CO2气腹对大鼠子宫内膜异位症病灶MMP-2和TIMP-1蛋白表达的影响

目的评价CO2气腹及不同气腹压力对子宫内膜异位症病灶基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）蛋白表达的影响。方法建立SD大鼠子宫内膜异位症模型,造模成功后随机分组：对照组、10mmHg和20mmHgCO2气腹组,气腹作用时间1h。气腹干预后1周、2周和6周检测子宫内膜异位病灶MMP-2、TIMP-1蛋白表达情况。结果与对照组比较,气腹干预后1周10mmHg和20mmHgCO2气腹组子宫内膜异位病灶MMP-2蛋白表达均显著降低（P〈0．001）,且10mmHg组低于20mmHg组（P〈0．001）,可持续至2周以后。两气腹组TIMP-1表达显著增强,且10mmHg组高于20mmHg组（P〈0．001）。MMP-2／TIMP-1比例下降,异位病灶组织侵袭能力下降。随着时间变化,两组MMP-2逐渐升高,TIMP-1下降,术后6周与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CO2气腹作用后早期可使子宫内膜异位灶组织MMP-2下降,TIMP-1升高,侵袭力下降,低气腹压力对子宫内膜异位病灶侵袭力的抑制作用更为明显。     

白细胞介素24对裸鼠人宫颈癌Hela细胞移植瘤抑制作用的探讨

目的：探讨基因重组质粒pDC316-hIL-24对裸鼠人宫颈癌模型的肿瘤生长及凋亡的作用。方法：于5周龄裸鼠腋窝外侧皮下注射1×10 7个／mLHela细胞悬液100uL,将15只构建成功的人宫颈癌Hela细胞裸鼠模型随机分为3组,分别于瘤体内注射转染试剂Lipofectamine2000与基因重组质粒pDC316-hIL-24（A组）、空质粒pDC316（B组）以及磷酸盐缓冲液（C组）,比较干预后各组移植瘤的体积及抑瘤率。应用RT-PCR法测定移植瘤中h／L-24的表达．HE染色观察各组肿瘤组织形态学变化。免疫组化方法研究肿瘤细胞凋亡情况。结果：①IL-24基因成功转染人肿瘤细胞并在其中成功表达,至实验结束时,B组和C组移植瘤体积大于A组（F=63．395,P〈0．05）;A组的平均抑瘤率高于B组（t=130．920,P〈0．01）。②病理学观察见A组宫颈癌细胞有局灶性坏死,细胞变大,胞质疏松,核深染,可见核固缩、核溶解、核碎裂,染色质成团状。⑧免疫组化结果显示,A组BCL-2蛋白表达低于其他2组（F=6．164,P〈0．05）,而其同源蛋白BAX表达高于其他2组（F=58．426,P〈0．05）。结论：基因重组质粒pDC316-hIL-24对宫颈癌裸鼠模型肿瘤生长具有明显的抑制作用,其可能通过激活细胞凋亡通路而诱导肿瘤细胞凋亡。     

白细胞介素24对裸鼠人宫颈癌Hela细胞移植瘤抑制作用的探讨

目的：探讨基因重组质粒pDC316-hIL-24对裸鼠人宫颈癌模型的肿瘤生长及凋亡的作用。方法：于5周龄裸鼠腋窝外侧皮下注射1×107个/mL Hela细胞悬液100 μL,将15只构建成功的人宫颈癌Hela细胞裸鼠模型随机分为3组,分别于瘤体内注射转染试剂Lipofectamine 2000与基因重组质粒pDC316-hIL -24（A组）、空质粒pDC316（B组）以及磷酸盐缓冲液（C组）,比较干预后各组移植瘤的体积及抑瘤率。应用RT-PCR法测定移植瘤中hIL-24的表达,HE染色观察各组肿瘤组织形态学变化,免疫组化方法研究肿瘤细胞凋亡情况。结果：①IL-24基因成功转染入肿瘤细胞并在其中成功表达,至实验结束时,B组和C组移植瘤体积大于A组（F=63.395,P ＜0.05）;A组的平均抑瘤率高于B组（t=130.920,P ＜0.01）。②病理学观察见A组宫颈癌细胞有局灶性坏死,细胞变大,胞质疏松,核深染,可见核固缩、核溶解、核碎裂,染色质成团状。③免疫组化结果显示,A组BCL-2蛋白表达低于其他2组（F=6.164,P ＜0.05）,而其同源蛋白BAX表达高于其他2组（F=58.426,P ＜0.05）。结论：基因重组质粒pDC316-hIL-24对宫颈癌裸鼠模型肿瘤生长具有明显的抑制作用,其可能通过激活细胞凋亡通路而诱导肿瘤细胞凋亡。     

血管形成抑制剂TNP-470对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的 观察血管形成抑制剂TNP－470（简称TNP）对人卵巢癌裸鼠皮上移植瘤生长的影响。方法 对30例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型,共分为5组：对照组（皮内及腹腔注射无菌生理盐水）,溶剂组（皮内注射1％乙醇及5％阿拉伯糖混合液）,TNP组（皮内注射TNP）,环磷酰胺（CTX）组（腹腔注射CTX）,TNP＋CTX组（皮内注射TNP,同时腹腔注射CTX）。观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况,裸鼠体重的变化,计算抑瘤率,并进行病理学检查。结果 溶剂组抑瘤率为7．9％,对照组为0％,两组比较,差异无显著性（P＞0．05）;TNP组抑瘤率为26．1％,CTX组为33．9％,两组比较,差异无显著性（P＞0．05）;TNP＋CTX组抑瘤率高达70．5％,有极明显的抑瘤效应,与对照组比较,差异有极显著性（P＜0．005）。TNP＋CTX组移植瘤镜下可见肿瘤细胞核浆比例明显小于对照组,核异形性明显少于对照组。结论 TNP对卵巢癌有一定的治疗作用;TNP与化学药物联合应用,抑瘤作用增强。     

CO_2对人卵巢癌细胞株生长转移相关因子表达及顺铂敏感性的影响

目的:探讨体外模拟腹腔镜二氧化碳(CO2)气腹环境对人卵巢癌细胞株SKOV3生长转移相关因子表达的影响及CO2气腹环境作用后SKOV3对顺铂(DDP)敏感性的变化。方法:将体外培养的处于对数生长期的SKOV3细胞分为4组,即CO2组、DDP组、CO2+DDP组及对照组。用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)法及免疫细胞化学法检测各组细胞的PCNA、VEGF和CD44v6mRNA和蛋白的表达。结果:(1)CO2气体与顺铂间无交互作用(P0.05);(2)CO2处理组肿瘤细胞的PCNA、VEGF和CD44v6mRNA和蛋白表达均明显升高(P0.01);(3)DDP组与对照组、CO2+DDP组与CO2组比较,DDP处理组肿瘤细胞的PCNA、VEGF和CD44v6mRNA和蛋白表达均明显降低(P0.01,P0.01)。结论:CO2环境能促进人卵巢癌细胞株SKOV3生长转移相关因子表达;DDP对肿瘤细胞生长转移因子的表达有抑制作用;CO2环境作用后,肿瘤细胞对DDP敏感性的变化不明显。     

肿瘤抑素抗血管活性相关肽对宫颈癌Hela细胞生长和转移抑制作用的实验研究

目的研究改造后的血管生成抑制相关肽（21肽）抗血管生成活性及对人宫颈癌Hela细胞皮下移植裸鼠模型的抑制作用,探讨其抑瘤作用机制。方法2005年8月至2006年2月哈尔滨医科大学第一临床医学院进行Hela细胞株皮下接种裸鼠造模,21肽治疗3周后,处死动物剥离肿瘤,称重并计算抑瘤率。免疫组化方法检测21肽对肿瘤组织的微血管密度（MVD）、增殖细胞核抗原（PCNA）和血管内皮生长因子（VEGF）的影响。结果21肽组平均抑瘤率可达51.89%,肿瘤组织微血管密度明显降低,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;21肽组肿瘤组织的PCNA、VEGF呈低表达,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论21肽具有显著的抗血管生成活性,可明显地抑制裸鼠宫颈癌细胞的生长,其抑制宫颈癌的作用机制可能与其降低新生血管形成和调解血管生成相关因子的表达有关。     

HIF-1α和Glut-1蛋白在中老年宫颈癌组织中的表达及其意义北大核心CSCD

目的探讨葡萄糖转运蛋白1（Glut-1）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在中老年宫颈癌组织中的表达及其临床意义。方法选取2013年1月至2015年12月在河南省南阳市中心医院收集的宫颈癌病理组织标本80例、正常宫颈组织标本40例,采用免疫组织化学染色检测两组标本中Glut-1、HIF-1α蛋白的表达水平并探讨其与临床病理学特征的关系。结果中老年宫颈癌组织中Glut-1蛋白的阳性表达率为58.75%、HIF-1α蛋白的阳性表达率为73.75%,正常宫颈组织中Glut-1蛋白的阳性表达率为25.00%、HIF-1α蛋白的阳性表达率为10.00%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;宫颈癌组织中HIF-1α蛋白的阳性表达在不同的肿瘤组织学分级、FIGO分期中差异有统计学意义（P〈0.05）,宫颈癌组织中Glut-1蛋白的阳性表达在不同年龄段的宫颈癌患者、肿瘤肌层浸润深度、是否伴有淋巴结转移的患者中差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论 Glut-1、HIF-1α在中老年宫颈癌组织中表达上调,并且与患者的临床病理学特征密切相关,对于指导临床诊断和治疗具有一定的价值。     

人子宫颈癌裸鼠移植瘤株与细胞系的建立及其生物学特性

目的：建立人宫颈癌裸鼠体内瘤株及其相应的体外细胞系。方法：把人宫颈高分化鳞癌手术切除标本移植于裸鼠皮下，生长后行鼠间连续传代。取移植瘤行体外培养，建立相应的体外细胞系。对体内瘤株和体外细胞系进行相关的生物学检测，并行体外细胞系克隆和无血清培养。结果：历时１７个月建成人宫颈高分化鳞癌裸鼠移植瘤株ＨＣＣ－９４Ｖ，瘤株生长稳定，已传２６代，移植成瘤率为９２．９％。光镜、电镜下的形态学特征与患者肿瘤组织一致，染色体多为异倍体；多种肿瘤标记物呈高表达，癌基因蛋白产物呈低表达；人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６型呈阳性、１８型呈阴性，与患者肿瘤组织的检测结果一致。体外培养维持传代１６个月，建成人宫颈癌细胞系ＨＣＣ－９４，生长稳定，已传１３１代。电镜下显示典型的桥粒和张力原纤维结构，以及人类肿瘤异常染色体特征。细胞的肿瘤标记物及癌基因蛋白产物呈高表达。ＨＰＶ１６及１８型呈阴性。细胞裸鼠移植致瘤，其组织病理形态学与患者肿瘤组织一致，且ＨＰＶ１６呈阳性。细胞系克隆出了３个亚株，无血清培养成功。结论：ＨＣＣ－９４Ｖ和ＨＣＣ－９４是一株新的宫颈癌裸鼠移植瘤株和细胞系，为宫颈癌的进一步研究提供了理想的材料和模型。     

TNF-α、E2、E6及E7在不同宫颈病变组织中的表达及其相关性分析

目的：检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）及高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）E2、E6、E7基因在不同宫颈病变组织中的表达并分析其相关性。方法：根据不同病理结果把标本分为HPV阴性正常组,HPV16阳性正常组,HPV16阳性宫颈内瘤变（CIN）Ⅰ～Ⅱ组,HPV16阳性CINⅢ组以及HPV16阳性宫颈腺癌/鳞状细胞癌（CIS/SCC）组。通过反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法对各组标本进行TNF-α、E2、E6及E7蛋白的检测,并对检测结果进行统计学分析。结果：HPV E6、E7基因在不同宫颈病变中的表达逐渐升高,且E7的逐级升高趋势更显著,E2升高至CINⅡ后出现下降,而TNF-α在不同宫颈病变中的表达虽呈升高趋势,但在宫颈浸润癌中与CINⅢ组中表达差异无统计学意义。结论：用E2/E7的比值来预测或诊断高度宫颈病变程度可能更准确。炎症因子TNF-α的升高可能加重了HPV E2基因的破坏,使得HR-HPV E6、E7癌基因过度表达,从而促进宫颈癌发生。     

HIF-1α与TRAIL-DR4在宫颈癌组织中的表达及与放疗敏感性的研究

目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)受体在宫颈癌组织中的表达变化,及与放疗敏感性的关系。方法:收集2003年7月至2005年1月宫颈癌活检组织45例,用原位杂交组织化学法检测宫颈癌组织中HIF-1αmRNA及TRAIL-DR4mRNA水平。结果:(1)在45例宫颈癌组织中27例(60%) HIF-1αmRNA呈阳性表达,Ⅰ/Ⅱ期肿瘤HIF-1αmRNA的表达显著低于Ⅲ/Ⅳ期肿瘤的表达(X~2=9．07,P＜0．05),随着组织分化的降低,HIF-1αmRNA的表达增强(X~2=8．03,P＜0．05),放疗敏感患者中HIF-1αmRNA表达明显低于放疗不敏感患者(X~2=10．37,P＜0．05);(2)TRAIL-DR4mRNA阳性表达率为57．8%。Ⅰ/Ⅱ期肿瘤DR4mRNA的表达显著高于Ⅲ/Ⅳ期肿瘤的表达(X~2=9．01,P＜0．05),中高分化宫颈癌的表达明显高于低分化宫颈癌(X~2=18．18,P＜0．05),放疗敏感患者中TRAIL-DR4mRNA表达明显高于放疗不敏感患者(X~2=6．91,PP＜0．05)。结论:HIF-1αmRNA及TRAIL-DR4mRNA与宫颈癌的放疗敏感有相关性。     

上推膀胱直肠后再次宫颈环形电切术对保留生育功能的价值

目的:探讨上推膀胱直肠后再次宫颈环形电切术(LEEP)在宫颈疾病治疗中的可行性,评价其对年轻患者保留子宫及生育功能的价值。方法:回顾性分析2010年1月至2014年4月在复旦大学附属妇产科医院就诊,因宫颈LEEP术后切缘阳性或术后随访复发、无法在门诊行常规LEEP而行上推膀胱直肠后再次LEEP的38例患者的临床资料。结果:38例患者均顺利完成了上推膀胱直肠后再次LEEP,术中均未出现膀胱、直肠损伤等并发症。手术时间38±7分钟,术中出血量20±5 ml,住院天数2.7±0.6天;其中1例患者术前病理检查为宫颈高度鳞状上皮内瘤变,术后升级为原位鳞癌合并原位腺癌行全子宫切除术,37例患者(97.4%)成功保留子宫,随访至今1例术后12个月低度鳞状上皮内瘤变行宫颈激光治疗,余均未见宫颈病变复发。12例患者有生育意愿,7例患者已成功妊娠,6例已分娩。结论:上推膀胱直肠后再次LEEP安全可行,可实现未生育妇女及年轻妇女保留子宫及生育能力的意愿。     

Responsiveness of gynecologic tumors to chemotherapeutic agents in the 6-day subrenal capsule assay

Various gynecologic malignancies have been tested in the 6-day subrenal capsule assay, which is an in vivo test of human tumor responsiveness to drug therapy. Fresh surgical explants of ovarian, endometrial, and cervical tumors were implanted as 1-mm³ fragments under the renal capsule of normal mice and tested against a spectrum of clinically active agents. Regardless of the site of origin, human tumors showed variations in growth rate when implanted under the renal capsule that appeared to reflect both the growth potential characteristic of each tumor as well as the heterogeneity of the cell populations comprising each tumor. An average of 60% of tumors showed positive growth and 11% demonstrated no measurable change in size. The response rates of 18 ovarian, 28 endometrial, and 20 cervical carcinomas to clinically active chemotherapeutic agents were determined. A range of responses, in terms of drugs indicated to be active and of the degree of responsiveness to active agents, was obtained with each histologic type. Response rates varied from 6% to tamoxifen in cervical carcinomas to 80% to 5-fluorouracil in ovarian carcinomas. The results of this study support the variability in chemotherapy responsiveness observed clinically with gynecologic tumors and suggest the feasibility of using the subrenal capsule assay as a predictive test.