾脏保护作用,并且临床运用安全。     

临床阳虚患者身体机能状态研究

【目的】对临床阳虚患者身体机能状态进行研究,以期为虚寒状态模型研究提供依据。【方法】收集符合纳入标准,且不符合排除标准的阳虚患者和健康对照者。阳虚患者30例,均来自北京中医药大学第三附属医院和东直门医院住院及门诊患者,健康对照者30例来自北京中医药大学职工。阳虚病人和健康对照者均在清晨7点半至8点,抽取静脉血3mL,分离血清。全自动生化分析仪检测血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、补体3（c3）、补体4（C4）、乳酸（LAC）、血糖（GLU）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）,放射免疫法检测血清皮质醇（COR）、三碘甲腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）、促甲状腺激素（TSH）。【结果】与健康人比较,阳虚病人血清中IgM、LAC、T3、COR明显降低（P〈O．05）,GLU和Tc的含量偏高（P〈0．01,P〈0．05）,其他指标变化不明显。【结论】临床阳虚患者在内分泌系统功能、物质能量代谢和免疫功能等方面表现出功能低下或紊乱。     

脾肾阳虚泄泻大鼠模型造模方法研究

脾肾阳虚泄泻是中医常见病症。迄今为止,还没有理想的脾肾阳虚泄泻大鼠模型可供研究。该文通过比较单因素(造模方法Ⅰ,注射氢化可的松+灌胃番泻叶)和复合因素(造模方法Ⅱ,灌胃腺嘌呤+饮食失节+劳倦过度+灌胃番泻叶)2种造模方法,以期建立符合中医证候的脾肾阳虚泄泻大鼠模型。该研究选取大鼠的腹泻指数、尿D-木糖排泄率、NOS/cGMP信号传导系统、脏器指数和病理组织学检查等指标,分别对2个模型组大鼠进行比较评价。结果表明,与正常组相比,造模Ⅰ组、Ⅱ组大鼠的所有考察指标均有显著性差异(P<0.01,P<0.05),且造模Ⅱ组在腹泻指数、NOS/cGMP信号通路、肾脏、睾丸和胸腺的脏器指数及病理组织检查等指标表征上与造模Ⅰ组相比有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。综合以上研究,以腺嘌呤致肾阳虚,饮食失节、劳倦过度同灌胃番泻叶致脾阳虚复合因素的造模方法,更符合脾肾阳虚泄泻模型的症候。因此该研究为在此动物模型基础上研究温肾暖脾,涩肠止泻方药的作用提供基础。     

脾、肾阳虚模型大鼠脂质过氧化与抗氧化相关性的比较研究

目的：探讨实验性脾、肾阳虚模型大鼠脂质过氧化与抗氧化的相关性。方法：采用经典方法分别复制脾阳虚证和肾阳虚证动物模型。观察并对比了两种模型大鼠和相应治疗组的脂质过氧化物(LPo)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)以及GSH—Px／LPO(抗氧化能力的重要参数)的变化。结果：脾、肾阳虚模型大鼠LPO含量增加,GSH—Px活性及GSH—Px／LP0比值下降,且组间差异显著。温补脾肾药物具有降低LPO含量,提高GSH—Px活性及抗氧化能力的作用。结论：脂质过氧化损伤是脾、肾阳虚证的共同病理生理基础。     

骨关节炎肾阳虚证信号转导差异表达基因分析

目的:以基因芯片技术从差异基因表达角度分析骨关节炎肾阳虚证与信号转导相关差异表达基因。方法:先后筛选出符合西医膝骨关节炎和中医肾阳虚证诊断标准的患者两组,每组8例,与8例正常对照组比较。两组病人均取血、提取mRNA,经标记、杂交、清洗、芯片扫描、图像的采集与数据分析等过程,分别混合与对照组杂交作两张基因芯片,最后对数据进行信息挖掘。结果:两张芯片各获得162和75条差异表达基因,其中与信号转导相关的分别为26条和11条;两张芯片共同差异表达基因6条,与信号相关的有3条,占总数的1/2。提示:信号转导是生命活动的一种最基本和最重要的方式。细胞间信号转导异常可能在肾阳虚证骨关节炎的发生、发展过程中起着重要作用。     

附子理中汤对脾阳虚证大鼠免疫细胞因子的影响

目的: 观察附子理中汤对免疫细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨其对脾阳虚证免疫功能影响的可能机制。 方法: Wistar大鼠100只随机分为对照组、模型组、附子理中汤低、中、高剂量组5组,每组20只。在模型组基础上,附子理中汤低、中、高剂量组按5,10,20 g·kg^-1 ig,每天1次,连续4周。检测胸腺指数、脾脏指数、IL-2,IL-6,IL-10,TNF-α含量。 结果: 与对照组比较,模型组胸腺指数,脾指数,IL-2,IL-6,TNF-α均降低(P<0.05或P<0.01),IL-10显著升高(P<0.01)。与模型组比较,附子理中汤中、高剂量组胸腺指数,脾指数,IL-2,IL-6,TNF-α均升高(P<0.05或P<0.01),IL-10降低(P<0.05或P<0.01)。 结论: 附子理中汤对细胞免疫因子产生影响,通过细胞免疫因子之间的效应可能是其改善脾阳虚大鼠免疫功能的机制之一。     

血管性认知障碍肾阳虚证的调查研究及DNA甲基化本质

目的：在病证结合背景模式下,调查血管性认知障碍肾阳虚证的分布情况并从DNA甲基化角度探讨血管性认知障碍肾阳虚证的生物学内涵,为未来中医药治疗该病证提供表观遗传学层面的靶点。方法：2020年9月至2022年11月,通过量表对北京社区居民进行认知障碍筛查,对血管性认知障碍（VCI）患者进行证候分析;后纳入VCI肾阳虚证患者与健康对照者,采集外周血,采用Illumina Human Methylation 850K BeadChip对受试者的外周静脉血进行全基因组DNA甲基化检测,筛选差异甲基化基因并对其进行生信分析。结果：研究共调查1 902人,患有VCI的人数为201例,占总调查人数的10.57%,其中肾阳虚证者占72.14%;甲基化结果显示,与正常组比较,VCI组有386个差异甲基化位点,可注释到136个基因。京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析显示,两组间差异基因主要涉及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路、雌激素（Estrogen）信号通路、环磷酸腺苷（cAMP）信号通路等通路。蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络分析显示,表皮生长因子受体（EGFR）、EGF...     

益气养荣组方对脾肾两虚型小细胞肺癌患者化疗后免疫功能干预效果随机对照研究

[目的] 观察益气养荣组方对脾肾两虚型小细胞肺癌化疗患者免疫功能的影响。[方法] 随机选择2018年1月—2019年6月行小细胞肺癌化疗治疗患者120例进行本次研究。使用随机数字法将患者分为观察组和对照组各60例,所有患者均给予EC方案进行化疗,对照组患者给予EC化疗方案配合常规止呕、护肝、护胃治疗,观察组在对照组治疗方案基础上给予中药汤剂益气养荣组方进行治疗,观察组和对照组连续干预2个化疗周期。比较两组患者干预前后血常规、骨髓抑制情况、免疫功能变化情况。[结果] 两组患者干预前白细胞（WBC）、血小板（PLT）、中性粒细胞（NEUT）、血红蛋白（Hb）水平无明显差异（P>0.05）,化疗1个疗程后14 d、化疗2个疗程后14 d两组患者上述血常规指标与干预前相比均有升高（P<0.05）,但观察组各时间点各项指标均高于对照组,且差异具有统计学意义（P<0.05）;两组患者两次化疗发生骨髓抑制分度情况均有统计学差异（P<0.05）,均为0度患者对照组低于观察组,Ⅲ、Ⅳ度骨髓抑制患者对照组高于观察组。观察组两次化疗患者骨髓抑制发生率均低于对照组,且具有统计学意义（P<0.05）;两组患者化疗前CD3⁺T、CD4⁺T、CD8⁺T、CD4⁺/CD8⁺、自然杀伤细胞（NK）水平均无明显差异（P>0.05）,化疗2个疗程后CD3⁺T、CD4⁺T、CD4⁺/CD8⁺、NK水平与化疗前相比均有所降低（P<0.05）,CD8⁺T水平无明显改变（P>0.05）,观察组化疗后CD3⁺T、CD4⁺T、CD8⁺T、CD4⁺/CD8⁺、NK水平均高于对照组（P<0.05）,CD8⁺T水平无组间差异（P>0.05）。[结论] 益气养荣组方对脾肾两虚型小细胞肺癌化疗患者的骨髓抑制具有很好的治疗效果,降低骨髓抑制的发生率,同时能够提高患者的免疫功能,应于临床推广应用。     

大鼠心肾阳虚证动物模型实验研究

目的　心肾阳虚证是中医临床上一种常见的病证 ,本实验研究欲建立与临床相应的大鼠心肾阳虚证动物模型。方法　从对中医心肾阳虚证的模拟入手 ,依据相关中医理论及心肾阳虚证的症状、体征 ,将大鼠甲状腺切除并 ip阿霉素 ,从而造成大鼠心肾阳虚模型。结果　大鼠甲状腺切除并 ip阿霉素后 ,动物左心室功能明显减退且甲状腺功能显著性低下 ,以及伴畏寒、蜷缩、呼吸微弱等 ,出现了非常类似人类心肾阳虚证的主要症状 ,认为该方法可造成大鼠心肾阳虚模型。结论　大鼠甲状腺切除并 ip阿霉素后 ,动物的症状、体征能体现所模拟的心肾阳虚证型 ,可将该方法作为中医心肾阳虚证动物模型的制作方案