以反相离子对HPLC法同时测定大鼠内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶

目的建立测定血清中内源性嘧啶类物质尿嘧啶（U）及二氢尿嘧啶（UH2）的反相离子对HPLC方法。方法：实验动物血清用5％高氯酸一步沉淀蛋白,分离并通过微孔滤膜后进样。色谱柱为迪马C。。色谱柱（250mm×4．6mm）,柱温10℃;流动相为含磷酸根0．03mol／L、含庚烷磺酸钠0．03mol／L及含6％甲醇的缓冲液（pH=3．0）,流速0．5ml／min。检测波长210nm,灵敏度为0．1AUFS。结果本文色谱条件可很好地分离尿嘧啶（U）及二氢尿嘧啶（UH2）。测定10只不同年龄不同性别来自不同实验动物中心的动物具有不同的U／UH2比值。结论以反相离子对HPLC法可精密测定大鼠内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶的比值。     

内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶的简易高效液相色谱测定法

目的建立测定内源性嘧啶类物质尿嘧啶(U)及二氢尿嘧啶(HU2)的反相高效液相色谱法,并应用于癌症病人5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗前的嘧啶代谢缺陷及毒性预测.方法色谱柱大连依利特ODS2(250mm×4.6mm,5μm).以5-Fu作内标,经沉淀蛋白并以异丙醇与乙酸混合液提取,进行色谱分析.流动相为0.01mol.L-1KH2PO4-H3PO4缓冲液（pH=3.0）,流速0.5ml.min-1,检测波长204nm.xf js UH2的线性方程为Y=136.70X-9.42(r=0.9909,n=7)U的线性方程为Y=78.05X+1.03(r=0.9993,n=7),线性浓度范围为8μg.L-1～500μg.L-1,UH2最低检测浓度为6μg.L-1,U最低检测浓度为4μg.L-1.平均回收率UH2为66.6%,U为70.4%.结论本方法在同一色谱条件下完全分离二种痕量内源性嘧啶类物质,并予以定量分析,结果可作为确定行5-氟尿嘧啶化疗方案的肿瘤病人个体化给药剂量的依据.     

以反相离子对HPLC法同时测定大鼠内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶

目的建立测定血清中内源性嘧啶类物质尿嘧啶(U)及二氢尿嘧啶(UH2)的反相离子对HPLC方法。方法:实验动物血清用5%高氯酸一步沉淀蛋白,分离并通过微孔滤膜后进样。色谱柱为迪马C18色谱柱(250mm×4.6mm),柱温10℃;流动相为含磷酸根0.03mol/L、含庚烷磺酸钠0.03mol/L及含6%甲醇的缓冲液(pH=3.0),流速0.5ml/min。检测波长210nm,灵敏度为0.1AUFS。结果本文色谱条件可很好地分离尿嘧啶(U)及二氢尿嘧啶(UH2)。测定10只不同年龄不同性别来自不同实验动物中心的动物具有不同的U/UH2比值。结论以反相离子对HPLC法可精密测定大鼠内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶的比值。     

内源性尿嘧啶类物质比值在5-氟尿嘧啶化疗中毒性预测价值的临床研究

目的：评价内源性二氢尿嘧啶（UH2）与尿嘧啶（U）的比值（Ruh2/u)在-5氟尿嘧啶（5-Fu）化疗方案中与5-氟尿嘧啶血药浓度（C5FU）、消化系统毒性级别的相关关系，为5-氟嘧啶化疗方案的调整及剂量个体化提供依据。方法：对20例以5-氟尿嘧啶化疗的鼻咽癌病人，化疗前测定RUH2/U，化疗中测定5-氟尿嘧啶血药浓度，化疗后评价5-氟尿嘧啶毒性并进行相关分析。结果：RU2/U与C5FU、5-氟尿嘧啶致腹泻、口腔粘膜毒性均具有显著相关性。结论：RUH2/U值大小可作为评价5-氟尿嘧啶临床用药的依据应用于疗效及毒性的预测。     

高效液相色谱法测定人血浆中内源性尿嘧啶二氢尿嘧啶含量

目的建立准确测定内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶血药浓度的高效液相色谱法.方法以氟尿嘧啶(5-FU)为内标,醋酸乙酯-异丙醇混合液(8515)为提取溶剂;色谱柱Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 靘);流动相A-0.01 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.5),B-乙腈,梯度洗脱;流速为0.8 mL·min-1;柱温为4 ℃;检测波长为204 nm(0～14.5 min),254 nm(14.5～35 min).结果尿嘧啶和二氢尿嘧啶线性范围为8～500 靏稬-1,线性回归方程分别为C(UH2)=61.760 8Y 0.506 5,r=0.999 8;C(U)=95.201 1Y-3.064 0,r=0.999 3,(n=7).最低检测质量浓度均为5 靏稬-1.尿嘧啶方法回收率为99.3%～107.0%,二氢尿嘧啶方法回收率为95.0%～98.3%.尿嘧啶日内RSD小于6.5%,日阍RSD小于11.7%,二氢尿嘧啶目内RSD小于9.2%,日间RSD小于12.4%.结论本方法可用于内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶血药浓度的常规监测.     

尿嘧啶有关物质测定方法的研究

目的：建立高效液相色谱法测定尿嘧啶的有关物质。方法：采用迪马C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相为0．34％磷酸二氢钾溶液-甲醇（94：6），检验波长258nm。结果：尿嘧啶的线性范围为0．1014—4．0560mg·L^-1，检测限为0．9mg·L^-1，精密度为0．11％。结论：该方法简便，灵敏，准确，快速，专属强，可用于尿嘧啶的质量控制。     

HPLC法间接测定肿瘤患者外周血中二氢尿嘧啶脱氢酶的活性

目的:建立间接测定肿瘤患者外周血中二氢尿嘧啶脱氢酶(DPD)活性的方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法测定肿瘤患者血浆中内源性物质二氢尿嘧啶(H2U)和尿嘧啶(U)的比值,间接估算DPD的活性。其中,色谱柱为XterraRPC18,流动相为甲醇-0.02mol·L-1磷酸二氢钠(pH4.0)(5:95),流速为1.0mL·min-1,检测波长分别为204nm(H2U)、260nm(U)。结果:H2U、U检测浓度分别在62.5～2000μg·L-1(r=0.9997)、15.625～500μg·L-1(r=0.9993)范围内线性关系良好,日内RSD分别≤7.7%、8.3%,日间RSD分别≤13.8%、13.4%,方法回收率分别为99.63%～103.02%、98.38%～109.08%。63例肿瘤患者的DPD活性(H2U/U比值)在肿瘤患者中变异较大,范围为1.51～6.67。结论:本方法可用于肿瘤患者外周血DPD活性的常规监测。     

肿瘤患者血浆内源性二氢尿嘧啶及尿嘧啶的测定

目的测定肿瘤患者血浆中的二氢尿嘧啶(H2U)与尿嘧啶(U)的比值来间接估计二氢尿嘧啶脱氢酶(DPD)的活性。方法采用HPLC法测定肿瘤患者血浆中内源性物质H2U和U的比值。色谱柱:反相C18柱(300mm×4.6mm,5μm);流动相:0.01mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH3.0),5μmol·L-1磷酸三乙胺;检测波长204nm。结果202例肿瘤患者入选,其H2U/U为(2.50±1.25)(0.53~7.51),男性为(2.58±0.85),女性为(2.41±0.98);有50例的H2U/U低于2.0,其中男性患者为29例,女性为21例。DPD酶活性与年龄、性别不存在相关性(P>0.05)。结论通过HPLC法测定血浆DPD酶活性来调节氟尿嘧啶的剂量,从而达到个体化给药的目的。     

HPLC法同时测定人血浆中5-氟尿嘧啶及其活性代谢物5-氟-2＇-脱氧尿嘧啶核苷的浓度

目的：建立一种同时测定人体血浆中5-氟尿嘧啶及其活性代谢物5-氟-2＇-脱氧尿嘧啶核苷浓度的HPLC法。方法：以肌苷为内标，血浆样品用硝酸银（10％）沉淀蛋白质，采用C18柱，检测波长为266nm，流动相：0．01mol·L^-1磷酸盐（用2mol·L^-1氢氧化钠溶液调pH为7．0）-甲醇（96：4），流速1．0mL·min^-1，柱温为45℃。结果：5-氟尿嘧啶和5-氟-2＇-脱氧尿嘧啶核苷分别在0．1～20μg·mL^-1（r=0．9997）和0．2～40μg·mL^-1（r=0．9997）浓度范围内线性关系良好，最低检测浓度分别为5和10ng·mL^-1，方法回收率分别为98．2％～101．2％、99．5％～102．3％，日内、日间RSD均小于6％。结论：方法灵敏、快速、准确，适用于临床上测定5-氟尿嘧啶及其活性代谢物5-氟-2＇-脱氧尿嘧啶核苷的血药浓度及药动学的研究。     

二氢嘧啶脱氢酶活性替代值在结直肠癌化疗中个体化给药的应用

目的:在氟尿嘧啶(5-FU) 醛氢叶酸(CF)结直肠癌化疗方案中,测定二氢嘧啶脱氢酶(DPD)活性替代值并评价与5-FU血药浓度及毒性级别的相关性.方法:以高效液相色谱法测定结直肠癌患者体内内源性嘧啶类物质二氢尿嘧啶(UH2)与尿嘧啶(U)的比值,作为DPD活性的替代值,同时行连续5 d的5-FU CF辅助化疗方案,第5天监测5-FU血药浓度,评价DPD酶活性替代值与5-FU血药浓度及毒性的相关性.结果:50例结直肠癌患者行5-FU CF辅助化疗方案,化疗前测定DPD酶活性替代值为(4.2±1.2),5-FU的血药浓度为(2 203.6±612.4)μg·L-1,DPD酶活性替代值与5-FU血药浓度、5-FU毒性级别呈负相关.结论:血中DPD酶活性替代值(UH2/U值)的测定可作为5-FU结直肠癌化疗时的血药浓度及毒性的预测指标,修正5-FU按体表面积的给药方式,为结直肠癌5-FU化疗个体化剂量的确定提供更为可靠的理论依据.     

单步萃取-HPLC法同时测定人血清中3种抗癫痫药浓度

目的:建立以单步萃取-高效液相色谱法同时测定人血清中卡马西平、苯妥英钠、苯巴比妥浓度的方法。方法:血清样品采用二氯甲烷单步萃取后进样测定,色谱柱为Ultimate XB-C18,流动相为甲醇-水(70∶30),流速为1 mL·min-1,检测波长为240nm,柱温为25℃,内标为2-氨基-2-氯-5-硝基二苯酮。结果:卡马西平、苯妥英钠、苯巴比妥血药浓度分别在1.33～33.25 mg·L-1(r=0.999 6)、1.96～49.0 mg·L-1(r=0.999 5)、2.88～72.0 mg·L-1(r=0.998 8)范围内线性关系良好,最低检测限分别为0.06、0.13、0.14 mg·L-1,方法回收率分别为94.0%～109.1%、93.6%～98.7%、97.0%～105.2%,日内、日间RSD均<10%。结论:本法操作简便、快速、准确、经济实用,可满足临床快速监测的需要。     

HPLC法测定人血浆中氯雷他定的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中氯雷他定浓度的方法。方法:色谱柱为KromasilC18柱,流动相为乙腈-标水为-0地.5西mo泮l·。L-结1磷果酸:氯氢雷二他钾定-磷血酸药(浓52度:4在3:05.5:～0.11)0,0流μg速·L为-11范.0围m内L·线mi性n-关1,系紫良外好检(测r波=长0.9为99237)5,n最m,低进检样测量浓为度2为0μ0L.5,柱μg·温L为-1室;方温法,内回收率为99.71%～102.41%;提取回收率为80.72%～83.78%;日内、日间RSD均<11%。结论:本方法适用于氯雷他定制剂的药动学及生物利用度研究。     

RP-HPLC法测定人血清中米氮平浓度

目的:建立测定人血清中米氮平浓度的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为IntersilODS-SP,流动相为乙腈-0.01mo·lL-1乙酸铵(30∶70),流速为1.0mL·min-1,激发波长为290nm,发射波长为350nm,内标为美托洛尔。结果:米氮平血药浓度在1.852～900μg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9991),最低检测浓度为1.852μg·L-1。平均相对回收率为94.8%～104.0%,提取回收率为97.8%～106.3%,日内RSD<13%,日间RSD<8%。结论:本方法简便、快速、灵敏、准确,可用于米氮平临床血药浓度监测及药动学研究。     

微波辅助萃取-高效液相色谱法测定金银花药材中槲皮素和木樨草素的含量

目的建立微波辅助萃取-高效液相色谱（MAE-HPIE）法分析金银花药材中槲皮素和木樨草素的含量。方法采用Diamomil C18柱（150mm×4．6mm,5μm）,以甲醇-0．2％三氟乙酸（55：45,V／V）为流动相,流速1．0mL·min^-1,检测波长350nm。微波辅助萃取条件：2．5mol·L^-1盐酸甲醇溶液10mL,微波功率为360W,提取时间为3min。结果槲皮素在5-100mg·L^-1内线性关系良好（r=0．9995）,平均加样回收率为92．35％,RSD为1．33％（n=3）;样品的日内和日间RSD分别为0．44％和1．61％。木樨草素在0．25～5mg·L^-1内线性关系良好（r=0．9999）,平均加样回收率为92．40％,RSD为1．13％;日内和日间RSD为0．79％和2．60％。结论该方法快速、准确,操作便捷,适用于提取分析和测定金银花中槲皮素和木樨草素的含量。     

LC-MS/MS测定人血浆中阿米舒必利的浓度

目的建立测定人血浆中阿米舒必利浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾检测法（LC-MS/MS）。方法以WelchMaterials XB-C18（2.1mm×150mm,3μm）为色谱柱,流动相为甲醇-水（95∶5,含5mmol·L^-1甲酸铵）,流速为0.3mL·min^-1,柱温：40℃,以乙酸乙酯-二氯甲烷（4∶1）为提取溶剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测（SRM）对阿米舒必利（m/z370.3→242.1）和内标舒必利（m/z324.2→112.1）进行测定。结果阿米舒必利高（400μg·L^-1）、中（250μg·L^-1）、低（1.25μg·L^-1）3个浓度的平均方法回收率分别为104.44%、104.74%和95.65%,日内（n=5）、日间（n=3）RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为0.52μg·L^-1。线性范围为：0.5～500μg·L^-1。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于阿米舒必利临床血浓监测和药动学研究。     

RP-HPLC法同时测定人血清中氯吡格雷和阿司匹林的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法同时测定人血清中氯吡格雷和阿司匹林浓度的方法。方法:色谱柱为Hypersil ODS C18,流动相为0.01mo·lL-1磷酸二氢钾溶液-甲醇(35∶65,磷酸调pH值至3),流速为1.0mL·min-1,检测波长为235nm,柱温为30℃。结果:氯吡格雷与阿司匹林血药浓度分别在0.25～16.0mg·L-1(r=0.9999)、0.125～8.0mg·L-1(r=0.9996)范围内线性关系良好;平均回收率分别为98.3%、99.6%,日内、日间RSD均<10%。结论:本方法简便、快速、灵敏度高,可用于人血清中氯吡格雷和阿司匹林浓度的检测与分析。     

HPLC法测定人血浆中多沙普仑的浓度

目的：建立测定人血浆中多沙普仑浓度的HPLC法。方法：血浆样品经液-液萃取处理后进行测定。色谱柱为Dia—monsil C18柱（200mm×4．6mm,5μm）;柱温为室温;流动相为磷酸二氢铵缓冲液（0．01Mol·L^-1,pH4．5）．甲醇-乙腈（56：30：14）;流速为1．3ml·min^-1;紫外检测波长为214nm;内标为非那西丁。结果：多沙普仑血药浓度在0．05-5μg·ml^-1范围内线性关系良好（r=0．9990）;提取回收率为60．6％～64．0％;日内RSD小于6．5％,日间RSD小于13．4％。结论：此方法操作简便,灵敏,准确,适用于多沙普仑的临床药物动力学研究。     

HPLC法测定大鼠血浆中呱氨托美丁及其代谢产物MED-5与托美丁的浓度

目的建立同时测定大鼠血浆中呱氨托美丁（MED-15）及其代谢产物MED-5与托美丁浓度的HPLC法。方法血浆样品用乙腈沉淀蛋白,采用HypersilODS C_（18）柱（250mm×4.6mm,5μm）进行分离,以甲醇-2%冰醋酸（60：40,V/V）为流动相,流速1.0mL·min~（-1）;紫外检测波长313 nm。结果大鼠血浆中MED-15、MED-5和托美丁线性范围分别是0.050～5.6、0.042～5.4和0.039～5 mg·L~（-1）（r分别为0.995 1、0.995 7、0.999 0）;定量下限分别为0.050、0.042和0.039mg·L~（-1）;平均相对回收率分别是100.3%、99.4%和99.9%,平均绝对回收率分别88.9%、87.8%和88.7%;日内、日间精密度均〈12%。血浆样品的稳定性符合要求。结论本研究所建立的大鼠血浆中MED-15、MED-5和托美丁浓度测定的HPLC方法灵敏、准确、精密、稳定,适用于大鼠体内MED-15的药动学研究。     

柱前衍生-超高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠的浓度

目的建立用于测定人血清中丙戊酸钠浓度的超高效液相色谱法。方法采用超高效液相色谱法,色谱柱为AC—QUITYUPLC@BEHC18（50mm×2．1mm,1．7μm）,柱温4J0℃,检测波长248nm,流动相：甲醇-水（60：40）（0min）→甲醇-水（80：20）（4min）→甲醇-水（100：0）（5min）→甲醇-水（60：40）（8min）,流速0．5mL·min^-1。结果血清质量浓度在16．632～166．320mg·L^-1内线性良好。回归方程：Y=0．019x＋0．0684,r=0．9999。在低、中、高质量浓度下的回收率分别为98．473％、98．508％、94．606％,日内精密度RSD为0．290％-1．614％（n=5）,日间精密度RSD为0．628％-2．522％（n=5）。结论本法灵敏、准确、快速、专属性强,适用于丙戊酸钠的血药浓度监测。