缺氧对大鼠心肌细胞系H9C2中HIF-1α、CT-1表达的影响

目的 观察缺氧对大鼠心肌细胞系H9C2细胞中HIF-1、CT-1的影响.方法 采用向培养液中加氯化钴( CoCl2)模拟缺氧.实验分为缺氧组(培养液中加入100 μmol/L的CoCl2)和对照组(培养液中无CoCl2).通过CCK-8试剂盒检测各组H9C2细胞的存活率.通过Real-time PCR检测HIF-1α和CT-1的mRNA水平,通过Western blot技术检测HIF-1 α和CT-1的蛋白质水平.结果 缺氧3d和4d后,缺氧组H9C2细胞的存活率较对照组下降(P＜0.05),缺氧后H9C2细胞中HIF-1α mRNA表达无明显改变(P＞0.05),而蛋白表达增加(P＜0.05).缺氧后H9C2细胞中CT-1 mRNA和蛋白水平均增加(P均＜0.05).结论 缺氧环境下大鼠心肌细胞系H9C2中HIF-1α和CT-1的表达增加.     

下肢缺血预处理对大鼠心肌HIF-1α表达的影响

目的 观察急性心肌梗死(AMI)和经下肢缺血预处理的大鼠缺血心肌中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因的表达及其在早期心肌缺血状态下的表达规律.方法 SD大鼠随机分为3组:①对照组;②AMI组:结扎左冠状动脉前降支;③下肢缺血预处理(LIP)组:下肢动脉夹闭再开放,随后复制AMI模型.应用伊文思蓝及氯化三苯硝基四氮唑红(TTC)染色,测定心肌梗死范围;应用RT-PCR测定各组心肌缺血区HIF-1α基因动态表达情况.结果 LIP组心肌梗死面积较AMI组明显减小;HIF-1α mRNA在正常心肌有表达,心肌缺血早期相升高;经下肢缺血预处理后缺血心肌的表达降低.结论 下肢缺血预处理对急性缺血心肌有保护作用,HIF-1α基因表达减少可能是其机制之一.     

压力负荷高血压大鼠心肌组织TNF-α表达与活性氧的关系

目的： 动态观察压力负荷高血压大鼠心肌组织TNF-α表达变化,并探讨其与活性氧的关系。方法： 采用腹主动脉缩窄法建立压力负荷高血压大鼠模型,应用ELISA动态观察心肌组织内TNF-α蛋白表达变化。采用比色法和天狼猩红染色检测心肌组织胶原含量,应用Fenton原理和细胞色素C还原实验测定心肌内活性氧（ROS）水平和还原型辅酶II （NADPH）氧化酶活性。结果： 腹主动脉缩窄后1w,大鼠血压显著升高。2w后,左室重量指数、心肌组织胶原含量以及胶原容积分数明显升高（P<0.01）,随着时间的延长,以上指标进一步升高。压力负荷4w时,大鼠心肌组织内TNF-α蛋白水平明显升高（P<0.01）,相关分析显示,心肌组织TNF-α含量与胶原蛋白含量成正相关（R=0.656 P<0.01）。此外,压力负荷1w时,大鼠心肌组织ROS水平和氧化酶活性亦明显升高（P<0.01）,并在2w达到最高水平,此后维持在较高水平。给予氮乙酰半胱氨酸（NAC,0.2g/kg/d,ig）干预后,压力负荷大鼠心肌组织内TNF-α蛋白水平明显下降（P<0.01）,左室重量指数、心肌组织胶原含量以及胶原容积分数亦明显降低（P<0.01）,结论：压力负荷可呈时间依赖性诱导心肌组织内TNF-α表达增加,参与心肌肥厚的发展;心肌组织内ROS水平的升高是压力负荷高血压大鼠心肌组织内TNF-α表达的重要分子机制之一。     

HIF-1α在胃癌组织中的表达及其意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α( HIF-1α)在胃癌组织中的表达及其意义.方法 选择120例胃癌标本(胃癌组)、68例正常胃黏膜组织(对照组),采用SP法检测两组HIF-1α的表达,并分析HIF-1α的表达与临床病理特征的关系.结果 胃癌组HIF-1α阳性表达率为70.83％,对照组不表达,两组比较P＜0.01.胃癌组中不同肿瘤分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移间HIF-1α阳性表达率差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论 HIF-1α可作为评估胃癌发展、转移及预后的参考指标.     

缺氧条件下心肌组织的形态学改变及缺氧诱导因子-1在心脏内的表达

目的观察缺氧条件下心肌组织的形态学改变以及缺氧诱导因子-1(HIF-1α)在心脏内的表达情况。方法将40只SD大鼠随机分为正常对照组、低氧12 h组、低氧24 h组,低氧36 h组。其中低氧12 h、低氧24 h、低氧36 h组制备体内缺氧模型。采用95%氮气+5%氧气,制备缺氧模型,缺氧时间分别为12、24、36 h,每天缺氧时间为2 h,其他时间置于空气中。所有大鼠在实验结束时均实施腹腔注射麻醉,断髓法处死,制备心肌组织石蜡切片,HE染色镜下观察心肌组织的形态学变化。SABC免疫组化法检测各组大鼠心肌细胞HIF-1α的表达情况。结果正常对照组心肌组织切片心肌细胞结构完整,核大呈圆形;低氧组大鼠的心肌细胞结构逐渐变化,心肌细胞明显肿胀,细胞间隙明显增加,核变小而不规则。免疫组化染色切片HIF-1α蛋白阳性物质定位于细胞核和细胞质,呈弥散或颗粒状。与正常对照组心肌组织HIF-1α的蛋白IOD比较,各缺氧组HIF-1α的蛋白IOD明显增加,有统计学意义(P<0.05)。结论低氧可诱导大鼠心肌组织出现破坏。HIF-1α在缺血心肌组织中高表达,可能参加了心肌缺血的代偿机制,有助于改善心肌供血。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤HIF-1α表达与去铁胺的作用机制

目的 研究缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage,HIBD)时低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达与去铁胺(deferoxamine,DFO)的作用.方法 将120只7日龄Wistar大鼠随机分为3组.假手术组(n=8)、HIBD组及DFO组,后两组根据处死时间分为3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、3 d、7 d亚组(每组8只).应用免疫组织化学法检测HIF-1α、Caspase-3的表达,应用原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞.结果 HIBD组HIF-1α,3 h轻微增高,12 h达高峰,后逐渐降低,其各时间点表达高于假手术组(P＜0.05);DFO组则6 h达高峰,后逐渐降低,与HIBD组比较各时间点HIF-1α表达均增多(P＜0.05).HIBD组脑组织Caspase-3,3 h开始表达,6 h明显升高,12 h和24 h仍在较高水平,7 d后降低,且各时间点表达高于假手术组(P＜0.05);DFO组各时间点Caspcse-3表达低于HIBD组(P＜0.05).结论 在新生鼠HIBD后,DFO可通过升高HIF-1α的表达而发挥抗凋亡作用,发挥其脑保护作用.     

HIF-1对大鼠急性缺血心肌的保护作用

目的研究HIF-1对大鼠急性缺血心肌的保护作用及其作用机制。方法应用HIF-1活性诱导剂氯化钴预处理大鼠,观察预处理对大鼠急性心肌梗死面积和心肌VEGF、iNOS蛋白表达的影响。结果氯化钴预处理组大鼠较对照组和假手术组急性心肌梗死面积显著减少(P<0.01),VEGF、iNOS蛋白表达显著增高(P<0.01)。结论HIF-1可以减少大鼠急性心肌梗死面积,对大鼠急性缺血心肌具有保护作用,其机制可能与HIF-1促进VEGF、iNOS蛋白表达增加有关。     

HIF-1α、iNoS在溃疡性结肠炎中的表达及临床意义

目的探讨低氧诱导因子-1α（（HIF-1α）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在溃疡性结肠炎（UC）组织中的表达及与疾病活动性的关系。方法采用免疫组织化学方法检测51例UC患者（活动期38例、缓解期13例）和20例正常对照组中的HIF-1α、iNOS表达。结果UC患者活动期HIF-1α表达显著高于正常人，差异有显著性（153．29±15．26 vs 193．28±16．65，P〈0．01），缓解期HIF-1α表达与正常人差异无显著性（185．45±12．08 vs 193．28±16．65，P〉0．05），HIF-1α的表达与Walmsley评分标准呈正相关；iNOS在溃疡性结肠炎患者活动期的表达显著高于正常人，差异有显著性（151．32±14．62 vs 196．67±17．43，P〈0．01），缓解期的表达与正常人差异无显著性（189．93±15．20 vs 196．67±17．43，P〉0．05），iNOS的表达与Walmsley评分标准也呈正相关；HIF-1α和iNOS在溃疡性结肠炎中表达水平呈正相关（r=0．627，P〈0．05）。结论HIF-1α和iNOS均参与了溃疡性结肠炎的发病且与疾病的活动性有关，HIF-1α作为一种转录因子可能是iNOS基因表达中的一个重要调节者。     

HIF-1α在中老年胃癌早期中的临床意义

目的探讨低氧诱导因子(HIF)-1α在胃癌组织及转移淋巴结中的表达情况及在中老年胃癌早期发生、发展、转移及预后中的作用及意义。方法对临床未进行化疗的60例胃癌患者切除的胃癌组织及转移淋巴结进行苏木素-伊红(HE)染色确定标本的组织分化程度,采用免疫组织化学方法检测HIF-1α在胃癌组织及转移淋巴结中的表达情况。结果 HIF-1α在胃癌组织中的阳性率为71.67%(43/60),转移淋巴结中的阳性率为86.7%(52/60),而正常胃组织仅有2列表达弱阳性,正常淋巴结中均未有阳性率表达,有显著差异(P<0.05),其中高分化阳性率为55%(11/20),中分化为65%(13/20),低分化为95.0%(19/20),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HIF-1α在胃癌中呈高表达,与胃癌新生血管形成、癌组织浸润、转移有密不可分的关系。     

慢性肝功能衰竭患者肝组织HIF-1α和SDF-1α表达的相关性分析

目的观察缺氧诱导因子-lα（HIF-lα）和基质细胞衍生因子-lα（SDF-1α）在慢性肝功能衰竭患者肝组织中的表达状况。方法采用免疫组织化学法检测21例慢性肝功能衰竭患者及10名正常人肝组织HIF-1α和SDF-1α的表达。结果 21例患者肝组织HIF-lα和SDF-1α呈高表达,阳性率分别为57.1%和71.4%,明显高于正常肝组织（P〈0.05）;在患者肝组织中两者表达呈正相关（r=0.482,P〈0.05）。结论慢性肝功能衰竭患者肝组织HIF-1α和SDF-1α表达增强,可能是HIF-1α上调了SDF-1α的表达,进而促进受损肝组织的自我修复。     

大肠腺癌组织中p-STAT3与HIF-1α的表达及临床意义

采用免疫组化ABC法检测57例大肠腺癌和20例大肠腺瘤组织中信号传导和转录激活因子3(STAT3)活化形式-磷酸化STAT3(p-STAT3)和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达.发现p-STAT3、HIF-1α在大肠腺癌组织中表达均高于大肠腺瘤,均与临床分期及淋巴结转移有关.在大肠腺癌组织中,p-STAT3与HIF-1α的表达呈正相关.认为p-STAT3与大肠腺癌侵袭转移及HIF-1α异常表达密切相关,联合检测两种蛋白有助于大肠腺癌恶性潜能的判断.     

昆明山海棠对胶原性关节炎大鼠HIF-1α表达的影响及其作用机制

目的 探讨昆明山海棠(THH)对低氧诱导因子(HIF-1α)在胶原性关节炎(CIA)大鼠模型中表达的影响及其作用机制.方法 建立CIA大鼠模型,然后用THH灌胃给药治疗30 d,观察关节炎指数(AI),30 d后HE染色观察关节的病理改变,RT-PCR以及免疫组化法检测HIF-1α的表达.结果 给药30 d后,THH组HE染色显示滑膜增殖以及炎症反应明显减轻,免疫组化以及PT-PCR显示HIF-1α表达明显降低(P＜0.05).结论 THH对CIA大鼠有显著疗效,其作用机制与调节外周血以及滑膜组织内的HIF-1α的表达有关.     

HIF-1α、COX-2在溃疡性结肠炎中的表达及与疾病活动性的关系

目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、环氧合酶-2(COX-2)在溃疡性结肠炎组织中的表达及与疾病活动性的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测51例UC患者(活动期38例,缓解期13例)和20例正常对照组中的HIF-1α、COX-2表达.结果 溃疡性结肠炎患者活动期HIF-1α表达显著高于正常人,差异有显著性(153.29±15.26vs.193.28±16.65)(P<0.01),缓解期HIF-1α表达与正常人差异无显著性(185.45±12.08 vs.193.28±16.65)(P>0.05).溃疡性结肠炎中HIF-1α的表达与Walmsley评分标准有相关性,且呈正相关;COX-2在溃疡性结肠炎患者的活动期的表达显著高于正常人,差异有显著性(156.45±18.25 vs.199.28±15.43)(P<0.01),缓解期的表达与正常人差异无显著性(190.93±13.78 vs.199.28±15.43)(P>0.05).溃疡性结肠炎中COX-2的表达与Walmsley评分标准也呈正相关;溃疡性结肠炎中HIF-1α和COX-2蛋白表达水平呈正相关(r=0.690)(P<0.5).结论 HIF-1α和COX-2均参与了溃疡性结肠炎的发病且与疾病的活动性有关,HIF-1α作为一种转录因子可能是COX-2均参与了溃疡性结肠炎的发病且与疾病的活动性有关,HIF-1α作为一种转录因子可能是COX-2基因表达中的一个重要调节者.     

VEGF、HIF-1α在恶性腹水中的表达及临床意义

目的为判断腹水性质提供有价值的指标。方法将87例腹水患者按腹水性质分为恶性腹水组53例、良性腹水组34例;采用ELISA法测定两组血管内皮生长因子（VEGF）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）水平：结果恶性腹水组血清、腹水VEGF、HIF-1α水平均明显高于良性腹水组（P〈0．01）,且化疗后水平下降;卵巢癌、肝癌患者腹水中VEGF、HIF-1α水平显著高于胃癌、结肠癌患者（P〈0．05）。结论腹水中VEGF、HIF-1α测定有助于腹水性质的判断;VEGF、HIF-1α参与了腹水的形成,抑制其水平有助于控制腹水,治疗肿瘤。     

HIF-1α、VEGF在慢性高原低氧环境下SD大鼠骨髓、心脏中的表达及意义

目的研究在慢性高原低氧环境下,SD大鼠骨髓、心脏中的缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）表达及意义。方法将30只SD大鼠随机分成高原低氧组和西宁对照组,喂养1个月后,采用免疫组化法测定两组大鼠骨髓、心肌中HIF-1α、VEGF的表达情况,记数用CD34标记的血管内皮细胞的微血管密度（MVD）;并测定各组大鼠血RBC、Hb、HCT。结果高原组大鼠血RBC、Hb、HCT明显高于西宁组（P均〈0．05）,骨髓、心肌中组织HIF-1α、VEGF、MVD阳性表达率明显高于西宁组（P均〈0．05）。高原组RBC、Hb、VEGF和MVD与HIF-1α均呈正相关,随HIF-1α表达量的增加而增加（P均〈0．05）。结论在慢性高原低氧环境中HIF-1α及其靶基因VEGF的表达明显上调,机体可能通过促进新生血管的形成来适应慢性高原低氧环境。     

NGF对CoCl2诱导的化学性缺氧神经元HIF-1α表达的影响

以CoCl2诱导的原代培养胚胎小鼠大脑皮层神经元为缺氧模型,Western blot分析神经生长因子(NGF)对神经元低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)表达的影响.发现正常培养的神经元HIF-1α、p-ERK表达水平较低,CoCl2缺氧处理后表达升高;单独NGF处理或预加NGF再缺氧处理时两者表达均明显上调;ERK特异性抑制剂PD98059处理后两者表达下调,NGF能阻止这种抑制作用;酪氨酸蛋白激酶的抑制剂Genistein处理能下调HIF-1α的表达,NGF不能阻止这种抑制作用;Genistein处理后p-ERK表达无变化,预加NGF则表达水平上调.认为NGF抗缺氧损伤作用可能与HIF-1α、p-ERK信号通路的激活有关.     

缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在动脉粥样硬化斑块中的表达及血管生成关系

目的:观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在动脉粥样硬化(As)斑块中的表达,探讨HIF-1α与斑块血管生成的关系。方法:24只Wistar大鼠随机分为正常组8只(普通饲料)和As模型组16只(高脂饮食+VitD3)。实验3个月后,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG);取主动脉石蜡包埋切片,HE染色;测量主动脉斑块占内膜总面积比(RAAPIs),内膜中膜面积比(I/M);免疫组化SP法检测HIF-1α蛋白的表达情况,鼠单克隆抗体CD34计数新生血管数目(MVD)。结果:实验后模型组血清TC、TG水平较正常组明显升高[(3.30±0.35)vs(1.51±0.19);(0.85±0.12)vs(0.50±0.14)],差异有统计学意义(P<0.01);模型组中RAAPIs,I/M明显高于正常组(P<0.05);模型组中HIF-1α蛋白表达增高;正常组中HIF-1α未见表达(87.5%vs 0%,P<0.01);模型组中微血管密度(MVD)明显高于正常组[(13.14±2.45)vs 0,P<0.05];不稳定斑块组HIF-1α、MVD均高于稳定斑块组[(100%vs 66.6%),(14.30±1.70)vs(10.25±1.26),P<0.05)],HIF-1α蛋白表达与MVD表达呈正相关(r=0.704,P=0.005)。结论:HIF-1α可通过促进As斑块内血管生成,从而增加斑块的不稳定性;HIF-1α的含量可能是影响斑块稳定性的重要因素。     

肝癌组织中Vasohibin1和HIF-1α表达及临床意义

目的研究肝癌组织中血管生成抑制蛋白(Vasohibin1)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及两者的相关性,并探讨其临床意义。方法随机收集64例原发性肝细胞肝癌手术患者的癌组织,另选其中的26例癌旁组织作为对照组,应用免疫组织化学法检测Vasohibin1与HIF-1α在肝癌组织与癌旁组织中的表达特征并进行评分,进一步分析二者间的相关性及与肝癌患者临床病理特征间的关系。结果肝细胞肝癌组织中Vasohibin1和HIF-1α表达升高,与癌旁组织比较差异有统计学意义(χ2=20.19,P=0.00;χ2=5.147,P=0.023)。结合肝癌患者临床病理特征的统计分析表明,Vasohibin1的高表达与肝癌各临床病理参数在统计学上无明显相关性(P>0.05),HIF-1α的高表达与有无肿瘤转移有关(χ2=4.882,P=0.027),并且肝癌组织中二者的表达在统计学上有相关性(r=0.481,P=0.00)。结论 Vasohibin1和HIF-1α在肝癌组织高表达,提示二者在肝癌发生发展过程中发挥作用;二者的表达相关性提示它们之间可能以VEGF作为纽带或者存在相互作用。     

肝癌组织中HIF-1α的表达与HIF-1α mRNA的扩增分析

目的分析肝癌组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及其基因的表达。方法以自身配对法分别收集经手术切除患者的肝癌及癌周组织各35份,以免疫组化法检测肝癌及癌周组织HIF-1α的表达,从癌组织中制备总RNA、逆转录合成cDNA,以巢式PCR扩增HIF-1α基因片段和DNA测序分析,以探讨HIF-1α及其基因表达的病理特征。结果肝癌及癌周组织中HIF-1α阳性表达呈棕黄色颗粒状,主要定位于胞浆中,部分位于胞核;癌周组织表达较强,中央静脉周闹表达明显;癌周组织HIF-1α表达阳性率明显高于肝癌组织（P〈0.01）;癌周组织中总RNA浓度明显高于肝癌组织（P〈0.01）;肝癌和癌周组织HIF-1α基因阳性率分别为54.3％和74.3％（P〉0.05）;癌组织HIF-1α表达率与肿瘤大小相关,与肿瘤数目和HBsAg阳性间未见明显相关。结论肝癌的发生、发展与肝组织HIF-1α过表达密切相关。     

HIF-1α和EMT相关蛋白在胰腺癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和上皮细胞间质转化(EMT)相关蛋白在胰腺导管腺癌(PDAC)组织中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学法检测92例PDAC和10例正常胰腺组织中HIF-1α、Snail、Slug、E-cadherin、N-cadherin的表达,并分析其与患者临床病理特征和预后的关系.结果:HIF-1α、Snail、Slug、E-cadherin、N-cadherin在PDAC和正常胰腺组织中表达的阳性率分别为:69.57%,69.57%,58.70%,36.96%,73.91%;10%,0%,0%,90%,0%.HIF-1α的表达与淋巴结转移有关;Snail的表达与TNM分期有关;Slug的表达与TNM分期和淋巴结转移有关;N-cadherin的表达与TNM分期、淋巴结转移和肿瘤分化程度有关.HIF-1α表达与Snail、Slug表达呈正相关(r=0.309,P=0.005;r=0.231,P=0.027);Snail表达与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.223,P=0.033);E-cadherin表达与N-cadherin表达呈负相关(r=-0.478,P=...