系统性红斑狼疮患者干扰素诱导基因的表达及其与疾病活动性的相关性研究

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中5个干扰素(IFN)诱导基因(IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL、ISG15)的表达及其与SLE疾病活动度的相关性.方法 运用SYBRgreen dye I实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测76例SLE患者与54名健康对照人的IFIT1、IFIT4、OASL、OASL及ISG15 mRNA表达水平(以-AACt值表示),并且与红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、补体C3、C4、抗核抗体(ANA)及抗dsDNA抗体等指标比较,分析IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL、ISG15 mRNA表达水平以及上述常规检测指标与SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分之间的相关性.结果 ①SLE组与正常对照组相比,IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15 mRNA表达显著增高(P＜0.01);SLE活动组与SLE缓解组比较,IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15 mRNA表达增高(P＜0.05);SLE组IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15 mRNA表达水平之间呈正相关(r＞0.5,P＜0.05).②SLE组IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15 mRNA表达水平均与SLEDAI积分呈显著正相关(r＞0.5,P＜0.05).③ESR、CRP、补体C3、C4、ANA与IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL、ISG15 mRNA表达水平及SLEDAI积分均无相关性,抗dsDNA抗体与IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL、ISG15 mRNA表达水平及SLEDAI积分呈正相关(r＞0.5,P＜0.05).结论 SLE患者IFIT1、IFIT4、OAS1、OASL及ISG15的表达水平在SLE患者中显著增高,并且与SLEDAI积分呈显著正相关,对SLE患者病情活动度和病情严重度的判断均有较大价值,抑制这5个基因的表达可能为SLE的治疗提供新的靶点.     

干扰素诱导基因与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的 探讨实时定量测定干扰素诱导基因[抗黏病毒1(MX1)基因,2′5′-寡腺苷酸合成酶1(OAS1),干扰素诱导蛋白44(IFI44)基因]表达水平与系统性红斑狼疮(SLE)临床表现及病情活动度的相关性.方法 收集100例SLE患者,40例非SLE其他自身免疫性疾病患者,40名健康对照的临床资料,取外周血抽提总RNA并反转录成cDNA,运用SYBR green dye Ⅰ实时定量聚合酶链反应(QT-PCR)在ABI PRISM 7000基因测序仪上检测患者和对照组的MXI、OAS1和IFI44定量表达水平(以△CT值表示)的差异,并与各临床指标及病情活动度进行相关性分析.采用方差分析和Spearman相关分析进行统计学处理.结果 ①SLE患者总体的MX1、OAS1、IFI44 mRNA △CT值(3.4±1.8,4.2±1.5,8.8±2.2)明显高于非SLE患者组(2.4±0.4,3.4±0.7,5.4±2.1)和健康对照组(2.3±1.2,2.6±0.7,5.2±2.0);②SLE患者组的OAS1、IFI44 mRNA △CT值在不同活动度的SLE组内[非活动组(3.8±1.4,3.2±1.8);轻度活动组(4.8±1.5,8.0±2.2);重度活动组(6.0±1.4,12.1±2.4)]差异具有统计学意义;③SLE患者组的OAS1、IFI44 mRNA△CT值与SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分之间有相关性(r=0.338,0.380);④在有关节炎的SLE患者中,其MX1、OAS1、IFI44表达水平升高,与无关节炎患者比较差异具有统计学意义;⑤在狼疮肾炎组内,IFI44mRNA △CT值表达(2.2±1.1)与非狼疮肾炎组(3.2±2.1)比较差异有统计学意义;⑥SLE组内3个基因表达存在高相关性且具有统计学意义(P均＜0.05).结论 干扰素诱导基因MX1、OAS1、IFI44在SLE患者中均有表达上调现象,OAS1、IFI44 mRNA实时定量表达水平对SLE患者的病情活动度判断有意义,且三者在SLE的发生发展中亦存在密切联系.     

系统性红斑狼疮外周血干扰素积分与临床相关研究

目的 讨Ⅰ型干扰素(IFN)诱导基因(IFIG)的表达与系统性红斑狼疮(SLE)的临床相关性.方法 实时定量聚合酶链反应(PCR)检测67例SLE患者及23名健康对照外周血白细胞中5个IFIG(OAS-1、Mx-1、Lv6e、IFIT1和IFIT4)的mRNA水平,计算IFN积分,并与相应临床资料进行统计学分析;随机挑取17例患者采用荧光素酶报告基因测定其血清IFN活性并与IFN积分行相关分析.结果 IFN积分在SLE患者中显著增高,并与血清IFN活性及SLE疾病活动指数(SLEDAI)-2K积分呈显著正相关,与补体C3水平呈负相关.此外,抗Sm、抗RNP抗体阳性的患者中存在IFN积分显著升高.结论 IFN积分与血清IFN活性密切相关,与SLE的疾病活动性及特定自身抗体表型相关,是反映SLE活动的新的生物标志物.     

Ⅰ型干扰素系统在自身免疫性炎性肌病大鼠肌肉和肺组织的表达

目的 通过观察自身免疫性炎性肌病(EAM)大鼠肌肉和肺组织Ⅰ型IFN系统的表达,初步探讨EAM合并肺间质病变的病理机制。方法 建立EAM大鼠模型,分为健康对照组、EAM模型对照组、EAM模型组,测3组大鼠血清中肌酸激酶(CK)水平,HE染色分析模型大鼠肌肉和肺脏病变程度,实时定量PCR测Ⅰ型IFN系统在肌肉和肺组织中的表达。结果 与健康对照组、EAM模型对照组比,EAM模型组血清CK[(209.17±91.95) IU/L]、肌肉病理评分[(2.17±0.76)分]和肺脏组织病理评分[(1.75 ±0.41)分]、肌肉组织中Ⅰ型IFN系统mRNA表达水平明显升高,差异有统计学意义(P值均小于0.05)。与EAM模型对照组比,EAM模型组肺组织IFNα、IFNβ、干扰素α受体1(IFNαR1)、信号传导蛋白和转录激活物1(STAT1)、黏病毒抑制蛋白1(MX1) mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P值均小于0.05),而干扰素诱导蛋白1(IFIT1)、干扰素诱导基因15(ISG15)表达水平差异无统计学意义。EAM模型组大鼠肌肉组织中IFNα、IFNβ、IFNαR1、STAT1、MX1、IFIT1、ISG15 mRNA表达与血清CK水平和肌肉病理评分呈正相关。EAM模型组大鼠肺组织中IFNα、IFNβ、IFNαR1、STAT1、MX1 mRNA表达与肺脏病理评分呈正相关。结论 EAM大鼠肌肉和肺组织均有Ⅰ型IFN系统表达,Ⅰ型IFN可能参与了EAM大鼠靶器官的病理损害。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血淋巴细胞亚群和细胞因子水平及药物对其的影响

目的 研究原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血淋巴细胞亚群、细胞因子特点及药物对其的影响.方法 82例初诊PBC患者随机分为熊去氧胆酸组(28例)、熊去氧胆酸联合泼尼松龙组(27例)、熊去氧胆酸联合硫唑嘌呤组(27例),检测治疗前和治疗3、6个月时外周血淋巴细胞亚群和细胞因子水平.另设健康对照组20例.结果 与健康对照组相比,PBC患者外周血CD_4~+T细胞比例升高[42.10±0.97)%比(36.40±2.18)%],IFN7[(36.40±1.49)ng/L比(25.70±2.50)ns/L]、IL-2[(68.30±3.14)ng/L比(37.10±3.72)ns/L]、IL-4[(53.30±2.49)ns/L比(40.70±3.78)ns/L]、IL-6[(41.30±2.91)ng/L比(31.20±3.14)ng/L]、TNFα[(30.10±0.94)ng/L比(23.50±1.68)ng/L]、IL一1β[(55.80±2.38)ng/L比(42.40±3.03)ns/L]、转化生长因子β(TGFβ)[(68.10±2.63)ng/L比(59.10±2.29)ng/L]水平升高;外周血TNFα水平与AIJT、AST、总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)、Mayo危险评分呈正相关(r分别为0.355、0.390、0.409、0.397、0.293,P<0.05).治疗后,熊去氧胆酸组外周血CD~+_4T细胞比例下降;熊去氧胆酸组IFNγ、IL-4、IL-6水平在治疗3个月后降低,而6个月后升高;熊去氧胆酸联合泼尼松龙组、熊去氧胆酸联合硫唑嘌呤组IFNγ、IL-4、IL-6均较治疗前降低.3组PBC患者治疗后IL-2、TNFα均较治疗前降低.结论 PBC患者外周血同时存在Th1型和Th2型细胞因子异常,且以Th1型细胞因子异常为主,提示PBC是以细胞免疫为主的自身免疫病.IFNγ、TNFα与病情相关.三种治疗方案对免疫系统的调节不完全相同.     

DNA损伤与慢性阻塞性肺疾病的关系

目的探讨DNA损伤与慢性阻塞性肺疾病(COPD)的关系。方法取20例吸烟的COPD患者、20例健康吸烟者和15例健康无吸烟者的外周血并分离淋巴细胞,用Western blot测淋巴细胞热休克蛋白70(HSP70)水平,用彗星实验测淋巴细胞DNA损伤程度。结果(1)DNA损伤积分:COPD患者[(42·1±10·2)分]明显高于健康吸烟者[(17·4±9·3)分],健康吸烟者高于健康无吸烟者[(10·1±3·6)分](F=70·86,P<0·01)。(2)外周血淋巴细胞HSP70表达水平(吸光度值):健康吸烟者(44·8±15·3)较健康无吸烟者(56·1±18·9)低,COPD者(20·9±9·9)又较健康吸烟者低(F=26·60,P<0·05)。(3)直线相关分析显示,HSP70水平与DNA损伤积分呈明显的负相关(r=-0·73,P<0·01)。结论DNA损伤在COPD的发生及发展中可能起一定作用,而DNA损伤的程度可能与HSP70表达水平的差异有关。     

糖尿病神经病变患者单核细胞TOLL样受体4的表达及其与血浆肿瘤坏死因子α、白介素6的相关性研究

目的研究T2DM伴糖尿病神经病变患者外周血单核细胞TOLL样受体4(TLR4)的表达及其与促炎因子TNF-α、IL-6的相关性。方法将研究对象分为正常组(NC,n=44),T2DM组(n=44),T2DM神经病变组(n=44)。分离和提取外周血单核细胞,流式细胞术和RT-PCR检测单核细胞表面TLR4蛋白和mRNA;ELISA检测血浆TNF-α和IL-6。结果 T2DM神经病变组HbA_1 c[(9.09±-1.62)%vs(8.36土1.10)%vs(5.30±0.89)%]、单核细胞TLR4蛋白[(42.02±9.69)%vs(31.27±6.87)%vs(11.96±5.54)%]和TLR4 mRNA[(2.98±1.06)vs(1.74±0.47)vs(1.12±0.52)]、血浆TNF-α[(8.75±3.14)vs(6.27土3.64)vs(3.19±1.17)Pg/m1]、IL-6[(3.63±1.81)vs(2.60±1.14)vs(1.54±0.58)pg/ml]水平均高于T2DM和NC组(P0.01);T2DM神经病变组TLR4蛋白与TNF-α、IL-6呈正相关(r=0.631,P0.0001;r=0.447,P=0.0023)。结论糖尿病神经病变患者单核细胞TLR4参与机体炎症反应,与糖尿病神经病变的发生发展密切相关。     

干扰素诱导蛋白44基因与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞干扰素诱导蛋白 44(IFI44)基因实时定量表达水平与SLE临床表现及病情活动的相关性.方法 收集100例SLE患者,40例非SLE其他自身免疫性疾病患者,40名健康对照人群的临床资料,抽提外周血总RNA并逆转录成eDNA,运用SYBRgreen dve Ⅰ实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测患者和对照组的IFI44基因定量表达水平,并对其与各临床指标及病情活动度的相关性进行分析.数据分析采用方差分析,采用Pearson及Spearman检验进行相关性分析.结果 ①SLE患者组的IFI44拷贝数26.8±5.3明显高于非SLE组7.4±2.7(P=0.0012)和健康对照组5.2±2.0(P=0.005);而非SLE患者组与健康对照组差异无统计学意义.②SLE重度活动组患者IFI44表达量63.1±22.4明显高于非活动组9.2±1.8(P=0.000)和轻度活动组患者28.0±7.2(P=0.015).③SLE患者组的IFI44拷贝数与SLEDAI积分之间呈正相关(r=0.38,P=0.000),与尿蛋白定量(24 h)也呈正相关(r=0.42,P=0.000).结论 IFI44基因在SLE患者中有明显表达上调现象;检测IFI44的表达水平有助于判断SLE患者病情活动状况.

Abstract：

Objective To investigate the expression of interferon-induced protein 44 (IFI44) gene in the leukocytes of the peripheral blood samples from patients with systemic lupus erythematosus (SLE), and to evaluate the relationship between the expression level and disease activity. Methods Mononuclear cells in the peripheral blood samples from 100 SLE patients were compared with those of 40 disease controls and 40 healthy donors (HD) and the expression of the IFI44 was evaluated by quantitative real-time PCR.Comparisons between groups were performed with ANOVA, and the correlation analysis between the level of expression was higher in SLE patients than disease controls and healthy donors (26.8±5.3, 7.4±2.7, 5.2±2.0,respectively) (P=0.0012, P=0.005), but no difference was found between disease controls and healthy donors. Mild disease activity and the SLE patients with stable disease (63.1±22.4, 28.0±7.2, 9.2±1.8, respectively)and 24 hours urine protein level (r=0.42, P=0.000). Conclusion IFI44 is demonstrated to be highly expressed in SLE patients. The level of IFI44 may be a promising candidate biomarker for identifying SLE activity.     

系统性红斑狼疮相关新基因IFIT4的亚细胞定位及干扰素-α对其表达的影响

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)相关新基因IFIT4的组织细胞分布、亚细胞定位及干扰素(IFN)-α对其表达的影响。方法利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IFIT4mRNA在各组织及免疫细胞中的表达;而后构建和转染绿色荧光蛋白(GFP)-IFIT4融合质粒入单核细胞,共聚焦显微镜观察IFIT4亚细胞定位;最后用Western-blot、qRT-PCR检测IFN-α和CpG-A刺激正常人外周血单个核细胞(PBMC)前后IFIT4、STAT1、RELB的表达差异。结果IFIT4mRNA主要表达在免疫相关组织和CD19 、CD8 、CD14 细胞;IFIT4蛋白定位于细胞质;其表达受IFN-!调控,CpG-A不直接参与IFIT4表达调控。结论IFIT4可能作为IFN-!效应分子在SLE免疫系统紊乱发病机制中发挥潜在致病作用。     

转化生长因子βⅡ型受体在狼疮肾炎患者外周血单个核细胞表达的意义

目的 探讨狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMCs)转化生长因子βⅡ型受体(TβR Ⅱ) mRNA表达水平及其与疾病活动性的关系.方法 应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测44=例LN患者(均为活动期患者)、21例其他非LN患者和40名健康对照组PBMCs中TβRⅡ mRNA的表达水平,LN患者中未使用与使用激素和(或)免疫抑制剂患者分别为16例和28例.结果 LN患者PBMC中T13R H mRNA水平1.7±1.0显著低于非LN组4.0±3.1及健康对照组4.1±2.5(P<0.01);LN患者中未使用激素和(或)免疫抑制剂组T13R H mRNA的表达水平1.3±1.0低于用药组2.0+0.9(P<0.05);LN患者PBMCs中的T13RII mRNA表达水平与系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)评分标准(r-0.309,P<0.05)及抗双链DNA抗体(r-0.401,P<0.01)呈显著负相关,与补体C3呈显著正相关(r=0.621,P<0.01).结论 LN患者PBMCs中的TβRⅡmRNA表达水平降低,TβRⅡ参与了LN的发病过程,并与疾病的活动性显著相关;应用激素和(或)免疫抑制剂可以提高TTβRⅡ mRNA的表达,减轻炎症损害.     

Association of increased interferon‐inducible gene expression with disease activity and lupus nephritis in patients with systemic lupus erythematosus

Objective

To study 5 type I interferon (IFN)–inducible genes (LY6E, OAS1, OASL, MX1, and ISG15) in patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and to correlate expression levels with disease activity and/or clinical manifestations.

Methods

Peripheral blood cells were obtained from 48 SLE patients, 48 normal controls, and 22 rheumatic disease controls, and total RNA was extracted and reverse transcribed into complementary DNA. Gene expression levels were measured by real‐time polymerase chain reaction, standardized to a housekeeping gene, and summed to an IFN score. Disease activity was determined by the Safety of Estrogens in Lupus Erythematosus: National Assessment–Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index (SELENA‐SLEDAI) composite.

Results

Each gene was highly expressed in SLE patients compared with normal controls (P ≤ 0.0003) or disease controls (P ≤ 0.0008 except for MX1). IFN scores were positively associated with the SELENA‐SLEDAI instrument score (P = 0.001), the SELENA‐SLEDAI flare score (P = 0.03), and the physician's global assessment score (P = 0.005). Compared with patients without nephritis, lupus nephritis patients had higher IFN scores (overall P < 0.0001), especially during active renal disease. IFN scores were weakly associated with neurologic manifestations. Elevated IFN scores were positively associated with the current presence of anti–double‐stranded DNA (anti‐dsDNA) antibodies (P = 0.007) or hypocomplementemia (P = 0.007). LY6E expression levels distinguished active from inactive lupus nephritis (P = 0.02) and were positively associated with proteinuria (P = 0.009).

Conclusion

The 5 IFN‐inducible genes were highly expressed in SLE patients, and increased levels were correlated with disease activity defined by several methods. IFN scores, or LY6E levels, were elevated in lupus nephritis patients, especially during active renal disease, and in patients with anti‐dsDNA antibody positivity and hypocomplementemia. IFN scores, or LY6E levels, may be useful as a biomarker for lupus nephritis therapy.

     

Association of increased interferon-inducible gene expression with disease activity and lupus nephritis in patients with systemic lupus erythematosus

OBJECTIVE: To study 5 type I interferon (IFN)-inducible genes (LY6E, OAS1, OASL, MX1, and ISG15) in patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and to correlate expression levels with disease activity and/or clinical manifestations. METHODS: Peripheral blood cells were obtained from 48 SLE patients, 48 normal controls, and 22 rheumatic disease controls, and total RNA was extracted and reverse transcribed into complementary DNA. Gene expression levels were measured by real-time polymerase chain reaction, standardized to a housekeeping gene, and summed to an IFN score. Disease activity was determined by the Safety of Estrogens in Lupus Erythematosus: National Assessment-Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index (SELENA-SLEDAI) composite. RESULTS: Each gene was highly expressed in SLE patients compared with normal controls (P < or = 0.0003) or disease controls (P < or = 0.0008 except for MX1). IFN scores were positively associated with the SELENA-SLEDAI instrument score (P = 0.001), the SELENA-SLEDAI flare score (P = 0.03), and the physician's global assessment score (P = 0.005). Compared with patients without nephritis, lupus nephritis patients had higher IFN scores (overall P < 0.0001), especially during active renal disease. IFN scores were weakly associated with neurologic manifestations. Elevated IFN scores were positively associated with the current presence of anti-double-stranded DNA (anti-dsDNA) antibodies (P = 0.007) or hypocomplementemia (P = 0.007). LY6E expression levels distinguished active from inactive lupus nephritis (P = 0.02) and were positively associated with proteinuria (P = 0.009). CONCLUSION: The 5 IFN-inducible genes were highly expressed in SLE patients, and increased levels were correlated with disease activity defined by several methods. IFN scores, or LY6E levels, were elevated in lupus nephritis patients, especially during active renal disease, and in patients with anti-dsDNA antibody positivity and hypocomplementemia. IFN scores, or LY6E levels, may be useful as a biomarker for lupus nephritis therapy.     

弥漫增生型狼疮肾炎患者趋化因子及其受体的表达

目的 了解弥漫增生型狼疮肾炎(LN)患者趋化因子MCP-1、CCL19、CXCL9、CXCL10和趋化因子受体CCR2、CCR7、CXCR3的表达,探讨趋化因子及其受体在LN发病中的作用.方法 ①同步收集12例弥漫增生型LN患者肾组织和外周血,抽提总RNA并反转录为cDNA,以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法 检测趋化因子基因MCP-1、CCL19、CXCL9、CXCL10和趋化因子受体基因CCR2、CCR7、CXCR3的表达水平.②应用免疫荧光抗体标记、激光扫描共聚焦显微镜技术观察患者肾组织趋化因子MCP-1、CCL19、CXCL9和CXCL10的表达.结果 弥漫增生型LN患者趋化因子基因MCP-1、CCL19、CXCL9和CXCL10 mRNA在肾脏组织和外周血的表达呈同步增高趋势,4种趋化因子蛋白在肾小球的表达显著增高.趋化因子受体CCR2和CXCR3在LN患者外周血高表达.结论 趋化因子MCP-1、CCL19、CXCL9和CXCL10外周血表达水平可能做为评估狼疮患者肾脏病变的生物学标记.阻断趋化因子与其相应受体的结合将可能减轻患者的临床症状、改善预后.     

干扰素指数在系统性红斑狼疮诊断和活动性判断中的应用价值

目的 选择5个干扰素诱导基因人黏液病毒抗性蛋白1(MX1);2',5'-寡腺苷酸样合成酶(OASL);2'5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1);α-干扰素诱导蛋白15(ISG15)、淋巴细胞抗原6复合体E(LY6E)作为系统性红斑狼疮(SLE)候选基因进行表达研究并探讨干扰素诱导基因在SLE中的表达情况以及对SLE诊断的临床价值.方法 收集68例SLE患者、50例其他自身免疫性疾病患者和26名健康者外周血细胞,提取RNA,以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术进行检测,观察各组间基因表达量的差异及各组间干扰素(IFN)指数的差异;应用受试者工作曲线(ROC)分析软件评价干扰素诱导基因在SLE诊断中的价值,Spearman相关分析法分析干扰素指数与SLE疾病活动度指标[SLEDAI积分和尿蛋白定量(24 h)]的相关性.采用t检验和秩和检验进行统计学分析.结果 ①SLE患者外周血细胞MX1、OASL、OAS1、ISG15、LY6E基因的表达水平均显著高于疾病对照组和健康对照组,差异有统计学意义(P值均＜0.01).②SLE患者干扰素指数(17.9±29.1)显著高于疾病对照组(3.0±8.1)和健康对照组(0±3.3),差异有统计学意义(P值均＜0.01).③在SLE诊断中,干扰素指数ROC曲线下的面积(AUCROC)为0.846,当干扰素指数取2.56时,对SLE患者诊断的敏感性为82.4%,特异性为76.3%.④SLE患者干扰素指数水平与SLEDAI积分(r=0.256,P＜0.01)和尿蛋白定量(24 h)水平(r=0.337,P＜0.01)呈显著正相关.⑤合并肾脏损害的SLE患者、抗Sm与抗dsDNA抗体阳性SLE患者干扰素指数显著升高,差异有统计学意义(P值均＜0.05).结论 干扰素诱导基因MX1、OASL、OAS1、ISG15和LY6E在SLE患者中呈高表达,干扰素指数的升高对于SLE的诊断及疾病活动性判断具有参考价值.     

弥漫增生型狼疮肾炎和膜型狼疮肾炎的不同细胞因子表达谱提示不同的免疫学发病机制

目的 从系统生物学角度全面研究弥漫增生型狼疮肾炎(Ⅳ型LN)和膜型狼疮肾炎(Ⅴ型LN)患者血清细胞因子表达谱.方法 分离静脉血清,通过抗体芯片技术同时检测4种Th1和5种Th2细胞因子表达.结果 ①细胞因子表达谱:在检测的9种细胞因子中,Ⅳ型LN患者有7种明显升高,包括3种Th1细胞因子[干扰素(INF)-γ、白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子(TNF)-α)]和4种Th2细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10、IL-13);而Ⅴ型LN仅有4种细胞因子表达上调(IL-2、IL-4、IL-10和IL-13).②相关性分析:Ⅳ型LN患者细胞因子与临床表现之间相关性较强,如IL-5与抗dsDNA抗体滴度及血肌酐呈正相关、与C3呈负相关;IL-10与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动指数(SLEDA1)呈正相关、与尿蛋白及血红蛋白浓度均呈负相关;IL-13与尿蛋白浓度呈负相关,IL-1与SLEDAI呈正相关、与血红蛋白浓度呈负相关.Ⅴ型LN患者仅IL-1与血肌酐之间呈正相关,IL-4与尿蛋白之间呈负相关.结论 不同病理分型的LN患者体内细胞因子表达谱不同,提示不同病理分型的LN其内在的免疫学发病机制存在差异,也提示不同的细胞因子表达可能代表不同类型的LN.     

系统性红斑狼疮患者血浆单核细胞化学吸引蛋白-1检测及其临床意义

目的 分析血浆单核细胞化学吸引蛋白-1(MCP-1)水平与系统性红斑狼疮(SLE)脏器受累及病情严重性的关系,探讨检测血浆MCP-1水平的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测95例SLE患者血浆MCP-1水平,并与21名健康体检者对照.结果 血浆MCP-1水平在SLE患者为(849±289)pg/ml,显著高于健康对照组的(426±266)pg/ml(P<0.01);在SLE患者,血浆MCP-1水平在有狼疮肾炎(LN)者明显高于无LN患者(P<0.01),并发狼疮脑病的患者也明显高于无中枢神经系统损害的患者(P相似文献   

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞端粒保护蛋白TPP1及POT1基因表达的研究

目的 研究端粒保护蛋白TPP1及POT1基因在系统性红斑狼疮(SEE)患者与健康人外周血单个核细胞(PBMCs)的表达及其与SEE肾损、疾病活动度的相关性.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应检测SEE患者活动组28例、缓解组20例及健康对照组30例PBMCs TPP1、POT1 mRNA表达水平,并且与SEE患者临床指标进行相关性分析.结果 SLE组与健康对照组相比,TPP1及POT1基因表达明显降低(P均<0.01),活动组与缓解组均显著低于健康对照组(P均<0.05);POT1基因在活动组的表达显著低于缓解组(P<0.05);TPP1及POT1基因在肾损组的表达低于无肾损组(P<0.01),在SLE肾损患者中,尿蛋白定量与TPP1及POT1基因的表达水平呈负相关(P<0.05),尿白细胞与POT1基因呈负相关(P<0.05);红细胞沉降率、C反应蛋白、抗核抗体与TPP1、POT1基因的表达及SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分没有相关性;POT1 mRNA的表达与血清IsG、SLEDAI评分呈负相关(P<0.05,P<0.01),与补体C3呈正相关(P<0.01);TPP1 mRNA的表达与血清IgG、SLEDAI评分及C3没有相关性.结论 端粒保护蛋白TPP1和POT1基因在SLE的发病中发挥重要作用,其参与了SLE肾脏损害的病理过程,POT1可作为SEE疾病活动的有效的评判指标.     

调节性T淋巴细胞转化生长因子-β白细胞介素-17对狼疮肾炎的影响及相互关系

目的 检测活动期、静止期狼疮肾炎(LN)患者及健康人外周血白细胞介素(IL)-10、IL-6、转化生长因子(TGF)-β、IL-17、CD4~+CD25~+CD127~(lo)调节性T淋巴细胞水平,探讨TGF-β与调节性T淋巴细胞、IL-6、IL-17在LN的变化及相互关系.方法 采用三色荧光染色通过流式细胞仪(FCM)检测外周血中CD4~+CD25~+CD127~(lo)细胞水平,以双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定LN患者外周血中TGF-β、IL-17水平,用CBA流式蛋白分析系统检测外周血中IL-10、IL-6水平.结果 ①活动期LN患者外周血调节性T淋巴细胞低于静止期、健康组(P<0.01),静止期与健康组差异无统计学意义(P>0.05).②活动期LN患者IL-10、IL-6与静止期相比显著升高(P<0.01).③活动期LN、静止期LN、健康组TGF-β、IL-17无变化.④LN患者调节性T淋巴细胞与IL-10、IL-6、SLEDAI之间呈负相关(P<0.05);与C3、C4之间无显著相关性.⑤LN患者外周血IL-10、IL-6与SLEDAI呈正相关(P<0.01),与C3、C4均呈负相关(P<0.01).LN患者外周血SLEDAI与C3、C4均呈负相关(P<0.01).⑥LN患者调节性T淋巴细胞与TGF-β、IL-17之间无相关性.⑦TGF-β与IL-17呈正相关(P<0.01).结论 ①LN患者外周血中调节性T淋巴细胞及IL-10、IL-6、TGF-β的水平变化可作为狼疮活动性的指标.②LN患者外周血中调节性T淋巴细胞与IL-10、IL-6呈负相关.③激素有助于提高调节性T淋巴细胞,降低IL-17.④T淋巴细胞将随机体状态、局部微环境的改变以及维护机体免疫平衡的需要出现不同的极化.     

狼疮性肾炎患者血清IL-6和sIL-2R水平变化的检测

目的探讨狼疮性肾炎(LN)患者血清中白细胞介素(IL)-6和可溶性IL-2受体(sIL-2R)的水平变化及临床意义。方法利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测42例LN患者和40例正常健康人血清IL-6和sIL-2R的水平。结果活动期LN组患者IL-6和sIL-2R水平显著高于静止期LN组患者及正常对照组(P<0.01),静止期LN组患者IL-6和sIL-2R水平显著高于正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。结论LN患者血清IL-6和sIL-2R显著升高,可能与LN的发生发展有关,并可作为病情及疗效判断的观察指标。