家蝇幼虫抗菌蛋白对黑色素瘤细胞的影响

目的 探讨家蝇幼虫抗菌蛋白对黑色素瘤细胞（A375）的抑制作用。方法 细胞计数法、四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法及吖啶橙（AO）染色法测定家蝇幼虫抗菌蛋白对如，A375细胞生长的影响；四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法测定家蝇幼虫抗菌蛋白对正常人牙周膜细胞生长的影响。结果 高浓度组A375细胞数及吸光度（A）值明显降低，细胞增殖抑制率随浓度的增加而增大；而各浓度组正常人牙周膜细胞A值及细胞增殖抑制率与对照组相比差异无统计学意义；高浓度组A375见细胞凋亡。结论 家蝇幼虫抗菌蛋白可能通过诱导细胞凋亡而抑制A375细胞生长，对正常人体细胞基本无抑制作用；这种抑制作用有一个阈值。     

家蝇幼虫抗菌蛋白对子宫内膜癌细胞生长影响

目的 探讨家蝇幼虫抗菌蛋白对子宫内膜癌细胞(JEC)的影响.方法 细胞计数法、四甲基偶氨噻唑蓝(MTT)法测定家蝇幼虫抗菌蛋白对JEC细胞生长的影响;MTT法测定家蝇幼虫抗菌蛋白对正常人牙周膜细胞生长的影响;苏木素-伊红(HE)染色法观察细胞凋亡,并计算细胞凋亡指数(AI).结果 高浓度组JEC细胞数及吸光度 (A)值明显降低,细胞增殖抑制率随浓度的增加而增大;各浓度组正常人牙周膜细胞的A值和细胞增殖抑制率与对照组比较差异均无统计学意义;HE染色见细胞凋亡,各浓度组AI均明显高于对照组.结论 家蝇幼虫抗菌蛋白可能是通过诱导细胞凋亡来抑制JEC细胞生长.     

硫酸镍致雌性小鼠卵巢损伤作用

目的探讨硫酸镍致小鼠卵巢细胞凋亡的毒作用及其机制，为防治镍毒性导致的卵巢早衰提供科学依据。方法健康昆明种雌性小鼠以每次以10．0，5．0，2．5mg/kg硫酸镍（NiS04）腹腔注射染毒，0．2ml／（10g·bw），1次／d，连续12d。阴道脱落细胞学观察动情周期。摘取小鼠卵巢，制备卵巢贴片观察卵巢细胞的形态学变化，并利用流式细胞仪测定卵巢细胞细胞周期及DNA含量。结果（1）染毒组小鼠动情间期延长且不规则。（2）光学显微镜可观察到细胞凋亡的形态学变化。（3）细胞周期分析显示随染毒剂量增加，小鼠卵巢细胞呈现G0／G1期细胞阻滞且G1峰前出现Ap峰（凋亡峰。亚二倍体峰），G2／M、S期细胞比例下降；细胞凋亡率增加；细胞增殖指数（PI）降低；异倍体指数（DI）增加。结论腹腔注射硫酸镍可导致雌性小鼠卵巢损伤，其损伤作用与NiS04调控细胞周期和诱导卵巢细胞凋亡有关。     

荧光激活细胞分选分别含有高比例G0／G1期、S期、G2／M期细胞亚群的研究

目的：建立利用荧光激活细胞分选技术同时分选、获得含不同细胞周期细胞群的方法。方法：应用流式细胞仪的光学参数-前向角和侧向角，在细胞群中设置12个门，然后进行分选，分选出的各门细胞再经碘化丙啶（PI）染色进行细胞周期检测。结果：低侧向角、中前向角的细胞群内G0／G1期细胞比例可达70．0％，中侧向角、低前向角的细胞群内S期细胞比例可达72．3％，高侧向角、高前向角的细胞群内G2／M期细胞比例可达42．8％。结论：应用流式细胞仪的光学参数可以有效同时分选、获得分别含有高比例G0／G1期、S期、G2／M期的细胞亚群。     

甲基丙烯酸环氧丙酯对人支气管上皮细胞周期及凋亡影响的研究

目的探讨甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)对人支气管上皮细胞周期及凋亡的影响。方法人支气管上皮细胞(16HBE)经1~16μg/ml剂量的GMA染毒不同次数后,应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期及凋亡率的改变,同时测定细胞分裂指数(MI)。结果经1次染毒处理后,随着染毒剂量的增加,G0/G1期细胞显著减少(P<0.01),S期和G2/M期细胞显著增加,凋亡细胞数增多,细胞分裂指数下降;随着染毒次数的增加,各剂量组细胞周期均明显阻滞于G0/G1期,但高剂量组细胞仍表现出S期和G2/M期增多现象;经3次染毒后,高剂量组细胞出现凋亡率下降、分裂指数升高现象。结论经GMA染毒处理后,16HBE细胞周期由G0/G1期向S期和G2/M期移动而呈现增殖性改变。     

乙醇抑制肝细胞增殖的机理探讨

目的：探讨乙醇对肝细胞增殖，去分化过程，细胞周期以及细胞凋亡的影响，进一步阐明乙醇抑制肝再生的机理。方法：SMMC－7721人肝癌细胞株染毒25－200mmol/L乙醇后，采用MTT法，图象分析仪，流式细胞仪等进行测定。结果：50mol/L以上浓度乙醇作用24h后，SMMC－7721人肝癌细胞的增殖明显降低，与乙醇剂量有依赖关系。乙醇显著抑制细胞伸展，作用2h后，25mmol/L乙醇组的平均细胞面积为266.31μm^2，是对照组的70％，而200mmol／L乙醇组的平均细胞面积仅为对照的22％，此外，乙醇处理组G0/G1期细胞比例显著高于对照组，流式细胞仪以及荧光镜检法均显示，乙醇组的凋亡率显著高于对照组。结论：乙醇通过抑制或延迟SMMC－7721细胞的伸展，造成细胞去分化的延迟，使细胞不能及时启动进入增殖阶段，在G0／G1期堆积，不能顺利进入DNA合成阶段S期和G2／M期，而朝着细胞凋亡方向发展。     

东北菱对鼠肝癌H22细胞凋亡及细胞周期进程的影响

目的研究东北菱对鼠肝癌H22细胞凋亡及周期的影响。方法用东北菱对鼠肝癌如细胞进行体外实验，采用流式细胞仪测定细胞周期及凋亡。结果细胞周期阻滞在G1／G0期，S期细胞明显减少，凋亡率在43．11％，而阳性5-Fu组凋亡率为19．62％。结论东北菱能促进肿瘤细胞凋亡。     

四物汤配方颗粒对骨髓抑制小鼠造血功能调控的实验研究

目的观察四物汤配方颗粒对骨髓抑制小鼠造血功能的影响。方法50只小鼠随机分成5组，正常组、照射处理组及3个不同剂量组。应用流式细胞术（FCM）检测小鼠骨髓细胞周期，采用原位杂交技术测定骨髓细胞凋亡基因Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达。结果四物汤配方颗粒各组均能明显促进骨髓G0／G1期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2／M期细胞的转化，增殖指数（PI）明显升高。提高骨髓细胞中Bcl-2 mRNA的表达，降低Bax mRNA的表达。结论四物汤配方颗粒通过促进骨髓抑制小鼠细胞周期的转化及抑制骨髓细胞凋亡，而达到促进造血功能的目的。     

热适应对热应激肝癌细胞周期影响

目的探讨热适应对热应激细胞周期的影响。方法将人肝癌细胞系7721细胞随机分为对照组、直接热暴露组、热适应组和热适应后热暴露组，分别给予不同的热处理，用流式细胞分析法检测细胞周期。结果热适应后43℃，暴露组G0／G1期细胞所占比例明显低于其他组（P〈0．05），直接43℃暴露组G2／M期细胞所占比例明显低于热适用后暴露组和对照组（P〈0．05），热适应后43℃暴露组S期细胞所占比例明显高于单纯热适应组和对照组（P〈0．05）。结论热适应处理不仅可有效阻止热应激诱导的G0／G1细胞周期阻滞的发生。而且可增强热应激诱导的G2／M期和S期细胞周期阻滞的发生。     

姜黄素对人肺成纤维细胞凋亡及细胞周期的影响

目的研究姜黄素对人肺成纤维细胞(human lung fibroblasts,HLFs)体外生长、细胞周期及凋亡的影响。方法应用CCK-8、Annexin-V/PI、PI流式细胞分析术、免疫印迹法,检测姜黄素对细胞的增殖、凋亡、细胞周期和Bax蛋白表达的影响。结果姜黄素对HLFs的增殖有抑制作用,可促进HLFs的早期凋亡,对细胞周期可产生G2/M期阻滞,增加HLFs的Bax蛋白的表达。结论姜黄素可抑制HLFs的增殖并能诱导其凋亡,其机制可能与细胞的G2/M期阻滞及凋亡相关蛋白的表达增强有关。     

感染大肠埃希菌后家蝇幼虫血细胞来源的初步研究

目的探讨家蝇3龄幼虫感染大肠埃希菌后大量增加的血细胞来源。方法观察对照组及感染大肠埃希菌后4、8、16h组家蝇3龄幼虫血淋巴的血细胞总数（THC）变化;用流式细胞仪检测感染前后各组家蝇3龄幼虫血细胞周期的变化。结果感染后4、8、16h组THC与对照组比较均有显著增加,感染后8 h组THC最高,达（38 920±2274）/μl;对照组幼虫血细胞增殖指数（PI）为15.98%;感染后各组G2/M期和S期细胞增多,PI值均明显增加;感染后4 h组PI值最高,达44.34%。结论家蝇幼虫血细胞自身具有分裂能力,是其造血功能的重要补充。     

哮喘气道重构时平滑肌细胞增殖周期的研究

目的探讨哮喘气道重构时平滑肌细胞增殖周期的改变及意义。方法建立大鼠哮喘模型,支气管-肺组织行HE染色,光镜及图像分析系统研究支气管内管壁、气道平滑肌的病理改变,流式细胞仪检测气道平滑肌细胞增殖周期分布。结果⑴哮喘组大鼠支气管内管壁厚度、平滑肌层厚度较对照组明显增厚(P<0.01)。⑵哮喘组大鼠G0/G1期气道平滑肌细胞比例显著低于对照组(P<0.01);S期、G2/M期气道平滑肌细胞比例显著高于对照组(P<0.01)。结论哮喘气道重构时平滑肌细胞异常增殖,处于增殖状态的细胞比例明显增多,抑制平滑肌细胞的细胞周期转换有可能阻止气道重构,可望成为治疗哮喘的新途径。     

不同浓度米非司酮对体外培养子宫肌瘤细胞周期的影响及其诱导的细胞凋亡

目的:研究不同浓度米非司酮对体外培养子宫肌瘤细胞凋亡的影响。方法:采用体外培养的子宫肌瘤细胞,用不同浓度米非司酮处理后培养48h,用流式细胞仪分析子宫肌瘤细胞周期和凋亡率的改变。结果:不同浓度的米非司酮均可诱导子宫肌瘤细胞的凋亡,随着米非司酮浓度的增加,子宫肌瘤细胞的凋亡率有增高的趋势(P<0·05),低浓度米非司酮(10-8~10-7mol/L)可使G2/M期子宫肌瘤细胞比例减少(P<0·05),高浓度米非司酮(10-6~10-4mol/L)可使S期细胞比例减少(P<0·05)和G2/M期细胞比例减少(P<0·01)。结论:米非司酮可引起体外培养子宫肌瘤细胞的凋亡,呈现浓度-效应关系,低浓度米非司酮和高浓度米非司酮可能引起不同时期子宫肌瘤细胞的凋亡。     

紫杉醇诱导卵巢癌细胞凋亡及细胞周期改变的研究

目的研究紫杉醇能否诱导卵巢癌HO-8910细胞凋亡,以及凋亡诱导与细胞周期改变的关系。方法紫杉醇不同浓度、不同作用时间分别处理HO-8910细胞,在光镜和电镜下观察紫杉醇作用后细胞形态变化,流式细胞仪分析细胞凋亡及细胞周期的改变。结果荧光染色及电镜观察到典型的凋亡细胞形态,流式细胞仪DNA含量分析,癌细胞在紫杉醇作用下,首先表现为G2/M期阻滞。但只有出现G2/M期明显阻滞后,经过一定时间才出现凋亡。结论紫杉醇能够诱导HO-8910细胞凋亡,紫杉醇诱导HO-8910细胞凋亡与细胞分裂期阻滞密切相关,这一作用机制将为临床治疗提供理论依据。     

双酚A对大鼠睾丸支持细胞的功能影响及机制

目的 探讨双酚A(BPA)对雄性SD大鼠睾丸支持细胞功能的影响及损伤机制.方法 将16～22日龄SPF级雄性SD大鼠的睾丸支持细胞制成3.0×10~6～3.5×10~6个/ml的细胞悬液,设立空白对照组、溶剂对照组和1×10~(-7)、1×10~(-6)、1×10~(-5)、1×10~(-4)mol/L BPA染毒组,观察睾丸支持细胞的增殖、细胞周期以及PCNA、Vimentin蛋白表达的情况.结果 各染毒组睾丸支持细胞的存活率明显低于对照组(P<0.05),G_0/G_1期细胞构成比增加,而S期和M期细胞构成比降低,PI下降.免疫细胞化学结果显示,10~(-4)mol/L、10~(-5) mol/L BPA实验组显著抑制大鼠睾丸支持细胞PCNA的表达.BPA在10~(-4) mol/L、10~(-5)mol/L、10~(-6) mol/L剂量组显著抑制大鼠睾丸支持细胞内Vimentin的表达.结论 双酚A可通过影响睾丸支持细胞的细胞增殖、细胞周期和抑制PCNA、Vimentin蛋白表达而表现出生殖毒性.

Abstract：

Objective To investigate the effects of bisphenol A on SD rat Sertoli cell function and the injury mechanism. Methods SD rat Sertoli cells were treated with bisphenol A at different doses,and the control group,solvent control group were set. Sertoli cell proliferation,cell cycle and PCNA.Vimentin protein expression were observed. Results The survival rate of Sertoli cells in the treated groups was significantly lower than the control group (P<0.05), constitution ratio of G_0/G_1 phase cells increased,while for S phase and M-phase, it decreased,and PI decreased. Immunocytochemistry showed PCNA expression in Sertoli cells was significantly inhibited by 10~(-4),10~(-5) mol/L BPA. Vimentin expression in Sertoli cells was significantly inhibited by 10~(-4), 10~(-5),10~(-6) mol/L BPA. Conclusion Bisphenol A can affect Sertoli cell proliferation,cell cycle and inhibit PCNA.Vimentin protein expression in Sertoli cells.     

蛋白激酶C信号通路在温石棉致肺成纤维细胞的细胞周期和凋亡改变中的作用

目的 探讨蛋白激酶C（PKC）信号通路与温石棉致人胚肺成纤维细胞（HEPF）的细胞周期及细胞凋亡改变的联系。方法 流式细胞技术测定PKC的抑制剂或激活剂对温石棉处理兔肺泡巨噬细胞（AM）的培养上清液致HEPF的细胞周期和凋亡改变的影响。同时设立空白对照、正常对照（不加粉尘的AM）、阴性对照（标准TiO2)和阳性对照（标准SiO2）。结果 温石棉处理AM的上清液刺激HEPF增殖时,HEPF的G／M期细胞百分比为7．2％,高于各对照组,而细胞凋亡百分率为3．5％,低于各对照组,差异均有显著性（P＜0．01）。PRKC抑制剂C25H24N4O2使温石棉所致HEPF增殖时的S期细胞百分比由37．8％减少到27．3％,凋亡百分率由3．5％增加到22．7％,差异均有显著性（P＜0．01）,而PKC激活剂PMA能使此S期细胞百分比增加。结论 温石棉所致HEPF增殖时的细胞周期变化与其上游PKC信号通路有关,PKC抑制剂和激活剂主要是作用 于S期DNA的合成和诱导细胞凋亡。     

玉米赤霉烯酮对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响

目的 观察真菌雌激素玉米赤霉烯酮（ZEA）对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响,并初步探讨其分子生物学作用机制。方法 用噻唑蓝比色法观察ZEA对MCF-7细胞增殖活力流式细胞术观察ZEA对MCF-7细胞增殖活力和细胞周期分布的影响;用凋亡DNA片段检测试剂盒和流式细胞术从不同方面检测ZEA对细胞凋亡的影响;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹技术检测ZEA对bcl-2和bax mRNA和蛋白质表达的影响。结果 MCF-7细胞生长为雌激素依赖性：溶剂对照组（外源性雌激素缺乏且内源性雌激素耗尽的条件下）细胞增殖活力为100％,10nmol／L雌二醇组细胞增殖活力为257．6％;另外,以溶剂对照组发生凋亡率为100％来计,10nmol／L雌二醇组细胞凋亡率只有为10．8％。ZEA对MCF-7细胞生物学效应的影响同雌二醇类似：在2～96nmol／L浓度范围内,ZEA可快速恢复MCF-7细胞增殖活力（96nmol／L组细胞增殖活力为对照组的2．4倍）,提高S期细胞分布比例（96nmol／L组S期细胞分布比例为对照组的2．3倍）,降低凋亡百分率（96nmol／L组细胞细胞凋亡率为对照组的23．7％）,并呈现出良好的剂量-效应关系。RT-PCR和蛋白印迹结果分析显示,ZEA能够促进bcl-2 mRNA和蛋白质表达,对bax的表达则表现出抑制作用。结论 同雌激素类似,ZEA可提高MCF-7细胞增殖活力并促进有丝分裂指数;通过对bcl-2和bax表达的调节作用,ZEA可抑制雌激素耗尽所诱导的MCF-7细胞凋亡。     

人生长激素对人结肠癌细胞LS-174-T增殖周期的影响

目的：研究人生长激素（hGH)对体外培养的结肠癌细胞株增殖周期和DNA倍体的影响和意义。方法：取指数生长期的结肠癌细胞株LS-174-T（简称174）,以顺铂和（或）不同浓度的hGH体外培养,24h后以流式细胞仪测定细胞增殖周期等指标。结果：hGH能诱导174细胞S期数率显著上升（P＜0.01),G2/M期参数下调（P＜0.01),DNA指数未见增高。加用顺铂后细胞大量凋亡,细胞存活率显著下降（P＜0.01),各组S期百分数或显著下降,或与对照组无差异。结论：hGH体外作用于174细胞,能促使细胞进入对化疗药敏感的DNA合成期,没有上调DNA倍体数;顺铂能诱导大量凋亡,并且抑制hGH促进细胞增殖的作用。