线粒体脑肌病中线粒体DNA的部分缺失

在2例Kearns－Sayre综合征（KSS）和2例慢性进行性眼外肌麻痹（CPEO）患者的骨骼肌线粒体DNA（mtDNA）中发现存在单一的大片段缺失突变。缺失的长度2．5～5．5kb，突变只发生在部分线粒体DNA中，突变型mtDNA占全部mtDNA的60．5％～84．6％。在10例其它的线粒体脑肌病患者骨骼肌标本和外周血标本及数例正常骨骼肌和胎肝标本的mtDNA中均未发现缺失突变。上述发现支持mtDNA的缺失突变为KSS和CPEO主要病因的观点。     

鱼藤酮对PC12细胞线粒体膜电位及细胞周期的影响

目的观察鱼藤酮对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(pheochromocytoma, PC12细胞)线粒体膜电位及细胞周期的影响,探讨鱼藤酮对多巴胺神经元的损伤机制.方法用流式细胞仪检测PC12细胞线粒体膜电位及细胞周期.结果 5.0 μmol/L鱼藤酮作用于PC12细胞12 h及24 h后,G0/G1期及S期细胞所占比例逐渐下降(P<0.01),而G2/M期细胞比例逐渐升高(P<0.01).单纯鱼藤酮中毒12 h线粒体膜电位即降低.结论大剂量(5.0 μmol/L)鱼藤酮引起线粒体膜电位降低及细胞周期改变,可能导致PC12细胞生长障碍.     

线粒体DNA缺失对人淋巴瘤Namalwa 细胞生长和侵袭能力的影响

目的探讨线粒体DNA（mtDNA）缺失对人淋巴瘤Namalwa 细胞生长和迁移能力的影响。方法采用溴化乙锭处理
Namalwa细胞获得mtDNA缺失的ρ0-Namalwa细胞;营养缺陷法、PCR扩增线粒体DNA片段、Western bloting检测COXII蛋白
表达等方法鉴定ρ0-Namalwa细胞;MTT方法及细胞周期测定细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;流式细胞
术检测活性氧（ROS）及细胞内钙离子水平。结果ρ0-Namalwa细胞在选择性培养基中正常生长,而在非选择性培养基中逐渐
死亡;ρ0-Namalwa细胞未扩增出mtDNA片段以及未表达COXII蛋白;与Namalwa细胞相比,ρ0-Namalwa的细胞增殖率、迁移及
侵袭能力、ROS水平及细胞内Ca2+浓度明显降低,细胞阻滞于G0/G1期。结论ρ0-Namalwa细胞与亲本Namalwa细胞相比,生长
及迁移能力减弱,可能与细胞内ROS产生减少及细胞内Ca2+浓度降低有关。
     

葛根素对过氧化氢诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:研究葛根素对过氧化氢(H2O2)诱导PC12细胞损伤的影响。方法:建立H2O2致PC12细胞损伤模型,倒置相差显微镜下进行一般形态学观察,化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量及细胞培养液和细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:100μmol/L H2O2诱导PC12细胞4 h,细胞呈现明显损伤形态,LDH释放量升高(P<0.001),细胞培养液和细胞内MDA含量增加(P<0.001),SOD活性下降(P<0.001)。葛根素可明显改善形态学损伤,显著降低LDH释放量和细胞培养液及细胞内MDA含量,提高SOD活性。结论:葛根素对H2O2诱导PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧化能力有关。     

加减"补中益气汤"的妙用

目的 探讨"补中益气汽"的加减妙用.方法 分析总结加减"补中益气汤"对治顽固性、多发性口腔溃疡、气虚眩晕、五更泻的临床经验.结论 效果急好.     

补中益气汤对危难症的治疗作用

目的：探讨补中益气汤对危难症的治疗作用。方法：运用补中益气汤对危难症在出现脾胃虚弱，气虚下陷之证时采用异病同治。结果：治疗重症肌无力(全身型)，尿毒症，功能性子宫出血，顽固性自汗．顽固性慢性湿疹、冷性荨麻疹，心源性水肿皆取得可靠疗效。结论：补中益气汤为治脾胃虚弱，气虚下陷的方剂，一些慢性病中见该证，一些危重症，难治症在其发展中也可出现该证，是以补中益气汤亦可参与危难症的抢救治疗。     

补中益气汤对脾虚动物胃粘膜细胞凋亡的影响

目的:研究补中益气汤对脾虚型CAG大鼠胃粘膜组织细胞凋亡的影响.方法:采用免疫组化法,以兔抗大鼠Bcl-2多抗、兔抗大鼠Fas多抗检测其调控基因.结果:脾虚型CAG大鼠胃粘膜组织细胞Bcl-2、Bcl-2/Fas明显低于正常大鼠,经补中益气汤治疗后能恢复到接近正常水平.结论:补中益气汤可用于脾虚证的治疗.     

补中益气汤对慢性萎缩性胃炎保护作用的实验研究

目的:研究补中益气汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)的影响。方法:将小鼠分为正常对照组、模型组、补中益气汤大剂量组及补中益气汤小剂量组4组。除正常对照组外,其余小鼠采用多因素刺激的方法,制作CAG小鼠模型,观察各组小鼠的一般状况及胃粘膜的病理改变。结果:模型组小鼠一般情况较正常组差,胃窦腺体明显萎缩,胃黏膜炎细胞浸润明显;与模型组比较,补中益气汤大剂量及小剂量组小鼠胃黏膜病变减轻,炎症程度明显降低(P<0.01)。结论:补中益气汤对CAG小鼠胃黏膜有保护作用。     

缺氧的血清剥夺诱导的PC12细胞DNA损伤与修复

探讨PC12细胞在缺氧(37℃,5%O2,95%N2)、血清剥夺条件下DNA损伤与修复、凋亡、坏死或生存的变化规律.应用单细胞凝胶电泳技术、流式细胞学技术检测在不同时间点,缺氧、无血清培养等诱导下对PC12细胞单链DNA损伤与修复、凋亡的影响.结果发现在PC12细胞DNA损伤值均在0.5h时达第一个峰值,随后下降.3h后DNA损伤数值再次逐渐增加并达到最高值.细胞凋亡峰值略滞后于DNA损伤峰值,并于DNA损伤程度基本相平行.提示PC12细胞在缺氧和血清剥夺条件下存在DNA损伤与修复的动态变化过程,DNA损伤后可能直接诱导细胞凋亡,DNA损伤程度在早期与细胞凋亡程度相一致.     

线粒体DNA缺失细胞系的建立

目的 线粒体DNA缺失细胞系的建立和鉴定。方法 利用EB可以插入无核蛋白保护的线粒体DNA分子层状排列的碱基对之间抑制mtDNA复制的特点,将Lweis肺癌细胞在含有低剂量的EB、丙酮酸钠、尿嘧啶的培养液长期培养。结果 经EB诱导,可培育出具有嘧啶依赖性的mtDNA缺失细胞系。结论 线粒体DNA缺火细胞系的建立,为进一步研究线粒体DNA分子的基因及功能提供了条件。     

硒对微波辐照致PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨硒对微波致神经细胞损伤的保护作用.方法以离体培养的PC12细胞为研究对象,采用65 mW/cm2的微波照射20 min进行致伤,以细胞存活率、MDA含量、SOD和GSH-Px活性为实验指标反映Na2SeO3预处理对微波辐照致PC12细胞损伤的影响.结果微波辐照后PC12细胞存活率明显降低,MDA含量增加,SOD、GSH-Px活性降低,而经过Na2SeO3预处理后再接受微波辐照,以上指标的变化明显减轻,并且高剂量Na2SeO3预处理作用更明显.结论硒可以提高PC12细胞的抗氧化能力,保护神经细胞对抗微波辐射导致的细胞损伤.     

缺氧和血清剥夺诱导的PC12细胞DNA损伤与修复

探讨 PC12细胞在缺氧 ( 3 7℃ ,5 % O2 ,95 % N2 )、血清剥夺条件下 DNA损伤与修复、凋亡、坏死或生存的变化规律。应用单细胞凝胶电泳技术、流式细胞学技术检测在不同时间点 ,缺氧、无血清培养等诱导下对 PC12细胞单链 DNA损伤与修复、凋亡的影响。结果发现在 PC12细胞 DNA损伤值均在 0 .5 h时达第一个峰值 ,随后下降。 3 h后DNA损伤数值再次逐渐增加并达到最高值。细胞凋亡峰值略滞后于 DNA损伤峰值 ,并于 DNA损伤程度基本相平行。提示 PC12细胞在缺氧和血清剥夺条件下存在 DNA损伤与修复的动态变化过程 ,DNA损伤后可能直接诱导细胞凋亡 ,DNA损伤程度在早期与细胞凋亡程度相一致     

试析虞抟对补中益气汤的发微

本文对明代医家虞抟承丹溪心法之遗风，秉东垣内伤之秘录，潜心运用补中益气汤的经验进行归纳，从扩大治病范围，论证详脉求病机，证变出入方药中几方面加以探讨，旨在继承和发扬著名医家的学术思想和医疗经验。     

补中益气汤治疗湿疹一得

患者张某某,女,45岁。系达县市丝厂工人,于1984年5月26目诊。患者于1983年11月下旬开始出现双下肢膝以下搔瘁起疹。曾先后用西药(强的松、扑尔敏、维生素类药)和中药(消风散、麻黄连翘赤小豆汤、三妙散、四物汤等化裁)治疗近5月,均罔效。延余诊治,细察患肢,疹子零星散布于双膝以下,疹似粟状,     

补中益气汤对创伤大鼠免疫系统T细胞亚群的影响

目的:利用大鼠闭合性创伤模型,观察创伤后7d应用补中益气汤后的免疫调节作用。方法:健康成年SD大鼠随机分为三组,正常对照组(A)、创伤对照组(B)、创伤后补中益气汤治疗组(C)。B组和C组制成双侧股骨闭合骨折创伤模型,伤后1h开始给A组、B组经胃灌注生理盐水,给C组经胃灌注补中益气汤,于创伤后6h、1d、3d、5d、7d,取股静脉血1ml测定免疫指标T细胞表型CD4、CD8及CD3含量。结果:创伤后大鼠B组所有时间段和C组在6h、1d时的CD3+T、CD4+T细胞数量比创伤前显著下降,CD8+T细胞数量显著增多,CD4+T/CD8+T明显降低(P<0.01),创伤后3d、5d、7d时C组血中T淋巴细胞比B组CD3+T、CD4+T细胞数量增加,CD8+T细胞数量下降,CD4+T/CD8+T上升与B组比较有统计学意义(P<0.05),B组在7d时比6h、1d、3d、5d时的CD3+T、CD4+T细胞数量有增加,CD8+T细胞数量有下降,CD4+T/CD8+T有上升,正常对照组无变化。结论:创伤后大鼠T淋巴细胞亚群数值下降,存在细胞免疫抑制现象,但随着伤后时间的迁移,细胞免疫功能有恢复迹象,应用补中益气汤能够明显提高CD4+T细胞数量,CD4+T/CD8+T比值增加,并在一定程度上降低T细胞表面CD8+T的表达。     

补中益气汤的临床应用

补中益气汤是宋金时期名医李东垣先生根据《素问.至真要大论》“劳者温之”、“损者温之”的治疗法则而创制的,载于他所著的《脾胃论》中,为治疗脾阳不振、中气下陷、脏腑虚衰或机体抗病能力低下等一系列虚弱性疾病的有效方剂。以下就方剂的组成、方义与临床运用等谈谈个人体会     

补中益气汤及其拆方的免疫调节作用

补中益气汤及其３个拆方对小鼠ＮＫＣ－ＩＬ－２－ＩＦＮ－γ免疫调节网的影响显示：大黄脾虚模型小鼠免疫调节网水平比正常小鼠明显降低；补中益气汤２０ｇ／ｋｇ、４０ｇ／ｋｇ，对脾虚小鼠低下的ＩＦＮ－γ活性以及补中益气汤４０ｇ／ｋｇ对脾虚小鼠低下的ＮＫ、ＩＬ－２活性皆有提高作用，并恢复至接近正常水平，但对正常小鼠无影响；整方和拆方Ⅰ均能提高脾虚小鼠低下的ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ活性，其中整方提高ＩＦＮ－γ活性的作用明显大于拆方Ⅰ，而拆方Ⅱ、Ⅲ无明显影响。提示提高和调整机体低下的ＮＫＣ－ＩＬ－２－ＩＦＮ－γ免疫调节网水平可能是补中益气汤益气健脾功效的机理之一；从ＩＦＮ－γ活性看来，整方的作用较好，方中起主要作用的是拆方Ⅰ（黄芪、人参、白术、炙甘草），补中益气汤组方有其合理性。     

线粒体裂变因子对OGD/R诱导的PC12细胞线粒体凋亡通路的影响

目的 探究线粒体裂变因子(mitochondrial fission factor, MFF)在氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/re-oxygenation, OGD/R)处理的PC12细胞中的表达及其对线粒体凋亡通路的影响。方法 选用PC12细胞系构建体外缺血性神经元损伤模型。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验明确MFF mRNA和蛋白在不同处理时间点的表达情况。通过RNA干扰技术沉默MFF基因表达,利用qRT-PCR、Western blot检测MFF mRNA和蛋白的表达情况;CCK-8检测沉默MFF对OGD/R处理的PC12细胞活力的影响;JC-1和试剂盒检测线粒体膜电位、腺苷三磷酸(adenosine triphosphate, ATP)和活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平变化;Western blot检测细胞色素C(cytochrome C,Cyt-C)、Bax和Bcl2的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测Caspase-3和Caspase-9...     

帕金森氏病和肌营养不良症（Erb型）中线粒体DNA的部分缺失

用PCR技术对12侧神经肌肉性疾病患者的16个标本进行T线粒体DNA缺失情况的研究。发现2例帕金森氏病患者的肌肉组织以及其中1例的外周血和另1例肌营养不良(Erb型)患者的肌肉组织中线粒体DNA至少有526bp的缺失。还对线粒体DNA的部分缺失与疾病发生的关系进行了讨论。