冠心病患者外周血内皮祖细胞数量和功能的变化

目的 :观察冠心病 (CHD)患者外周血内皮祖细胞 (endothelialprogenitorcells,EPC)数量和功能的改变。方法 :选择CHD患者和非CHD患者各 2 0例 ,用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞 ,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板 ,培养 7d后贴壁细胞进行细胞化学分析。激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记荆豆凝血素Ⅰ和DiI 标记的乙酰化低密度脂蛋白双染色阳性细胞为正在分化的EPC。采用二苯基四氮唑嗅盐比色法、改良的Boyden小室和黏附能力测定实验观察EPC的增殖能力、迁移能力和黏附能力。 结果 :CHD患者外周血EPC数量明显减少 [(31.8± 7.7)∶(5 9.5± 10 .6 )EPC/视野 (× 2 0 0 ) ,P <0 .0 5 ],且CHD患者外周血EPC的黏附能力、迁移能力和增殖能力也明显受损。结论 :CHD患者外周血EPC数量减少、功能减退。     

冠心病患者循环内皮祖细胞与血管内皮功能的变化

目的:探讨冠心病患者循环内皮祖细胞(EPCs)数量及功能变化与血管内皮舒张功能的关系。方法:将58例患者分为对照组(20例)、稳定性心绞痛组(11例)、不稳定性心绞痛组(27例)。采用高分辨率二维超声检测肱动脉血流介导的内皮依赖性血管舒张功能(FMD)及硝酸甘油介导的非内皮依赖性血管舒张功能(NMD);用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,培养7天后贴壁细胞进行细胞化学分析,激光共聚焦显微镜鉴定异硫氰酸荧光素标记荆豆凝集素I和DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白双染色阳性细胞为正在分化的EPCs,采用二苯基四氮唑嗅盐比色法、改良的Boyden小室和黏附能力测定实验观察内皮祖细胞的增殖能力、迁移能力和黏附能力。结果:①稳定性心绞痛组与不稳定性心绞痛组的FMD均明显低于对照组,有显著性差异(P<0．05～0．01),而稳定性心绞痛组的FMD较不稳定性心绞痛组也降低,有显著性差异(P<0．05);3组间NMD差异无统计学意义(P>0．05)。②稳定性心绞痛组、不稳定性心绞痛组较对照组循环EPCs数量明显减少,且黏附、迁移及增殖能力也明显下降,均有极显著性差异(P<0．01);不稳定性心绞痛组较稳定性心绞痛组EPCs数量及迁移能力无差异(P>0．05),但黏附和增殖能力降低(P<0．05)。③直线相关性分析发现不稳定性心绞痛组EPCs的数量及功能均与FMD呈正相关(P<0．05),而稳定性心绞痛组仅EPCs黏附功能与FMD呈正相关(P<0．05)。结论:冠状动脉EPCs数量及功能下降与血管内皮依赖性舒张功能障碍一致,提示当冠心病患者血管内皮功能受损而又缺乏足够有效的EPCs时,可能影响冠心病的病情程度及临床表现。     

活动期系统性红斑狼疮患者外周血内皮祖细胞数量及功能变化的研究

目的 观察活动期系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血内皮祖细胞(CEPC)的数量、功能(包括抗炎功能)以及整体状态的变化.方法 研究共纳入35例病情处于活动期的SLE患者(女性28例,男性7例),另选择35名年龄和性别与之匹配的健康志愿者作为对照组.CEPC的数量通过荧光激活细胞分选方法确定;CEPC在纤维连接蛋白上的黏附能力以及单核细胞系细胞(THP-1细胞)向CEPC的黏附能力均采用细胞黏附计数法进行评价;CEPC的迁移能力通过Transwell小室迁移率分析法来分析;采用离体Matrigel上成管实验方法检测CEPC的成管功能.分别采用实时定量聚合酶链反应(PCR)法和Western-blotting法测定CEPC中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和白细胞介素(IL)-6的表达,以及细胞黏附分子(ICAM)-1和磷酸化akt(p-akt)的表达(后者反映CEPC的抗炎能力和整体状态).结果 活动期SLE患者CEPC的数量与对照组比较差异无统计学意义[(0.054±0.018)%和(0.079±0.017)%.P=0.094],但其部分功能受影响:CEPC在纤维连接蛋白上的黏附能力显著下降(50±17和24±11,P=0.04)而THP-1细胞向CEPC的黏附功能显著增强(10.0±2.0和32.0±3.0,P＜0.01);CEPC的迁移功能下降[(4.81±0.23)%和(1.21±0.08)%,P＜0.01];CEPC在Matrigel上的成管功能显著下降(18.0±2.0和12.0±3.0,P=0.024);CEPC中iNOS和IL-6(P均＜0.01)的表达和ICAM-1表达水平均显著增加,而p-akt的表达水平显著下降.结论 活动期SLE患者CEPC数量并未显著减少但其部分功能受损,包括迁移和成管能力等.活动期SLE患者CEPC细胞状态差,抗炎能力降低.     

CD14+-内皮祖细胞数量与冠心病及心血管危险因素无关

目的:证据显示内皮祖细胞(EPCs)含两亚群即CD34+-EPCs和CD14+-EPCs.之前评估EPCs与冠心病关系的研究并没有区分CD34+-EPCs和CD14+-EPC8这两类细胞或只纳入了CD34+-EPCs.因此本研究探索了CD14+-EPCs数量与冠心病及心血管危险因素的关系.方法:100例患者入选(对照组34例,稳定性冠心病组41例,急性冠脉综合征组25例),CD14+-EPCs定义为表面标记CD14阳性和血管内皮生长因子受体-2(KDR)阳性细胞,用流式细胞仪检测其数量.结果:3组间CD14+-EPCs水平差异无统计学意义;CD14+-EPCs数量与冠状动脉严重程度或危险因素也无关.结论:CD14+-EPCs水平与冠心病严重程度或心血管危险因素无关.     

氯沙坦对冠心病外周血内皮祖细胞的动员作用及影响内皮功能的机制

目的观察氯沙坦对冠心病患者外周血内皮祖细胞(EPCs)数量及血流介导的内皮舒张功能的影响,并探讨其改善内皮功能的机制。方法选取经冠脉造影确诊为冠心病65例,随机分为标准治疗组32例和ARB治疗组33例,同时选取非冠心病31例作为健康对照组。标准治疗组给予常规药物,ARB治疗组给予常规物药+氯沙坦治疗,随访8周,治疗前后分别用流式细胞术检测EPCs水平、超声测定流量介导血管扩张(FMD)情况。结果基线水平,冠心病内皮功能较健康对照组明显低下、EPCs数量明显减少(P<0.05);FMD与EPCs数量呈正相关(r=0.57,P<0.01)。治疗8周后,标准治疗组和ARB治疗组冠心病患者FMD均有不同程度的改善,循环血EPCs数量均有不同程度的增加,但是ARB治疗组变化更明显(P<0.05);ARB治疗组EPCs的增加与内皮功能的改善呈正相关(r=0.52,P<0.01)。结论氯沙坦对EPCs具有一定的动员作用,ARB类药物氯沙坦可能通过增加外周血EPCs数量,进而改善内皮功能。     

冠心病患者外周血晚期内皮祖细胞集落数量与功能的变化

目的探讨冠心病患者外周血晚期内皮祖细胞集落数量和功能的变化。方法入选研究对象54例,分成冠心病组(n=27)和对照组(n=27)。密度梯度离心法从外周血中获得单个核细胞,体外培养扩增21天后鉴定内皮祖细胞,计数晚期集落数量,分别用MTT比色法、改良的Boyden小室法和HFN培养板测定晚期内皮祖细胞的增殖、迁移和黏附功能。结果冠心病组内皮祖细胞晚期集落数量(2.5±1.2)与对照组(3.8±1.6)相比,明显减少(P<0.05);增殖、迁移和黏附能力与对照组比较(分别为0.324±0.024比0.433±0.064,9.9±2.5比13.9±4.1,21.3±5.1比31.0±7.1)显著降低(P<0.05)。结论冠心病患者晚期内皮祖细胞的数量减少,功能受损。     

内皮祖细胞与冠心病的研究新进展

冠心病是严重危害人类健康的常见病,其发病机制主要是“内皮损伤反应”。内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）是血管内皮细胞（endothelial cells,ECs）的前体细胞,参与人胚胎血管生成,促进出生后内皮损伤的修复和缺血组织的血管新生,维护血管内皮的完整性及功能。     

冠心病患者内皮祖细胞变化与冠状动脉病变的相关性

目的观察冠心病患者外周血中提取的内皮祖细胞的细胞形态、数量、集落数与正常对照组的区别。并研究冠心病患者冠状动脉狭窄的不同范围和程度与内皮祖细胞数量变化的相关性。方法选择冠心病患者57例和对照组30例,从外周血获取单个核细胞,体外培养后进行细胞分析和计数。并分析冠状动脉狭窄的不同范围和程度,患者内皮祖细胞数量和成集落数量的区别,并进行相关分析。结果 (1)冠心病患者外周血内皮祖细胞数量(23.1±1.8比56.7±2.4)和细胞集落数(14.7±2.5比24.2±1.7)较对照组明显减少;(2)随着冠状动脉狭窄范围的扩大和狭窄程度的加重,内皮祖细胞的数量和活性明显下降。结论冠心病患者外周血内皮祖细胞的数量和成集落的数量明显降低;冠心病患者外周血内皮祖细胞的数量与冠状动脉病变的范围和狭窄程度呈负相关。     

氧化低密度脂蛋白对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响

目的观察氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)对外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)数量和功能的影响.方法密度梯度离心法获取外周血单个核细胞,培养7天后,收集贴壁细胞并加入不同浓度Ox-LDL(分别为25μg/ml,50μg/ml,100μg/ml,200μg/ml)和LDL(100μg/ml)培养一定的时间(6 h,12 h,24h以及48h).激光共聚焦显微镜和流式细胞仪鉴定EPC,分别观察EPC的增殖、迁移、黏附和体外血管生成能力.结果Ox-LDL显著减少外周血EPC数量,200μg/ml Ox-LDL作用24h对EPC数量的影响最为显著(较对照组减少了近70%,P＜0.001).另外,100μg/ml Ox-LDL呈时间依赖关系减少EPC数量,于24h达到高峰(P＜0.01).Ox-LDL也显著损害了外周血EPC的黏附、迁移、增殖和体外血管生成能力.结论Ox-LDL可减少EPC数量并损害EPC功能.     

冠心病患者循环内皮祖细胞变化及功能的研究

目的探讨冠心病患者外周血循环内皮祖细胞(EPC)变化及其纤溶、黏附和炎症因子表达。方法选择冠心病患者57例(冠心病组)和对照组30例,提取EPC进行数量和细胞集落的比较。用酶联免疫吸附法和底物发光法检测EPC分泌组织型纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)的浓度和活性。用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测EPC的tPA、PAI、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARγ)的mRNA表达水平。结果冠心病组EPC数量较对照组明显减少(P0.05),形成细胞集落数、细胞增殖能力也明显降低(P0.05)。与对照组比较,冠心病组EPC分泌的tPA含量和活性明显下降(P0.05),PAI含量和活性明显升高(P0.01)。RT-PCR检测结果显示,与对照组比较,冠心病组EPC的tPA、PPARγmRNA表达减弱,PAI、VCAM-1、ICAM-1 mRNA表达增强(P0.05)。结论冠心病患者外周血循环EPC数量减少,纤溶功能减低,黏附和炎症因子表达增强,其在冠心病发生发展中起到重要作用。     

Circulating endothelial progenitor cells correlate with erectile function in patients with coronary heart disease.

AIMS: The aim of the study was to determine the influence of endothelial progenitor cells (EPC) on erectile dysfunction (ED). EPC play a major role in repair mechanisms of the endothelial monolayer, but the role of EPC in ED is unclear. METHODS AND RESULTS: Circulating levels of CD34(+)/KDR(+) and CD133(+) EPC were determined in 119 patients with known coronary artery disease. ED was evaluated with an ED-score generated from the KEED questionnaire. Prevalence of ED was 59.7%. In univariate analysis, age, hypertension, reduced left ventricular ejection fraction (LVEF), diabetes, and circulating levels of CD133(+) EPC, but not cardiovascular drug treatment were associated with ED. Body mass index (BMI) was positively (r = 0.319, P=0.003) and high-density lipoprotein was negatively (r=-0.246, P=0.034) correlated with ED. Adjustment for age, diabetes, hypertension, BMI, smoking, LVEF, use of statins and lower urinary tract symptoms, and prior coronary intervention revealed low levels of circulating immature CD133(+) EPC as independent risk factor for ED (95% CI -11.183 to -1.7371, P=0.008). CONCLUSION: Reduced levels of circulating CD133(+) EPC are an independent risk factor for ED. Thus, EPC may be a link between cardiovascular risk factors, endothelial dysfunction, and ED.     

冠心病患者外周血内皮祖细胞数量与心功能的关系

目的探讨冠心病患者外周血内皮祖细胞数量与心功能的关系。方法所有入组病例均为2010年8月至12月在粤北人民医院心内科住院患者,冠心病组(既往行冠脉造影或心脏CTA检查明确诊断为冠心病者)60例,根据ACC/AHA指南,选取心功能为B期组30例,D期组30例,对照组30例(冠脉造影正常),采用流式细胞仪检测循环外周血中CD133+和CD34+双阳性的细胞的数量。结果心功能B期组循环外周血中内皮祖细胞的数量与对照组和心功能D期组相比均显著升高(P<0.05);对照组循环外周血中内皮祖细胞的数量较心功能D期组显著升高(P<0.05)。结论外周血循环内皮祖细胞在未发生心衰的冠心病患者中升高;在严重心衰患者中降低。调节内皮祖细胞的释放可能作为一种治疗心衰的新思路。     

他汀类药物对不同类型冠心病患者外周血中内皮祖细胞数量的影响

目的：研究他汀类药物对不同类型冠心病患者外周血中内皮祖细胞（EPCs）数量的影响。方法：选择127例冠心病患者,分为急性心肌梗死（AMI）介入治疗组（A组,45例）,AMI保守治疗组（B组,29例）,不稳定型心绞痛组（C组,31例）,稳定型心绞痛组（D组,22例）,入院后均给予阿托伐他汀治疗;同时选择30例非冠心病患者作为非冠心病对照组,不给予阿托伐他汀治疗。上述所有患者在入院即刻、14d、30d采血,检测患者外周血中CD133标记的EPCs数量。结果：冠心病各组及非冠心病对照组患者外周血中均有EPCs（CD133）的表达,与入院即刻相比,冠心病各组患者服用阿托伐他汀后EPCs（CD133）的表达在14d和30d后明显上升[A组：（0.015±0.016）%比（0.411±0.361）%比（0.472±0.384）%,B组：（0.009±0.010）%比（0.250±0.031）%比（0.413±0.035）%,C组：（0.421±0.814）%比（1.065±2.014）%比（1.325±2.321）%,D组：（1.387±0.021）%比（2.153±0.167）%比（3.052±0.086）%],P均〈0.05;非冠心病对照组患者EPCs（CD133）的表达在14d和30d后无明显变化（P〉0.05）。结论：他汀类药物能增加冠心病患者外周血内皮祖细胞数量。     

冠心病患者外周血内皮祖细胞数量及生物学功能与肝细胞生长因子的关系

目的观察冠心病患者外周血内皮祖细胞（EPCs）数量及生物学功能的变化,进一步探讨肝细胞生长因子（HGF）对其影响,为临床应用HGF提供理论依据。方法收集50例非冠心病患者（对照组）、50例冠心病患者（冠心病组;每例分为HGF干预组和非HGF干预组）外周血,应用流式细胞仪和ELISA法分别检测各组CD133＋／CD34＋细胞的数量和HGF水平;采用密度梯度离心法分离培养各组外周血中EPCs,通过MTT法、Transwell迁移试验、黏附能力测定试验及PI—AnnexinV双重染色法来分别检测EPCs的增殖、迁移、黏附能力和凋亡水平。结果与对照组比较,冠心病组外周血中CD133＋／CD34＋细胞数量减少[（2．15±0．69）％1）S（5．26±1．16）％,P〈0．011,血浆中HGF浓度升高[（6．80±1．22）w（2．62±0．83）gg／L,P〈0．01],EPCs增殖、迁移、黏附等生物学功能减弱（P〈0．05）;HGF干预组EPCs增殖、迁移、黏附等生物学功能显著改善（P〈0．05）。各组细胞凋亡水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论外周血中CD133＋／CD34＋细胞数量和血浆中HGF水平的变化可能成为冠心病患者新的危险评估因素。     

Endurance training increases the number of endothelial progenitor cells in patients with cardiovascular risk and coronary artery disease

OBJECTIVE: As regular physical exercise improves endothelial dysfunction and promotes cardiovascular health, we investigated the effect of training on angiogenesis by measuring the number of circulating endothelial progenitor cells (EPC), the level of EPC-mobilizing growth factors and tested vascular function by flow-mediated dilation (FMD) in patients with coronary artery disease (CAD) and cardiovascular risk factors (CVRF). In addition, degradation products of the NO pathway (NOx) were determined. METHODS AND RESULTS: Twenty patients with documented CAD and/or CVRF joined a 12-week supervised running training. Circulating EPCs--defined by the surface markers CD34, KDR and CD133--were measured at baseline and after exercise training by flow cytometry. We found a significant increase in circulating EPCs (2.9+/-0.4-fold increase; P < .0001), which was positively correlated with both, the change of FMD (r = .81, P < .001) and the increase of NOx synthesis (r = .83, P < .001). Plasma VEGF and erythropoietin did not change in response to exercise. However, we observed a positive correlation between the number of EPCs and erythropoietin at baseline (r = .70, P < .01) and after training (r = .73, P < .01). CONCLUSIONS: Regular exercise training augments the number of circulating EPCs in patients with CVRF and CAD and is associated with improved vascular function and NO synthesis.     

Endothelial progenitor cells correlate with endothelial function in patients with coronary artery disease

Endothelial progenitor cells (EPC) predict morbidity and mortality in patients at cardiovascular risk.Patients with low EPC counts and impaired endothelial colony forming activity have a higher incidence for cardiovascular events compared to patients with high EPC counts and favorable colony forming activity. The pathophysiological basis for this finding may be an insufficient endothelial cell repair by EPC.We postulate that EPC influence coronary endothelial function which itself is relevant for the outcome of patients at cardiovascular risk. To test this hypothesis in humans, endothelial function was invasively assessed in 90 patients with coronary heart disease by quantitative coronary angiography during intracoronary acetylcholine infusion. Flow cytometry of mononuclear cells isolated from peripheral blood was performed to assess CD133(+) or CD34(+)/KDR(+) EPC. EPC function was assessed ex vivo by determination of endothelial colony forming units. Low EPC number as well as impaired endothelial colony forming activity correlated with severely impaired coronary endothelial function in univariate analysis. Multivariate analysis revealed that only the number of EPC predicts severe endothelial dysfunction independent of classical cardiovascular risk factors. Endothelial function closely correlates with the number of circulating EPC providing new mechanistic insights and options for risk assessment in patients with coronary heart disease.