康宁克通或干扰素局部注射对瘢痕PDGF BB基因表达影响

目的明确康宁克通和干扰素α２ｂ对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制是否通过ＰＤＧＦ途径。方法对６例增生性瘢痕同一个体分区域同时局部注射康宁克通或干扰素α２ｂ后３天及７天的ＰＤＧＦＢＢｍＲＮＡ原位表达进行了观察。结果①康宁克通或干扰素α２ｂ在局部注射后７天增生性瘢痕的ＰＤＧＦＢＢｍＲＮＡ表达强度比未注射区均明显减少（Ｐ＜０．０１）,但局部注射后３天表达强度与未注射区相比均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。②增生性瘢痕的ＰＤＧＦＢＢｍＲＮＡ原位表达强度高于正常皮肤。结论激素及干扰素α２ｂ治疗瘢痕的机制之一是通过抑制ＰＤＧＦ基因表达,从而减少成纤维细胞的有丝分裂,使瘢痕的成纤细胞增殖受到抑制。     

康宁克通或干扰素局部注射对瘢痕PDGF BB基因表达影响

目的 明确康宁克通和干扰素α－２b对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制是否通过ＰＤＧＦ途 径。方法 对６例增生性瘢痕同一个体分区域同时局部注射康宁克通或干扰素α－２b后３ 天及７天的ＰＤＧＦ ＢＢ ｍＲＮＡ原位表达进行了观察。结果 ①康宁克通或干扰素α－２b在局部注射后７天的ＰＤＧＦ ＢＢ ｍＲＮＡ表达强度比未注射区均明显减少（Ｐ〈０．０１）,但局部注射后３天表达强度与未注射区相比均无显著性差异（Ｐ〉０．０５）     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中TGF—β1及Ⅰ,Ⅲ型胶原基因 …

目的 检测增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中ＴＧＦ－β１及Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达,了解其相互关系及意义。方法 斑点杂交分析检测Ｈ和Ｋ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原及ＴＧＦ－β１ｍＲＢＡ稳态水平的改变;原位杂交检测ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ在组织中的空间分布。结果 ①Ｋ和Ｈ组织中ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ稳态水平明显高于Ｎ组和Ｓ组;②Ｋ选择性Ｉ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强,而Ｈ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ表达均增强。     

转移生长因子—β,碱性成纤维细胞生长因子诱导人成骨细胞表达血小板衍生生

目的 探讨转移生长因子（ＴＧＦ）－β、碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对人成骨细胞血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）－ＢｍＲＮＡ表达的影响及其意义。方法 体外分离培养人成骨细胞。在体外培养的成骨细胞中分别加入１０、２０、４０、８０、１６０ｕｇ／Ｌ梯度浓度的ＰＤＧＦ－ＢＢ培养细胞２４ｈ,以摄取＾３Ｈ－ＴｄＲ为细胞增殖指标检测细胞增殖状况。以４ｕｇ／Ｌ的ＴＧＦ－β和１０ｕｇ／Ｌ的ｂＦＧＦ培养细胞２４ｈ,寡核苷酸探针检测细胞ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ的表达。结果 １０～１６０ｕｇ／Ｌ的ＰＤＧＦ－ＢＢ可促进成骨细胞增殖（Ｐ〈０．０５）。在普通培养条件下,细胞下表达ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ;当培养体系中加入ＴＧＦ－β和ｂＦＧＦ,可见ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ的表达。结论 ＰＤＧＦ－Ｂ基因的表达可能是骨组织生长的储备因素,ＴＧＦ－β和ｂＲＮ     

生长因子在大鼠前列腺组织中的表达及雄激素的调控作用

目的　观察雄激素水平改变对大鼠前列腺组织碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ） 和转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）表达的影响。方法　采用分子杂交技术研究ｂＦＧＦｍＲＮＡ 及ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ 在去势和未去势大鼠前列腺组织中表达的差异。结果　去势组ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ 杂交斑点ＩＯＤ 均值为３１５．５,是未去势组（１７９）的１．７６ 倍;而未去势组ｂＦＧＦｍＲＮＡ 杂交斑点ＩＯＤ 均值为４４５ ．３,是去势组（２００．３） 的２．２２倍,差异均有显著性（Ｐ＜０ ．０１）。结论　雄激素水平变化可影响ｂＦＧＦｍＲＮＡ 及ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ 的表达,ｂＦＧＦ及ＴＧＦβ１ 介导雄激素的作用。     

bFGF调节PDGF对人成骨细胞的促增殖作用

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）促成骨细胞增殖作用的影响及其机制。方法 分离培养人成骨细胞;以ＰＤＧＦ－ＡＢ（１００ｎｇ／ｍｌ）单独培养、ｂＦＧＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）与ＰＤＧＦ－ＡＢ（１００ｎｇ／ｍｌ）混合培养、不加生长因子等３种方式培养细胞,绘制细胞生长曲线;ｂＦＧＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）与ＰＤＧＦ－ＡＡ或ＰＤＧＦ－ＢＢ（浓度均为４０ｎｇ／ｍｌ）以不同方式联     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达的改变及意义

目的检测增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中ＴＧＦβ１及Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达,了解其相互关系及意义。方法斑点杂交分析检测Ｈ和Ｋ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原及ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ稳态水平的改变;原位杂交检测ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ在组织中的空间分布。结果①Ｋ和Ｈ组织中ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ稳态水平明显高于Ｎ组和Ｓ组;②Ｋ选择性Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强,而Ｈ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ表达均增强。结论ＴＧＦβ１在Ｈ和Ｋ的发病机理中起了重要作用,Ｋ和Ｈ发生发展中具有不同的分子机理。     

腹膜透析对转化生长因子β1在残存肾中表达的影响

探讨清除循环中毒素后生长因子和残存肾小球的改变。方法采用分子杂交技术和组织病理分析方法在肾次全切除的残存肾大鼠模型上研究腹膜透析（ＰＤ）对转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）ｍＲＮＡ在残存肾中表达的影响和肾小球硬化的变化。分模型组和ＰＤ组，第８周ＰＤ组开始作腹膜透析至第１２周。分别在第７周和１２周各组杀检６只作肾病理检查（ＨＥ．ＰＡＳ染色）和ＴＧＦ－β１ｃＤＮＡ缝隙点样杂交。结果在实验的第７周两组间肾小球硬化指数（ＧＳＩ）及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达均无显著性差异。第十二周，ＰＤ组的ＧＳＩ及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达均显著低于模型组。ＧＳＩ改变程度与ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达丰度变化呈明显正相关（ｒ＝０．６５Ｐ＜０．０５）。结论腹膜透析可明显减少ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的表达并延缓残存肾小球的硬化     

蛋白激酶A在转化生长因子β-1刺激增生性瘢痕成纤维细胞增殖中的作用

目的：探讨蛋白激酶Ａ在转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）刺激增生性瘢痕和正常人皮肤皮纤维细胞（ＨＳ＿ＦＢ和ＮＳ－ＦＢ）增殖中的信号转导作用。方法：利用＾３２Ｐ掺入底物法测定ＨＳ－ＦＢ和ＮＳ－ＦＢ的ＰＫＡ活性;使用直接计数法和ＭＴＴ法测定ＴＧＦ－β１和ｃＡＭＰ、Ｈ７等刺激两种细胞后增殖能力的变化。结果：ＮＳ－ＦＢ被ＴＧＦ－β１刺激后ＰＫＡ的活性短暂升高后很快恢复（３０ｍｉｎ内,但Ｐ〉０．０５）。ＨＳ－ＦＢ则在３０～６０ｍｉｎ降低（Ｐ〈０．０５）,１ｈ后恢复;ＨＳ－ＦＢ的ＰＫＡ活性比ＮＳ－ＦＢ低（但Ｐ〉０．０５）。ＴＧＦ－β１能强烈刺激两种细胞增殖（３０ｍｉｎ后Ｐ〈０．０５）,对ＨＳ－ＦＢ的刺激作用更强（刺激６０ｍｉｎ后Ｐ〈０．０５）。ｃＡＭＰ可抑制两种细胞增殖（６０ｍｉｎ后Ｐ〈０．０５）,Ｈ７有拟ＴＧＦ－β１的刺     

前列腺增生组织中bFGFmRNA表达的意义

目的 探讨前列腺组织中碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因和蛋白及基受体表达的意义。方法 应用原位分子杂交和免疫组化方法检测３８例前列腺增生（ＢＰＨ）组织和１０例正常前列腺（ＮＰ）组织中ｂＦＧＦｍＲＮＡ、ｂＦＧＦ和ＦＧＦＲ１表达。结果 前列腺间质细胞和上皮细胞中均见ｂＦＧＦｍＲＮＡ、ｂＦＧＦ和ＦＧＦＲ１阳性染色。ＢＰＨ间质细胞中三者表达显著高于ＮＰ组织,但ＢＰＨ与ＮＰ上皮细胞中三者表达无显著性。     

增殖瘢痕成纤维细胞接触后增殖及生物合成特性对异常瘢痕形成的机理

目的 为明确不同异常瘢痕成纤维细胞在体外完全接触后其增殖活性及生物全成功能的特性。方法 以瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤（各6例）为材料，通过细胞培养、免疫组织化学及分子生物学等方法，对不同成纤维细胞在细胞接触及未接触时通过检测增殖细胞核内抗原、P16、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及前胶原基因表达对成纤维细胞的增殖、抑制及生物合成进行了研究。结果 瘢痕疙瘩成纤维细胞接触表现为细胞交叉重叠及较高的增殖活性及旺盛的生物合成功能，提示其失去了接触性抑制及密度抑制。皮肤成纤维细胞接触后则增殖及生物合成功能明显下降。增生性瘢痕成纤维细胞接触后表现为旺盛的生物合成功能，但其增殖活性处于瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞之间。结论 不同瘢痕成纤维细胞接触后增殖及生物合成的特性可能是形成不同瘢痕的机理之一。     

microRNA-21调控TGF-β通路促进增生性瘢痕形成的机制研究

目的探讨micro RNA-21在增生性瘢痕(Hypertrophic scars,HS)形成中的作用及机制,为生物学防治提供新靶点。方法收集临床患者正常皮肤及HS标本,组织学检测、组织胶原定量检测;免疫组化、Real-time PCR检测正常细胞外基质Col 1 A1、Col 3 A1、Fibronectin(FN)及α-SMA的表达;Real-time PCR检测micro RNA-21 m RNA表达水平;培养HS成纤维细胞,构建micro RNA-21反义表达载体,并加入TGF-β诱导,Real-time PCR检测Col 1 A1、Col 3A1及micro RNA-21的表达。结果 HS中胶原的含量及细胞外基质表达明显高于正常皮肤;HS组织中micro RNA-21表达高于正常皮肤组织;TGF-β可增强HS成纤维细胞中micro RNA-21的表达,而瘢痕成纤维细胞转染micro RNA-21反义表达载体后可明显降低瘢痕相关基因的表达。结论皮肤创伤愈合后局部micro RNA-21表达升高,促进了细胞外基质的合成,而TGF-β进一步加强了micro RNA-21对瘢痕形成的促进作用,可能是导致HS形成的重要原因。     

Effect of heparin on production of transforming growth factor (TGF)-beta1 and TGF-beta1 mRNA expression by human normal skin and hyperplastic scar fibroblasts

Heparin affects both dermal fibroblast proliferation and collagen and may mediate these effects by altering the levels of transforming growth factor-beta1 (TGF-beta1) production and TGF-beta1 mRNA expression as a wound healing modulator. The purpose of this study is to probe the effect of heparin on TGF-beta1 and TGF-beta1 mRNA production by human normal skin and hyperplastic scar fibroblasts. This research investigates the effect of heparin on TGF-beta1 and TGF-beta1 mRNA production by human normal skin and hyperplastic scar fibroblasts with exposure to 0 microg/mL, 100 microg/mL, 300 microg/mL, or 600 microg/mL heparin for 24, 48, 72, or 96 hours in a serum-free in vitro model. Levels of TGF-beta1 in the supernatants and TGF-beta1 mRNA expression of fibroblasts were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and real time RT-PCR, respectively. Heparin (300 microg/mL and 600 microg/mL) stimulated TGF-beta1 production by normal skin (26% to 83%) and hyperplastic scar fibroblasts (63% to 85%), with statistical significance (P < 0.05) at various time points. Heparin (300 microg/mL and 600 microg/mL) also stimulated TGF-beta1 mRNA expression by normal skin (12% to 53%) and hyperplastic scar fibroblasts (33% to 52%), with statistical significance (P < 0.05) at various time points. These effects of heparin on normal skin and hyperplastic scar fibroblasts may have implications for hyperplastic scar formation and wound healing in vivo.     

增生性瘢痕转化生长因子β及其受体的分布及表达

目的　探讨转化生长因子 β(TGF β)及其受体在增生性瘢痕形成中的作用机制。　 方法　收集临床手术切除后的正常皮肤组织 7例和增生性瘢痕组织标本 11例 ,用免疫组织化学和原位杂交的方法检测TGF β及其TGF β受体 (TGFR)Ⅰ、TGFRⅡ在组织中的定位分布、蛋白和mRNA表达。　结果　在正常皮肤组织中 ,与TGF β1 、TGF β2 、TGFRⅠ比较 ,TGF β3和TGFRⅡ呈较高表达 ;在增生性瘢痕组织中则呈现与正常皮肤组织中的表达相反的结果。与正常皮肤组织相比 ,增生性瘢痕组织中TGF β1 、TGF β2 和TGFRⅠ的蛋白和mRNA表达均明显增加 ,而TGF β3和TGFRⅡ的蛋白以及mRNA表达相对减少。　结论　创面愈合过程中TGF β及其受体不同水平的表达与增生性瘢痕的形成直接相关。     

瘢痕成纤维细胞α1-4整合素表达研究

目的 了解增生性瘢痕组织内成纤维细胞膜上α１－４整合素粘附分子表达水平,并探讨整合素在瘢痕增生发展过程中的作用及意义。方法 提取增生性瘢痕及正常皮肤组织中的细胞膜蛋白,以免疫斑点杂交检测整合素表达水平;组织标本石蜡切片,以免疫组织化学染色方法显示不同亚型整合素的表达部位。结果 ①从增生性瘢痕组织中提取的膜蛋白内含有相对较高的α１、α２、α３和α４整合素成份;②在正常皮肤及增生性瘢痕组织的表皮基底细     

体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成及结缔组织生长因子的表达

目的　探讨结缔组织生长因子在人增生性瘢痕发病机制中的作用。方法　体外培养人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞 ,通过H3 脯氨酸掺入法检测细胞胶原合成 ,通过免疫细胞化学染色和逆转录聚合酶链反应检测细胞结缔组织生长因子蛋白质和mRNA的表达。结果　和正常皮肤成纤维细胞相比 ,增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成和结缔组织生长因子蛋白质及mRNA的表达均显著增高 (P <0 0 1)。结论　结缔组织生长因子可能在增生性瘢痕纤维化过程中发挥重要促进作用。     

Exogenous transforming growth factor-beta amplifies its own expression and induces scar formation in a model of human fetal skin repair.

OBJECTIVE: Fetal skin wounds heal without scarring. To determine the role of TGF-beta 1 in fetal wound healing, mRNA expression of TGF-beta 1 was analyzed in human fetal and adult skin wounds. METHODS: Human fetal skin transplanted to a subcutaneous location on an adult athymic mouse that was subsequently wounded heals without scar, whereas human adult skin heals with scar formation in that location. In situ hybridization for TGF-beta 1 mRNA expression and species-specific immunohistochemistry for fibroblasts, macrophages, and neutrophils were performed in human adult wounds, fetal wounds, and fetal wounds treated with a TGF-beta 1 slow release disk. RESULTS: Transforming growth factor-beta 1 mRNA expression was induced by wounding adult skin. No TGF-beta 1 mRNA upregulation was detected in human fetal skin after wounding. However, when exogenous TGF-beta 1 was added to human fetal skin, induction of TGF-beta 1 mRNA expression in human fetal fibroblasts occurred, an adult-like inflammatory response was detected, and the skin healed with scar formation. CONCLUSIONS: Transforming growth factor-beta 1 is an important modulator in scar formation. Anti-TGF-beta 1 strategies may promote scarless healing in adult wounds.     

重组人转化生长因子β3对成纤维细胞作用的观察

目的　观察重组人转化生长因子 β3(recombinehumantransforminggrowthfactorβ3,rhTGFβ3)对成纤维细胞的作用 ,探讨其可能机制。　 方法　取体外培养的人正常皮肤成纤维细胞(normalskinfibroblast,NSFb)和增生性瘢痕成纤维细胞 (hypertrophicscarfibroblast,HSFb) ,经不同浓度的rhTGFβ3处理 ;另设不含rhTGFβ3的DMEM培养液相应细胞组作为对照。通过放射免疫和Northernblot杂交法 ,观察NSFb和HSFb中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及转录水平mRNA表达的变化。　结果　 (1)NSFb和HSFb中Ⅰ、Ⅲ型前胶原的表达有明显不同 ;(2 )与对照组相比 ,经rhTGFβ3处理的各实验组Ⅰ、Ⅲ型前胶原合成明显增加 (P <0 .0 0 1) ,Ⅰ Ⅲ型前胶原的比例变小 ;(3)rhTGFβ3对NSFb和HSFb生物学作用的影响呈明显的量效关系。在相同剂量作用下 ,HSFb的PCⅠ、PCⅢ含量高于NSFb。　结论　rhTGFβ3能有效提高成纤维细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成和Ⅰ、Ⅲ型构成比中Ⅲ型胶原的相对含量 ,可能对加速创面愈合及减少瘢痕形成具有重要的作用     

整合素α5β1在病理性瘢痕中的表达及意义

目的　研究整合素α5β1 在病理性瘢痕中的表达情况 ,探讨其在瘢痕发生、发展中的作用和意义。方法　运用SP免疫组化及SPA 胶体金免疫电镜技术对 15例增生性瘢痕、15例瘢痕疙瘩及 10例正常皮肤进行整合素α5β1 的检测 ,并对结果进行半定量及定量分析。结果　在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的成纤维细胞中整合素α5β1 呈阳性表达 ,较正常皮肤强 (P <0 0 1) ;在瘢痕疙瘩中的表达较增生性瘢痕强 (P <0 0 1)。结论　整合素α5β1 与病理性瘢痕发生、发展关系密切。设法减少整合素α5β1 在成纤维细胞的过度表达或许是抑制瘢痕增生、软化瘢痕的新途径