肝炎病人中不同基因型TTV的检出及序列分析

目的：了解TTV在肝炎病人中的感染率及基因型别。方法：采用半式套式PCR方法,对72例不同型别的肝炎病人血清进行TTV DNA的PCR检测并对部分阳性株进行序列测定及计算机分析。结果：在72例不同肝炎病人中,共检出39例TTV DNA阳性血清, 总检出率为54．16％。其中在非甲庚型肝炎病人中TTV DNA阳性率为87．5％,而在明确诊断为甲－庚型肝炎病人中TTV DNA阳性率为50％,两组相比差异显（x^2＝4．0278,P＜0．05）。测序的6分离株相互间的核酸同源性为60．4％－93．2％,氨基酸的同源性为54．1％－97．3％。这6个分离株与9个G1、G2代表株核酸的同源性为60．4％－99．1％,氨基酸的同源性为55．4％－98．6％。经系统发育分析表明这6株TTV可分属于G1、G2两个基因型的4个亚型。结论：非甲－庚型肝炎病人的TTV感染率明显高于明确病原的甲－庚型肝炎的病原之一。检出的TTV至少可分属于G1、G2两个基因型中的4个亚型。     

山东泰安地区人群中TTV感染调查及TTV山东株基因序列分析

目的 了解山东地区输血后丙型肝炎和非甲－庚型肝炎TTV感染及基因变异的状况。方法 应用RT－PCR方法检测41例输血后丙型肝炎和16例非甲－庚型肝炎患者血清中TTVDNA，并对阳性血清扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆法测充，分析其基因变异的情况。结果 41例输血后丙型肝炎患者血清中TTVDNA阳性检出率为19.5%(8/41)，而16例非甲－庚型肝炎患者血清中阳性检出率为31.3%(5/16)。TTV山东第一析序列与山东第二株序列相应位置核苷酸同源性与日本 株和中国第一株相比较分别为94%和91％；山东TTV的两株序列间同源性均为91％。结论 本项研究证实山东地区输血后丙型肝炎和非甲－庚型肝炎患者中存在较高TTV感染，输血可能为会传播TTV感染途径之一，是否该地区存在着不同的TTV亚型还有待于进一步调查证实。     

不同人群TTV检测及阳性标本核苷酸序列分析

目的了解不同人群TTV感染状况及基因型别，探讨TTV传播途径。方法设计合成引物采用半套式聚合酶链反应方法，对献血者、肝炎病人、幼儿及母婴配对等4组人群血清进行TTV DNA的PCR检测并对部分阳性株进行序列测定及分析。结果(1)在457份被检血清中检测出TTV DNA阳性111份，总阳性率24．29％。在血清转氨酶(ALT)正常的96份献血者血清标本中TTV DNA阳性检出率为16．6％，而在ALT异常、HBsAg及抗HCV阴性的99份献血者血清标本中，TTV DNA的阳性检出率为36．3％，明显高于ALT正常献血者。(2)在72例不同肝炎病人血清中，TTV DNA阳性检出率为54．16％；在非甲一庚型肝炎病人中TTV DNA阳性率为87．5％，高于甲一庚型肝炎的病人中TTV DNA阳性率。(3)110份体检幼儿血清中，共检出TTV DNA阳性14份，总检出率为12．73％。(4)一对母婴配对血清的TTV DNA同时阳性且序列相同。(5)12个阳性株序列分析结果显示：11株分属于G1、G2 2个基因型的5个亚型，而另1株与Gla、Glb的同源性为74．8％～80．2％。结论(1)献血者人群中存在TTV感染，TTV可以导致感染个体的肝功能异常。(2)TTV感染与肝炎有关，可能是非甲一庚型肝炎的病原之一。(3)TTV可能存在血源途径外的其它传播选径；TTV存在母婴垂直传播途径。     

TTV母婴传播途径随访研究

目的了解输血传播病毒(TTV)在孕产妇血清、乳汁及新生儿脐血中的感染情况,探讨其在母婴间的传播途径及生后1年期间的带菌情况.方法应用套式PCR对400例正常孕产妇分娩前的血清及其新生儿的脐血血清标本、产妇的乳汁配对进行TTV DNA检测,对阳性的母亲及其新生儿进行6个月、12个月随访,对TTV DNA成对阳性的母血、母乳及其婴儿的血进行克隆和序列测定,比较分析母婴TTV感染株之间核苷酸的序列同源性.结果62例孕妇血清、4例新生儿脐血清、20例母乳检测出TTV DNA,孕母TTV感染率15.5%(62/400),出生时母婴TTV传播率6.5%(4/62),阳性母亲乳汁TTV DNA检出率32.2%(20/62),经6个月、12个月随访孕母血TTV DNA阳性的42对母乳喂养的母婴,母血清TTV DNA阳性率分别为21.3%(9/42)、82.1%(23/28),婴儿血清TTV DNA阳性率分别为40.5%(17/42)、28.5%(8/28).配对比较母婴间TTV感染株序列同源性为97.4%～99.8%.结论TTV可经非血液途径传播,TTV感染可自然转阴,并存在健康携带者.     

TTV母婴传播途径随访研究

目的 :了解输血传播病毒 (TTV)在孕产妇血清、乳汁及新生儿脐血中的感染情况 ,探讨其在母婴间的传播途径及生后 1年期间的带菌情况。方法 :应用套式 PCR对 40 0例正常孕产妇分娩前的血清及其新生儿的脐血血清标本、产妇的乳汁配对进行 TTV DNA检测 ,对阳性的母亲及其新生儿进行 6个月、 12个月随访 ,对 TTV DNA成对阳性的母血、母乳及其婴儿的血进行克隆和序列测定 ,比较分析母婴 TTV感染株之间核苷酸的序列同源性。结果 :62例孕妇血清、 4例新生儿脐血清、 2 0例母乳检测出 TTV DNA,孕母 TTV感染率 15.5% (62 / 4 0 0 ) ,出生时母婴 TTV传播率 6.5% (4/ 62 ) ,阳性母亲乳汁 TTV DNA检出率 3 2 .2 % (2 0 / 62 ) ,经 6个月、 12个月随访孕母血 TTV DNA阳性的 42对母乳喂养的母婴 ,母血清 TTV DNA阳性率分别为2 1.3 % (9/ 4 2 )、 82 .1% (2 3 / 2 8) ,婴儿血清 TTV DNA阳性率分别为 40 .5% (17/ 4 2 )、 2 8.5% (8/ 2 8)。配对比较母婴间 TTV感染株序列同源性为 97.4%～ 99.8%。结论 :TTV可经非血液途径传播 ,TTV感染可自然转阴 ,并存在健康携带者     

上海部分健康体检人员中感染TTV的基因分型

目的 调查上海地区健康人群TTV感染情况及其基因分型。方法 用PCR法检测血清标本中的TTVDNA，对TTVDNA阳性标本作核酸序列测定。结果 100份健康体检人员血清标本，用PCR法检出TTVDNA阳性标本21份。其中14份作了部分序列测定，10份部分序列与TTVG1a基因亚型组的TA278株等的同源性为96．2％－99．5％。另4份与G1a组同源性为662．％－67．6％，与TTVG4基因型相同源性为81．9％－84．8％，与国内报道的各株TTV中同源性最大的61．SEQ为81．9％－84．3％。结论 上海地区部分健康人群中除分布有TTGG1a基因亚型感染外，还分布有国内未见报道的TTV基因型感染，其可归为TTVG4的一基因亚型。     

健康献血员中TTV感染情况的检测

目的检测邢台和北京2城市健康献血员血清中TT病毒(TTV)感染情况,并结合北京市慢性乙型肝炎和慢性丙型肝炎病人TTV感染情况进行比较,以阐明TTV在健康人群中的感染情况及其存在的意义.方法用改良非编码区(UTR)PCR和N22 PCR法,分别检测健康献血员、慢性乙型肝炎和慢性丙型肝炎病人血清中TTV DNA.结果 UTR PCR检测表明,健康献血员TTV DNA检出率为98.3%,而60例慢性乙型肝炎和80例慢性丙型肝炎患者血清中TTV DNA检出率均为100%;N22 PCR在上述人群中TTV DNA检出率分别为32.6%,35.0%和42.5%.结论 TT病毒在人群中有很高的感染率,但N22 PCR检测的结果与UTR PCR相比明显偏低,二者间有显著性差异.在健康人群和慢性肝炎病人中,采用相同PCR方法的TTV DNA检出率无显著性差异.     

河北部分地区不同人群TTV感染的研究

TT病毒（TT virus，TTV）是一种单链DNA病毒，自1997年底日本学者从1例输血后非甲非戊型肝炎病人的血清中分离出TTV以来，各国学者对TTV的研究日益深入，1998年Okamoto等报道了TTV全基因序列。为了解TTV在河北省不同人群中的感染状况，分析TTV与肝病的关系，笔者对正常人群和甲、乙、丙型、不明原因肝炎患者及其他肝病患者进行了TTV DNA检测，结果如下。     

山东地区输血传播病毒（TTV）检测和部分基因克隆及序列测定

目的 了解TTV山东分离株感染状况及基因变异的情况。方法 应用逆转录聚合酶链反应（PCR）检测26例山东地区非甲－庚型肝炎和12例肝细胞癌患者血清中TTVDNA,并对阳性扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆和测序,分析其基因变异的情况。结果 26例非甲－庚型肝炎中11例TTV－DAN阳性（42．3％）。对其中两株（TTVSD4、TTVSD5）部分基因克隆测序,并与日本株（ABOO8394）相比较,其核苷酸序列同源性为99．9％和100％。而12例肝细胞癌患者中3例TTVDNA阳性（25．0％）,对其中一株（TTVSD6）部分基因克隆与测序,与日本株（ABOO8394）相比较,其核苷酸序列同源性为99％;TTV山东株三株间核苷酸同源性均为99％。结论 本项研究证实山东地区非甲－庚型肝炎和肝细胞癌患者中存在着较高TTV感染,TTV感染可能具有嗜肝性,而且可能与肝功能损害有关,是引起非甲－庚型肝炎重要病原。     

TTV在HBV携带者和乙型肝炎患者中感染情况分析

目的　输血传播病毒 (TTV)在中国郑州地区乙型肝炎病毒携带者、乙型肝炎患者中的感染情况。方法　采用TTV基因组ORF1区的套式聚合酶链反应 (nested -PCR)方法 ,对不同人群的血清标本进行检测。结果TTVDNA在 4 4例乙型肝炎病毒携带者中检出 10例 (2 2 .7% ) ,在 5 6例乙型肝炎患者中检出 13例 (2 3.2 % ) ,差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论　TTV感染与ALT的升高无必然联系 ,TTV可能存在条件致病性     

我国不同人群输血传播病毒感染调查

目的　了解不同人群输血传播病毒 (TTV)的感染状况。方法　采用套式PCR法检测血清标本中TTVDNA ,并对其中 1株TTV的部分基因序列进行了测定。结果　不同人群TTVDNA阳性率分别为 :正常体检人群 10 .3% ,献血员 43.7% ,吸毒者 15 .6% ,血液透析病人5 4.4% ,妓女 65 .0 % ,慢性丙型肝炎病人 2 5 .0 % ,非甲～庚型肝炎 0 / 11。结论　TTV在各类人群中均有较高的感染率     

组织原位杂交法研究输血传播病毒的致病性

目的 根据肝组织中TT病毒(TTV)感染和复制状况探讨病毒的致病性。方法 以重组质粒为模板、地高辛素为标记物、对称和不对称PCR法分别标记TTV双链探针和2条单链探针。原位杂交检测56例肝组织,其中6例TTV阳性分别做单链探针杂交。结果 5l例非甲～非庚型肝炎肝组织中TTV阳性率27．5％(14／51)。对照组5例杂交阴性。TTV DNA主要见于肝细胞核内,受染细胞的病变和坏死不十分明显;在急性、慢性和重症肝炎及肝硬化组织中均有检出。用单链探针检测病毒基因链的结果与双链探针杂交结果一致,杂交信号强度相仿;2例肝组织TTV基因链与互补链同时存在,信号强度较弱。结论 TTV可能导致肝损伤,并在肝脏内有复制;但病毒对肝细胞的直接损伤作用不明显。     

江西省九江市健康婴儿中TTV感染的调查

目的 了解九江市健康婴儿血清中输血传播病毒(TTV)感染状况及传播途径。方法用改良非编码区聚合酶链反应(UTR PCR)和N22 PCR法,分别检测婴儿和献血员血清中TTVDNA。结果 用改良UTR PCR检测86例婴儿中51例(53.5％)TTV DNA为阳性,59例献血员中TTV DNA全部阳性。而N22 PCR在这两类人群中阳性检出例数分别为14例(16.3％)和22例(37.3％)。在<30天龄、1～6月龄和7～12月龄婴儿中,TTV DNA检出率分别为0、33.3％、95.0％(UTR PCR)和O、7.4％、30.0％(N22 PCR)。结论 用UTR PCR检测表明,九江市95％的半岁以上婴儿及100％成人都感染有TTV,而用N22 PCR在相同人群中检测的结果明显偏低,两种方法的检出率差异有显著性;婴儿中TTV的原发感染可能是出生后从环境中获得,并且随其年龄增长感染逐渐增多,半岁后可接近同一地区健康成人的感染水平。     

Transfusion transmitted virus infection in patients on maintenance haemodialysis and in hospital workers

A newly discovered DNA virus, transfusion transmitted virus (TTV), was isolated from a post-transfusional hepatitis patient in Japan. A high prevalence (32-46%) of TTV infections in patients receiving maintenance haemodialysis (HD) has been reported but the occupational risk of TTV on HD units has not yet been determined. We determined the prevalence of TTV in workers in the same HD unit and the risk factors for TTV infection in HD patients, using logistic regression analysis. The prevalence of TTV DNA was 59.6% in 198 HD patients, significantly higher than that in the HD unit (13 of 39, 33.3%;P= 0.002) and non-HD healthcare workers (20 of 75, 26.7%; P= 0.001). A logistic regression analysis showed that male gender and negative test results for hepatitis G virus RNA were risk factors for TTV infection, but prior blood transfusion and duration of HD were not. Stepwise selection of multiple regression analysis showed that the presence of hepatitis C virus RNA was the only significant predictor for high serum ALT activity, and that the presence of TTV DNA was not. These results indicate that TTV is one of the prevalent human viruses transmissible either parenterally or nonparenterally in HD patients, but the occupational risk of TTV infection in HD unit workers is as low as in other healthcare workers. The pathogenic effects of TTV on the liver appear to be limited.     

中国部分地区新型肝炎病毒TTV感染的分子流行病学

目的了解我国部分地区新型肝炎病毒ＴＴＶ感染的分子流行病学、ＴＴＶ在人群中的感染分布状况,探讨ＴＴＶ在肝炎发病中的作用和地位。方法采用ＰＣＲ方法检测血清标本中ＴＴＶＤＮＡ,克隆测定不同地理株ＴＴＶ的部分基因序列,分析其基因变异情况。结果检测了南方（广东深圳和江苏南京）和北方（北京和辽宁沈阳）的１１２例非甲～非庚型肝炎病人,其中ＴＴＶＤＮＡ阳性者４８例,阳性率４２．９％,而１０２例甲～庚型肝炎病人中阳性率为２．９％（χ２＝４２．８,Ｐ＜０．０１）。ＡＬＴ异常而无甲～庚型肝炎病毒感染标志的献血员中,ＴＴＶＤＮＡ阳性率（３４６％）明显高于ＡＬＴ正常献血员的阳性率（１６．８％,χ２＝４．５,Ｐ＜０．０１）。南方株（广东深圳ＴＴＶＣＨＮ００２、南京ＴＴＶＮＡＮ００１）和北方株（北京ＴＴＶＳＨＢ０１５）病毒间同源性在９８％以上,日本发表的序列同源性也高于９７％。结论我国北方和南方地区均存在ＴＴＶ感染。ＴＴＶ感染与ＡＬＴ异常有极为密切的关系,可能是导致非甲～非庚型肝炎的重要病原。正常人群中存在ＴＴＶ感染者,类似于ＨＢｓＡｇ的所谓“慢性携带状态”。     

深圳市一般人群输血传播病毒感染的现况研究

目的　探讨深圳市一般人群中输血传播病毒 (TTV)感染情况及其影响因素。方法采用多阶段随机抽样抽取研究对象 ,并用套式聚合酶链反应法 (nPCR)检测该人群血清中TTVDNA。结果　深圳市一般人群中TTVDNA总阳性率为 11.86% ,男女阳性率分别为 14 .67%和9.41% ;年龄组间TTVDNA阳性率差异无显著性 ,单因素和logistic回归分析未显示肝病史、近期手术史、注射史、拔牙史及乙型肝炎疫苗接种等因素与TTVDNA感染有关 ;HBsAg、抗 -HBs和抗 -HBc与TTV感染无统计学意义。但不同职业人群TTVDNA阳性率差异有显著性 ,地税干部和中小学教师TTVDNA阳性率高于其他人群。结论　深圳市一般人群中TTV感染率较高 ,尤其是地税干部和中小学教师 ,但其流行因素尚需进一步研究     

异源双链泳动分析法快速检测TT病毒基因型

目的 建立一种简单、敏感、特异和成本低的TT病毒(TTV)基因型测定方法。方法 采用巢式聚合酶链反应方法(nPCR)对96名正常人和180例各型肝炎患者血清标本进行TTV DNA检测，然后采用异源双链泳动分析法(HMA)和序列测定分析法对TTV DNA阳性标本进行基因分型。结果 各型病毒性肝炎中TTV DNA阳性率为22．2％(40／180)，正常人为19．8％(19／96)，两者差异无显著性(X^2=0．220，P=0．639)。在甲、乙、丙、戊型肝炎和非甲～戊型肝炎患者中TTV DNA阳性率分别为20．0％(6／30)、16．7％(5／30)、23．3％(7／30)、36．7％(11／30)和18．3％(11／60)。在40例TTV DNA阳性标本中，经HMA法分型，G1型为50．0％(20／40)，G2型为17．5％(7／40)，混合型为25．0％(10／40)，另有7．5％(3／40)未能分型。10例TTV混合型感染的标本经克隆测序及基因进化树分析，5例为G1和G2型，2例为G1和G3型，1例为G1和G4型，1例为G2和G3型，1例为G1、G2和G3混合型感染。结论 HMA是一种简单、敏感、特异和经济的分型法，可用于TTV基因型分型。     

输血传播病毒对妊娠结局的影响

目的:探讨TTV感染对妊娠结局的影响。方法:应用半巢式聚合酶链反应技术检测113例孕产妇血清及其新生儿脐血的TTV—DNA。结果:孕产妇TTV阳性率13.3%(15/113),新生儿TTV阳性率7.8%(9/113)。孕产妇TTV阳性者及阴性者的分娩结局比较,无显著性差异。结论:孕产妇及新生儿间存在母婴垂直传播,孕妇感染TTV后未见不良妊娠结局,远期影响尚需观察。