蛋白酶体功能与帕金森病相关性实验研究

目的 观察蛋白酶体抑制剂诱导大鼠黑质多巴胺能神经元α-突触核蛋白（α-synuclein，α-Syn）的表达及聚集．探讨蛋白酶体功能在帕金森病（PD）发病中的作用机制。方法采用立体定向将蛋白酶体抑制剂Lactacystin注射至大鼠黑质部位。以免疫荧光法观察黑质区多巴胺能神经元变性缺失，并应用免疫荧光双标法观察多巴胺能神经元内蛋白聚集的包涵体及其主要成分α-Syn的表达．然后通过原位杂交分析α-Syn mRNA表达及Western印迹法检测黑质α-Syn表达量改变。结果注射Lactacystin第7天大鼠开始出现自发性活动减少．阿扑吗啡尚可诱导出旋转行为；3周后患侧黑质部位酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞明显减少。TH与硫磺素、硫磺素与α-Syn复合染色呈阳性。α-Syn mRNA表达量升高，蛋白表达水平增加。结论Lactacystin诱导大鼠黑质细胞α-Syn表达升高并出现蛋白聚集可能是导致PD发病的机制之一。     

蛋白酶体抑制剂诱导多巴胺能神经元变性伴包涵体形成

目的 观察蛋白酶体抑制剂诱导黑质多巴胺(DA)能神经元变性伴胞浆内包涵体形成，探讨蛋白酶体功能在帕金森病发病机制中的作用。方法将蛋白酶体抑制剂Lactacystin立体定向注射至大鼠黑质部位。免疫荧光观察黑质区DA神经元变性缺失及胶质细胞变化。免疫荧光双标法观察DA能神经元内蛋白聚集的包涵体及其主要成分α-共核蛋白(α-synuclein)、Parkin和泛素(ubiquitin)的表达。同时观察。DA能神经元发生细胞凋亡。结果注射Lactacystin第7天大鼠开始出现自发性活动减少，阿扑吗啡可诱导出旋转行为；3周后黑质部位酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞减少，呈剂量依赖性；小胶质细胞增生明显。TH与硫磺素、硫磺素与α-synuclein、硫磺素与Parkin、以及硫磺素与ubiquitin复合染色呈阳性；TH与TUNEL双染亦呈阳性。结论Lactacystin对多巴胺能神经元具有毒性作用，且导致蛋白聚集，包涵体形成。蛋白酶体功能异常可能在帕金森发病机制中起重要作用。     

百草枯与lactacystin对黑质细胞协同毒性作用

目的:探讨百草枯(PQ)与lactacystin对黑质细胞的协同毒性作用。方法:取SD雄性大鼠56只,随机分为NS组、lactacystin组(以下简称lact组)、PQ组和双因素组,每组14只。PQ组和双因素组预先每日口服小剂量PQ 0.5 mg·kg-1,NS组和lact组每日口服等量的NS,连续喂养8周后,在lact组和双因素组大鼠单侧SNc立体定向注射低剂量蛋白酶体抑制剂lactacystin 2 μg,NS组和PQ组注射等量的NS。观察大鼠行为变化、TH阳性细胞数以及α-synuclein蛋白表达变化。结果:仅双因素组大鼠出现严重的动作迟缓、少动、姿势异常以及APO诱导的持续左向旋转;黑质部TH阳性细胞数较NS组显著减少,且大于lact组和PQ组两组减少之和(P< 0.05);双因素组黑质细胞α-synuclein的表达较NS组显著增高,多数细胞内出现α-synuclein免疫反应呈强阳性的Lewy小体。结论: lactacystin与PQ之间存在协同作用,长期小剂量PQ的暴露能显著增加蛋白酶体功能轻微损害的大鼠患PD的风险。     

蛋白酶体抑制剂诱导大鼠黑质变性伴包涵体形成

目的 观察蛋白酶体抑制剂Lactacystin诱导大鼠黑质变性伴包涵体形成及运动行为学的改变,探讨蛋白酶体功能下降在帕金森病(PDl发病机制中的作用. 方法 24只SD大鼠采用随机数字表法分为kactacystin实验组和生理盐水组.每组12只,Lactacystin实验组将蛋白酶体抑制剂Lactacystin立体定向注射人大鼠左侧黑质致密部(SNc).生理盐水组注射等体积生理盐水;观察大鼠自主行为和阿朴吗啡(APO)诱导的旋转行为的改变;Nissl染色法观察SNc病理改变;免疫组化法观察SNc及纹状体酪氨酸羟化酶(TH)和SNc中α-共核蛋白的表达;透射电镜观察SNc超微结构的改变. 结果 Lactacystin实验组大鼠给药7 d后出现自发性活动减少、动作缓慢、震颤、且症状逐步加重.APO可诱导出向健侧的旋转运动;Nissl染色发现Lactacystin实验组左侧SNc神经元数量减少,尼氏体结构松散;免疫组化结果表明21 d后Lactacystin实验组左侧SNc出现变性,TH免疫阳性神经元数量减少,α-共核蛋白表达增强,纹状体内TH免疫阳性纤维数量减少;电镜观察到蛋白质聚集形成的包涵体. 结论 Lactacystin单侧SNc注射可以诱导大鼠黑质变性伴包涵体形成及大鼠行为改变.蛋白酶体功能下降可能在PD发病机制中起重要作用.     

蛋白酶体抑制剂诱导多巴胺能神经元变性及诱导型一氧化氮合酶变化

目的探讨蛋白酶体（proteasome）功能下降在帕金森病（PD）发病机制中的作用，以及模型大鼠脑内黑质部位诱导型一氧化氮合酶（iNOS）是否参与蛋白酶体抑制剂Lactacystin诱导的多巴胺能神经元变性。方法将30只健康雄性SD大鼠分为5组（生理盐水对照组，1d组、3d组、1周组、3周组），每组6只。将蛋白酶体抑制剂Lactacystin立体定向注射至大鼠黑质部位，记录大鼠在不同时间点的行为学改变，并用免疫组化方法观察生理盐水对照组及不同时间点组（1d、3d，1周、3周）大鼠黑质区多巴胺能神经元变性及iNOS变化。结果Lactacystin注射1周后大鼠开始出现自发性活动减少，阿朴吗啡可诱导出旋转行为；3周后，30min旋转次数为258．90±11．56；实验3周组黑质部位TH阳性细胞减少。1d后iNOS阳性细胞明显增多，3d时达高峰，1周后开始下降，3周时基本消失。结论蛋白酶体功能下降可能是多巴胺能神经元变性的始动因素，而iNOS上调可能是多巴胺能神经元变性的重要过程。     

帕金森病样大鼠模型的稳定性观察

6-OHDA损毁大鼠一侧中脑黑质细胞造成偏侧帕金森病(PD)样大鼠模型,用小动物旋转行为记录仪记录阿朴吗啡诱发大鼠的旋转行为;TH免疫细胞化学染色观察中脑黑质细胞的损毁状况.连续观察10个月其旋转行为无自发性恢复;PD样模型大鼠损毁侧中脑无TH阳性细胞存在.结果表明6-OHDA损毁大鼠一侧中脑黑质细胞可造成稳定、可靠的类似PD病人病理变化的偏侧动物模型.     

帕金病样大鼠模型的稳定性观察

6-OHDA损毁大鼠一侧中脑黑质细胞造成偏侧帕金森病(PD)样大鼠模型,用小动物旋转行为记录仪记录阿朴吗啡诱发大鼠的旋转行为;TH免疫细胞化学染色观察中脑黑质细胞的损毁状况。连续观察10个月其旋转行为无自发性恢复;PD样模型大鼠损毁侧中脑无TH阳性细胞存在。结果表明6-OHDA损毁大鼠一侧中脑黑质细胞可造成稳定、可靠的类似PD病人病理变化的偏侧动物模型。     

偏侧帕金森病大鼠模型的行为,免疫组化和脑微透析的实验研究

评价6-羟多巴胺(6-OHDA)损毁大鼠单侧黑质制备的偏侧帕金森病动物模型。应用6-羟多巴胺损毁SD大鼠单侧黑质制备偏侧PD鼠模型。3周后根据药物诱发试验,TH免疫组化证实模型制作成功。进一步用脑微透析技术结合HPLC-ECD在体检测PD鼠纹状体多巴胺及代谢产物含量。结果:82只大鼠中有36只阿朴吗啡(APO)诱发的旋转次数>7转/min。6-OHDA注射侧黑质DA神经末稍已绝大多数被损毁。6-OHDA损毁侧纹状体多巴胺及代谢产物明显低于健侧(P<0.05,P<0.01)。应用6-OHDA制备的偏侧PD鼠模型是PD研究的理想模型之一。     

Lactacystin诱导的帕金森病大鼠模型病理退行性改变的研究

目的 观察Lactacystin诱导的帕金森病(PD)模型大鼠的病理退行性改变,探索其发病机制.方法 取成年健康SD大鼠32只,采用随机数字表法分为实验组(16只)和对照组(16只),实验组左侧黑质致密部(SNc)注射蛋白酶体抑制剂Lactacystin,对照组以等体积生理盐水代替.分别存注射后1、3、5、7、9、11、14和21 d,观察两组大鼠的行为学变化;应用HE染色观察小胶质细胞并计数,免疫组化检测黑质及纹状体组织罗暗算酪氨酸羟化酶(TH)神经元变化和RT-PCR检测黑质部TH和α-synuclein mRNA的表达.结果 与对照组相比,实验组大鼠逐渐出现行为学改变:HE染色显示小胶质细胞在注射Lactacystin后第1天为(3501.92±57.32)个,第7天为(4895.50±52.67)个,第21天为(5340.18±52.87)个,与对照组(3271.23±63.76)个相比增高,差异具有统计学意义(P＜0.05):免疫组化检测显示黑质中多巴胺(DA)神经元在注射Lactacystin后逐渐变性死亡,第7天神经元数为(568.57±36.39)个,第21天为(119.67±21.06)个,与对照组(679.76±30.24)个相比,差异具有统计学意义(P＜0.05);免疫组化检测纹状体TH免疫阳性纤维显示其在注射Lactacystin后逐渐稀疏,强度逐渐变弱,实验组TH免疫阳性纤维平均光密度第7天为(0.1953±0.0076),与对照组(0.2412±0.0067)相比,差异无统计学意义(P＞0.05),第21天为(0.0781±0.0013)个,与对照组(0.2412±0.0067)个相比降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).同时,实验组mRNA检测显示,THmRNA表达越来越少,而α-synuclein mRNA在残存TH神经元中逐渐增多.结论 Lactacystin诱导的PD模型大鼠的病理呈退行性改变.符合PD发病的隐匿性、缓慢进展性特征.     

蛋白酶体抑制剂诱导大鼠运动行为改变的研究

目的 观察蛋白酶体抑制剂诱导大鼠黑质变性及大鼠运动行为改变,探讨蛋白酶体功能下降在帕金森病发病机制中的作用.方法 将蛋白酶体抑制剂立体定向注射入大鼠左侧黑质致密部,对照组注射等体积的生理盐水.观察大鼠自主行为和阿朴吗啡诱导的旋转行为的改变.开野实验观察大鼠自发运动行为改变.免疫组织化学法观察黑质致密部及纹状体内酪氨酸羟化酶的表达.结果 Lactacystin组大鼠给药一周后出现自发性活动减少,动作缓慢,震颤、对外界刺激不自主竖毛,且症状逐步加重;阿朴吗啡可诱导出向健侧的旋转运动.开野实验中,Lactacystin组大鼠自发运动行为出现改变.三周后黑质部位酪氨酸羟化酶免疫阳性细胞及纹状体内酪氨酸羟化酶免疫阳性神经纤维减少.结论 蛋白酶体抑制剂Lactacystin单侧黑质致密部微量注射可以诱导大鼠黑质变性并出现运动行为改变,蛋白酶体抑制剂在帕金森病动物模型制备上有潜在价值,蛋白酶体功能下降可能在帕金森病发病机制中起重要作用.     

Customer, Client, Consumer, Recipient, or Patient

Since the arrival of managed care, there has been a trend toward changing the basic terminology used to address clinicians and patients. Instead of the term patient, third party payors frequently use terms such as customer, client, consumer or recipient. One study demonstrated that patients prefer to be called patients. To investigate the preferred term to refer to patients and to be referred to by patients, we mailed a questionnaire to 100 physicians in four medical specialties each and to 100 psychologists. The overall response rate was 61%. Physicians overwhelmingly preferred to refer to patients by the patient's last name, their second preference was the patient's first name. Psychologists preferred to refer to the patients by first name, their second preference was the patient's last name. No group favored using terms such as client, customer, consumer, or recipient. Most physicians and psychologists preferred being referred to as doctors and nobody favored the term provider.     

Fasciitis, perimyositis, myositis, polymyositis, and eosinophilia

Several groups of cases of fasciitis and myositis with eosinophilia are reported. The common features are inflammation into fascia and/or perimysium, and/or muscle fibers; eosinophilia in blood and/or in muscle biopsy. The following classification of 24 cases is suggested: at one end of the spectrum are fasciitis with eosinophilia: diffuse fasciitis (Shulman syndrome): 10 cases (3 with hematological complications); 2 cases of diffuse fasciitis with muscle atrophy; 3 cases of restricted fasciitis. Relapsing perimyositis with eosinophilia belong to the same spectrum, either diffuse (5 cases) with myalgias, or localized (2 cases). Other cases are focal myositis or multiple myositis, polymyositis with eosinophilia. The relationship among these cases is discussed. There is a continuum among the different groups. The pathophysiology remains unknown.     

高海拔地区缺血性卒中患者单核 细胞/HDL-C比值与脑动脉粥样硬化性狭窄的相关性

目的 研究高海拔地区缺血性卒中患者单核细胞/HDL-C比值（monocyte/HDL-C ratio,MHR）与颅内动脉粥样硬化性狭窄（intracranial atherosclerotic stenosis,ICSA）程度的相关性。 方法 回顾性连续纳入2017年6月-2021年6月在青海省人民医院住院治疗的高海拔地区（海拔2260～4080?m）的急性缺血性卒中患者,依据DSA上脑血管狭窄程度（以狭窄最严重的动脉为准）分为无狭窄组、轻度狭窄（狭窄率≤50%）组、中度狭窄（狭窄率50%～70%）组、重度狭窄（狭窄率≥70%）组及闭塞（100%）组。比较5组患者的临床资料、实验室检查指标和MHR,并采用logistic回归模型计算不同程度血管狭窄的独立危险因素。 结果 共纳入349例患者,其中无狭窄组69例、轻度狭窄组78例、中度狭窄组41例、重度狭窄组84例、闭塞组77例。5组中年龄、性别分布、吸烟、饮酒、高血压、糖尿病比例方面差异均有统计学意义,实验室检查中白细胞、单核细胞、中性粒细胞、血小板计数以及血红蛋白、HDL-C水平和MHR差异也有统计学意义。多因素logistic回归分析显示,相对于无动脉狭窄,高龄为脑血管轻度狭窄（OR?1.061,95%CI?1.027～1.097,P＜0.001）,中度狭窄（OR?1.057,95%CI?1.017～1.099,P＝0.005）,重度狭窄（OR?1.096,95%CI?1.057～1.137,P＜0.001）,闭塞（OR?1.036,95%CI?1.001～1.072,P＝0.046）的独立危险因素;相对于无动脉狭窄,高MHR为轻度狭窄（OR?1.041,95%CI?1.009～1.074,P＝0.011）,中度狭窄（OR?1.082,95%CI?1.045～1.119,P＜0.001）,重度狭窄（OR?1.096,95%CI?1.062～1.131,P＜0.001）,闭塞（OR?1.101,95%CI?1.067～1.136,P＜0.001）的独立危险因素;相对于无动脉狭窄,单核细胞计数升高是中度狭窄（OR?1.684,95%CI?1.569～2.725,P=0.027）、重度狭窄（OR?3.529,95%CI?1.541～5.766,P=0.002 ）和闭塞（OR?5.446,95%CI?4.453～6.917,P=0.002）的独立危险因素。 结论 高龄、高MHR和单核细胞计数升高在高海拔地区对急性缺血性卒中患者的脑动脉粥样硬化性狭窄程度具有一定预测价值。     

Frontal lobe psychopathology: mania, depression, confabulation, catatonia, perseveration, obsessive compulsions, and schizophrenia

The frontal lobes can be subdivided into major functional neuroanatomical domains, which, when injured, surgically destroyed, or reduced in activity or volume, give rise to signature pathological and psychiatric symptomology. A review of case reports and over 50 years of research, including magnetic resonance imaging, positron emission tomography, and single photon emission computed tomography scans, indicates that apathy, "blunted" schizophrenia, major depression, and aphasic-perseverative disturbance of speech and thought are associated with left lateral as well as bilateral frontal (and striatal) abnormalities. Impulsiveness, confabulatory verbosity, grandiosity, increased sexuality, and mania are associated with right frontal (as well as bilateral) disturbances. Gegenhalten, catatonia, and disturbances of "will" are indicative of medial frontal injuries. Disinhibitory states and obsessive-compulsive perseverative abnormalities are more frequently observed with orbital frontal lobe dysfunction, including frontal-striatal disturbances. These associations, however, are not always clear-cut as patients with the same diagnosis may demonstrate different symptoms that may be due to an additional abnormality in a different region of the brain. Moreover, as the frontal subdivisions are richly interconnected, and as frontal lobe abnormalities are not always discrete or well localized, a wide array of seemingly divergent waxing and waning symptoms may be manifest, sometimes simultaneously, including manic depression and what has been referred to as the "frontal lobe personality."