2007-2009年三峡库区返乡人员日本血吸虫特异性抗体水平调查

目的掌握三峡库区血吸虫病疫区返乡人员抗日本血吸虫特异性抗体分布特征,探讨该人群抗血吸虫特异性抗体的影响因素。方法选择三峡库区前往血吸虫病疫区打工的返乡人员为研究对象,采取统一的调查表进行个案调查。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人群血吸虫特异性抗体(IgG),计算人群抗体水平平均几何均数(G值),并进行统计分析。结果 2007-2009年共调查疫区返乡人员1940人,G值为0.0176,抗体阳性率为2.27%(44/1940),各年G值差异有统计学意义(F=48.074,P0.05)。自血吸虫病流行省返乡者占77.89%(1511/1940),G值为0.0199,显著高于自传播阻断省返乡者(F=30.007,P0.05)。男性G值为0.0178,女性为0.0174,差异无统计学意义(F=0.059,P0.05)。55～59岁年龄组G值最高(0.0316),各年龄组间G值差异有统计学意义(F=3.187,P0.05),45岁以上人群抗体水平显著高于45岁以下人群(F=13.491,P0.05);离渝前农民和船民G值显著高于民工和商业服务(P均0.05),离渝后商业服务G值显著低于船民、农民和民工(P均0.05);不同文化程度者G值差异有统计学意义(F=5.400,P0.05),文化程度高,G值低。逐步回归分析表明,文化程度、流动原因、离渝前职业、疫区省类型以及返乡次数等因素与抗体水平之间存在明显关联。结论疫区返乡人群存在血吸虫感染的危险,建议进一步健全三峡库区血吸虫病监测体系,针对重点人群开展健康教育,预防和控制血吸虫病在三峡库区发生和流行。     

间接荧光抗体试验检测日本血吸虫感染家兔血清中特异性抗…

用尾蚴，雌虫，雄虫和血吸虫感染兔肝组织内虫卵冰冻切片抗原进行间接荧光抗体试验，观察日本血吸虫感染家兔血表中特异性抗体的动态变化，抗尾蚴，成虫，虫卵抗体检出的最早时间分别为３ｗｋ，３ｗｋ，４ｗｋ，其抗体滴度高峰分别在感染后７ｗｋ，１０－１２ｗｋ和１０ｗｋ。以抗尾蚴抗体水平最高，抗虫卵抗体次之，抗雌，雄虫抗体较低。     

感染日本血吸虫单性尾蚴兔抗体水平的观察

对９只雄性尾蚴感染兔（检虫１５－１３３条，平均５３．１条）及９只雌性尾蚴感染兔（检虫１－１０２条，平均３６．１条）定期采血，用ＥＬＩＳＡ、ＬＡ及ＣＨＲ进行检测，至感染后１年阳性率依次为８８．９％、５５．６％及８３．３％。３种方法检出阳性反应时间分别为感染后３－５１ｗｋ、４－１７ｗｋ及２－３５ｗｋ，其中ＥＬＩＳＡ法波动性较大，ＬＡ及ＣＨＲ则较稳定。此结果从一个侧面提示检测抗体的方法不应偏废，至少对于血防监测用于发现新感染是值得推荐的。     

慢性日本血吸虫病患者唾液中特异性抗体的检测

[目的 ]研究日本血吸虫病患者唾液中抗血吸虫特异性抗体检测的可行性。 [方法 ]应用 EL ISA检测血吸虫病患者及正常人唾液中的抗血吸虫抗体并与血清中的特异性抗体比较。[结果 ]慢性血吸虫病患者唾液 32份 ,阳性 2 9份 (90 .6 % ) ,血清 32份 ,阳性 32份 (10 0 % ) ,经χ2 检验两者间差别无显著性意义 (P>0 .0 5 )。正常人唾液140份 ,阳性 8份 (5 .75 % ) ,正常人血清 15 6份 ,阳性 6份 (3.8% ) ,两者间差别无显著性意义 (P>0 .0 5 )。 [结论 ]检测唾液中的特异性抗体可以作为血吸虫病免疫诊断或筛查的一种无创伤性方法     

间接荧光抗体试验检测日本血吸虫感染家兔血清中特异性抗体水平的动态变化

用尾蚴、雌虫、雄虫和血吸虫感染兔肝组织内虫卵冰冻切片抗原进行间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ），观察日本血吸虫感染家兔血清中特异性抗体的动态变化。抗尾蚴、成虫（雌、雄虫）、虫卵抗体检出的最早时间分别为３ｗｋ、３ｗｋ、４ｗｋ，其抗体滴度高峰分别在感染后７ｗｋ、１０～１２ｗｋ和１０ｗｋ。以抗尾蚴抗体水平最高，抗虫卵抗体次之，抗雌、雄虫抗体较低。这为全面了解感染宿主对血吸虫各期抗原（尾蚴、雌、雄虫、虫卵）的免疫反应及免疫学诊断提供了新的资料     

移民新建镇人群血吸虫抗体水平变化的观察

目的 通过血清学方法观察移民新建镇人群血吸虫抗体水平的变化。 方法 2002-2005年选择长江安徽段血吸虫病流行区退人又退耕的双退点、退人不退耕的单退点和未退人退耕的对照点各1个为试点，采用斑点金免疫渗滤法（DIGFA）与ELISA法纵向平行检测各试点人群血吸虫抗体水平。 结果 双退点DIGFA、ELISA测得的人群血吸虫抗体阳性率分别从2002年的6.63%、7.26%下降到2005年的3.52%和3.71%，差异均有统计学意义（χ²=5.2625，P<0.05；χ²=6.3296，P<0.05）；单退点和对照点人群的血吸虫抗体阳性率无显著变化。ELISA纵向检测3个试点人群血清血吸虫抗体的吸光度（A₄₅₀值）水平，经单因素方差分析，单退点2005年A₄₅₀均值为0.147，较2003年的0.182有显著下降（P<0.01）。双退点、对照点人群的血吸虫抗体均值无显著变化。 结论 移民新建镇人群血吸虫抗体阳性率及抗体水平呈不同程度的下降。     

检测特异性抗体用于日本血吸虫病疗效考核的研究

为探讨特异性ＩｇＧ及其亚类对日本血吸虫病的疗效考核价值,用直接ＥＬＩＳＡ及间接ＥＬＩＳＡ 方法检测了２６４ 份治疗前和治疗后不同时间慢性血吸虫病病人以及５０ 份正常人血清中虫卵抗原（ＳＥＡ）和成虫抗原（ＡＷＡ）特异性ＩｇＧ、ＩｇＧ１ 和ＩｇＧ４。结果ＩｇＧＳＥＡ 及ＩｇＧ４ＳＥＡ在治疗后３ 个月出现有显著意义的下降且于治疗后１２ 个月降至正常;ＡＷＡ特异性抗体均于治疗后６ 个月才下降,其中仅ＩｇＧ４ＡＷＡ 于治疗后１２ 个月降至正常;ＩｇＧ４ＳＥＡ／ＡＷＡ 在治疗后１２ 个月时的阴转率最高（９７．７ ％） ,ＩｇＧＳＥＡ 次之（７５％ ）。表明治疗后ＳＥＡ 特异性ＩｇＧ 及ＩｇＧ４ 下降较ＡＷＡ特异性抗体快;ＩｇＧ４ 为一短期抗体,尤其ＩｇＧ４ＳＥＡ,可作为判断日本血吸虫病是否治愈的指标。     

单性和双性日本血吸虫感染兔特异性抗体的动态研究

血吸虫病鼠肝组织内虫卵及血吸虫成虫冰冻切片抗原免疫酶染色试验(TEFS-IEST及AWFS-IEST)均能显示单性和双性日本血吸虫感染家兔特异性抗体的动态,滴度高峰均在感染后10wk。特异性抗体水平与感染度及感染期密切相关,抗虫卵抗体水平高于抗成虫者,双性感染抗体水平高于单性感染者,TEFS-IEST的检测敏感性显著高于AWFS-IEST及双面胶纸条法环卵沉淀试验。     

人群日本血吸虫病再感染与优势抗体应答的研究

目的 :为研究日本血吸虫病流行区人群中特异性抗体水平是否为再感染的危险因素。方法 :选择江西省新建县鄱阳湖一小岛上三个毗邻的自然村作为观察试区 ,调查 196名 ( 3- 2 5岁 )感染者中 ,吡喹酮治疗后粪检阴性的 138人经过一个感染季节后再感染的情况 ,并检测其血清特异性同型限制性抗体水平。同时就人群接触疫水的暴露水平及年龄因素、血样中特异的同型限制性抗体水平诸因素同再感染的关系进行非条件 logistic回归分析。结果 :虫卵可溶性抗原和粗制成虫抗原特异的 Ig G4抗体水平是再感染发生的危险因素 ,危险度分别是 2 .83和 2 .4 0。结论 :本研究结果可能成为构建对再感染易感状态作预测性诊断试验的基础。     

日本血吸虫特异性抗体与诊断抗原的应用研究进展

血清学抗体检测因检测成本低，操作易掌握，方法较成熟，被广泛应用于日本血吸虫病的辅助诊断和疫情监测。为提高检测的敏感性和特异性、区分病程、考核疗效，已有大量研究用以探索短程抗体及诊断抗原。本文将日本血吸虫特异性抗体、诊断抗原的应用研究进展综述如下。     

日本血吸虫抗体间接血凝试验检测档案的建立

目的 目的 建立日本血吸虫抗体间接血凝试验 （IHA） 检测的书面、 电子档案。方法 方法 在血吸虫病IHA查病过程中, 将书面原始记录、 电子记录、 样品血清库结合起来, 使记录的信息相互补充, 形成完整的检测档案。结果 结果 日本血吸虫抗体IHA检测档案可长期保存血吸虫病查病资料, 更可进行实验溯源, 其操作简单, 有利于提高查病质量。结论 结论 建立的日本血吸虫抗体IHA检测档案简单实用, 值得推广。     

日本血吸虫NP30抗体检测方法的优化

目的为了提高单克隆抗独特型抗体NP30抗体检测系统在大山区日本血吸虫病疫区的诊断效能,在原有的双抗体夹心ELISA方法的基础上对其进行优化、改良,建立间接ELISA血清学诊断方法。方法通过正交设计,选用L27(313)正交表,对NP30腹水包被酶标板的浓度、血清浓度、血清孵育时间和辣根过氧化物酶标记抗人IgG的二抗孵育时间共4个因素的3个水平进行不同组合的实验,确定该间接法的最佳实验条件。并用建立的方法对50份云南大山区日本血吸虫粪孵阳性病人血清样本和50份非疫区正常人血清样本进行检测,评价其敏感性和特异性。结果确定的该间接法最佳检测条件为:NP30腹水4μg/ml包被酶标板,血清浓度为1∶100,37℃孵育60min,二抗为37℃孵育30min。该方法的敏感性和特异性分别为88%和96%。结论该方法具有较高的诊断价值,可用于大山区日本血吸虫病疫区的诊断检测。     

日本血吸虫特异性IgE抗体相关肽表位的筛选与免疫学鉴定

目的　从噬菌体表面显示肽库筛选并鉴定日本血吸虫特异性IgE抗体相关表位。 方法用ABC 酶联免疫吸附 (ELISA)法检测日本血吸虫病流行区居民血清 15 0份 ,选择其中 15份具高滴度血吸虫特异性IgE抗体的血清 ,混合后经蛋白G柱亲和层析祛除IgG抗体 ,用于对 12肽的噬菌体表面显示肽库进行 5轮免疫亲和淘筛。从所获噬菌体克隆中挑取 35个克隆 ,经DNA序列测定 ,对各独立肽表位进行免疫学鉴定。结果　经 5轮筛选 ,DNA序列测定显示共有 4个独立噬菌体克隆 ,其中 phage 3和 phage 6有较多重复克隆存在 ,为优势克隆 ;Westernblot分析显示 ,筛库血清中特异性IgE抗体能有效识别各噬菌体克隆。分别用各克隆噬菌体免疫小鼠 ,均能诱导特异性IgE抗体产生。结论　从 12肽噬菌体表面显示肽库中成功筛选到日本血吸虫特异性IgE抗体相关肽表位。     

日本血吸虫病低度流行区吡喹酮薄膜衣片临床疗效及不良反应评价

【摘要】 目的  评价日本血吸虫病低度流行区吡喹酮薄膜衣片对血吸虫病患者的疗效。 方法  选择1 个血吸虫病低度流行村,对5~60岁常住居民采用毛蚴孵化法进行粪检,并统计患者感染度（EPG）。阳性者分别采用60mg/kg 或40mg/kg 吡喹酮薄膜衣片进行病原学治疗。治疗6 周后粪检复查,评估吡喹酮薄膜衣片疗效,阳性者采用相同治疗进行第2 次治疗;同时观察吡喹酮服药后的不良反应发生情况。 结果  87 例观察对象中,有吡喹酮抗虫治疗史1 次者43例,2 次以上者44例;中度感染37例（EPG：216~312）,轻度感染50例（ EPG：24~96）;第1 次治疗使用吡喹酮薄膜衣片60mg/kg 37例,40mg/kg 50例,复查均未查见毛蚴或虫卵。患者不良反应发生率为17.24%。 结论  在日本血吸虫病低度流行区,吡喹酮薄膜衣片对血吸虫感染者具有较高敏感性。     

日本血吸虫病免疫检测试剂IgG抗体冻干质量控制品的制备

目的 制备日本血吸虫病免疫检测试剂IgG抗体质量控制品。 方法 收集湖北省血吸虫病流行区粪检筛查血吸虫感染病人血清和无疫水接触史、无血吸虫感染史且粪检阴性人群血清,用取得中华人民共和国医疗器械注册证的检测试剂进行检测,制成冻干质量控制品。 结果 共筛选出12份阳性质控品、1份灵敏度质控品、1份精密度质控品和10份阴性质控品;阳性质控品根据ELISA法检测血清效价不同,分为强、中、弱阳性质控品。经12个月实际储存条件及破坏稳定性实验,该质控品稳定性可达1年。 结论 所制备的冻干质控品使用方便,结果稳定,可以满足日本血吸虫病诊断试剂实验室质量控制需求。     

日本血吸虫抗独特型抗体NP30抗体检测法在云南大山区应用效果的评价

目的评价日本血吸虫抗独特型抗体NP30抗体检测法在云南大山区血吸虫病流行现场的应用效果.方法对云南大山区血吸虫病流行区的506位居民进行粪检,同时用NP30抗体检测法和血吸虫抗体ELISA检测试剂盒(SEA-ELISA)分别对其血清进行检测,评价NP30抗体检测法的敏感性;同时检测非流行区的100份血清确定其特异性.结果 NP30抗体检测法和SEA-ELISA法的粪检阳性符合率分别为87.80%(144/164)和84.76%(139/164);两者的特异性分别为96.00%(96/100)和94.00%(94/100),差异均无显著性(P均＞0.05),但在粪孵阴性人群血清样本中,NP30抗体检测法和SEA-ELISA法的检出率分别为44.15%(151/342)和70.47%(241/342),差异有显著性(P＜0.05).结论 NP30抗体检测法可用于云南大山区血吸虫病筛查.     

中国日本血吸虫病流行区学龄儿童感染率用于评估社区人群感染率的研究

目的分析学龄儿童日本血吸虫感染率与社区人群感染率之间的相关关系。方法通过检索CNKI和PubMed,收集1990-2009年公开发表的在中国大陆开展的有关年龄分层日本血吸虫感染率的相关文献,采取最小二乘法和极大似然法,以线性回归和logistic回归对学龄儿童与社区总人群、学龄儿童与社区中其他人群日本血吸虫感染率之间的关系进行拟合分析,以期找到最适的回归拟合。结果变换后的logistic回归拟合学龄儿童与社区人群日本血吸虫感染率之间关系的效果最好,回归系数aG、bG、aI、bI、aA、bA值分别为0.4718、6.8462、0.7985、9.6128、0.1619和4.2688。结论学龄儿童日本血吸虫感染率可考虑作为评估中国社区人群日本血吸虫感染率的一个指标。     

Evaluation of IgG-ELISA for the diagnosis of Schistosoma japonicum in a high prevalence, low intensity endemic area of China

Antibody-based diagnostic methods for detecting infection with Schistosoma japonicum have been developed and integrated into the national control program in China; however, the utility of these methods compared with conventional coprological methods remains unclear. In two consecutive years, we compared the performance characteristics of Kato-Katz with a commercially available enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) that detects anti-egg antigen IgG antibodies in a high prevalence, low intensity village in China (1025 subjects in 2005 and 652 subjects in 2006). In comparison with Kato-Katz based on duplicate stool specimens, each read in triplicate, the sensitivity of IgG-ELISA was high, ranging from 79.3% to 87.4% but with a relatively low specificity of 38.9% to 53.5%. The positive predictive value ranged from 20.8% to 24.6% while the negative predictive value ranged from 93.1% to 94.4%. When analyzed as continuous variables, there was a poor correlation between EPG (eggs per gram feces) and antibody level in both years (r(2005)=0.23 and r(2006)=0.41). We detected a trend toward reduced sensitivity at lower infection intensity as measured by Kato-Katz in 2005 (P=0.262) and 2006 (P=0.287). We evaluated changes in antibody levels and the prevalence of positive antibody in the cohort of subjects examined in both 2005 and 2006 (n=565). The prevalence of positive antibody but not the continuous antibody level, decreased in individuals who were uninfected at both time points or who transitioned from infected to uninfected as assessed by Kato-Katz. In this cohort, the distribution of antibody levels measured in 2006 among individuals who were positive by Kato-Katz in 2006 broadly overlapped with the distribution of antibody levels in individuals who were negative by Kato-Katz in both 2005 and 2006. Our results indicate fairly poor performance characteristics of the anti-egg antigen IgG-ELISA for the detection of active infection with S. japonicum in our community based sample and are in contrast with other reports based on more selected populations. The high prevalence but low intensity of S. japonicum in our study community reflects the evolving epidemiology of schistosomiasis in communities receiving intermittent treatment with praziquantel in China. We suggest marked caution in implementing anti-egg antigen IgG-ELISA based diagnosis for either individual level diagnosis or population-based targeting for national control programs.     

Expression, characterization and therapeutic efficacy of chimeric Fab of anti-idiotypic antibody NP30 against Schistosoma japonicum

The murine monoclonal anti-idiotypic antibody NP30 is a promising therapeutic antibody against Schistosoma japonicum. However, the immunogenicity of murine NP30 limits its further study and application in humans. Here the chimeric Fab of NP30 (chFab-NP30) comprising the variable regions of murine NP30 and constant regions of human antibody was assembled. chFab-NP30 was expressed and purified as a soluble and functional protein. Administration of chFab-NP30 in vivo increased the survival rate, reduced egg burdens and ameliorated organ pathology of mice with acute schistosomiasis. Our study indicated that chFab-NP30 is a promising candidate to be used as a specific and efficient recombinant antibody against acute schistosomiasis japonica. Further studies on function mechanism of chFab-NP30 needs to be carried out in the future.