电针对MCAO模型大鼠海马CA1区P-gp表达的影响

目的:研究电针内关对局灶性脑缺血模型大鼠海马CA1区微血管内皮细胞P-gp表达的影响,探讨针刺治疗脑缺血的机制。方法:采用大脑中动脉栓塞法(MCAO)复制局灶性脑缺血模型,电针内关、地机,应用免疫组化法观察各组大鼠海马CA1区P-gp的表达。结果:MCAO模型大鼠海马CA1区微血管内皮细胞MDR1表达下降,30d时表达与15d相比明显增多,有显著性差异(P<0.05),表现为时间依赖性升高。针刺内关穴后P-gp的表达显著增多,并且针刺天数不同疗效也不同。结论:针刺对MCAO大鼠海马CA1区P-gp的表达有良性调节作用。     

侯氏黑散及其拆方对MCAO大鼠神经病理学的影响

目的:研究侯氏黑散及其拆方对大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠的保护作用,并探讨侯氏黑散组方配伍的意义。方法:线栓法阻断大脑中动脉建立大鼠局灶性脑缺血损伤模型,以Bederson10分制评分标准对实验大鼠作行为评分,采用HE染色对脑缺血损伤部位进行整体观察,计数海马CA1区和CA3区完整的锥体细胞;尼氏体染色结合图像分析技术检测MCAO大鼠海马锥体细胞尼氏体的变化。结果:侯氏黑散全方及其拆方君加臣药、君加臣加佐药可明显改善MCAO大鼠神经功能缺损,减轻海马神经元变性程度,增加海马锥体细胞数;侯氏黑散全方组海马锥体细胞尼氏体的脱失较模型组减少,积分光密度值显著增高。结论:侯氏黑散具有明显保护海马神经细胞的作用,全方组的疗效明显优于拆方组,符合方剂学整体取性原理。     

参附注射液对大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区Caspase-3表达的影响

目的研究参附注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注后海马CA1区半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）表达的影响。方法成年雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、参附注射液治疗组。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）再灌注模型,应用HE染色检测海马CA1区组织病理学改变,免疫组织化学法检测海马CA1区神经细胞Caspase-3的表达。结果缺血组大鼠海马CA1区神经细胞Caspase-3的表达较假手术组显著增强（P〈0.01）,给予参附注射液处理后,Caspase-3的表达较缺血组减弱（P〈0.01）,差异均有统计学意义。结论参附注射液可降低大鼠局灶性脑缺血再灌注后海马CA1区Caspase-3的表达,可能与其脑保护作用有关。     

缝隙连接胞间通讯对大脑中动脉缺血后海马迟发性神经元死亡的影响

目的 观察探讨星型胶质细胞缝隙连接胞间通讯变化对大鼠大脑中动脉缺血再灌流后海马区迟发性神经元死亡(DND)的影响.方法 建立大鼠短暂性大脑中动脉缺血再灌流模型.利用尼氏染色、TUNEL方法 观察再灌流后星型胶质细胞缝隙连接蛋白抑制剂CBX对海马DND的影响.结果 大脑中动脉缺血再灌流后3 d、7 d海马神经元明显脱失,部分CA1、CA2区神经元凋亡;应用CBX后TUNEL阳性神经元数目明显减少,幸存神经元数目增加.结论 星型胶质细胞缝隙连接蛋白抑制剂CBX可有效抑制大鼠大脑中动脉缺血后海马神经元DND.     

丙泊酚预处理对脑缺血再灌注大鼠认知功能及wnt信号通路的影响

目的:研究丙泊酚预处理对脑缺血再灌注大鼠海马CA1区神经元的影响及其机制。方法:采用Longa线栓改良法制作大鼠左大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,阻断左侧大脑中动脉,2 h后拔出线栓造成再灌注损伤。将大鼠分为三组:假手术组(S组):线栓仅进入10 cm后拔出;缺血再灌注组(M组):线栓阻断大脑中动脉后,尾静脉泵注20 mL/h 0.9%氯化钠溶液;丙泊酚组(P组):线栓阻断大脑中动脉后,尾静脉泵注20 mg/(kg·h)丙泊酚。24 h后用Longa E神经症状评分法,选取1～3分大鼠,每组8只进行实验。造模后行水迷宫试验评估认知功能,HE染色观察海马区形态学改变,Western blotting检测wnt3a、wnt5a、β-catenin蛋白表达。结果:与假手术组比较,缺血再灌注组大鼠学习记忆能力显著降低(P<0.01);海马CA1区神经元细胞减少,变性细胞增多;脑组织中wnt3a、wnt5a、β-catenin蛋白表达上调(P<0.05)。与缺血再灌注组比较,丙泊酚预处理后大鼠空间认知和学习能力改善(P<0.05);海马CA1区正常神经元细胞增多,变性、坏死细胞减少;wnt3a、wnt5a、β-catenin蛋白表达明显增强(P<0.01)。结论:丙泊酚预处理脑缺血再灌注大鼠可能通过激活经典和非经典wnt信号通路,减少海马神经元的损伤,改善大鼠空间认知和学习能力。     

三七总皂苷对脑缺血再灌注后海马CA1区损伤的影响

目的 探讨大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区神经元损伤的病理改变及三七总皂苷(PNS)对其的影响。方法 采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉阻断(MCAO)局灶性脑缺血模型，缺血2h，再灌注46h。大鼠随机分为假手术组、缺血再灌模型组、PNSI组和PNSⅡ组。以神经症状缺损记分、海马CA1区组织学分级、海马CA1区神经元密度等作为评价指标。结果 三七总皂苷组神经症状明显减轻或接近正常，其行为评分得分明显低；三七总皂苷组海马CA1区组织学分级降低、神经元密度增加，与模型组问有显著性差异。结论 三七总皂苷能减轻脑缺血再灌注引起的损伤性神经症状及海马CA1区神经元损伤的程度。     

大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3的表达及纳洛酮的影响

目的:探讨Caspase-3在缺血再灌注大鼠海马神经元中的表达及纳洛酮的影响。方法:用插线法制作大鼠大脑中动脉闭塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型,左侧MCAO1h,再灌注23h后处死,对照组给予生理盐水,纳洛酮组给予纳洛酮,海马区Caspase-3的表达通过免疫组化来测定;缺血侧海马区凋亡细胞数采用TUNEL法测定。结果:对照组、纳洛酮组、假手术组缺血侧海马区平均密度值分别为0.130±0.012、0.062±0.004、0.053±0.006。对照组大鼠缺血侧海马区Caspase-3的表达较假手术组显著增强(P<0.01),给予纳洛酮处理后,Caspase-3的表达减弱(P<0.01)。对照组缺血侧海马区许多神经元有凋亡现象,纳洛酮组凋亡神经元减少,假手术组偶见凋亡神经元。结论:短暂的脑缺血可导致海马区Caspase-3的表达增加,凋亡神经元增多。海马区Caspase-3的激活与神经元的凋亡相关,纳洛酮可抑制海马区Caspase-3的表达,减少神经元的凋亡。     

猕猴大脑中动脉缺血后海马CA1区结构改变及胰岛素样生长因子-1的表达

目的:探讨猕猴大脑中动脉阻塞/再灌(MCAO)后海马CA1区胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的表达。方法:采用猕猴MCAO模型,缺血2h,再灌24h,用免疫组化方法检测脑缺血后IGF-1蛋白的表达。结果:MCAO后缺血侧海马CA1区形态结构改变,神经元密度降低,IGF-1蛋白阳性细胞数与假手术组比较明显减少(P<0.05)。结论:MCAO缺血侧海马CA1区结构改变,IGF-1蛋白表达减少,提示海马内IGF-1在脑缺血损伤中可能具有一定的作用。     

复方当归注射液对脑缺血神经保护作用的实验研究

目的:研究复方当归注射液对其对脑缺血的保护作用.方法:建立阻断大鼠大脑中动脉所致局灶性脑缺血、结扎大鼠双侧颈总动脉和花生四烯酸诱发的急性血栓性脑缺血模型的动物模型,测定复方当归注射液的神经保护作用.结果:复方当归注射液可以增加脑缺血大鼠脑海马CA1区神经细胞数量.结论:复方当归注射液可促进脑缺血及脑缺血后遗症神经功能恢复,减轻后遗症的神经功能障碍,对脑缺血具有保护作用.     

钙蛋白酶抑制剂减少大鼠局灶性脑缺血再灌注模型海马CA1区神经元凋亡

目的:研究钙蛋白酶抑制剂calpeptin干预治疗对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型海马CA1区神经元凋亡的影响及其可能机制。方法:选择健康成年雄性SD大鼠128只作为研究动物,采用随机数字表法将其分为MACO组、calpeptin组、DMSO组及sham组,制作大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血2 h后分别再灌注6、12、24 h及48 h后进行神经功能学评分,免疫组化检测海马CA1区神经元caspase-3的表达,TUNEL法检测原位细胞凋亡,观察海马CA1区神经元凋亡。结果:DMSO组的各项检测指标与MACO组比较差异无统计学意义(P>0.05);calpeptin组的神经功能评分及caspase-3表达均低于同时间点MCAO组及DMSO组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);再灌注12、24、48 h后,calpeptin组神经元凋亡情况优于同时间点MCAO组及DMSO组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:calpeptin可减少大鼠局灶性脑缺血再灌注模型海马CA1区的神经元凋亡,对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抑制caspase-3的表达有关。     

细胞外信号调节激酶在局灶性脑缺血中的表达

目的:研究细胞外信号调节激酶(ERK)在局灶性脑缺血再灌注海马神经元中的表达.方法:线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型.大鼠随机分成假手术组(sham组)、脑缺血再灌注组(I/R组),每组根据再灌注时间不同再分为3,6,24,48和72 h亚组,每亚组各6只鼠.在预定时间点进行HE染色观察组织学变化;TUNEL法检测CA1区细胞凋亡的动态变化规律;免疫组织化学方法研究ERK的表达特征.结果:MCAO后海马神经元存活数量较假手术组明显减少;凋亡细胞大量出现,以48 h为高峰;MCAO后3 h,磷酸化ERK在局灶性脑缺血大鼠脑组织中显著升高,6 h达到最高峰,72 h恢复到正常水平.结论:脑缺血再灌注损伤可能导致ERK活性上调,参与缺血后神经细胞凋亡过程.     

地黄饮子对脑缺血后大鼠海马BDNF的影响

目的研究地黄饮子对大鼠持续性脑缺血后海马内脑源性神经营养因子(BDNF)的影响.方法用线栓法建立大鼠脑缺血模型,以免疫组化技术显示地黄饮子在缺血后对海马区BDNF的影响.结果在大鼠脑缺血区有BDNF阳性神经元表达,缺血组和给药组海马区神经元随缺血时间的延长,存活细胞数目均逐渐减少,而给药组存活的神经细胞数目较缺血组多.结论地黄饮子可通过促进BDNF表达,抑制细胞死亡,促进脑缺血后海马神经元的存活和修复.     

高频电疗对大鼠脑缺血再灌注损伤后caspase-3 和 海马神经细胞超微结构的影响

目的：观察高频电疗对大鼠脑缺血再灌注损伤后caspase-3和海马神经细胞超微结构的影响。方法： 线栓法 制备大鼠一侧大脑中动脉缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion and reperfusion,MCAO/R)模型。采用Zea-Longa评 分法评定神经功能缺损程度。将符合条件的大鼠随机分成假手术组、模型组及高频电疗组。1,3,7 d后取标本,电 镜观察海马神经元细胞超微结构,Western印迹检测caspase-3蛋白的表达。结果：电镜示假手术组海马CA1区神经细胞 完整,各细胞器结构、形态正常。模型组海马神经元肿胀、坏死,细胞器碎裂,神经细胞损伤严重。高频电疗后海 马神经元损伤均较模型组减轻。同时间点(3,7 d)高频电疗组caspase-3升高程度较模型组降低 (P<0.05 )。结论：高频 电疗可改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,抑制caspase-3及脑神经细胞凋亡,减轻神经元超微结构损伤,有一定 的脑保护作用。     

MLK3信号通路在癫痫及脑缺血海马CA3区神经元中的不同作用

目的:研究混合性谱系激酶3(MLK3)信号通路对癫痫及脑缺血海马CA3区神经元的作用?方法:采用海人藻酸(KA)或四动脉结扎法分别建立大鼠癫痫及全脑缺血模型,运用免疫印迹技术检测在KA注射后及脑缺血再灌注后不同时间海马CA3区MLK3和c-Jun的N端激酶(JNK)的活化水平;采用焦油紫染色,观察大鼠海马CA3区神经元的损伤?结果:KA刺激6 h,癫痫大鼠海马CA3区MLK3和JNK明显激活,1 d后仍维持在较高水平(P < 0.05);MLK3和JNK的总蛋白表达并无显著改变?脑缺血大鼠海马CA3区,缺血再灌注后各时间点,MLK3和JNK并未出现明显的活化?此外,大鼠致痫后7 d,海马CA3区神经元大量死亡;缺血再灌注后7 d,海马CA3区神经元并未受到明显损伤?结论:MLK3/JNK信号通路参与了癫痫脑损伤海马CA3区神经元的损伤;但并未介导缺血性脑损伤海马CA3区神经元的存活?     

慢性脑缺血对大鼠海马钙通道Cav1.3表达的影响

目的:探讨慢性脑缺血后大鼠海马钙通道Cav1.3蛋白表达的变化.方法:雄性Wistar大鼠36只随机分为假手术组、缺血7d组和缺血14d组.通过阻断左侧椎动脉和双侧颈总动脉的方法制作慢性脑缺血模型.采用尼氏染色法观察海马CA1区神经元形态结构的变化,蛋白质印迹法检测大鼠海马钙通道Cav1.3蛋白的表达情况.结果:与缺血7d组比较,缺血14d组大鼠海马CA1区神经元的病理变化明显加重.随着缺血时间的延长,海马钙通道Cav1.3蛋白的表达明显降低.结论:慢性脑缺血可能通过降低海马钙通道Cav1.3蛋白的表达影响海马神经元的正常功能.     

大鼠脑缺血再灌注后核因子-кB的表达及纳洛酮的影响

目的:探讨核因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)在缺血再灌注大鼠海马神经元中的表达及纳洛酮的影响。方法:用插线法制作大鼠大脑中动脉闭塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型,海马区NF-κBP65亚单位的水平通过免疫组化来测定,苏木精-伊红染色观察缺血侧脑组织形态学变化。结果:缺血再灌注组大鼠缺血侧海马区P65亚单位的表达较假手术组显著增强(P<0.01),给予纳洛酮处理后,P65的表达减弱(P<0.01)。缺血再灌注组缺血侧海马区许多神经元有凋亡现象,缺血再灌注纳洛酮组凋亡神经元减少,假手术组未见凋亡神经元。结论:短暂的脑缺血可导致海马区NF-κB的表达增加,凋亡神经元增多。海马区NF-κB的激活与神经元的凋亡相关,纳洛酮可抑制海马区NF-κB的表达,减少神经元的凋亡。     

雌激素对慢性脑缺血大鼠海马一氧化氮合酶阳性神经元的影响

目的 :观察雌激素对慢性脑缺血后大鼠海马一氧化氮合酶阳性神经元数目的影响。方法 :雌性SD大鼠 15只 ,分为假手术对照组 (A组 ) ,缺血后治疗组 (B组 ) ,缺血后未治疗组 (C组 )。B、C组行双侧卵巢切除术 ,术后次日行双侧颈总动脉结扎并切断。B组大鼠二次术后腹腔注射苯甲酸雌二醇 (1mg/kg/3d) ,C组予等量煮沸后麻油。假手术对照组仅暴露卵巢和双侧颈总动脉 ,术后予等量煮沸过的麻油。 3 0天后灌注固定取脑 ,NADPH -d组织化学染色。结果 :B组大鼠海马CA1一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元数目较A组明显下降 (P <0 .0 5 )。C组大鼠海马CA1区NOS阳性神经元数目也较A组明显下降 (P <0 .0 1) ,与B组相比C组大鼠海马CA1区NOS阳性神经元数目也明显下降 (P <0 .0 5 )。结论 :慢性脑缺血能使大鼠海马内对缺血最敏感区域CA1一氧化氮合酶阳性神经元数目明显下降 ,缺少雌激素的脑保护作用后这种损伤加重     

神经生长因子预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用机制的研究

目的:探讨神经生长因子(NGF)预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的机制.方法:采用四动脉阻断(4VO)法制作大鼠全脑缺血模型.18只大鼠随机分为3组,每组6只.对照组:只分离翼小孔和颈总动脉,未予脑缺血处理;缺血组:未行NGF预处理,只行脑缺血再灌注处理;NGF预处理组:全脑缺血前12 h脑室内注射NGF 20 U,所有大鼠缺血20 min再灌注24 h后取脑组织.采用TUNEL法原位标记DNA片段,观察海马CA1区神经细胞凋亡的变化.结果:NGF预处理组海马CA1区TUNEL阳性神经细胞为(10.83±2.84)细胞/视野,与缺血组(17.69±3.79)细胞/视野比较显著减少(P＜0.05).结论:NGF预处理通过抑制神经细胞凋亡对大鼠全脑缺血再灌注损伤有保护作用.     

猕猴大脑中动脉缺血后海马CA1区结构改变及胰岛素样生长因子-1的表达

目的：探讨猕猴大脑中动脉阻塞／再灌（MCAO）后海马CA1区胰岛素样生长因子-1（IGF-1）的表达。方法：采用猕猴MCAO模型，缺血2h，再灌24h，用免疫组化方法检测脑缺血后IGF-1蛋白的表达。结果：MCAO后缺血侧海马CA1区形态结构改变，神经元密度降低，IGF-1蛋白阳性细胞数与假手术组比较明显减少（P〈0．05）。结论：MCAO缺血侧海马CA1区结构改变，IGF-1蛋白表达减少，提示海马内IGF-1在脑缺血损伤中可能具有一定的作用。     

针刺人中对急性脑缺血大鼠海马rCBF神经元超微结构的影响

研究结果表明,急性不完全性脑缺血大鼠海马出现局部脑血流量(rCBF)的下降,并伴有海马CA1区神经元超微结构损伤。电针人中穴能够增加缺血海马的rCBF,同时也减轻了因缺血造成的神经细胞损伤。提示针刺人中穴具有抗急性缺血性肺损伤的作用,且与其增加了缺血区的rCBF密切相关。