Q及N型Ca^2＋道在兔不全梗阻性不稳定膀胱中功能的初探

目的：对Q及N型Ca^2 通道在兔不全梗阻性不稳定膀胱中的功能进行研究。方法：成年同龄雄性新西兰白兔30只，其中15只为对照组(仅仅手术游离兔膀胱颈而不做结扎梗阻为对照组)，15只为膀胱出口不全梗阻8周尿流动力学证实为不稳定膀胱者为实验组。模型成熟后，采用急性酶法分离及传代培养的方法获得单个膀胱平滑肌细胞。运用膀胱平滑肌M受体激动剂和Q及N型Ca^2 通道阻滞剂，进行共聚焦显微镜检测其Ca^2 浓度变化；了解膀胱平滑肌细胞是否存在Q及N型Ca^2 通道；运用免疫组织化学方法进一步证实膀胱平滑肌细胞上是否存在Q及N型Ca^2 通道及其变化。结果：共聚焦显微镜及免疫组化均证实膀胱平滑肌细胞膜存在Q及N型Ca^2 通道，且不稳定膀胱平滑肌细胞膜之Q及N型Ca^2 通道数量明显增多。结论：膀胱平滑肌细胞Ca^2 及其通道病理性改变是出现不稳定膀胱的重要因素之一。     

梗阻性不稳定膀胱逼尿肌细胞内Ca2+的变化及意义

目的：对Ca^2＋在兔不全梗阻性不稳定膀胱逼尿肌细胞中的变化进行研究。方法：成年同龄雄性新西兰白兔30只，其中15只为膀胱出口不全梗阻8周，尿流动力学证实为不稳定膀胱者为实验组，15只仅手术游离兔膀胱颈而不做结扎梗阻为对照组。模型成熟后，采用急性酶法分离及传代培养的方法获得单个膀胱平滑肌细胞。对培养的第一代细胞采用激光共聚焦显微镜观察模型膀胱平滑肌细胞静态Ca^2＋浓度。结果：静息状态下不全梗阻性不稳定膀胱平滑肌细胞内Ca^2＋浓度明显增高（Ca^2＋超负荷）。结论：膀胱逼尿肌细胞Ca^2＋病理性改变是出现不稳定膀胱的重要因素之一。     

梗阻性不稳定膀胱模型的尿流动力学评价

目的：建立兔不全梗阻性不稳定膀胱动物模型，并观察其尿流动力学的变化。方法：取雄性成年新西兰大白兔30只，随机分为对照(假手术)组和梗阻组各15只。不全梗阻性手术后第8周，在氯胺酮和氟哌利多全麻下行尿流动力学等检侧。结果：梗阻8周后，梗阻组兔的膀胱尿流动力学主要参数较对照组有显著变化。梗阻组不稳定膀胱的发生率为60％。该膀胱出口不全梗阻动物模型无论从膀胱的病理或尿流动力学的改变，均与人类慢性膀胱出口不全梗阻类似。结论：这一动物模型的成功建立，为进一步研究人类慢性不全梗阻性不稳定膀胱疾病的病理、病理生理变化及治疗提供了一个平台。     

钙激活钾通道电流在膀胱逼尿肌不稳定中的表达变化研究

目的观察膀胱逼尿肌不稳定(DI)中钙激活钾通道(BKCa)电流变化,探讨BKCa在DI发生机制中的作用。方法通过膀胱出口部位梗阻法建立大鼠DI模型,取其膀胱平滑肌,酶消化分离单个平滑肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录BKCa宏观电流,比较其电流密度在DI和正常大鼠中的变化。结果大鼠膀胱平滑肌细胞表达较为丰富的BKCa电流,具有其他平滑肌细胞BKCa相似的电生理特性,即外向整流特性,能够被BKCa通道特异性阻断剂IbTX(300 nM)阻断。DI大鼠膀胱平滑肌BKCa在多个膜电位时电流密度明显下降,在膜电位为+60时电流密度由(32.42±7.97)pA/pF(n=21)下降到(20.56±4.63)pA/pF(n=18),两组相比,P<0.01。结论 BKCa可能参与了大鼠膀胱DI的发生,调控DI时BKCa通道活性可能作为治疗DI的靶点之一。     

清醒大鼠膀胱测压建立梗阻性逼尿肌不稳定模型

目的探讨通过清醒膀胱测压建立梗阻性逼尿肌不稳定(detrusor instability,DI)模型的方法。方法成年雌性Wistar大鼠于会阴部行不完全性尿道结扎制作尿道出口梗阻模型,6周后耻骨上膀胱造瘘,于清醒状态下行充盈性膀胱测压,观察膀胱容量、压力变化、排尿反射及逼尿肌不稳定的发生情况。结果大鼠清醒测压时保持排尿反射,梗阻组发生逼尿肌不稳定的占76.17%,单位时间发生率(1.38±0.80)次/min,逼尿肌不稳定组膀胱最大压力(93.62±12.91)cmH2O和容量(1.20±0.41)mL较对照组(51.50±8.78)cmH2O(、0.33±0.08)mL显著增高(P<0.01)。结论清醒大鼠膀胱测压是建立梗阻性逼尿肌不稳定模型的可靠和实用的方法。     

钙激活钾通道基因和蛋白水平在膀胱逼尿肌不稳定中的表达

目的观察膀胱逼尿肌不稳定（DI）中钙激活钾通道（BKCa）基因和蛋白水平变化,探讨BKCa在DI发生机制中的作用。方法通过膀胱出口部位梗阻法建立大鼠DI模型,取其膀胱平滑肌,提取总RNA和总蛋白,以β-actin为内参,分别采用定量PCR和WesternBlot化学发光法检测BKCa通道基因和蛋白水平。结果 DI组大鼠膀胱平滑肌BKCa通道基因和蛋白水平均明显下降,与对照组相比,DI组mRNA水平相对量（与内参照基因β-actin）由0.35±0.12（n=15）下降到0.21±0.09（n=12）,两组比较有显著性差异（P〈0.05）,BKCa通道蛋白水平相对量（与内参照蛋白β-actin）0.41±0.08（n=15）下降到0.23±0.06（n=12）,两组相比有显著性差异（P〈0.01）。结论 BKCa在膀胱逼尿肌不稳定时发生明显改变,可能参与了大鼠膀胱DI的发生,调控DI时BKCa通道活性可以作为治疗DI的靶点之一。     

尿液中内皮素-1在兔不全梗阻性膀胱中的研究

目的 :探讨尿液中内皮素 1(ET 1)在兔不全梗阻性膀胱中的变化和意义。　方法 :运用放射免疫分析技术对 10只成年雄性新西兰白兔不全梗阻性膀胱 (实验组 ,分为梗阻 3周组及梗阻 6周组 )及 10只同龄雄性新西兰白兔无梗阻性膀胱 (对照组 ,分为术后 3周组及术后 6周组 )兔尿液中ET 1进行研究。　结果 :尿液中ET 1含量实验组较对照组明显升高 ,实验组梗阻 3周组与对照组术后 3周组及实验组梗阻 6周组与对照组术后 6周组比较均差异显著 (P <0 .0 1) ,实验组梗阻 3周组与 6周组比无显著差异 (P >0 .5 ) ,对照组术后 3周组与术后 6周组比无显著差异 (P >0 .5 )。　结论 :在兔不全梗阻性膀胱中 ,ET 1对膀胱壁结构改变及功能紊乱具有一定作用 ,尿液中ET 1升高可作为诊断膀胱出口梗阻的一个重要参数。     

血浆内皮素-1在兔不全梗阻性膀胱中的研究

目的 :研究血浆内皮素 1(ET 1)在兔不全梗阻性膀胱中的改变及意义。　方法 :10只成年雄性新西兰白兔不全梗阻性膀胱[1 ,2 ] 为实验组 (分梗阻 3周组及梗阻 6周组 )及 10只同龄雄性新西兰白兔无梗阻性膀胱为对照组(分术后 3周组及术后 6周组 ) ,采用放射免疫分析技术对兔血浆ET 1进行研究。　结果 :实验组血浆ET 1含量较对照组明显升高 ,梗阻 3周组与梗阻 6周组相比无显著差异 ;对照组术后 3周组与术后 6周组相比无显著差异 (P>0 .5 )。　结论 :血浆ET 1的上调与兔膀胱不全梗阻的病理改变有着一定的内在联系 ,并且可作为诊断膀胱出口梗阻的一个重要参数     

内皮素-1在兔不全梗阻性膀胱平滑肌组织中的变化及意义

目的 :探讨内皮素 1 (ET 1 )在兔不全梗阻性膀胱平滑肌组织中的变化及意义。　方法 :运用放射免疫分析技术对 1 0只成年雄性新西兰白兔不全梗阻性膀胱 (实验组 ,梗阻 6周 )及 1 0只同龄雄性新西兰白兔无梗阻性膀胱(对照组 ,术后 6周 )膀胱壁组织 (分为膀胱体部及颈部平滑肌组织 )中ET 1进行研究。　结果 :尿液中ET 1含量实验组较对照组膀胱壁的膀胱体部平滑肌组织ET 1含量明显升高 (P <0 .0 5 )。膀胱颈部平滑肌组织ET 1含量无明显变化 (P >0 .2 )。实验组膀胱重量明显增加 (P <0 .0 0 1 )。　结论 :在兔不全梗阻性膀胱的膀胱壁结构改变及功能紊乱具有重要作用     

正常与不稳定大鼠膀胱逼尿肌T型Ca2+通道亚型对比研究

目的探讨正常与不稳定大鼠逼尿肌T型Ca2 通道亚型基因的表达和T型Ca2 电流密度差异.方法RT-PCR法与膜片钳检测逼尿肌细胞T型Ca2 亚型通道基因表达和电流密度.结果①在T型Ca2 通道亚型α1I、α1G、α1H中,正常逼尿肌表达α1 I,DI逼尿肌表达α1I与α1G,二者均无α1H表达;②正常与DI逼尿肌均存在T型Ca2 电流;③DI组峰值电流(peak I)幅度和密度均大于正常组.结论DI逼尿肌胞外钙离子通过T型Ca2 通道的内流增加,这种变化可能与DI逼尿肌T型Ca2 亚型通道基因的异常表达有关.     

内皮素及其受体在兔不全梗阻性膀胱的实验研究

目的:内皮素及其受体在兔不全梗阻性膀胱中的改变和意义.方法运用放射免疫分析技术对10只成年雄性新西兰白兔不全梗阻性膀胱(兔不全梗阻性膀胱[1,2]为实验组分梗阻3周组及梗阻6周组)及10只同龄雄性新西兰白兔无梗阻性膀胱(为对照组,分为术后3周组和6周组)的兔血桨、尿液及膀胱平滑肌组织中内皮素-1及其受体进行研究.结果实验组较对照组血浆与尿液中内皮素-1含量均明显增高(血浆3周组与血浆6周组均为P＜O.05;尿液3周组与6周组均为P＜0.001);实验组较对照组膀胱体部平滑肌组织内皮素及其受体含量明显升高(P＜0.05),而膀胱颈部平滑肌组织内皮素-1及其受体含量无显著性差异(P＞0.2);实验组膀胱重量明显增加(P＜0.001).结论内皮素-1具有收缩平滑肌和促平滑肌、纤维结缔组织增生(有丝分裂)作用,内皮素及其受体的上调在兔不全梗阻性膀胱中为其膀胱壁结构改变和功能紊乱的重要因素.血浆、尿液中内皮素在兔不全梗阻性膀胱中含量的上调与兔不全梗阻性膀胱壁结构的改变与功能紊乱的病理过程具有一定的内在联系,并可作为膀胱出口梗阻诊断的重要参数.     

内皮素-1受体在兔不全梗阻性膀胱中的研究

目的 :研究内皮素 1受体 (ET 1R)在兔不全梗阻性膀胱中的变化和意义。　方法 :采用受体的放射配基结合分析技术 (RBA) ,对 10只成年雄性新西兰白兔不全梗阻性膀胱 (兔不全梗阻性膀胱模型 ,梗阻 6周为实验组 )及 10只同龄雄性新西兰白兔无梗阻性膀胱术后 6周 (对照组 )的膀胱体及膀胱颈部平滑肌组织ET 1R进行研究。结果 :在膀胱体平滑肌组织中ET 1R结合量 ,实验组较对照组明显增多 (P <0 .0 2 ) ,而膀胱颈平滑肌组织中ET 1R结合量无明显变化 (P >0 .2 )。实验组较对照组的膀胱重量明显增加 (P <0 .0 0 1)。　结论 :兔不全梗阻性膀胱的膀胱体平滑肌组织中ET 1R结合量明显增多。ET 1具有收缩平滑肌和促平滑肌、纤维结缔组织增生 (有丝分裂 )的作用 ,故ET 1R的上调是导致兔不全梗阻性膀胱壁结构改变及功能紊乱的重要因素之一。     

大鼠BOO对膀胱逼尿肌生物力学特性的影响

目的 建立能较好模拟膀胱出口梗阻(Bladder outlet obstruction，BOO)的稳定的大鼠实验模型，探讨对逼尿肌收缩功能及顺应性的影响及其机制。方法 实验采用Wistar雌性大鼠近端尿道不全结扎法建立BOO模型；采用灌流肌槽，以胆碱类药物(氯化氨基甲酰胆碱carbachol，非选择性M受体激动剂)作为刺激因素，测定离体逼尿肌条的主动收缩功能。充盈期膀胱压力测定检测膀胱顺应性及低压充盈期未容积的变化。结果 2周后手术组膀胱出现典型的梗阻后表现。低压充盈期膀胱容积及膀胱湿重(ml，g)均显著大于假手术组(ml，g)。出现逼尿肌不稳定(Detrusor instability，DI)者收缩力逼尿肌条显著低于假手术组，逼尿肌稳定(Detmsor tstability，DS)者梗阻2周时及梗阻4周时分别表现为高于和低于假手术组。梗阻后不稳定组大鼠逼尿肌呈低顺应性，而稳定组逼尿肌顺应性升高。结论 ①成年Wistar大鼠采用内径1mm的近端尿道不全结扎法，建立的BOO实验动物模型具有方法简便、存活率高、稳定性好等特点，适合于膀胱出口梗阻的相关实验研究。②梗阻后逼尿肌的收缩性有两种改变：不稳定组逼尿肌收缩性受损，稳定组逼尿肌收缩性出现双相性改变，即早期呈代偿性升高，继而降低。③梗阻后膀胱顺应性依逼尿肌稳定性而异：逼尿肌不稳定时呈低顺应性，而逼尿肌稳定组顺应性升高。     

一氧化氮合酶神经在兔不全梗阻性膀胱中的变化及意义

目的 :探讨一氧化氮合酶 (NOS)神经在兔不全梗阻性膀胱中的变化及意义。　方法 :采用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 (NADPH)免疫组化方法 ,对 10只新西兰白兔 (成年雄性 )不全梗阻性膀胱 (自制兔不全梗阻性膀胱 ,梗阻时间为 6周 ,作为实验组 )及 10只无梗阻性膀胱同龄新西兰白兔 (对照组 )膀胱体及膀胱颈部组织进行研究。　结果 :实验组兔膀胱体、膀胱颈部粘膜及膀胱体平滑肌NOS神经均明显减少 (膀胱体粘膜为P <0 .0 5 ,膀胱颈粘膜为P <0 .0 1,膀胱体平滑肌为P <0 .0 5 ) ;膀胱颈部平滑肌NOS神经无显著变化。　结论 :一氧化氮对平滑肌具有松弛作用 ,NOS神经的减少对兔不全梗阻性膀胱的结构和功能变化具有一定作用。     

前列腺增生症致膀胱出口梗阻的尿动力学诊断

目的：评价尿道阻力因子(URA)、A-G图、AG数在诊断前列腺增生症(BPH)致膀胱出口梗阻(1300)中的价值。方法：分别应用URA、A—G图和AG数对69例BPH病人的压力-流率的检查结果进行分析。结果：URA、A-G图、AG数诊断BOO者分别为73．9％、62．3％和68．1％。URA诊断为BOO,而A-G图诊断为可疑BOO者占19．6％。URA和AG数呈显著正相关。结论:URA、A-G图、AG数对BOO的诊断均有意义。URA灵敏度较高。A—G图可疑BOO者,应进一步应用URA进行分析,     

雄性大鼠膀胱出口梗阻两种模型制作方法的比较研究

目的 通过采用耻骨后膀胱颈和会阴途径球部尿道部分结扎两种方法,建立雄性大鼠膀胱出口部分梗阻（paritial bladder outlet obstraction, pBOO）模型,并对所建模型进行鉴定和比较,为pBOO后膀胱重构（bladder reconstruction）的深入研究提供一种成活率高,复制性和稳定性较好的动物模型。方法 80只健康雄性Wistar大鼠随机分为三组：I组为假手术组（对照组）,20只;Ⅱ组为耻骨后途径膀胱颈部分结扎组,30只;Ⅲ组为会阴途径球部尿道部分结扎组,30只。依据梗阻时间分别将I组、Ⅱ组、Ⅲ组大鼠随机分为2周组和4周组,于术后2周和4周对大鼠行尿动力学检测后,完整切除膀胱测其重量,将精囊腺组织和部分膀胱用4%甲醛固定,HE染色观察组织学变化。结果 Ⅱ组和Ⅲ组成活率分别为73.3%和80.0%,二者无统计学意义;I组、Ⅱ组、Ⅲ组建模手术时间分别为（9.75±2.29）、（17.33±3.54）、（10.77±2.44）min,Ⅱ组与I组和Ⅲ组比较差异均有统计学意义;I组、Ⅱ组、Ⅲ组的2周组和4周组逼尿肌漏尿点压（detrusor leak point pressure, DLPP）分别为（26.31±2.32）、（27.34±3.93）、（24.68±2.39）mmHg和（26.42±2.41）、（34.23±3.01）、（32.63±3.20）mmHg,I组与Ⅱ组和Ⅲ组的4周组比较差异有统计学意义,Ⅱ组和Ⅲ组的2周组和4周组比较差异均有统计学意义。结论 耻骨后途经膀胱颈部分结扎和会阴途径球部尿道部分结扎两种方法都能成功建立雄性大鼠pBOO模型,与耻骨后途径相比,会阴途径成活率高,手术操作时间短,复制性和稳定性好。     

经腹超声下测量之膀胱重量对前列腺增生膀胱出口梗阻的临床意义

目的探讨经腹超声下测量之膀胱重量(ultrasound estimated bladder weight,UEBW)对前列腺增生膀胱出口梗阻(BOO)的临床意义及与尿动力学指数的相关性。方法来我院就诊的50例有下尿路症状的前列腺患者(排除神经、内分泌系统疾病,无下尿路外伤与手术史)分为膀胱出口梗阻组(B组)和非膀胱出口梗阻(NB组)及对照组(NC组)。比较组间的年龄、IPSS、UEBW、最大尿流率(Qmax)、最大尿流率时膀胱压力的差异。再比较这些参数之间的差异及相关性。UEBW通过将膀胱假想成球体,测量膀胱壁厚度及膀胱体积以计算。结果UEBW:B组(48.6±17.8)g,NB组(29.5±4.7)g,NC组(24.4±4.6)g。B组与NB组及NC组相比较P均小于0.001。结论UEBW可作为一种非侵袭性的诊断膀胱出口梗阻的指标,在临床上有广泛的应用价值。