白藜芦醇对小鼠艾滋病治疗作用的实验研究

[目的]观察中药虎杖提取物白藜芦醇的体内抗小鼠艾滋病病毒作用.[方法]BALB/C小鼠50只,随机分成正常组,模型组,白藜芦醇高、低剂量组(剂量分别为20、4mg·kg-1·d-1),齐多呋定(AZT)组(剂量为100mg·kg-1·d-1);除正常组外,其他组小鼠均腹腔接种Friend型鼠白血病病毒(FLV),复制小鼠艾滋病模型;病毒攻击后1 d,各组均按设计剂量给药,连续21 d;剖杀小鼠,观察白藜芦醇对模型小鼠的脾指数(质量比)及脾指数抑制率、胸腺指数(质量比)、外周血白细胞和红细胞计数以及CD3 、CD4 、CD8 T淋巴细胞亚群水平的影响.[结果]白藜芦醇高剂量组能抑制模型小鼠的脾肿大(P＜0.05)和胸腺萎缩(P＜0.01),升高外周血CD3 、CD4 、CD8 T淋巴细胞亚群水平(P＜0.05或P＜0.01),与模型组比较差异均具有显著性意义.但对外周血的白细胞和红细胞数量未见显著性影响.[结论]白藜芦醇具有一定的体内抗小鼠艾滋病病毒作用.     

增液布津汤对干燥综合征小鼠T细胞亚群的影响

目的 研究增液布津汤对干燥综合征小鼠T细胞亚群的影响,探寻代表方药增液布津汤方对SS干预作用机理.方法 用80只BALB/c小鼠,按体质量随机分为6组,各组均在第0天即开始给药,每天一次,直至第60天.于首次免疫后第61天球后静脉放血处死小鼠,解剖取相应脏器检测颌下腺、胸腺指数及外周血中T淋巴细胞亚群.结果 模型组颌下腺指数与正常组比较均显著降低,而给予药物后,均能显著增加干燥综合征(SS)小鼠的颌下腺指数,尤其是大剂量组作用明显(P＜0.01).各给药组均有降低CD4+/CD8+比值的趋势,阳性对照组、中、大剂量组明显降低CD4+/CD8+比值,与模型组比较有显著差异(P＜0.01),但小剂量组无统计学意义.结论 给予药物后,均能显著降低SS小鼠的胸腺指数,说明药物能抑制免疫炎症反应.增液布津汤通过调节CD4+、CD4+/CD8+比值来调节INF-γ、IL-6含量,通过抑制细胞因子IL-6、IFN-γ蛋白合成及分泌,间接地抑制了Th细胞的分化与增殖,调节Th1/Th2平衡来保护SS.     

冰香散挥发油对流感病毒感染鼠的预防作用及T淋巴细胞亚群的影响

[目的]观察冰香散挥发油预防性给药和不同途径给药(滴鼻、雾化)对流感病毒A/FM/1/47 (H1N1)鼠肺适应株感染小鼠的肺指数和T淋巴细胞亚群的影响.[方法]选用NIH小鼠,随机分为正常组、模型组、病毒唑组(剂量为100mg/kg)、冰香散滴鼻组(剂量为0.03g/kg)、冰香散雾化组(剂量为0.6g/kg),采用不同途径预防性给药7d,第8天小鼠攻毒,再持续给药4d后称取肺质量计算肺指数,取脾制成单细胞悬液经流式细胞仪测定各组T细胞亚群水平.[结果]冰香散滴鼻组、冰香散雾化组均能显著降低小鼠感染甲型流感病毒后的肺指数,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05);冰香散滴鼻组能显著提高小鼠脾组织T细胞亚群CD4+、CD3+水平和CD4+/CD8+比值(P＜0.05或P＜0.01).[结论]冰香散滴鼻防治流感的作用与其能调节T淋巴细胞水平有关.     

当归红芪超滤膜提取物对12C6+重离子束辐射致H22荷瘤小鼠免疫功能损伤的影响

目的观察当归红芪超滤膜提取物抗~(12)C~(6+)重离子束辐射致H22荷瘤小鼠免疫功能损伤的作用。方法 H22细胞皮下注射法构建H22荷瘤小鼠模型,以检测血液白细胞数目为评价标准确定~(12)C~(6+)重离子束辐射致H22荷瘤小鼠免疫损伤最佳辐射剂量及当归红芪超滤膜提取物药物干预最佳剂量。实验分正常对照组、肿瘤模型组、单纯药物组(给予当归红芪超滤膜提取物6.72 g/kg)、单纯放射组(照射剂量为4Gy)、药物(给予当归红芪超滤膜提取物6.72 g/kg)+放射(照射剂量为4Gy)组。测定各组脾脏指数、胸腺指数;流式细胞仪技术分析各组小鼠血液T淋巴细胞亚群变化;ELISA法检测各组小鼠血清补体C3、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)含量;光镜下观察脾脏病理形态学改变。结果与肿瘤模型组比较,单纯放射组血液白细胞数目、脾脏指数、胸腺指数、血液CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数量、血清补体C3、IFN-γ、IL-4含量明显下降(P0.05),CD4+/CD8+比值、IFN-γ/IL-4比值明显下降(P0.05)。病理形态学显示:肿瘤模型组小鼠脾脏形态结构如常,多数脾窦扩张淤血,脾小体清晰,可见动脉周围淋巴鞘,巨核细胞多见,与正常对照组小鼠脾脏形态无明显差异;单纯放射组脾脏脾小体及红髓脾索萎缩,淋巴细胞明显减少,巨核细胞数量减少,纤维组织增生。与单纯放射组比较,药物+放射组血液白细胞数目、脾脏指数、胸腺指数、血液CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数量、血清补体C3、IFN-γ含量明显上升(P0.05),CD4+/CD8+比值、IFN-γ/IL-4比值有明显上升(P0.05),病理形态学损伤改变明显减轻。结论当归红芪超滤膜提取物有减轻~(12)C~(6+)重离子束辐射引起H22的荷瘤小鼠免疫功能损伤的作用。     

余甘子叶提取物对荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞CD4+、CD8+亚群的影响

[目的]观察余甘子叶提取物(PL)对荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞CD4+、CD8+亚群的影响.[方法]建立H22荷瘤小鼠模型,灌胃给予余甘子叶提取物高、中、低剂量(1.982,0.991,0.496g/kg),观察余甘子叶提取物对荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞CD4+、CD8+亚群的影响.[结果]余甘子叶提取物高、中剂量(1.982,0.991g/kg)能显著提高荷瘤小鼠T淋巴细胞及其CD4+亚群相对数量(P＜0.05),上调CD4+/CD8+亚群比例(P＜0.05).[结论]通过提高T淋巴细胞及其CD4+亚群相对数量,使CD4+/CD8+比例接近正常值,此可能是余甘子叶提取物抗肿瘤的免疫学机制之一.     

红豆杉多糖对免疫功能低下小鼠细胞免疫功能的影响

目的探讨红豆杉多糖增强免疫低下小鼠免疫功能的机制。方法将48只昆明小鼠按随机数字表法分为正常对照组,氢化可的松模型组,红豆杉多糖低、中、高剂量组及猴头菇多糖阳性对照组,每组8只。除正常对照组外,其余各组小鼠皮下注射氢化可的松0.2mg/kg,隔天1次,共14d,制备小鼠免疫功能低下模型。正常对照组和氢化可的松模型组予0.9%氯化钠溶液10ml/kg灌胃,红豆杉多糖低、中、高剂量组分别予等量不同浓度10、20、40mg/ml红豆杉多糖溶液灌胃,猴头菇多糖阳性对照组予等量浓度为1.1mg/ml猴头菇多糖溶液灌胃,均1次/d,连续14d。流式细胞术检测小鼠血CD4+、CD8+细胞百分比,ELIAS法检测血清IL-4水平,测量小鼠胸腺指数。结果与正常对照组比较,氢化可的松模型组CD4+、CD8+细胞百分比均明显降低（P＜0.01）,红豆杉多糖低、中、高剂量组与氢化可的松模型组对比,CD4+、CD8+细胞百分比均有所增加（均P＜0.05）,其中红豆杉多糖中剂量组能降低CD4+/CD8+比值（P＜0.05）。与正常对照组比较,氢化可的松模型组血清IL-4水平明显下降,差异有统计学意义（P＜0.01）;红豆杉多糖低、中、高剂量组IL-4水平均高于氢化可的松模型组（P＜0.05或0.01）。氢化可的松模型组与正常对照组比较,胸腺指数明显降低（P＜0.01）。红豆杉多糖低、中、高剂量组及猴头菇多糖阳性对照组与氢化可的松模型组比较,胸腺指数均有所增加（P＜0.05）,其中红豆杉多糖中剂量组及猴头菇多糖阳性对照组均明显增高（P＜0.01）。结论红豆杉多糖增强细胞免疫的机制它可能主要通过调节细胞免疫来增强免疫低下小鼠的免疫功能。     

人类免疫缺陷病毒1感染者外周血CD8+T淋巴细胞表面CD38和人类白细胞抗原DR表达的研究

目的 探索人类免疫缺陷病毒（HIV）-1感染者外周血CD8+T淋巴细胞表面CD38（CD38+/CD8+）、人类白细胞抗原DR（HLA-DR）（HLA-DR+/CD8+）表达水平的变化及其与疾病进展的关系。方法 选取2012年5-8月河南省淮阳县中医院、西平县中医院、驻马店驿城区中医院、泌阳县中医院、博爱县中医院收治的经河南省疾病预防控制中心确诊的HIV-1感染者409例为HIV-1感染组,河南中医学院第一附属医院体检健康者28例为对照组。采用流式细胞仪检测外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞计数和百分比,计算CD4+/CD8+,实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测血浆病毒载量,应用全血染色、流式细胞术检测HIV-1感染者CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+。根据CD4+T淋巴细胞计数分为4组：＜200 cells/μl组87例、200～＜350 cells/μl组119例、350～＜500 cells/μl组99例、≥500 cells/μl组104例,比较不同CD4+T淋巴细胞计数者间CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+。结果 HIV-1感染组CD4+T淋巴细胞计数、百分比低于对照组,CD8+T淋巴细胞计数、百分比高于对照组（P＜0.001）;HIV-1感染组CD4+/CD8+低于对照组（P＜0.001）。HIV-1感染者血浆病毒载量为（38 415±1 067）copies/ml。Pearson相关分析表明,HIV-1感染者CD4+T淋巴细胞计数与血浆病毒载量呈负相关（r=-0.246,P＜0.001）;CD38+/CD8+与CD4+T淋巴细胞计数呈负相关（r=-0.260,P＜0.001）;CD38+/CD8+与血浆病毒载量呈正相关（r=0.409,P＜0.001）;HLA-DR+/CD8+与CD4+T淋巴细胞计数呈负相关（r=-0.225,P＜0.001）;HLA-DR+/CD8+与血浆病毒载量呈正相关（r=0.378,P＜0.001）。200～＜350 cells/μl组、350～＜500 cells/μl组、≥500 cells/μl组CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+低于＜200 cells/μl组（P＜0.05）。结论 HIV-1感染者CD4+T淋巴细胞计数、百分比降低,CD8+T淋巴细胞计数、百分比升高,CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+与血浆病毒载量呈正相关。CD4+T淋巴细胞计数、CD8+T淋巴细胞计数结合CD8+T淋巴细胞的活化水平可以更全面地反映HIV-1感染者免疫功能受损的程度,HIV-1感染后CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+的变化可作为评价疾病进展的新指标。     

红豆杉多糖对小鼠免疫功能的影响

目的:探讨红豆杉多糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法:40只小鼠随机分为正常对照组、模型组及红豆杉多糖低、中、高剂量组,每组8只。除正常对照组外,其余各组小鼠皮下注射氢化可的松0.2 mg/kg,隔天1次,共14 d,制备小鼠免疫低下模型。正常对照组和模型组灌胃0.9%Na Cl溶液200 mg/kg,红豆杉多糖低、中、高剂量组分别按红豆杉多糖100、200、400 mg/kg连续14 d灌胃。采用流式细胞术检测小鼠血清中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+细胞数。结果:与正常对照组比较,模型组CD3+、CD4+、CD8+、CD19+淋巴细胞数均明显降低,CD4+/CD8+比值明显升高(P0.01);与模型组比较,红豆杉多糖高、中、低剂量组CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞及CD19+B淋巴细胞数均明显增加,中剂量组CD4+/CD8+比值明显降低(P0.05,P0.01)。结论:红豆杉多糖可增强免疫低下小鼠免疫功能,其机制可能与调节血清中T细胞亚群和B淋巴细胞有关。     

ADSCs对辐射诱发C57小鼠胸腺瘤免疫功能的影响及其机制

目的:观察脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对辐射诱发小鼠胸腺瘤免疫功能的影响及其可能的机制,方法:清洁级C57BL/6小鼠32只,随机分为4组:对照组、照射组、照射+ADSCs组、假照射+ADSCs组,各8只,末次照射后第7天后分别处死4组小鼠,计算小鼠胸腺指数.刀豆素A(ConA)诱导的胸腺淋巴细胞转化率采用MTY法测定,运用流式细胞仪检测胸腺淋巴细胞的细胞周期以及T淋巴细胞亚群的变化.结果:照射+ ADSCs组相对于照射组小鼠的胸腺淋巴细胞转化率和胸腺指数显著增高(P＜0.05),并且CD4+T淋巴细胞的含量显著增加(P＜0.05),CD8+T淋巴细胞明显下降(P＜0.05),CD4+/CD8+T淋巴细胞比值显著升高(P＜0.05).结论:ADSCs可能通过调节小鼠胸腺内细胞水平的变化,保护小鼠胸腺细胞的免疫功能.