双歧杆菌脂磷壁酸延缓细胞衰老的作用机制

目的 探讨双歧杆菌脂磷壁酸(Lipoteichoic acid,LTA)在延缓H2O2诱导细胞衰老中的作用.方法 H2O2诱导WI-38细胞衰老,β-半乳糖苷酶细胞化学染色计算衰老细胞百分率变化,RT-PCR和Western印迹检测衰老细胞p21、细胞周期蛋白E(cyclin E)和周期蛋白依赖性蛋白激酶2(CDK2)表达水平的变化.结果 双歧杆菌LTA处理后,β-半乳糖苷酶细胞化学染色阳性细胞百分率较衰老模型组降低(P＜0.01).与年轻对照组相比,衰老模型组细胞中p21的表达增高,cyclin E和CDK2表达降低,而双歧杆菌LTA能够逆转上述变化(P＜0.01).结论 双歧杆菌能延缓H2O2诱导的细胞衰老,机制可能与改变p21,cyclin E和CDK2表达水平有关.     

双歧杆菌脂磷壁酸抗氧化作用的实验研究

目的 通过研究双歧杆菌表面分子脂磷壁酸（LTA）对D-半乳糖致衰老小鼠氧化系统指标及Klotho基因表达变化的影响,探讨双歧杆菌LTA延缓衰老的分子机制。方法 在D-半乳糖诱导小鼠亚急性衰老的同时,每日腹腔注射双歧杆菌LTA。用试剂盒检测小鼠肾脏组织SOD活性及MDA的含量,同时用RT-PCR、Western blot及免疫组化方法检测各组小鼠肾脏组织Klotho基因表达情况。结果 与青年对照组小鼠比较,衰老模型组小鼠SOD活性显著下降,MDA含量显著升高,Klotho基因在转录和翻译水平表达均明显下降;而双歧杆菌LTA能显著逆转上述变化。结论 双歧杆菌LTA可能通过提高衰老小鼠的抗氧化活性及上调Klotho基因表达,从而发挥其延缓衰老的作用。     

双歧杆菌对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用

目的观察双歧杆菌对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠血液中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）含量的影响。方法小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖建立亚急性老年模型，用双歧杆菌液拌少量小鼠饲料喂饲小鼠，实验前后取血检测血中s0D、GSH-Px及MDA值进行比较。结果双歧杆菌明显提高小鼠全血SOD含量（P〈0．01）和GSH-Px含量（P〈0．05），明显降低小鼠全血GSH-Px含量。结论双歧杆菌具有明显的抗衰老作用。     

西藏灵菇酸奶对人工致衰老小鼠肝肾指数的影响

目的 研究西藏灵菇酸奶对D-半乳糖(D-gal)所致的亚急性衰老模型小鼠的影响,探讨其抗衰老作用机制.方法 将健康小鼠随机分成3组,用D-gal建立人工致衰模型组,同时将模型组留半每日灌服西藏灵菇酸奶制备西藏灵菇酸奶灌胃组,设置青年组进行对照.30 d后,检测小鼠体质量及肝肾指数;同时测定肝、肾组织中超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)的含量变化.结果 衰老模型组与青年组相比,体质量显著降低,肝脏指数显著增加,肾脏指数极显著增加;灵菇酸奶灌胃组与衰老模型组相比,体质量显著增加,肝脏指数显著降低、肾脏指数极显著降低;西藏灵菇酸奶灌胃组小鼠的肝、肾组织SOD、CAT、GSH-Px活性增加,MDA含量显著降低.结论 西藏灵菇酸奶可通过增强机体清除氧自由基能力,增强机体免疫功能,从而提高抗氧化酶活性而发挥抗衰老作用.     

A组β溶血性链球菌脂磷壁酸抗体在风湿热诊断中的意义

目的 探讨A组β溶血性链球菌（乙链菌）脂磷壁酸（LTA）抗体在风湿热诊断中的意义。方法 用从A组乙链菌中提取的LTA作为抗原，采用斑点酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清中的LTA抗体。结果 ①风湿性心脏炎组LTA－IgG抗体滴度水平高于静止期风湿性心脏病组、病毒性心肌炎组、非湿性心脏瓣膜病组，其他关节炎组的滴度水平；②活动期风湿热患者LTA－IgG抗体阳性率（64％）高于对照组的阳性率；③风湿性心脏炎患者的LTA－IgG抗体阳性率与外周血淋巴细胞促凝血活性（PCA）、抗链球菌壁多糖抗体（ASP）、抗DNAse－B、血沉、C反应蛋白的阳性率相接近，高于抗链球菌溶血素O(ASO)的阳性率。结论 血清LTA抗体在判断风湿热和风湿性心脏病风湿活动有较高的敏感性和一定的特异性。     

A组乙型链球菌脂磷壁酸的提取及其交叉反应性研究

目的 探讨A组乙型链球菌(iAS)脂磷壁酸(LTA)提取方法及其在风湿热发病过程中的意义。方法 用曲通114(TX—114)从GAS中提取LTA并用阴离子交换树脂二乙基氨基纤维素(DEAE—Sephace1)层析纯化；做LTA与人心瓣膜抗原吸附试验；分析LTA抗体的滴度与风湿性心脏病瓣膜病理结果的关系。结果 用TX—114提取并用阴离子交换树脂DEAE-Sephaccl层析纯化的LTA纯度较高，且保持了LTA的生物学活性；吸附抗体后的血清标本LTA抗体由阳性转为阴性，而末吸附抗体的血清标本LTA抗体仍为阳性，提示LTA与人心瓣膜之间存在交叉抗原性：血清LTA—IgG抗体阳性的4例患者中有3例病理切片发现心瓣膜或心肌间质有灶性炎症细胞浸润；血清LTA-IgG抗体阴性的6例病人均未见灶性炎症细胞浸润(Fiher精确概率=0．033)。结论 TX—114法是提取GAS的LTA的有效新方法；GAS的UFA与人心瓣膜之间存在交叉抗原性，LTA可能参与了风湿热的发病过程。     

党参水煎剂对亚急性衰老模型小鼠胸腺自由基代谢和细胞凋亡的影响

目的通过动物实验研究党参水煎剂延缓衰老的作用机制。方法 SPF级小鼠随机分为空白对照组、衰老模型组、维生素E组、党参低剂量组和党参高剂量组,采用D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型;观察党参水煎剂对小鼠胸腺组织形态的影响;检测小鼠胸腺组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用流式细胞仪检测胸腺组织细胞凋亡率。结果党参高、低剂量组胸腺组织病理明显改善,MDA含量降低,SOD活性升高,胸腺细胞凋亡率显著降低(均P<0.05)。结论党参水煎剂能改善小鼠胸腺组织病理形态和自由基代谢失调的状况,抑制细胞凋亡,延缓胸腺萎缩,提高机体免疫功能,延缓免疫衰老进程。     

间歇运动对老龄小鼠骨骼肌组织自由基代谢的影响

目的 观察间歇游泳训练对老龄小鼠骨骼肌组织自由基代谢的影响.方法 40只健康雌性昆明种小白鼠分为成年对照组、老龄对照组、老龄无负荷间歇运动组、老龄递增负荷间歇运动组、老龄无负荷运动与递增负荷间歇运动交替组.10 w训练结束后48 h在安静状态下处死,行丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的测定.结果 老龄无负荷运动组和交替运动组MDA含量[(1.39±0.03),(1.36±0.05) nmol/mgprot]较老龄对照组MDA含量[(1.49±0.08) nmol/mgprot]下降(P＜0.05),无负荷运动组SOD活性[(5.33±0.08) U/mgprot]较老年对照组[(5.23±0.05) U/mgprot]高(P＜0.05),交替运动组SOD活性[(5.39±0.07) U/mgprot]较老年对照组显著增高(P＜0.01).无负荷运动组和交替运动组CAT活性[(1.59±0.06),(1.71±0.07) U/mgprot]较老年对照组[(1.44±0.03) U/mgprot]显著增高(P＜0.01);无负荷运动组CAT活性较负荷运动组高(P＜0.05).负荷运动组GPX活性[(67.93±1.67) U/mgprot]较老年对照组[(66.03±0.58) U/mgprot]高(P＜0.05);无负荷运动组和交替运动组GSH-Px活性[(72.03±2.53),(75.54±4.22) U/mgprot]较老年对照组显著增高(P＜0.01).结论 间歇运动能延缓骨骼肌衰老,但不同形式的间歇运动引起骨骼肌组织自由基代谢的变化不同.     

双歧杆菌对高脂饮食诱导非酒精性脂肪性肝病大鼠血脂代谢的影响

目的探讨双歧杆菌对高脂饮食诱导非酒精性脂肪性肝病大鼠血脂代谢的影响。方法将45只雄性SD大鼠随机等分为对照组、模型组和治疗组。对照组喂以普通饲料,模型组喂以高脂饲料,治疗组喂以高脂饲料和双歧杆菌。6 w后比较各组大鼠肝指数和肝组织学改变,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)的水平以及肝总脂肪(HLs)含量,采用荧光实时定量RT-PCR测定禁食诱导脂肪因子(FIAF)mRNA的表达。结果模型组肝指数和肝组织脂肪变性程度均显著高于对照组(P0.05);而治疗组肝指数和肝组织脂肪变性程度均显著低于模型组(P0.05)。与对照组比较,模型组ALT、AST、TC、TG和HLs水平显著升高(P0.05);与模型组比较,治疗组ALT、AST、TC、TG和HLs水平显著降低(P0.05)。与对照组比较,模型组FIAF mRNA的表达显著升高(P0.05);与模型组比较,治疗组FIAF mRNA的表达显著降低(P0.05)。结论双歧杆菌能够降低NAFLD大鼠的血脂水平,减少肝脏组织中脂肪的沉积,改善肝脏的炎症反应,其机制可能与调节脂质的摄入和抑制FIAF基因的表达有关。     

黄蘑多糖对多器官衰老小鼠氧自由基水平的影响

目的研究黄蘑多糖对多器官衰老小鼠脑、心、肝、肾组织中谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽还原酶(GR)的影响。方法比色分析法测GSH、GR含量变化。结果黄蘑多糖小鼠脑、心、肝、肾GSH含量明显高于对照组(P0.01;P0.05);黄蘑多糖小鼠脑、心、肝、肾GR含量明显高于对照组(P0.01;P0.05)。结论黄蘑多糖能提高衰老小鼠机体GSH、GR活力,增强机体抗氧化能力。     

嗜酸乳杆菌和青春双歧杆菌治疗实验性结肠炎小鼠的作用及其机制

目的 评价青春双歧杆菌和嗜酸乳杆菌对实验性结肠炎小鼠模型的治疗效果并初步探讨其机制.方法 75只BABL/C小鼠均分为5组并给予相应处理,其中4组为实验组,分别为:青春双歧杆菌BF0624治疗组(B组)、嗜酸乳杆菌LT0637治疗组(L组)、水杨酸柳氮磺胺吡啶治疗组(S组)、0.9%氯化钠对照组(NS组);另设正常对照组(N组).实验组小鼠用4%葡聚糖硫酸钠造模,N组则饮用0.9%氯化钠溶液.实验期间每天记录动物体重、大便隐血情况,计算疾病活动指数(DAI).在第4、6、8天各组各处死5只小鼠,分离结肠,测量其长度,行病理组织学检查,逆转录PCR和Western印迹法分别测定热休克蛋白(HSP)70、糖皮质激素受体(GR)、白细胞介素(IL)-10和肿瘤坏死因子(TNF)-α的基因和蛋白表达.结果 青春双歧杆菌BF0624和嗜酸乳杆菌LT0637能缓解实验性结肠炎小鼠的肠道炎性反应,第3天时L组小鼠DAI积分(1.8±0.4)低于NS组(2.8±1.0),从第5天开始各治疗组DAI均明显降低.B组、L组、S组第8天时结肠长度分别为(9.0±0.6)、(9.3±0.6)、(8.8±1.1)cm,均大于NS组[(8.1±0.6)cm,P值均＜0.05].第8天时L组小鼠结肠黏膜病理组织学明显改善(组织学评分6.0±1.0).B组和L组IL-10和HSP70表达上调,TNF-α表达下调,GR无变化.结论 青春双歧杆菌BF0624和嗜酸乳杆菌LT0637均对溃疡性结肠炎有治疗作用,益生菌的治疗机制可能与上调HSP70和IL-10以及下调TNF-α的表达有关.     

双歧杆菌对小鼠急性实验性结肠炎作用的研究

目的 研究双歧杆菌在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的急性溃疡性结肠炎小鼠模型中的作用.方法 将80只BALB/C小鼠均分为8组,每组10只.除正常对照组、单纯0501菌株组、单纯c122菌株组外,其他5组动物均给予5%DSS造模7 d.在造模开始前2 d,阴性对照组用0.9%氯化钠液灌肠、阳性对照组用柳氮磺胺吡啶(SASP)20 mg/ml灌肠、DSS+0501菌株组用1×109 CFU/ml 0501菌液灌肠、DSS+c122菌株组用1×109 CFU/ml c122液菌灌肠.9 d后处死动物取结肠标本,行H-E染色,观察镜下结肠病理变化,并用免疫组化染色、RT-PCR技术分析结肠黏膜中白细胞介素(IL)-10 mRNA及蛋白表达.结果 DSS造模过程中给予双歧杆菌灌肠小鼠(0501菌株组和c122菌株组)的结肠炎性反应程度较模型组加重,结肠黏膜IL-10表达减少.而单纯给予双歧杆菌灌肠小鼠(单纯0501菌株组和单纯c122菌株组)未见结肠炎表现.结论 双歧杆菌的某些菌株在结肠黏膜屏障功能受损情况下,可加重溃疡性结肠炎小鼠的结肠黏膜损伤.     

双歧杆菌上清液对D-半乳糖的抗衰老作用

目的 通过观察双歧杆菌上清液(SCS)对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠血脂和学习记忆行为的影响,探讨SCS降低血脂的机制,为进一步研究SCS中有效延缓衰老的成分提供理论依据.方法 小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖和生理盐水建立亚急性衰老模型和正常对照.同时,对实验组小鼠腹腔注射SCS,连续培养42 d后称重,检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL-C) 含量.结果 与模型组相比,实验组小鼠血清TG、TC水平显著降低(P<0.05),血清HDL-C水平明显提高,学习记忆能力较模型组明显提高.结论 SCS能降低血清TG、TC含量,延缓D-半乳糖小鼠的衰老进程.     

双歧杆菌对实验性结肠炎中趋化因子的影响

目的观察双歧杆菌在三硝基苯磺酸（TNBS）／乙醇诱导的实验性结肠炎的作用,并探讨其作用机制。方法40只SPF级SI）大鼠随机均分为正常组（N组）、模型组（M组）、双歧杆菌干预组（双歧杆菌预防性应用组：A组;双歧杆菌治疗组：B组）。TNBS／乙醇制备大鼠结肠炎模型。A组造模前7d始予双歧杆菌0．1mL,B组造模后予双歧杆菌0．1mL,双歧杆菌悬液浓度：1x10。cfu／mL,正常组与模型组生理盐水2mL,连续灌胃14d。观察各组大鼠结肠炎疾病活动指数（DAI）,评价结肠大体形态损伤指数（CMDI）和组织学损伤指数（TDI）,免疫组织化学法检测结肠组织CCL20、CCR6的表达,EL／SA法检测血清中CCL20、CCR6、TNF-α和IL-10含量。结果双歧杆菌干预组DAI、CMDI和TDI评分明显低于模型组,血清TNF—d、CCL20、CCR6及结肠组织CCL20、CCR6的表达明显降低（P均〈0．01）,而血清IL-10水平升高（P〈0．01）。A组与B组差异无统计学意义。结论双歧杆菌可能通过降低组织及血清CCL20及其受体CCR6表达,调节促炎因子与抗炎因子的平衡,对实验性结肠炎发挥治疗作用,且提前应用能提高疗效,发挥更好的作用。     

滋补肾阴方左归饮对老年小鼠自由基代谢及免疫功能的影响

目的 研究补肾阴方左归饮延缓衰老的作用机制。方法 测定老年小鼠血清中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及总抗氧化能力（T-AOC）;胸腺指数、脾指数,脾脏T淋巴细胞增殖活性及血清白介素-2（IL-2）水平,并观察左归饮对上述指标的影响。结果 与青年小鼠比较,老年小鼠血清中SOD和T-AOC下降,MDA水平升高,同时胸腺指数、脾指数、T淋巴细胞活性和血清中细胞因子IL-2水平降低,左归饮明显改善上述指标,且差异显著。单味熟地仅能明显降低老年小鼠血清中MDA含量和显著增强老年小鼠T淋巴细胞增殖活性,对其他指标影响不大,显示整方抗衰老的优势。结论 左归饮可从改善自由基代谢和增强免疫两方面发挥延缓衰老的作用。     

内毒素致衰老模型小鼠脏器的自由基代谢变化与毒素清的作用

以Ｄ－半乳糖复制小鼠衰老模型，观察内毒素导致脏器ＳＯＤ和ＬＰＯ含量的变化和中药复方毒素清对其保护作用，并与青年小鼠和氢化可的松对照。结果表明，青年内毒素组血清、心、肝、肺和衰老模型组血清、心、肝、肺、肾ＳＯＤ含量明显低于青年组（Ｐ＜０．０５～０．０１），衰老内毒素组血清、肝、肺ＳＯＤ低于衰老模型组（Ｐ＜０．０５）；与衰老内毒素组比较，毒素清高剂量组血清、肝、肺、肾和低剂量组的肝及氢化可的松组肺ＳＯＤ含量均明显升高（Ｐ＜０．０５）。衰老内毒素组肾、肝、肺ＭＤＡ含量较衰老模型组有升高趋势，高低剂量组肺、肝和氢化可的松组肺ＭＤＡ含量明显低下（Ｐ＜０．０１），其中肝的ＭＤＡ水平接近模型组和青年组（Ｐ＞０．０５）。提示内毒素降低衰老小鼠肝、肺等ＳＯＤ含量和增加ＬＰＯ水平，减弱机体抗自由基能力和增强脂质过氧化损伤；毒素清能够显著降低肝、肺等ＬＰＯ含量和提高ＳＯＤ水平，增强脏器组织抗自由基能力和抑制脂质过氧化反应，从而防止组织细胞的损伤。     

双歧杆菌对裸鼠腹腔巨噬细胞分泌功能的影响

本文对裸鼠腹腔注射青春型双歧杆菌,以ELISA法检测了其腹腔巨噬细胞分泌IL—6的含量。结果表明双歧杆菌注射组裸鼠腹腔巨噬细胞分泌IL—6的量显著高于对照组(p<0.01),提示青春型双歧杆菌可刺激巨噬细胞产生IL—6,它的产生可能部分介导了双歧杆菌的多种重要功能。     

两歧双歧杆菌干预周期对IL-10基因敲除小鼠结肠上皮屏障保护作用的影响

目的:探讨不同两歧双歧杆菌菌株(Bifidobacterium bifidum,B.bifidumS17)干预周期对IL-10-/-小鼠结肠上皮肠屏障功能保护作用的影响.方法:分成4组:WT组、WT+BBf(B.bifidum)组、IL-10-/-组和IL-10-/-+BBf组,周期设为2、4、6wk,5只/组,分别灌饲PBS液或B.bifidum溶液,检测结肠组织肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)、白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和干扰素ν(interferon-ν,INF-ν)浓度,小鼠结肠上皮通透性和TER,紧密连接蛋白的表达.结果:B.bifidum干预4wk的小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β、INF-ν浓度,结肠黏膜上皮通透性、TER和紧密连接蛋白表达较对照组、干预2wk有显著性差异(均P<0.01),与干预6wk相比较无显著性差异.结论:B.bifidum干预4wk可检测明确的肠屏障保护作用,增加干预周期,并不能增加肠屏障保护效果.     

青春型双歧杆菌对哮喘儿童树突状细胞功能的影响

目的研究青春型双歧杆菌对过敏性哮喘儿童外周血单个核细胞来源的树突状细胞（dendritic calls,DC）表面共刺激分子表达及其细胞因子分泌的影响。方法从15例过敏性哮喘儿童和15例非哮喘儿童的外周血单个核细胞诱导生成未成熟DC．与青春型双歧杆菌共培养48小时后．用流式细胞仪检测DC表面CD86和HLA-DR分子的表达,用ELISA方法检测培养上清中自细胞介素（IL）-10、IL-12和IFN-γ的水平。结果经双歧杆菌刺激后,哮喘儿童DC表面CD86表达明显增高（P〈0．05）,DC分泌IL-12和IFN-γ水平明显增高;而双歧杆菌刺激对非哮喘儿童的CD86和HLA-DR表达无明显影响,但可使其DC分泌IL-12及IL-10水平明显增高。结论青春型双歧杆菌既可以通过上调CD86的表达,促进DC成熟;又可刺激DC分泌IL-12和IFN-γ,改变Th2优势分化,纠正Th1/Th2失衡,这可能是益生菌防治变态反应性疾病的机制之一。