RA患者外周血CD141~+DCs数量的变化及其与Tregs的关系

目的探讨RA患者外周血各DCs亚群数量的变化,为进一步阐明RA的发病机制奠定基础。方法选取63例RA患者和30例相匹配的健康体检者作为正常对照组,将入选的RA患者根据疾病活动性评分(DAS28)分为3个亚组。采用流式细胞术检测所有受试者外周血DCs、Treg细胞比例并分析各DC亚群与Treg的相关性。结果 RA患者外周血总的DCs数量低于正常对照组(P0.05);RA患者pDCs的比例与正常对照组无差异(P0.05);CD1C~+DCs比例降低,但无统计学意义(P0.05);CD141~+DCs比例明显下降(P0.01),并与Tregs的变化一致,r=0.51,P0.01。结论 RA患者的CD141~+DCs比例下降与Tregs的下降有关,可能在RA的发病中起到一定的作用。     

类风湿性关节炎中树突状细胞亚群分析

目的 分析类风湿性关节炎患者外周血和关节液中的DC(dendritic cell,DC)亚群以及DC亚群与炎症产生的关系.方法 收集来自西南医院体检中心26例健康人外周血作为对照组,来自西南医院风湿免疫科28例RA患者的外周血及滑膜液作为实验组,其中RA患者的外周血和滑膜液来自同一 RA患者.采用人外周血淋巴细胞分离液...     

不同预处理移植后树突状细胞早期重建及与移植物中CD34+细胞相关性分析

目的：比较不同预处理异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后早期树突状细胞（DCs）亚群重建情况，以及移植物中CD34^＋细胞是否影响移植后早期DCs亚群重建。方法：采用三色流式细胞仪动态检测不同预处理移植后早期外周血树突状细胞亚群DC1、DC2水平。结果：移植后早期清髓性移植患者体内DCs亚群数量非常低，常规移植组移植后14天与半相合移植组相比，DC1、DC2均无统计学意义（P〉0．05）。非清髓性移植组（NST）DC1、DC2高于清髓性移植组，两者相比具有统计学意义（P〈0．05）。在30天和60天，所有组DC1、DC2略有波动，但是幅度不大。以输入的CD34^＋细胞数平均分为三组，三组患者DC1、DC2移植后14、30和60天均无统计学意义（P〉0．05）。结论：NST后患者早期DCs重建较清髓性干细胞移植患者早，而常规移植和半相合移植早期DCs重建较慢，二者无差别。移植物中的CD34^＋细胞不影响移植后早期DCs亚群重建。     

肺结核患者外周血CD4~+和CD8~+记忆性T细胞亚群、IL-17、IL-27表达的初步探讨

目的:探讨肺结核患者外周血CD4+和CD8+记忆性T细胞亚群及白细胞介素17(Interleukin-17,IL-17),IL-27的表达。方法:采用流式细胞术检测肺结核患者组外周血CD4+和CD8+记忆性T细胞,患者组按治疗史分为初治组,复治组;按痰涂片抗酸染色分为痰涂阳性组,痰涂阴性组。初治组8例为凡既往未用过抗结核药物治疗或用药时间少于一个月的新发病例;复治组22例为凡既往应用抗结核药物一个月以上的新发病例、复发病例、初治治疗失败病例等;痰涂阳组9例为痰涂片抗酸染色阳性;痰涂阴组21例为痰涂片抗酸染色阴性。ELISA法检测IL-17,IL-27。结果:①与健康对照组比较:患者组CD4+效应型记忆性T细胞均显著增高(P<0.05),初治组与涂阴组CD8+效应型记忆性T细胞均显著降低(P<0.05),复治组IL-17显著降低(P<0.05),而IL-27显著增高(P<0.05)。②与初治组比较:复治组CD4+中央型记忆性T细胞显著降低(P<0.05),而CD8+效应型记忆性T细胞显著增高(P<0.05),IL-17显著降低(P<0.05),IL-27显著增高(P<0.05)。③与涂阴组比较:涂阳组CD4+中央型记忆性T细胞显著降低(P<0.05),CD8+效应型记忆性T细胞显著增高(P<0.05),CD8+中央型记忆性T细胞显著降低(P<0.05)。④Spearman相关性分析显示:IL-17与IL-27呈正相关(P<0.05),记忆性T细胞亚群与IL-17,IL-27水平无显著相关性(P>0.05)。结论:肺结核患者外周血CD4+效应型记忆性T细胞的表达可望作为TB初步诊断的观察指标,CD4+中央型记忆性T细胞和CD8+效应型记忆性T细胞的表达均可望作为TB患者的临床分组依据,TB外周血IL-17、IL-27水平可望用于判断TB的炎症程度。     

恶性卵巢肿瘤患者外周血免疫细胞及其亚群的检测分析

目的探讨卵巢癌患者外周血多种免疫细胞及其亚群与临床病理指标的相关性及意义。方法采用流式细胞术(FCM)检测24例恶性卵巢肿瘤患者术前外周血和腹水中调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞(Th1)、树突状细胞(DC)、自然杀伤细胞(NK)等免疫细胞亚群,并与20例健康妇女进行比较,同时对其与各临床病理因素的相关性进行统计学分析。结果与对照组相比,24例恶性卵巢肿瘤患者Treg水平升高,Th1细胞水平和CD8+T细胞表面的活化受体NKG2D均明显减少(P0.05)且升高程度与病理分级有关(P0.05)。与健康对照组相比,患者外周血中总DC水平没有变化,但成熟DC下降,且与临床分期有关(P0.05),浆细胞样DC升高,与病理分级有关(P0.05)。且与外周血相比,患者腹水中NK细胞的CD16+和CD8+T细胞的NKG2D受体水平均下降。结论恶性卵巢肿瘤患者抗肿瘤免疫综合功能下降,外周血和腹水中肿瘤杀伤效应细胞T细胞和NK细胞的免疫功能都受到明显抑制,且DC的抗原提呈能力下降。     

Graves病患者外周血免疫调节细胞及其亚群比例异常

目的观察Graves病(GD)患者外周血各种免疫调节细胞及其亚群的变化。方法采用流式细胞术(FCM)分别检测32例GD患者及30例健康人外周血调节性T细胞(Treg)、Th1细胞、Th2细胞、调节性B细胞(Breg)、树突状细胞(DC)等免疫细胞亚群,并进行比较。结果与正常对照组相比,GD患者Treg比例降低,Th1细胞、Th2细胞数量增加;Breg数量减少;DC数量下降,髓样DC(mDC)占DC比例下降,而浆细胞样DC(pDC)比例升高,成熟型DC比例升高。结论 GD患者外周血中存在免疫调节细胞的失衡,可能在GD的发生、发展中起一定作用。     

树突状细胞对慢性阻塞性肺疾病的诊断意义

目的:检测慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者外周血树突状细胞(DCs)亚群的水平,探讨其与AECOPD的关系。方法:采用流式细胞术四色荧光分析法分别检测34例AECOPD患者及15例健康者的外周血树突状细胞亚群(mDCs和pDCs)的水平;采用肺功能仪对各组患者进行肺功能检查。结果:AECOPD组中GOLDⅠ级、GOLDⅡ级、GOLDⅢ-Ⅳ级各组的mDCs与pDCs的水平均明显高于对照组(P0.05),且随着AECOPD患者肺功能严重程度的增加,mDCs与pDCs的水平也随之增加(P0.05)。结论:AECOPD患者mDCs与pDCs的水平升高,且与病情的严重程度明显相关,提示DCs参与了慢阻肺的炎症反应过程。     

特应性皮炎患者外周血细胞亚群DC1/DC2、Th1/Th2检测的临床意义

为探讨特应性皮炎（AD）患者外周血细胞亚群DC（DC1/DC2）与细胞亚群Th（Th1/Th2）分化状态及其临床意义,采用免疫荧光三标记流式细胞术检测35例特应性皮炎患者外周血DC1/DC2亚群（DC1/CD11 c＋和DC2/CD123＋）、Th1/Th2亚群（CD3＋CD4＋CD30-/CD3＋CD4＋CD30＋）,并以35名正常人作为对照组。结果表明,特应性皮炎患者DC CD123＋百分率比对照组明显增高（P＆lt;0.05）,而CD11 c＋DC百分率与对照组相比,无统计学意义（P＆gt;0.05）;Th2（CD3＋CD4＋CD30＋）显著增高（P＆lt;0.05）,Th1亚型（CD3＋CD4＋CD30-）与对照组比较,差异无统计学意义（P＆gt;0.05）。特应性皮炎患者外周血细胞亚群DC2呈优势,导致向细胞亚群Th2的免疫反应偏移,这可能与特应性皮炎的发病有关。     

慢性乙型肝炎患者外周血来源的树突状细胞功能的研究

目的:研究慢性乙型肝炎患者外周血来源的树突状细胞(Dendritic cells, DCs)与慢性乙型肝炎的病程发展以及不同抗病毒治疗的关系.方法:采集71例慢性乙肝患者外周静脉血,抗凝,分离外周血单个核细胞(PBMCs).进行体外诱导培养,使之发育成DC,流式细胞仪检测其表面共刺激分子的表达.其中57例HBV-DNA阳性患者,分别采用拉米夫定或α-干扰素治疗,1个疗程后,再次检测DC表面分子的表达,并分析、比较治疗前后的表达水平.结果:与正常对照比较,慢性肝炎和慢性病毒携带者DC上CD1a(13.97±5.22和11.28±5.70 vs 27.25±4.32)%以及CD86(57.27±12.57和32.94±11.37 vs 82.12±13.54)%的表达,均明显降低(P＜0.05或0.01).比较血清HBV-DNA载量与DC表面分子的表达,发现DNA阴性组DC上CD1a、CD40、CD80和CD86的表达均比DNA阳性组高,但只有CD86的表达量有明显差别(P＜0.05).此外,57例抗病毒治疗后,拉米夫定治疗组CD40的表达(66.40±7.85 vs 43.48±7.93)%明显高于治疗前水平;而α-干扰素治疗组,CD40的表达(78.71±6.31)%高于治疗前水平外,CD86的表达(87.47±16.07 vs 44.18±10.07)%也明显高于治疗前水平(P＜0.05).结论:慢性乙型肝炎病毒感染与DC功能缺陷密切相关,血清中HBV-DNA载量越高,DC功能的缺陷越明显.拉米夫定和α-干扰素抗病毒治疗均能使患者外周血来源的DC表面的共刺激分子有不同程度的升高,促使DC成熟和功能的恢复.     

慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTL、非特异性CTL的变化和意义

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者的外周血HBV特异性CTL、非特异性CTL的变化和意义。方法对80例人白细胞抗原(HLA)-A2阳性的CHB患者用流式细胞仪检测外周血HBV特异性CTL、非特异性CTL和T细胞亚群,对20例HLA-A2阳性的急性乙型肝炎(AHB)患者作HBV特异性CTL、非特异性CTL的检测,30例健康献血员作非特异性CTL和T细胞亚群的检测作为对照。结果80例CHB患者的HBV特异性CTL低于急性乙型肝炎患者,分别为(0.32±0.11)%和(1.1±0.31)%,t=7.704,P=0.000,非特异性CTL高于正常对照组,分别为(18.23±5.13)%和(15.83±4.99%),t=2.220,P=0.028。结论CHB患者的HBV特异性CTL较低,一方面是导致HBV慢性持续感染的主要原因,另一方面启动了非特异性CTL引起肝功能损害。     

Low Number of Peripheral Blood B Lymphocytes in Patients with Pulmonary Tuberculosis

The cellular immune response plays a critical role in the containment of persistent Mycobacterium tuberculosis infection; however, the immunological mechanisms that lead to its control are not completely identified. The goal of this study was to evaluate B (CD19+) and T (CD3+) peripheral blood lymphocyte profiles and T-cell subsets (CD4+ and CD8+) in patients with pulmonary tuberculosis (TB). Percentages (p = 0.02) and absolute numbers (p = 0.005) of B cells were significantly lower in patients with pulmonary TB than in healthy donors. In contrast, percentages (p = 0.12) and absolute numbers (p = 0.14) of T cells were similar in TB patients and healthy donors. No significant differences in percentages of CD4+ (p = 0.19) or CD8+ (p = 0.85) T cells between patients and healthy donors were observed. In summary, patients with pulmonary tuberculosis had a lower number of peripheral blood B lymphocytes than healthy controls.     

2型糖尿病合并肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群分析及临床护理对策

目的 探讨2型糖尿病合并肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群的特点,为临床护理提供证据支持.方法 利用流式细胞术对41例2型糖尿病合并肺结核患者（DM＋ LTB组）及60例单纯肺结核患者（LTB组）的外周血淋巴细胞亚群进行检测,并以健康成年人为对照组,对检测结果进行统计学分析.结果 DM＋ LTB组和LTB组的外周血淋巴细胞亚群绝对值均显著低于正常对照组（P＜0.05）,DM＋ LTB组CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋比值显著高于LTB组（P＜0.05）.结论 2型糖尿病合并肺结核患者存在比较严重的细胞免疫功能紊乱.护理人员应从加强健康教育、心理及饮食等方面加强护理,提高患者的机体免疫力.     

Gamma/delta T cell subsets in patients with active Mycobacterium tuberculosis infection and tuberculin anergy

Earlier data suggest that gamma/delta T cells may play an important role in the immune response to Mycobacterium tuberculosis. The aim of this study was to determine the percentage of different gamma/delta subsets in peripheral blood of active tuberculosis patients with a positive or negative tuberculin reaction. Thirty-eight patients infected with M. tuberculosis and 22 healthy controls were included in the study. Venous blood was taken before starting antimycobacterial treatment. Lymphocytes were reacted with monoclonal antibodies specific for different gamma/delta V chains (Vdelta1, Vdelta2, Vgamma9 and Vgamma4). The results were analysed in the context of tuberculin reactivity and X-ray findings. Our results revealed a selective loss of Vgamma9/Vdelta2 T cells in the peripheral blood of tuberculin-negative patients with active tuberculosis compared to healthy controls, while the ratio of Vgamma9/Vdelta2 T cells in the peripheral blood of patients with a positive skin test did not differ from that of healthy controls. These findings demonstrate a relationship between the loss of the major M. tuberculosis-reactive subset of gammadelta T cells and the absence of tuberculin reactivity. The data are consistent with the hypothesis that gammadelta T cells play a role in the protective immune response to M. tuberculosis infection.     

抗原诱发的γ干扰素测定在结核诊断中的应用

目的 探讨结核分枝杆菌特异性抗原早期分泌抗原靶6000(ESAT-6)体外诱发的γ干扰素反应在结核感染和结核病诊断中的价值.方法 外周全血中加入ESAT-6抗原,诱导产生γ干扰素,以酶联免疫吸附法测定γ干扰素浓度,以增加的百分率为ESAT-6抗原诱发的γ干扰素反应值.进行下列研究:对比结核密切接触者(60例)、痰培养证实的结核患者(46例)以及健康人(55例);追踪调查儿童(68例)、青少年(52例)、老年(45例);治疗过程中动态观察20例结核患者;比较HIV(+)TB(+)者(78例)和HIV(+)TB(-)者(60例).结果 结核密切接触者与痰培养证实的结核患者ESAT-6反应具有很高的敏感性;儿童与青少年ESAT-6反应与临床诊断和预后具有很高的一致性;65%的结核患者在治疗过程中ESAT-6反应呈下降趋势;ESAT-6反应在HIV(+)TB(+)的诊断中敏感度为87.2%.结论 体外ESAT-6诱发的γ干扰素测定对活动性结核病尤其是儿童和青少年结核病的诊断有一定意义,也可用于鉴别HIV阳性者合并结核.     

多发性骨髓瘤患者淋巴细胞亚群变化对免疫功能的影响研究

目的分析多发性骨髓瘤（MM）患者外周血T 淋巴细胞尧B 淋巴细胞和自然杀伤（NK）细胞的变化遥方法收集69 例 MM 患者及52 例健康体检人员的抗凝血,用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞总数（Lym）尧CD3+ T 淋巴细胞尧CD19+ B 淋巴细 胞及CD16+56+NK细胞数量遥结果与对照组比较,MM 组Lym尧CD3+尧CD4+尧CD8+尧CD4+/CD8+尧CD19+等6个项目差异均有 统计学意义（约0.05）,CD16+56+差异无统计学意义（跃0.05）遥结论MM患者在疾病进程中与T淋巴细胞亚群及B淋巴细胞尧 Lym 密切相关,对评价MM 患者的免疫状况尧疾病进展和疗效等方面具有重要作用遥     

结核分枝杆菌相关IFN-γ释放试验在结核病诊断及疗效监测中的应用

目的：目的：探讨结核分枝杆菌相关γ-干扰素释放试验（TB-IGRA）在结核病诊断及临床抗结核治疗效果评价中的应用价值。方法：对196例临床确诊结核患者进行相关病史收集，同时进行TB-IGRA、结核菌素皮肤试验、结核杆菌培养、涂片镜检、结核抗体检测，结核患者的治疗过程中按用药疗程（初治患者第2、5、6个月，复治患者第2、5、8个月）对其进行随访，在治疗结束后6个月和1年后各随访一次，比较TB-IGRA与结核菌素皮肤试验在治疗过程中的变化。结果：确诊结核病例196例，其中肺结核158例，肺外结核38例，TB-IGRA在结核诊断中灵敏度为82．1％，特异性为91．7％，阳性预测值为93．1％，阴性预测值为79．3％，与传统实验室检查方法相比有显著性差异（P〈0．01）。在结核患者的抗结核治疗过程中，TB-IGRA阳性率及浓度水平治疗前与治疗后2、6月以及复治后2、5、8月比较显著下降（P〈0．01），TB—IGRA水平与结核分枝杆菌数量存在较好相关性，与传统的TST方法评估疗效相比有显著性差异（P〈0．01）。结论：TB-IGRA在结核诊断中敏感性和阳性预测值较高，可作为较好的结核诊断的依据，同时TB-IGRA对肺外结核的灵敏度较高，为肺外结核患者的诊断提供了较为可靠的依据，通过治疗过程TB—IGRA检测分析，外周血TB-IGRA的变化随着抗结核治疗的进程下降的趋势明显，与结核涂片镜检结果符合率较高，是临床疗效评估较为理想的指标。     

天然调节T细胞与结核病免疫病理关联

目的 检测调节性T细胞(Tr)在结核病病人是否增高,确证Tr与结核免疫病理的关联性,为Tr功能研究提供疾病模型.方法 流式细胞术(FACS)分选CD3+CD4+T及CD3+CD8+T等主要淋巴细胞亚群,通过RT-PCR测定Foxp3基因在正常和结核病病人T细胞亚群中的表达,FACS多色分析Foxp3 T细胞在CD4+CD25+细胞群体中的分布,累积病例分析Tr细胞在外周血扩增情况,免疫组化方法分析Tr在结核病理的浸润,结合临床资料分析Tr数量的改变与结核病的关联性.结果 Foxp3基因在正常和结核病病人CD3+ CD4+T细胞中特异性扩增,FACS分析表明foxp3主要表达于CD4+ CD25high亚群中,占CD4+ CD25highT细胞的80%以上,以CD4+CD2high Foxp3+三联标志检测40例正常与51例活动性结核病病人外周血Tr占CD4+T细胞比例分别为(0.23±0.20)%和(1.01±1.00)%,结核病病人较正常人高4.4倍,Tr在结核病明显扩增(P<0.01),结核病理组织中有高频率Foxp3+细胞浸润.Tr扩增与结核病有效治疗和预后的关联性有深入探讨价值.结论 Tr细胞在结核病病人增高,并与结核免疫病理损伤相关,结核病可作为Tr细胞功能研究的疾病模型.     

CD4+CXCR5+ follicular helper T cells in salivary gland promote B cells maturation in patients with primary Sjogren’s syndrome

Objective: To examine amount of CD4⁺CXCR5⁺Tfh cells and B cells subsets in salivary gland and peripheral blood from patients with primary Sjogren’s syndrome (pSS) and to analyze whether the frequency of CD4⁺CXCR5⁺Tfh cells is associated with pSS pathologic process. Methods: The percentages of CD4⁺CXCR5⁺Tfh cells and B cell subsets were examined by flow cytometry. B-lymphocyte chemoattraetant (BLC; also called CXCL13), IL-21, IL-6 from the serum of pSS patients was assessed by polymerase chain reaction–enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results: The percentages of CD4⁺CXCR5⁺Tfh cells in peripheral blood were increased in pSS patients, but decreased after treatment with glucocorticoid and/or immunosuppressive drugs. Abnormal B cell subsets appeared in salivary and peripheral blood of pSS patients. The frequency of salivary CD4⁺CXCR5⁺Tfh cells was positively correlated with CD19⁺CD27⁺ memory B cells and CD19⁺CD27^high plasma cells. Also increase of salivary CD19⁺CD27^high plasma cells was positively associated with serum ANA titer of pSS patients. Conclusions: CD4⁺CXCR5⁺Tfh cells are significantly increased in salivary and peripheral blood in pSS patients with aberrant CD19⁺CD27⁺ memory B cells and CD19⁺CD27^high plasma cells, suggesting that CD4⁺CXCR5⁺Tfh cells may contribute to the pathogenesis of pSS by promoting the maturation of B cells.     

利用基因芯片技术快速检测结核杆菌耐药性的初步研究

目的：探讨利用基因芯片技术检测结核杆菌的耐药性。方法：结核杆菌耐药性检测基因芯片的制备；临床分离株结核杆菌培养和药敏检测；结核杆菌基因组DNA的制备和结核杆菌耐药基因的聚和酶链反应；基因芯片的杂交、洗涤、检测与分析。结果：临床分离株结核杆菌培养和药敏检测结果：1株为药物敏感株结核杆菌(对异烟肼、利福平、链霉素、乙肤丁醇4种药物均敏感)；4株为多耐药株结核杆菌(对异烟肼、利福平、链霉素、乙肤丁醇4种药物均耐药)；药敏检测结果与5位患者临床的诊断性治疗的结果完全一致；进一步利用基因芯片技术进行检测，检测结果与上述结果相符合。结论：利用基因芯片技术检测结核杆菌的耐药性，准确、快速、高效。