胚胎脊髓移植联合应用bFGF对脊髓损伤后神经再生的影响

目的：探讨胚胎脊髓（fetal spinal cord, FSC）移植联合外源性碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）的应用对脊髓损伤后脊髓神经再生的影响.方法：采用大鼠胸段（T8～T11）脊髓左侧半横切损伤模型.移植供体为同种异体妊娠14 d的孕鼠,将实验动物分为3组：A组为损伤＋FSC移植组;B组为损伤＋FSC移植＋bFGF组;C组为单纯损伤组.术后1～8周每周行综合行为评分（combined behavioral score, CBS）评定大鼠功能,并取术后8周损伤区脊髓组织0.5 cm作嗜银染色及NF200免疫组织化学检查,分别标记轴突和胶质细胞,进行定量分析,观察神经纤维再生情况.结果：胚胎脊髓移植和外源性bFGF可以防止成鼠脊髓损伤后神经元的萎缩,图像分析发现其作用A、B组优于C组,可以较好的恢复神经元形态.CBS评分提示大鼠神经功能的恢复也有同样趋势,统计学分析治疗组与对照组间有显著性差异.免疫组织化学检查,术后8周A、B组NF着色点较C组密集,且没有明显的胶质增生.结论：脊髓损伤后联合应用胚胎脊髓移植和 bFGF可以防止神经元的萎缩,并且对神经纤维再生及功能的恢复有促进作用.     

液态氮冷冻保存对异种神经移植后神经再生的影响

将成年日本大耳兔的胫神经在液态氮中保存４周或４０周，经反复冰冻、融解５次后移植至Ｗｉｓｔａｒ大白鼠的坐骨神经中。异种神经移植术后８、１２、２４周可观察到宿主的再生神经纤维从近段坐骨神经越过近端吻合部长入异种移植神经，继而越过远端吻合部向远段坐骨神经延伸。用体视学方法对异种神经移植段再生神经纤维的ＡＡ、ＮＡ和ＡＡ／ＮＡ测定和比较表明：异种神经在液态氮中保存４周和４０周后再移植，不影响宿主神经纤维的再生，两组之间的再生神经纤维无显著性差别     

神经干细胞移植对脊髓损伤后神经再生促进作用的研究进展

脊髓损伤后神经再生成为世界性的难题与研究重点.近年来研究表明具有多向分化潜能的神经干细胞存在于神经系统的多个区域.且能够适应性地与宿主中枢神经整合,产生外源性神经元和神经胶质细胞,从而重新连接已断的神经元回路.此外,神经干细胞还可通过分泌神经营养因子及抑制神经再生阻碍因子等作用使残存脱髓鞘的神经纤维和新生的神经纤维髓鞘化,从而恢复神经结构的完整性,促进神经功能恢复.     

神经干细胞移植对脊髓创伤后神经再生促进作用的研究进展

近年来研究发现成年哺乳动物的中枢神经系统中存在神经干细胞（neural stem cells,NSCs）,是中枢神经系统中保持分裂和分化潜能的细胞。它具有增殖和多向分化的潜能,在移植部位分裂增殖,并在局部微环境的作用下分化成相应的细胞来补充替代受损的细胞,恢复中枢神经系统的正常结构和功能。随着对神经干细胞及其相关领域广泛深入的研究,神经干细胞对中枢神经系统损伤后的功能修复作用愈来愈受到人们的重视。 NSCs存在于神经系统的多个区域,且能够适应性地与宿主中枢神经整合,产生外源性神经元和神经胶质细胞,从而重新连接已断的神经元回路。此外,NSCs还可通过分泌神经营养因子及抑制神经再生阻碍因子等作用使残存脱髓鞘的神经纤维和新生的神经纤维髓鞘化,从而恢复神经结构的完整性,促进神经功能恢复。     

脐血干细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经再生和后肢运动功能的影响

200表达显著增加,并且后肢运动功能均有较明显的恢复.结论 脐血干细胞移植可以促进脊髓损伤大鼠轴突再生和后肢运动功能恢复.本课题将为临床上治疗脊髓损伤这一疑难疾患提供了一种新思路.     

FK506对同种异体神经移植后神经再生的影响

目的研究免疫抑制剂FK506对冷冻处理后的同种异体神经移植后神经再生的作用.方法选择成年的新西兰大白兔36只.4只作为供体,切取双侧坐骨神经,制成10 mm神经段,深低温冷冻储存2周.其余32只随机分为实验组和对照组.将兔左侧坐骨神经造成10 mm长缺损,用复温后的同种异体神经进行移植桥接.然后作以下处理实验组移植部位应用FK506(10 μg/d×14 d),对照组不做任何处理,任其自然生长.于术后12周进行组织学、电生理、超微结构、形态学定量分析、肌湿重以及免疫学等观察.结果在观察的时限内,实验组及对照组32只大白兔在进行同种异体神经移植后均未发生急性移植排斥反应.但实验组大白兔的移植部位运动神经传导速度(30.58±2.16)s明显快于对照组(21.78±2.43)s(P＜0.05).光镜及电镜检查发现实验组大白兔的有髓神经纤维数量、神经束膜间毛细血管及雪旺氏细胞细胞器等明显多于对照组(P＜0.05).结论免疫抑制剂FK506可促进冷冻处理后的同种异体神经移植后周围神经再生.     

bFGF对神经干细胞分化为星形胶质细胞的影响

 目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠脊髓来源神经干细胞分化形成星形胶质细胞亚型的影响。方法：悬浮培养法培养大鼠脊髓来源的神经干细胞,形成神经球后,以免疫荧光法鉴定神经干细胞。把神经干细胞分为A、B两组,A组加入血清,B组加入血清和bFGF,分化培养7 d后,GFAP抗体标记星形胶质细胞,观察其各亚型的比率和形态特点。结果：神经干细胞分化第7d,A组和B组均形成4种亚型星形胶质细胞,分别为胞体延长型,扁平多角形,星形和双极型。B组中双极型星形胶质细胞的突起长度明显超过A组。结论：bFGF可以显著促进脊髓来源神经干细胞分化成的双极型星形胶质细胞的突起生长。     

自体成纤维细胞注射移植对衰老模型鼠皮肤结构的影响

目的:探讨自体成纤维细胞注射移植对衰老模型鼠皮肤结构的影响.方法:切取大鼠背部全层皮肤培养成纤维细胞,同时给大鼠注射定量的D-半乳糖促使其衰老即建立衰老模型,最后在衰老模型上注射移植培养的自体成纤维细胞,用显微镜观察鼠皮肤组织切片,图像分析仪计算胶原面积比值和测量真皮及皮下组织的厚度,并对所得数据进行统计学分析.结果:移植的成纤维细胞存活;细胞注射1个月时,实验组和对照组的胶原面积比值和真皮厚度相比差异无统计学意义(P＞0.05),2个月时,实验组和对照组的胶原面积比值和真皮厚度相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论:移植的自体成纤维细胞能够存活并分泌胶原细胞,增加皮肤厚度,使皮肤外观丰满.     

羊膜上皮细胞移植对大鼠脊髓半横断损伤后神经再生的促进作用

目的:探讨羊膜上皮细胞(AECs)移植对大鼠脊髓半横断损伤后神经再生的影响,为AECs移植修复脊髓损伤(SCI)提供实验依据.方法:采用30只Wistar大鼠建立脊髓半横断损伤模型.损伤后分别进行明胶海绵加生理盐水移植(明胶海绵组)和明胶海绵加AECs移植(AECs移植组),同时设SCI模型组和假手术组作为对照.移植后...     

自体静脉套管联合雪旺细胞移植对周围神经缺损再生的影响

目的观察自体静脉套管联合雪旺细胞移植对周围神经缺损再生的影响,以探索周围神经缺损修复的新的治疗方法。方法20只新西兰白兔随机分为实验组和对照组,每组10只。取兔自体股外静脉,套于神经两断端之间,制成静脉套管,实验组向静脉套管内注射雪旺细胞、对照组注射生理盐水,术后6周通过光镜及透射电镜观察神经再生情况,采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计分析,组间均值比较采用t检验,P〈0.05为差异有统计学意义。结果HE染色结果显示,实验组有髓神经和无髓神经数量较多,排列较整齐,髓鞘清晰可见,纤维数量较少。对照组有一定数量无髓神经,而有髓神经少见,纤维数量较多。t检验结果显示差异具有统计学意义（P〈0.05）。电镜观察实验组有髓神经纤维数量较多,排列较整齐,髓鞘清晰可见,纤维数量较少。可见雪旺细胞与有髓神经纤维相连。对照组有髓神经纤维和无髓神经纤维数量较少,排列不整齐,髓鞘不清晰,纤维数量较多,无雪旺细胞。结论本研究结果表明静脉套管可以促进周围神经再生;雪旺细胞注入神经缺损的静脉套管对周围神经再生的作用优于单纯使用静脉套管。     

EGF与bFGF对体外大鼠巩膜成纤维细胞增殖的影响

目的研究表皮生长因子（EGF）和碱性成纤维生长因子（bFGF）在体外对大鼠巩膜成纤维细胞生长的影响。为进一步了解近视发生的分子机制提供依据。方法采用植块法培养大鼠巩膜成纤维细胞。细胞经传代纯化鉴定后,取第3～4代细胞加入不同浓度的EGF（0．1～200ng／mL）、bFGF（0．1～50ng／mL）。分别培养24、48、72h用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞的增殖密度。观察不同浓度、时间下细胞增殖情况。结果发现0．1～100ng／mL的EGF和0．1～50ng／mL的bFGF对大鼠巩膜成纤维细胞均有明显的促增殖作用,且呈剂量相关性。结论一定浓度的EGF、bFGF对体外培养的大鼠巩膜成纤维细胞的生长具有促进作用。     

bFGF在尿道下裂阴茎下弯组织中的表达及意义

目的探讨尿道下裂阴茎下弯畸形阴茎海绵体腹侧表面组织病理学特点,认识尿道下裂阴茎下弯形成机制。方法研究23例尿道下裂伴阴茎下弯,3例隐匿性阴茎和3例躯体瘢痕病例。采用HE染色及苦味酸-天狼猩红染色检测纤维组织增生改变,免疫组织化学检测组织中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的阳性表达情况。结果（1）阴茎海绵体腹侧表面组织,在尿道下裂病例存在排列相对整齐的纤维组织;而瘢痕病例的纤维组织排列较紊乱且纤维变性较多;隐匿性阴茎病例则主要由疏松结缔组织组成。与隐匿性阴茎病例对照比较,尿道下裂和瘢痕病例的Ⅰ／Ⅲ型胶原比例明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;与尿道下裂阴茎下弯程度比较。差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）尿道下裂组和癍痕组bFGF表达强度均较对照组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论尿道下裂并发阴茎下弯者,其阴茎腹侧海绵体表面及尿道板皮下组织可能存在纤维化,且此纤维化与阴茎下弯形成相关。     

bFGF对骨骼肌肌卫星细胞增殖的影响--PCNA免疫组化法的实验研究

目的：试图用致中胚层来源细胞分裂剂—碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)使正常成熟骨骼肌肌卫星细胞从静止状态变成增殖活动。方法：用21只大白鼠腓肠肌为实验材料，随机分3组，每组各7只，A组肌肉内注入bFGF；B组肌肉内注入生理盐水；C组肌肉内不注任何物质。连注14d后，取各组腓肠肌制成HE染色和增殖细胞核抗原(prolifcrate cell nucleus antigen，PCNA)染色切片，最后光镜下观察和对观察相关资料做统计学处理。肌卫星细胞核，HE染色为蓝色，PCNA染色阳性为棕黄色。结果：细胞核数量，A组较B、C两组多；B组较C组多；C组肌肉内几乎未见有PCNA阳性细胞核存在。结论：bFGF可使骨骼肌的肌卫星细胞，由静止变成增殖状态，为解决成体干细胞快速增殖这一难题，提供参考依据。     

应用bFGF与EGF促进皮肤扩张的临床研究

目的:探索碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)在扩张术中的临床应用方法与效果.方法:27例患者共埋置62个扩张器,随机分为治疗组和对照组,采用自身对照.治疗组在常规扩张的同时于扩张器周围注入bFGF与EGF,对照组仅常规扩张.测量两组扩张率、即时回缩率并进行统计学处理.结果:治疗组的扩张至额定容量的时间、即时回缩率较对照组减少(P＜0.05),扩张率较对照组明显增加(P＜0.01).结论:bFGF与EGF能够促进扩张,降低皮瓣回缩率,提高皮瓣质量,改善治疗效果.     

颌面部爆炸伤愈合过程中VEGF和bFGF 含量变化的实验研究

目的：探讨颌面部软组织爆炸伤愈合过程中血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）和碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在伤口渗液中含量的动态变化,以及其对上述创伤愈合中血管再生过程的刺激作用。方法：采用改进的家兔颌面部爆炸伤动物模型,以ＫＴＹ－０４型雷管为爆炸源,复制颌面部爆炸损伤,选用聚乙烯醇（ＰＶＡ）海绵收集伤口渗液,双抗体夹心酶（ＥＬＩＳＡ）法检测其中ＶＥＧＦ和ｂＦＧＦ含量。结果：颌面部爆炸伤伤口渗液中ＶＥＧＦ含量在伤后第１周内稳步上升,于伤后第１ 天起和正常血清组比较,差异明显,伤后第３天达到（２．９±２．７）ｎｇ／ｍ ｌ,差异非常显著（Ｐ＜ ０．０１）,伤后７ ｄ达峰值。伤口渗液中ｂＦＧＦ的含量在伤后６ ｈ即达到峰值,为（５６５±４３６）ｐｇ／ｍ ｌ,并在之后１～２ ｄ 内迅速下降,于伤后３～５ ｄ 基本达到正常血清水平,伤后７ｄ 略有上升。结论：ＶＥＧＦ和ｂＦＧＦ参与颌面部爆炸伤愈合过程中血管再生的两个不同阶段,二者有协同作用,ｂＦＧＦ刺激血管再生的启动,并诱导ＶＥＧＦ的合成,ＶＥＧＦ则调节和维持之后的血管再生过程。     

碱性成纤维细胞生长因子与重组异种骨复合的临床应用

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和重组异种骨(RBX)复合(bFGF／RBX)后的临床应用体会。方法 分别将bFGF／RBX用于脊柱结核后路植骨融合3例、股骨中下段骨髓炎后病理骨折骨不连2例、骨囊性变术后骨缺损修复9例、成骨不全弯曲畸形栅状截骨矫形1例。结果 全部病例骨痂生长丰富、改造塑形及愈合时间早而充分；无原发病复发、排异反应、感染，术后反应热均在术后4～5d至正常。结论 bFGF／RBX是一种组织相容性好、诱导成骨能力强、安全可靠且骨源丰富的生物复合植骨材料。但须注意原发病的治疗、植骨床的准备及该材料的制备和应用原则。     

bFGF对高眼压下兔视网膜神经节细胞的保护作用

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)对高眼压下兔视网膜神经节细胞的保护作用。方法：每周1次前房注入甲基纤维素制成慢性高眼压动物模型，随机将动物分为高眼压对照组、外科对照组和bFGF治疗组，另加1组正常对照组。治疗组每周1次玻璃体内注射bFGF，高眼压对照组不作任何处理，外科对照组仅于玻璃体内注入与治疗组等量的磷酸缓冲生理盐水(plosphate buffered saline，PBS)，实验持续4wk。每周测定各组动物的图像视网膜电图(pattern electroretinogram，PERG)，观察各组动物b波变化趋势，最后光镜、电镜观察动物视网膜神经节细胞的超微结构变化。结果：治疗组PERGb波振幅仅见轻微下降趋势，与正常组接近，两对照组则下降趋势显著，结果经方差分析有统计学意义；形态学上可见治疗组节细胞超微结构变化轻微，对照组则变化明显。结论：bFGF作为一种神经营养因子，对高眼压下兔视网膜神经节细胞具有保护作用。     

碱性成纤维细胞生长因子与垂体腺瘤增殖及侵袭能力的关系

利用免疫组织化学方法检测 5 1例人类垂体腺瘤标本的碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)与增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白表达。结果显示 ,在 2 9例 (5 6 9% )垂体腺瘤标本中检测到bFGF呈中等强度以上的阳性表达 ;bFGF表达水平与PCNA标记指数呈正相关 ;在无功能腺瘤中 ,bFGF的表达与肿瘤侵袭性相关 ,但在激素分泌性腺瘤中两者相关性不明显。提示bFGF可能参与了垂体腺瘤的增殖过程及部分腺瘤的侵袭过程。     

翻转静脉桥接加碱性成纤维细胞生长因子修复面神经缺损的实验研究

目的探讨利用翻转静脉桥接加碱性成纤维细胞生长因子形成的再生室修复兔面神经缺损的可行性.方法手术制作兔左侧面神经下颊支15 mm缺损模型,分3组不同方法修复:常规静脉桥接加注生理盐水组、翻转静脉加注生理盐水组、翻转静脉加注碱性成纤维细胞生长因子组.术后100 d进行大体观察、神经电生理检测、组织学观察,以评价神经再生情况.结果翻转静脉加注碱性成纤维细胞生长因子组较单纯应用翻转静脉桥接技术或常规静脉桥接加注生理盐水而言,其神经传导速度恢复得到显著提高、组织学表现更接近正常.结论翻转静脉桥接加注碱性成纤维细胞生长因子修复周围神经缺损的效果好于单纯使用翻转静脉桥接或常规静脉桥接.     

bFGF预处理对Iso致大鼠心肌损伤及Fas/FasL系统的影响

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对异丙基肾上腺素(Isoprenaline，Iso)致大鼠心肌损伤心肌细胞凋亡及Fas／FasL系统的影响。方法：将Wistar雄性大白鼠随机分成三组：对照组、Iso损伤纽、bFGF预处理组，光镜观察心肌组织的病理变化，TUNEL法检测心肌细胞凋亡，免疫组化和原位杂交方法检测Fas、FasL、Caspase-3蛋白及mRNA的表达水平。结果：Iso损伤组心肌坏死较重，有显著心肌细胞凋亡，且Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显上调，bFGF预处理组心肌坏死明显减轻，凋亡细胞数减少，Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显下调。结论：bFGF可通过抑制Fas、FasL、Caspase-3的蛋白及mRNA表达，减少心肌细胞凋亡而减轻保护大鼠的心肌损伤。