17β-雌二醇对体外机械牵张诱导心肌细胞肥大的影响

目的:研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对体外机械牵张诱导的心肌细胞肥大的影响。方法:以机械牵张刺激体外培养的新生大鼠心肌细胞,建立心肌细胞肥大模型,采用免疫荧光方法分析心肌细胞表面积、Western blot方法检测肥大指标之一β-MHC的表达,以观察E2对机械牵张诱导的心肌细胞肥大的影响,并采用Western blot方法检测心肌细胞整合素β1(inte-grinβ1)表达的变化。结果:与对照组相比,机械牵张24 h后,心肌细胞表面积、心肌细胞胎儿型蛋白β-MHC表达增加,表明机械牵张24 h可诱导心肌细胞肥大。同时,机械牵张24 h心肌细胞整合素β1水平亦显著增加。100 nmol/L E2预处理30 min可明显减轻机械牵张诱导的心肌细胞表面积和β-MHC蛋白水平的增加,降低机械牵张诱导的心肌细胞整合素β1增加,该效应可被雌激素受体非特异性拮抗剂ICI182780逆转。结论:一定水平的E2可改善机械牵张诱导的心肌细胞肥大反应,并且能降低机械牵张诱导的integrinβ1表达的增加。     

雌、孕激素对ET-1诱导的心肌细胞肥大反应的影响

目的观察不同浓度的17β-雌二醇（E2）和孕酮（P）单独及联合运用对内皮素-1（ET-1）诱导的心肌细胞肥大反应的影响。方法以ET-1刺激体外培养的新生大鼠心肌细胞,建立心肌肥大细胞模型,以心肌细胞[^3H]-亮氨酸（^3H—leu）掺入作为心肌肥大反应的指标。结果E2可明显抑制ET-1诱导的心肌细胞^3H—leu掺入的增加,而P对此无显著作用;E2／P联合运用时,P对E2降低ET-1诱导的心肌细胞^3H—leu掺入增加的作用具有一定程度的抑制作用。结论E2可抑制ET-1诱导的心肌细胞肥大反应,E2／P联合使用时,P可一定程度的抑制E2对心肌的保护效应,应用时应以低浓度为宜。     

BAPTA对去甲肾上腺素刺激的大鼠心肌细胞蛋白合成及c-fos和β-MHC表达的影响

目的观察去甲肾上腺素（norepinephrine，NE）刺激导致的心肌细胞肥大中，钙信号通路和心肌细胞蛋白合成以及c—fos和β—MHC表达之间的关系。方法去甲。肾上腺素（10^-5mol／L）刺激原代培养的心肌细胞，细胞内钙离子络合剂BAPTA（20μmol／L）阻断钙信号通路，通过^3H—leucine掺入测定蛋白质合成，RT—PCR测定c—fos及β—MHCmRNA的表达．结果NE刺激组的心肌细胞^3H—leucine摄人量、c—fos及β—MHC的表达均显著高于正常对照组（P〈0．01），BAPTA阻断后明显降低（P〈0．01），单纯BAPTA阻断组的^3H—leucine摄入量和β-MHC的表达低于正常对照组（P〈0．01），在正常对照组及单纯BAPTA阻断组未见c—fos明显表达。结论Ca^2＋信号通路不但参与NE刺激引起的心肌细胞蛋白合成增加、c-fos及β—MHC的过度表达，且在正常心肌细胞蛋白质合成及β—MHC表达中也起重要作用。     

17—β—雌二醇诱发大鼠垂体催乳素瘤及原癌基因C—myc的超表达

SD大鼠皮下埋植17—β—雌二醇60天后,垂体重量明显增加,其前叶细胞增生明显且分化受抑制,血浆泌乳素含量显著升高,斑点杂交显示垂体细胞原癌基因C—myc的转录水平明显增加。     

维拉帕米对高糖与去甲肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的影响

目的 利用体外培养的乳鼠心肌细胞，观察维拉帕米对高浓度葡萄糖与去甲肾上腺素共同诱导的肥大心肌细胞的影响，并推测其作用机制。方法 以培养的乳鼠心肌细胞为模型分组给药后，用[^3H]leucine标记法测定心肌细胞蛋白的合成；利用计算机图象分析系统测心肌细胞的体积。结果 一定浓度的维拉帕米在对高糖和去甲肾上腺素诱导的肥大心肌细胞的蛋白合成及体积均有显著的抑制作用。结论 维拉帕米能有效抑制高糖与去甲肾上腺素诱导的心肌细胞肥大。     

葛根素对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大及凋亡的影响

\[摘要\]目的利用体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞,探讨葛根素(puerarin,Pue)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)所致心肌细胞肥大和心肌细胞凋亡的影响。方法新生大鼠心肌细胞培养,除对照组外,分别给予ISO(10-5mol/L)、Pue(10-6mol/L)、ISO(10-5mol/L)+Pue(10-6mol/L)、ISO(10-5mol/L)+普萘洛尔(propranolol,Pro, 2×10-6 mol/L),检测培养心肌细胞蛋白质含量、细胞体积、蛋白质的合成及细胞凋亡率。结果和对照组相比,ISO可使心肌细胞总蛋白含量、体积和凋亡率明显增加(P<0.01);Pue可以抑制由于ISO诱导所出现的上述情况,结果与Pro相近。结论Pue能对抗ISO引起的心肌肥大及细胞凋亡,此效应可能是葛根素抑制心肌肥厚发生的保护机制之一。     

BAPTA对去甲肾上腺素刺激的大鼠心肌细胞蛋白合成及c-fos和β-MHC表达的影响

目的观察去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)刺激导致的心肌细胞肥大中,钙信号通路和心肌细胞蛋白合成以及c-fos和β-MHC表达之间的关系.方法去甲肾上腺素(10-5mol/L)刺激原代培养的心肌细胞,细胞内钙离子络合剂BAPTA(20 μmol/L)阻断钙信号通路,通过3H-leucine掺入测定蛋白质合成,RT-PCR测定c-fos及β-MHC mRNA的表达.结果NE刺激组的心肌细胞3H-leucine摄入量、c-fos及β-MHC的表达均显著高于正常对照组(P＜0.01),BAPTA阻断后明显降低(P＜0.01),单纯BAPTA阻断组的3H-leucine摄入量和β-MHC的表达低于正常对照组(P＜0.01),在正常对照组及单纯BAPTA阻断组未见c-fos明显表达.结论Ca2 信号通路不但参与NE刺激引起的心肌细胞蛋白合成增加、c-fos及β-MHC的过度表达,且在正常心肌细胞蛋白质合成及β-MHC表达中也起重要作用.     

17-β-雌二醇对凝血酶诱导血管平滑肌细胞增生和c-fos、bcl-2蛋白表达影响

目的通过建立凝血酶(T)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增生模型,观察17-β-雌二醇(E_2)对 T 诱导的VSMC 增生的影响,并进一步观察其对 c-fos 蛋白和 bcl-2蛋白的表达有何作用,旨在认识 E_2作用的分子机制。方法以细胞计数法和流式细胞仪 DNA 含量测定,细胞周期分析的方法观察 T 及 E_2对 VSMC 增生和 DNA 合成的影响。免疫印迹法(Western blot)观察 T 及 E_2等各处理因素作用1小时及3天后,c-fos 蛋白和 bcl-2蛋白的变化情况。结果 10~(-9)～10~(-7)M 的E_2呈浓度依赖性地抑制2u/ml T 诱导的细胞增生和 DNA 合成作用(P<0.01)。各处理因素作用1小时后,T 能显著促进 c-fos蛋白的增加。各浓度的 E_2能显著抑制 T 的促 c-fos 蛋白增加作用,作用3天后,c-fos 蛋白含量各组差异无显著性。各处理因素作用1小时后,bcl-2蛋白无显著变化,作用3天后,T 能显著促进 bcl-2蛋白的增加。各浓度的 E_2能显著抑制这种增加。上述各项指标中,雌激素受体(ER)拮抗剂 tamoxifen(TAM)(10~(-6)M)能部分阻断10~(-7)M E_2的作用,差异有显著性。结论 E_2能抑制 T 诱导的 VSMC 增生,这可能与其抑制 c-fos 蛋白和 bcl-2蛋白表达有关,且该作用至少部分通过 ER 介导。     

Beta肾上腺素受体介导的心肌细胞肥大分子机制及相关中药研究进展

心肌肥大主要是以心肌细胞面积增大及心肌细胞基因表达方面的改变为特征,是心肌细胞对外界生理或病理刺激的代偿性适应变化。然而长期处于代偿性肥大阶段可能会使心肌细胞失代偿、收缩功能紊乱而最终导致心衰的发生。β肾上腺素受体(βAR)是G蛋白偶联受体(GPCR)超家族成员之一,对心脏功能调节起关键作用,其介导的信号通路参与了心肌细胞肥大过程。近年来,中药对βAR介导的心肌细胞肥大调控的相关报道逐渐增多。因此,对βAR介导的信号通路在心肌肥大过程中的作用及中药对相关信号通路的调节进行综述,以期对后续研究提供参考。     

β-17雌二醇对小鼠腹腔巨噬细胞的影响

向小鼠腹部皮下注入20μg β-17雌二醇后,小鼠腹腔巨噬细胞数量增加,吞噬功能及形成EAC花环能力增强。试验结果表明β-17雌二醇具有增强体内单核吞噬细胞系统的功能的特性,妊娠期间小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)增多、功能活跃的现象在某种程度上受雌激素的影响。     

17β雌二醇对丙泊酚诱导皮层神经元凋亡的影响

目的 探讨17β雌二醇对丙泊酚诱导原代培养皮层神经元凋亡的影响及机制。方法 原代培养7 d的大鼠皮层神经元,随机分为三组:溶剂对照组(给予等溶剂20%脂肪乳),丙泊酚组(丙泊酚终浓度为500μmol/L),17β雌二醇+丙泊酚组(17β雌二醇终浓度为0.1μmol/L,丙泊酚终浓度为500μmol/L)。上述药物处理皮层神经元12 h后,用Hoechst 33258核染色法和TUNEL法检测皮层神经元调亡,Western-blot法测定神经元Bcl-2,Bax和cleaved caspase-3蛋白的水平。结果 与溶剂对照组比较,丙泊酚组神经元凋亡率显著性增加(P<0.01),Bcl-2蛋白水平显著性下降(P<0.01),Bax蛋白水平显著性增加(P<0.01),Bcl-2/Bax显著性降低(P<0.01),cleaved caspase-3蛋白水平显著性增加(P<0.01)。与丙泊酚组比较,17β雌二醇+丙泊酚组神经元凋亡率显著性下降(P<0.01),Bcl-2蛋白水平显著性增加(P<0.01), Bax蛋白水平显著性下降(P<0.01),Bcl-2/Bax显著性增加(P<0.01),cleaved caspase-3蛋白水平显著性下降(P<0.01)。结论 17β雌二醇可通过影响Bc1-2和Bax蛋白水平抑制皮层神经元凋亡,产生保护作用。     

秦皮素对苯肾上腺素诱导的大鼠心肌细胞肥大的影响

目的：观察秦皮素对苯肾上腺素诱导的原代SD乳鼠心肌细胞肥大的影响。方法建立苯肾上腺素诱导的SD乳鼠原代心肌细胞肥大模型,观察秦皮素对心肌细胞肥大的影响;图像分析法计算心肌细胞面积;[3H]‐亮氨酸掺入法测试心肌细胞蛋白质合成速率;实时定量荧光PCR法检测心肌细胞Nrf2和肥大分子标志物心房钠尿肽、心房利尿肽的mRNA表达水平。结果（1）80μmol／L苯肾上腺素刺激心肌细胞48h能成功复制SD乳鼠心肌细胞肥大模型并伴随Nrf2表达量的增加;（2）秦皮素呈剂量依赖性地抑制苯肾上腺素刺激的SD乳鼠心肌细胞面积的增大、蛋白质合成速率的增加和肥大分子标志物的上调。结论秦皮素能显著抑制PE 诱导的原代大鼠心肌细胞肥大。     

ox-LDL诱导人外周血内皮祖细胞凋亡及17β-雌二醇的影响

目的 观察17 β-雌二醇(E2)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人外周血内皮祖细胞(EPCs)凋亡的影响.方法 密度梯度离心法分离人外周血EPCs,培养7 d后进行实验分组,分为对照组、ox-LDL组及不同浓度E2组,采用不同浓度E2干预24h.采用异硫氰酸荧光素标记的Annexin-v、碘化丙锭(PI)双染色免疫荧光法检测各组EPCs凋亡率.结果 与对照组(12.31±0.34)%相比,ox-LDL诱导组的凋亡率(31.43±1.05)%有显著性增高(P<0.01).而E2抑制ox-LDL诱导的EPCs凋亡,并具有剂量依赖性,在10 nmol/L、50nmol/L、100 nmol/L浓度E2干预24 h后凋亡率依次为(22.39±0.68)%、(20.42±2.56)%、(13.93±0.30)%,差异有显著性(P<0.01).加入ICI182,780组的凋亡率上升至(28.6±1)%,加入LY294002组的凋亡率上升至(25.2±1.0)%,与单纯E2组(13.9±0.30)%的凋亡率比较,差异有显著性(P<0.01).结论 17β-雌二醇具有剂量依赖性抑制OX-LDL诱导EPCs凋亡的作用,其作用机制与雌激素受体及P13K通路有关.     

环孢素A对血管紧张素Ⅱ诱导的新生大鼠心肌细胞肥大及c-fos表达的影响

目的 在培养的新生大鼠心肌细胞上观察环孢素A(CsA)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大和c-fos表达增加的作用，借以探讨CsA抑制血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥厚的机制。方法 用Bradford比色法测量心肌细胞总蛋白的含量；用Western Blot方法定量测定心肌细胞c-fos蛋白含量。结果 ①AngⅡ可明显增加心肌细胞的蛋白总量，CsA可以浓度依赖地抑制AngⅡ诱导的心肌蛋白含量的增加；②AngⅡ可诱导rfos蛋白表达增加，CsA可浓度依赖性抑制AngⅡ的这一作用。结论 CsA可以抑制AngⅡ诱导的培养新生大鼠心肌细胞肥大，抑制AngⅡ引起的心肌细胞c-fos蛋白表达增加可能是其作用机制之一。     

17β-雌二醇对大鼠腹腔巨噬细胞免疫活性影响

目的研究17β-雌二醇(17β-Estradiol,E)对大鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。方法以大鼠腹腔巨噬细胞为对象,采用吞噬中性红法及MTT法,观察不同剂量、不同时间雌激素处理后腹腔巨噬细胞的活性及吞噬功能的变化;采用ELISA方法检测细胞因子IL-6的含量的变化。结果剂量为10-4、10-6可引起腹腔巨噬细胞吞噬功能抑制,该作用在E处理后的4h、8h、20h均明显,随时间延长,作用增加。剂量10-8可增强吞噬功能;各组IL-6的含量均高于正常对照组。结论17β-雌二醇具免疫增强和免疫抑制双重功效,并随时间、剂量大小有变化。     

激活心肌细胞内钙对心肌细胞c-fos白表达的影响

目的　探讨钙内流及钙释放对心肌细胞c-fos蛋白表达有何影响,为深入了解心肌细胞重塑的分子机制提供实验依据。方法　应用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ,10-7mol/L)刺激原代培养的大鼠心肌细胞钙内流,雷尼丁(RY,10－7mol/L)刺激心肌细胞内钙释放。免疫组织化学方法检测不同刺激时相的心肌细胞c-fos蛋白表达部位。免疫印迹杂交检测不同刺激时相的心肌细胞c-fos蛋白半定量。结果　AngⅡ与RY均可刺激心肌细胞〔Ca     

三七总皂苷对去甲肾上腺素诱导的心肌肥大的影响

目的:研究三七总皂苷(PN S)对去甲肾上腺素(NE)诱导的新生大鼠心肌肥大的作用,并探讨其作用机制。方法:用NE诱导培养新生大鼠心肌细胞制作心肌肥大模型。经G iem sa染色后用图像分析仪测定细胞表面积,B rad ford法测细胞蛋白质含量,观察0.02、0.1、0.5 g.L-13个浓度的PN S对肥大心肌细胞的影响。结果:肥大组细胞表面积及蛋白质含量比对照组明显增加(P<0.01);PN S中、高剂量组与肥大组比较,细胞表面积及蛋白质含量均显著减少(P<0.01);低剂量PN S对细胞表面积及蛋白质含量无明显影响(P>0.05)。结论:PN S可浓度依赖性地拮抗NE诱导的大鼠心肌细胞的肥大反应。     

17β-雌二醇对宫颈癌HeLa细胞增殖的促进作用

目的 :研究 17β 雌二醇 (E2 )对人宫颈癌HeLa细胞系增殖的影响 ,并探讨其可能的机制。　方法 :应用细胞培养、细胞计数、甲基噻唑基四唑 (MTT)、流式细胞术和激光共聚焦显微镜技术。　结果 :E2 (10 - 6mol L)使细胞生长曲线上移 ;E2 (10 - 8～ 10 - 6mol L)呈剂量依赖性地促进宫颈癌HeLa细胞系的增殖。流式细胞术检测细胞周期发现 ,E2 (10 - 6mol L)可促进细胞周期由G1 期进入S期 ,G1 期的DNA含量由 70 .0 %下降到 5 5 .5 % ,S期的DNA含量由17.3%上升到 2 9.0 %。激光共聚焦检测到E2 (10 - 6mol L)可使细胞内Ca2 浓度显著升高。　结论 :E2 可以通过调节细胞周期和细胞内Ca2 浓度水平 ,从而调节宫颈癌HeLa细胞的增殖活动