抗人精子单克隆抗体HZ4对人精子的作用

用人精子抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠制备抗人精子单克隆抗体。对其中ＨＺ４株进行抗生育作用测试。ＨＺ４使Ｉｏｎｏｐｈｏｒｅ诱导的人精子顶体反应率由７３．３％降至２８．５％；使人精子仓鼠卵穿透率由２４％降至０；但对精子免疫制动、精子顶体蛋白酶活性无影响。     

17β-雌二醇诱导人精子顶体反应及胞内钙离子增加的研究

目的探讨雌激素对人精子的激活作用及其可能的作用机制。方法以17β-雌二醇(E2)及非透膜性大分子雌二醇-牛血清白蛋白交联物(E2-BSA)分别作用于生育力正常男性的精子,以三色法染色评价精子顶体反应(AR)发生率,流式细胞术检测精子内游离Ca2 浓度[Ca2 ]i的变化。结果E2可引起获能精子AR率明显增加,使[Ca2 ]i快速升高,对非获能精子则无明显影响;E2-BSA同样可以提高获能精子AR率及[Ca2 ]i,其作用与E2相似;E2诱导获能精子[Ca2 ]i升高依赖于胞外Ca2 的内流。结论雌激素对人精子有一定的激活作用,该作用可能是通过与人精子膜上的雌激素结合位点作用后使胞外Ca2 内流而实现的。     

利血平对人精子顶体反应的影响

用间接免疫荧光法对利血平作用后的人精子顶体反应进行了观察和分析。结果表明:利血平对由ionophore A23187(A23187)诱导的人精子顶体反应有明显的抑制作用,其抑制强度随利血平浓度的降低而减弱。提示利血平有希望成为一种新的外用避孕药。     

IL-1对冷冻复温人精子顶体反应的影响

目的：研究复温温度和白细胞介素－1（IL－1）对冷冻精子复温后存活率和顶体反应率的影响。方法：采用精液速冻法，不同浓度IL－1作用于解冻后的精液，以三色染色法检测顶体反应率。结果：对冻融精子37℃水浴复温效果优于41℃，10ng/ml,50ng/ml IL-1可减少精子存活率和顶体反应率。结论：一定剂量IL－1可降低精子存活率和顶体反应率，可能是由于IL－1可使Na^ -K^ -ATP酶活性降低，而对丙二醛（MDA）无影响。     

对人精子顶体反应率在优选及冷冻前后变化的实验研究

目的 旨在了解人精子顶体反应率优先及冷冻前后的变化。方法 应用甘油、甘油－卵黄、柠檬酸钠（GYC）及甘油－卵黄－柠檬酸钠－L－谷氨酰胺（GYCG）三种冷冻保护剂及上游法、Percoll密度梯度离心法及双曲管优选法，检测冻贮前后及优选前后人精子顶体反应率。结果 （1）人精子冻融后其顶体反应率在GYCG组无显著改变，而在甘油组、GYC组则明显下降；（2）在上游法、Percoll密度梯度离心法及双曲管优选法优选后顶体反应率均有显著增加。结论 冷冻复温使人类精子顶体反应率下降，GYCG对人类精子的顶体反应率有较好的保护作用；本研究中的三种优选方法均可增加精子顶体反应率。     

豚鼠精子顶体反应期间卵透明带诱导激活磷酸脂酶A2活性

目的 为了探讨HA是否参与ZP诱发的AR，它的激活是否依赖于Ca^2 的存在以及HA在豚鼠精子AR过程中的信号转导通路。方法 将豚鼠精子悬浮在最小获能培养基(MCM-LCa^2 ，23μM／LCa^2 )中预培养1h后，用[^11C]氯化胆碱或[^11C]花生四烯酸(AA)标记精子，并持续获能培养5h。经间断percoll密度梯度(30％～55％～85％)离心、洗涤。并将精子重新悬浮于MCM—LCa^2 培养其中。然后暴露于1mM/LCa^2 和／或ZP、百日咳毒素(PIX)、PLA2抑制剂、EGTA和甘油二脂激酶抑制剂(DAGKI),15分钟。精子膜脂类的提取、分离和鉴定采用Roldan和Varquer（1996)所报道方法。同时部分精子用相差显微镜检测AR百分率。结果获能精子Ca^2 ／ZP合并应用后，可进一步加速AA释放和溶血磷脂酰胆碱(LysoPC)产生。同时伴有磷脂酰胆碱减少(这些变化是PLA2活性的指征)。Ca^2 ／ZP的刺激亦导致精子AR率的增高；上述效应可被PLA2抑制剂马兜铃酸所阻断；采用PIX(G蛋白抑制剂)作用于已获能精子。结果发现由ZP引起AA和LysoPC含量升高以及AR率增加的效应均可被PIX抑制；23μMCa^2 存在下。精子虽不发生AR，但AA释放和LySoPC生成仍维持于较低的水平，而加入2mMEGTA(Ca^2 螫合剂)或250μMCa^2 (Ca^2 通道阻滞剂)可抑制HA的激活，导致AA和LySoPC的生成降低。DAG激酶抑制剂及K59022可加速AA及LySoPC产生,并促进口激发的AR。结论 上述结果表明，PLA2在四诱发豚鼠精子AR过程中起着关键作用,其激活仅需要低钙参与,同时PLA2活性受DAG和G蛋白介导信号转导通路的调控。     

卵胞浆内单精子注射后人精子激活鼠卵母细胞能力的研究

目的 :研究各种质量精子的鼠卵母细胞激活能力。方法 :选用 2 0～ 2 5 g昆明种雌性白鼠 ,超排卵取卵细胞 ,用 Percoll密度梯度离心法处理正常精液、少精、弱精、畸精以及冷冻后的正常精液 ,选择优质的精子进行显微注射 ,计算卵母细胞激活率、卵细胞形态正常率。结果 :各种质量精液中优选的精子激活鼠卵母细胞能力差异无显著性 ( P>0 .0 5 )。结论 :人精子激活鼠卵母细胞能力与最初精液状态没有直接的相关性 ,它不受精子数量、活力、运动性及形态的影响     

人精子激活卵细胞包相关因子检测方法的建立

目的:建立卵胞浆内单精子注射技术(ICSI)前人精子激活卵细胞相关因子检测方法.方法:选用20～25 g昆明雌性白鼠,超排卵取卵细胞,上游法优选人正常精子显微注射,对实验中一些环节进行观察比较.结果:显微注射针内径5～7 μm较适合人精子与鼠卵细胞之间的注射,小鼠卵细胞体外培养2 h左右进行显微注射效果较好,显微注射人精子的鼠卵细胞激活率与实验对照组、空白对照组比较,前者有较高的激活率,激活过程不易受操作程序及自发激活的影响,与人卵细胞接近.结论:此模型可用于ICSI前人精子激活能力的检测.     

人精子超激活运动的比例特征

目的 研究正常人精子超激活运动的比例特征.方法 11例常规检查正常的精液,通过Percoll分离处理再分别在获能条件下培养3和5h,利用计算机辅助精子分析仪对人精子直线速度(VSL),曲线速度(VCL),平均路径速度(VAP),线性[LIN,(VSL/ VCL) ×100],头部侧振幅(ALH)和精子超激活(％)进行检测分析.结果 在获能条件下培养3h时,精子超激活运动比例的均值为25.3％,标准差13.2％,中位数为27.0％,95％可信区间为16.4％～34.1％;在5h时,比例的均值为18.9％,标准差14.3％,中位数为18.0％,95％可信区间为9.3％ ～28.5％;两者服从正态分布.在获能培养3～5h过程中,人精子超激活运动的比例随时间延长呈降低趋势,但统计学差异不显著.结论 人精子在获能培养3h和5h时超激活运动比例的均值分别25.3％和18.9％,95％可信区间分别为16.4％ ～34.1％和9.3％ ～28.5％,并且比例随时间的延长而呈降低趋势.     

α5整合素亚基在肺癌细胞凋亡中作用的实验研究

目的探讨α5整合素亚基在肺癌细胞凋亡中的作用.方法以特异性单克隆抗体阻断肺癌细胞中α5整合素亚基的功能,TUNEL实验检测肺癌细胞的凋亡情况.结果肺癌GLC-82细胞24h、48h AI值分别为(1.3±0.67)%和(2.4±0.84)%.在1.0μg/ml、5.0μg/ml和10.0μg/ml浓度的抗体作用后24h的AI分别为(2.0±0.66)%、(2.7±0.67)%和(2.8±0.63)%;48h的AI分别为(3.4±0.96)%、(4.7±1.33)%和(5.1±1.19)%.与对照组相比差异有显著性(P＜0.05).结论α5整合素亚基可能抑制体外培养的GLc-82肺癌细胞的凋亡.     

The Relationship between Some lons and Acrosome Reaction of Human Sperm

Ｔｈｅ　Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｓｏｍｅ　ｌｏｎｓ　ａｎｄ　Ａｃｒｏｓｏｍｅ　Ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｕｍａｎ　ＳｐｅｒｍＷａｎｇＣｈｕｎ－ｍａｎ（王春年）；ＸｉｅＷｅｎ－ｙｉｎｇ（谢文英）；ＸｕＳｈｅｎｇ（徐胜）ａｎｄＷａｎｇＹ...     

精子透明带结合与辅助生殖技术中的精子优选问题

卵胞质内单精子注射技术(ICSI)使严重少弱精子症及梗阻性无精子症患者获得生育其遗传学子代成为可能。但ICSI后受精胚胎的质量和植入率仍不理想且人为选择的精子不能确保其子代的安全。选择何种精子进行ICSI,能否改善胚胎质量,降低子代风险等已成为现今研究的热点。各国学者分别从受精的关键、影响受精的因素以及ICSI治疗不育症的潜在风险等多方面进行研究。     

磷酸二酯酶抑制剂己酮可可碱对人精子受精力的影响

为进一步证明己酮可可碱(pentoxifylline,PF)对精子受精力的影响,对29例临床送检标本进行精液常规分析及体外受精实验.结果:6例精液常规及受精率均低于正常;14例精液常规正常, 但受精率低;9例精液常规及受精率均正常.所有标本均提取上游精子, 其中部分经体外获能后用作对照,部分用1mg/ml PF,37℃, 孵育0.5小时后再行体外获能.获能精子与去透明带金黄地鼠卵行异种体外受精,然后观察受精率,受精指数,及每个卵表面附着的精子平均数,结果提示PF对精液常规正常但受精力低下的精液标本有明显增强精子受精力的作用,这类患者精子经PF体外处理可能提高人工助孕技术的成功率.     

纤连蛋白抗血清对人精子受精能力的影响

采用体外异种穿卵试验的方法，研究纤连蛋白抗血清对人精子受精能力的影响，统计不同浓度的纤连蛋白抗血清作用下的穿卵率变化。结果发现：低浓度的纤连蛋白抗血清能使人精子穿透去透明带金黄地鼠卵的穿卵率有所提高；高浓度的纤连蛋白抗血清则对人精子的穿卵率无影响。     

人精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验与人精卵体外受精的比较

目的　研究在人工助孕技术中能否以人精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验 ( SPA)结果作为确定采用人精卵体外受精 ( IVF)或经卵细胞胞浆内单精子注射 ( ICSI)的指标。方法　对 2 2例准备行 IVF的夫妇男方精子 SPA受精率与其 IVF受精率结果进行比较。结果　 SPA和 IVF受精率分别为 38.6 %± 2 3.5 %与 5 3.5 %±2 8.4% ,SPA受精率较 IVF受精率低 ,但随着 SPA受精率的增加 ,IVF受精率也呈明显增加的趋势。在 SPA受精率大于 10 %的病例中 ,约 76 %的病例 IVF受精率大于 5 0 %。经统计学分析两者有显著相关性 ( rs=0 .70 46 ,| U | =3.2 2 84>u0 .0 1 /2 )。结论　 SPA受精率可作为助孕技术中确定 IVF或 ICSI助孕方案的参考指标     

富硒蘑菇对小鼠精子运动能力的影响

目的 :研究富硒蘑菇 (SEM )对低硒雄性小鼠精子活力的影响 ,并阐明其作用机理。方法 :用低硒饲料复制低硒小鼠模型 ,灌胃补充富硒蘑菇 ,按灌胃剂量分为低剂量 (SEML)、中剂量 (SEMM)、高剂量 (SEMH) 3组 ,及低硒组 (Se de)和亚硒酸钠组 (Se) ,饲以低硒饲料或亚硒酸钠 112 μg·kg-1·d-1灌胃 ;正常组饲以标准小鼠饲料 ,蒸馏水灌胃。实验历时 4 5d。用计算机辅助精子质量分析 (CASA)技术测定小鼠精子运动速度和轨迹 ,判定精子运动能力 ,用荧光分析法测定睾丸硒谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH px)、超氧化物歧化酶 (SOD)活性及丙二醛 (MDA)含量。结果 :SEM各组和Se组精子活力和活率加强 ,A、B级精子百分率增加 ,D级精子减少 ,各项运动参数VCL、VSL、STR、LIN和WOB增加 ,睾丸硒含量增加 ,GSH px和SOD活性显著增强 ,MDA含量降低。比较补充相同含硒量的SEMM组和Se组 ,前者各项指标有略好于后者的倾向。结论 :SEM有抗氧化损伤 ,改善低硒小鼠精子运动能力的作用。     

整合素与卵巢癌关系的相关研究

整合素是细胞表面的一种黏附因子,它通过介导细胞与细胞,细胞与细胞外基质间的相互作用参与细胞的多种生理活动。整合素与肿瘤的发生、发展以及侵润转移关系十分密切。近年来正成为研究的重点和热点,而卵巢癌仍旧是妇科恶性肿瘤疾病的主要死亡原因。现仅就整合素与卵巢癌的研究现状进行综述。     

Fca受体在人支气管平滑肌细胞的表达与功能研究

目的 探讨Fca受体在人支气管平滑肌细胞的表达特征及其功能.方法 采用RT-PCR和免疫荧光技术,从基因和蛋白水平检测Fca受体在人支气管平滑肌细胞的表达;以Fura-2/AM为细胞内钙离子荧光指示剂,观察IgA对人支气管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响.结果 RT-PCR和免疫荧光染色方法、均检测到Fca受体在人支气管平滑肌细胞的表达.slgA与人支气管平滑肌细胞孵育90min后,细胞内Ca2 浓度明显增高,差异具有显著性(P＜0.05).mlgA与人支气管平滑肌细胞孵育90min后,细胞内Ca2 浓度无明显改变(P＞0.05).结论 Fca受体在人支气管平滑肌细胞存在表达,slgA使人支气管平滑肌细胞内钙离子浓度增高.