胰岛素对新生大鼠缺氧/复氧心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨胰岛素在新生大鼠缺氧/复氧心肌细胞损伤中对细胞凋亡的影响。方法:通过给原代培养乳鼠心室肌细胞行缺氧2 h/复氧4 h,建立缺氧/复氧(Anoxia/Reoxygenation)心肌细胞损伤模型。将培养心肌细胞随机分为:正常对照组(CON)、缺氧/复氧组(A/R)、缺氧/复氧+胰岛素组(I/R+INS)。于复氧4 h后,利用2,4二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,硫代巴比妥酸显色法检测丙二醛(MDA)含量,原位末端标记法(TINEL)和DNA梯带法(DNA Ladder)检测细胞凋亡,并比较各组间差异。结果:与A/R组相比,A/R+INS可明显降低MDA、LDH值(P<0.01),抑制心肌细胞凋亡(P<0.01)。结论:胰岛素具有减少新生大鼠缺氧/复氧心肌细胞损伤作用,其作用机制与抑制细胞凋亡作用有关。     

HBSP减轻急性缺氧复氧大鼠心肌细胞损伤

目的研究促红细胞生成素衍生肽(HBSP)对急性缺氧/复氧心肌细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法体外培养H9C2乳鼠心肌细胞系,建立缺氧(3 h)/复氧(3 h)模型。实验分为对照组、缺氧/复氧组(A/R)、A/R+HBSP组。测定培养细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)含量;用annexin-V与PI双染法及流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;分离细胞质与线粒体,用Western blot法检测线粒体内和胞浆中的细胞色素C蛋白的表达,用caspase试剂盒检测心肌细胞caspase-9及caspase-3的表达。结果与正常对照组比较,A/R组细胞存活率和线粒体内细胞色素C蛋白水平明显下降(P0.01),而凋亡率、caspase-9、caspase-3活性及胞质内细胞色素C蛋白水平均显著升高(P0.01)。结论HBSP对缺氧复氧乳鼠心肌细胞具有明显的保护作用,其机制可能与抑制线粒体途径介导的细胞凋亡有关。     

缺氧/复氧对培养SD乳大鼠心肌细胞端粒酶逆转录酶的影响

目的了解缺氧／复氧对培养SD乳大鼠心肌细胞端粒酶逆转录酶（TERT）表达的影响。方法采用real—time quantitative PCR与免疫组化方法检测培养SD乳大鼠心肌细胞在对照组，缺氧6h，复氧24、48h，心肌细胞TERT表达的改变。结果与对照组相比，缺氧／复氧可以使培养SD乳大鼠心肌细胞在缺氧6h、复氧24、48h心肌细胞TERT在mRNA与蛋白水平表达明显增强，与对照组相比有统计学意义（P〈0．01）。结论缺氧／复氧可以使培养SD乳大鼠心肌细胞TERT表达明显增强，可能对抗缺氧／复氧造成端粒缩短而诱导的细胞衰老。     

阿魏酸钠预处理保护成年大鼠心肌细胞缺氧复氧的损伤

背景：阿魏酸钠预处理能对心肌细胞产生保护作用并已在大鼠体外心脏和乳鼠心肌细胞水平得以证实,尚缺乏在成年大鼠心肌细胞水平上的研究。 目的：探讨阿魏酸钠预处理对成年大鼠缺氧复氧心肌细胞的保护作用及其K+ATP通道机制。 方法：用Langendorff系统灌流心脏,以胶原酶消化法分离纯化成年大鼠心肌细胞并给予模拟缺氧复氧液以及干预因素阿魏酸钠、K+ATP通道阻断剂格列本脲处理,随机分为6组：正常对照组、缺氧复氧组、缺氧预适应+缺氧复氧组、阿魏酸钠+缺氧复氧组、格列本脲+缺氧预适应+缺氧复氧组、格列本脲+阿魏酸钠+缺氧复氧组。 结果与结论：①心肌细胞存活率：缺氧复氧组与对照组比较,细胞存活率明显降低(P < 0.01);缺氧预适应+缺氧复氧组、阿魏酸钠+缺氧复氧组与缺氧复氧组比较,细胞存活率明显增高(P < 0.01);格列本脲+缺氧预适应+缺氧复氧组、格列本脲+阿魏酸钠+缺氧复氧组与缺氧复氧组相比,差异无显著性意义,但明显高于缺氧预适应+缺氧复氧组(P < 0.01)。②乳酸脱氢酶活性：各组间乳酸脱氢酶活性比较结果与心肌细胞存活率比较结果吻合。③透射电镜观察：缺氧复氧组心肌细胞线粒体明显肿胀,嵴消失或变形,细胞膜结构破坏,有核边聚现象;缺氧预适应+缺氧复氧组、阿魏酸钠+缺氧复氧组心肌细胞超微结构改变轻微,线粒体排列规则、大小均匀,嵴及内外膜清晰完整,核膜完整,较缺氧复氧组损伤明显减轻;格列本脲+缺氧预适应+缺氧复氧组、格列本脲+阿魏酸钠+缺氧复氧组心肌细胞超微结构改变与缺氧复氧组相似。结果可见阿魏酸钠预处理对成年大鼠心肌细胞具有药理性心肌缺血预适应保护作用且该作用可能与K+ATP通道有关。 关键词：阿魏酸钠;成年大鼠;心肌细胞;缺氧复氧;心肌保护 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.11.012     

丙泊酚减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤

目的 探讨丙泊酚(Pro)通过调控JNK/p38 MAPK通路对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响.方法 将细胞分为对照(control)组、缺氧/复氧(A/R)组、缺氧/复氧+Pro低、中、高剂量(A/R+Pro-L、A/R+Pro-M、A/R+Pro-H)组、缺氧/复氧+Pro+p38 MAPK通路抑制剂(A/R+...     

黄芪皂甙对培养心肌细胞缺氧复氧损伤保护作用的电镜观察

目的：了解缺氧复氧对培养新生大鼠心肌细胞超微结构的影响及其黄芪皂甙的保护作用。方法：实验细胞分为三组：对照组（以Ｈａｎｋ液代替培养液培养）、损伤组（以氮饱和无氧无糖Ｈａｎｋ液密闭培养３ｈ后复氧）及保护组（Ｈａｎｋ液中加入２５ｍｇ·Ｌ－１黄芪皂甙，余同损伤组）用电镜观察各组超微结构。结果：电镜下，损伤组心肌细胞的细胞形态、细胞膜、细胞核、线粒体等结构均可发生明显的改变，而黄芪皂甙保护组心肌细胞超微结构的改变则明显较损伤组轻。结论：黄芪皂甙具有减轻实验性缺氧复氧对培养的心肌细胞损伤的作用。     

黄连素对缺氧复氧诱导大鼠心肌细胞内Nrf2/Keap1的影响

目的　探讨黄连素(BR)对大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤后凋亡的影响及其作用机制。 方法　将培养的H9c2心肌细胞随机分为：正常对照组(NC组)、单纯药物组(BR组)、缺氧/复氧组(H/R组)、药物低剂量LBR组(1.5×10-6 mol/L)及高剂量HBR组(1.5×10-4 mol/L)。处理结束后,用MTT比色法检测H9c2心肌细胞的活力,用Hoechst33258染色检测细胞核形态的变化,用Western blot法检测Nrf2, Keap1蛋白的表达。 结果　与NC组比较,单纯BR对H9c2心肌细胞无影响。与H/R组比较,低、高剂量BR组细胞的活力明显上升(65.2±1.6%; 82.3±1.4%) (P<0.01),心肌细胞的凋亡率明显减少(P<0.05),Western blot的结果显示,BR可明显促进抗氧化相关蛋白Nrf2表达,抑制Keap1的表达。 结论　 BR对H9c2心肌细胞H/R损伤后的凋亡具有显著的抑制作用,可能与其促进抗氧化核转录因子Nrf2表达有关。     

腺苷对大鼠缺氧/复氧星形胶质细胞的保护作用

目的:明确在正常状态和缺氧状态,不规则趋化因子(FKN)对脑细胞是否有损害作用;腺苷是否可以抑制FKN的作用。方法:原代培养大鼠星形胶质细胞,分为正常组、模型组和腺苷组。模型组细胞接受8 h缺氧/24h复氧处理;腺苷组细胞在缺氧前24 h加入150μmol/L腺苷后再进行8 h缺氧/24 h复氧处理。采用ELISA法检测各组FKN的相对表达量,MTT法检测各组细胞存活率。结果:与正常组相比,星形胶质细胞在缺氧/复氧后,细胞明显肿胀坏死,有大量的FKN释放。与模型组相比,腺苷组可明显降低缺氧/复氧损伤时FKN的释放,且细胞水肿坏死较轻;正常组、模型组、腺苷组在缺氧8 h/复氧24 h后细胞活力(OD值)分别是0.759、0.119和0.504。结论:腺苷预处理可使缺氧/复氧后星形胶质细胞FKN的释放减少,从而起到神经保护作用。     

山姜素对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的保护作用机制北大核心CSCD

目的:探讨山姜素对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的保护作用机制。方法:H/R诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞损伤模型,不同浓度山姜素处理H9C2细胞,pcDNA、pcDNA-circPRKCI转染H9C2细胞24 h后再进行H/R处理;si-NC、si-circPRKCI分别转染H9C2细胞24 h后置于山姜素培养液中继续培养24 h,再进行H/R处理;试剂盒检测LDH、MDA、SOD水平;ELISA检测MPO、IL-1β、TNF-α水平;MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡率;化学发光法检测ATP含量;qRTPCR检测circPRKCI、miR-29b-3p表达;双荧光素酶报告基因实验检测circPRKCI与miR-29b-3p的靶向关系;Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:山姜素可降低H/R诱导的H9C2细胞LDH、MDA、MPO、IL-1β、TNF-α水平、凋亡率和Bax蛋白水平(P<0.05),而增强SOD活性和提高细胞存活率、ATP含量及Bcl-2蛋白水平(P<0.05),提高circPRKCI表达(P<0.05),降低miR-29b-3p表达(P<0.05),且呈剂量依赖性。H/R诱导的H9C2细胞转染pcDNA-circPRKCI后,LDH、MDA、MPO、IL-1β、TNF-α水平、凋亡率和Bax蛋白水平降低(P<0.05),SOD活性、Bcl-2蛋白水平、细胞存活率和ATP含量升高(P<0.05);circPRKCI可靶向调控miR-29b-3p表达;干扰circPRKCI表达部分逆转山姜素对H/R诱导的H9C2细胞氧化应激、炎症反应、增殖、凋亡及ATP含量的作用。结论:山姜素可通过调控circPRKCI/miR-29b-3p轴抑制细胞氧化应激、炎症反应、凋亡及促进细胞增殖进而减轻H/R诱导的心肌细胞损伤。     

ROS/PKC/p38 MAPK途径在山茱萸多糖抑制心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用

 目的:观察山茱萸多糖（polysaccharide from Fructus corni,PFC）对缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）损伤心肌细胞的保护作用,并探讨其对ROS/PKC/p38 MAPK途径的影响。方法: 分离原代乳鼠心肌细胞,建立H/R模型,细胞分为7组：正常对照组（N组）、缺氧/复氧组(H/R组)、缺氧/复氧+PFC（终浓度20 mg/L、100 mg/L和200 mg/L）预处理组、缺氧/复氧+PFC（100 mg/L）预处理+蛋白激酶C特异性阻断剂chelerythrine（1 μmol/L）组及缺氧/复氧+PFC（100 mg/L）预处理+p38 MAPK特异性阻断剂SB203580（10 μmol/L）组。倒置显微镜下观察细胞形态和自发搏动频率,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡率,酶标仪测定ROS含量、SOD活性及LDH漏出量,免疫印迹法检测PKC、p-p38 MAPK和HSP70的蛋白水平。结果: H/R组细胞活力下降,搏动频率减慢,细胞ROS含量、LDH漏出量、细胞凋亡率及p-p38 MAPK的水平均较N组显著增加（P<0.01）。经PFC预处理后,细胞搏动频率、SOD活性及PKC、HSP70的水平较H/R 组显著增加（P<0.05,）,p-p38 MAPK的水平和细胞凋亡率均减少（P<0.05）,而PFC的保护作用能被chelerythrine或SB203580抑制。结论: 山茱萸多糖可抑制心肌细胞缺氧/复氧损伤,其作用可能与增加SOD活性、抑制ROS产生、激活PKC并抑制p38MAPK的过度激活有关。     

西洋参茎叶总皂苷通过抑制过度内质网应激减轻大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的: 观察西洋参茎叶总皂苷 (PQS) 对缺氧/复氧 (H/R) 心肌细胞的保护作用,并从内质网应激 (ERS)的角度探讨其分子机制。方法: 建立心肌细胞缺氧/复氧 (H/R) 损伤模型,以台盼蓝染色法、乳酸脱氢酶活性以及流式细胞术检测细胞损伤及凋亡情况;以RT-PCR和Western blotting方法,检测ERS标志分子葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、钙网蛋白 (CRT)、C/EBP同源蛋白 (CHOP)、caspase-12及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果: 和H/R组心肌细胞相比,PQS+H/R组:(1) 细胞凋亡率降低4.19% (P<0.05),存活率升高21.2% (P<0.05),LDH活性降低66.58% (P<0.05);(2) Bcl-2 mRNA和蛋白表达分别升高30.9%和48.0% (P<0.05),Bax mRNA和蛋白表达分别降低39.7%和48.4% (P<0.05);(3) GRP78 mRNA和蛋白表达分别降低61.6%和37.7% (P<0.05),CRT mRNA和蛋白表达分别降低35.7%和52.2% (P<0.05); CHOP mRNA和蛋白表达分别降低57.0%和51.7% (P<0.05);剪切后的caspase-12蛋白表达降低34.9% (P<0.05)。结论: PQS可减轻H/R诱导的心肌细胞损伤,其机制是降低H/R诱导的GRP78、CRT mRNA和蛋白表达,抑制CHOP、caspase-12等内质网凋亡通路激活,从而抑制过度ERS介导的细胞凋亡。     

甘氨酸脂质体的制备及其对心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响

目的： 将甘氨酸(Gly)包封于脂质体内，制备甘氨酸脂质体(glycine liposomes)微粒；观察甘氨酸脂质体对培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的拮抗作用。 方法： （1）采用逆相蒸发法制备Gly脂质体微粒，观察乙醚、氯仿、乙醚＋氯仿3种不同有机溶媒对包封率的影响；透射电镜观察Gly脂质体形态、粒径。（2）建立培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型，实验结束前测定各组培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）含量。 结果： （1）用乙醚＋氯仿混合溶媒制备的Gly脂质体包封率最高，达到64.8％（P<0.01）；（2）Gly、Gly脂质体与空白脂质体均能抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞LDH、CK、CK-MB释放。其中，Gly脂质体组抑制作用最为明显（P<0.05，P<0.01）。 结论： 用乙醚＋氯仿混合溶媒制备Gly脂质体能获得较高的包封率；Gly脂质体能对培养乳鼠缺氧/复氧心肌细胞发挥保护作用，其作用机制可能与脂质体携载Gly进入细胞作用于胞内细胞器有关。     

京尼平对缺氧/复氧损伤后大鼠心肌细胞凋亡及自噬的影响

目的 探讨京尼平对缺氧/复氧(H/R)损伤后大鼠心肌细胞凋亡及自噬的影响。方法 建立H/R损伤模型,体外培养的大鼠H9c2心肌细胞行缺氧12 h、复氧4 h。实验分为对照组（Con）、京尼平组(GE)、缺氧/复氧组(H/R)、缺氧/复氧+京尼平组(H/R+GE)。细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡,透射电子显微镜观察自噬体,Western blotting检测Bax、Bcl-2、P62、Beclin1、LC3-Ⅱ、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和p-mTOR蛋白的表达。结果 京尼平预处理增强了H/R损伤后的H9c2心肌细胞活力,抑制细胞凋亡及自噬体累积,降低自噬结构断面积与细胞质断面积的比值。Western blotting结果显示,京尼平预处理减少了H/R损伤后Bax、LC3-Ⅱ和Beclin1蛋白表达,增加Bcl-2、P62、p-Akt和p-mTOR蛋白表达。结论 京尼平可以抑制H/R损伤后心肌细胞凋亡及自噬,其机制可能与上调Akt/mTOR信号通路有关。     

抗衰老Klotho蛋白减轻大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的:观察抗衰老Klotho蛋白对大鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的作用并探讨其作用机制。方法:建立大鼠乳鼠心肌细胞H/R模型,并将心肌细胞分为正常对照组、H/R模型组和不同浓度(0.1μmol/L、1μmol/L和10μmol/L)Klotho作用H/R组。观察各组心肌细胞H/R前后搏动频率变化,利用MTT方法检测细胞存活率;测定各组心肌细胞H/R后LDH、CK、AST的漏出量及MDA含量、SOD活性;流式细胞术检测各组心肌细胞的凋亡率;real-time PCR检测各组心肌细胞中内质网应激标记及凋亡相关分子GRP78、CRT和CHOP和caspase-12 mRNA的表达情况;Western blot法检测心肌细胞内内质网应激凋亡蛋白CHOP和caspase-12蛋白表达及Akt磷酸化水平。结果:与正常对照组相比,H/R模型组中心肌细胞搏动频率和细胞存活率显著下降,细胞凋亡率显著升高(P0.05);LDH、CK、AST和MDA含量升高而SOD活性显著降低(P0.05);GRP78、CRT、CHOP和caspase-12 mRNA表达显著增高(P0.05);CHOP和caspase-12蛋白表达随之增高而Akt的磷酸化水平显著降低(P0.05)。与H/R模型组相比,抗衰老Klotho蛋白作用H/R心肌细胞后,心肌细胞搏动频率和细胞存活率显著升高,细胞凋亡率逐渐降低(P0.05),LDH、CK、AST和MDA含量下降而SOD活性显著增高(P0.05),GRP78、CRT、CHOP和caspase-12 mRNA的表达逐渐降低(P0.05),CHOP和caspase-12蛋白表达也随之降低,而Akt磷酸化水平显著增加(P0.05)。结论:抗衰老Klotho蛋白能够提升H/R损伤后心肌细胞的存活率,抑制细胞凋亡,通过抵抗氧化应激和过度内质网应激反应发挥作用,并与激活Akt磷酸化有关。     

miR-25对缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡的作用

目的:探讨微小RNA-25(miR-25)在缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡过程中的作用及机制。方法:构建miR-25高表达H9c2细胞系,行缺氧/复氧损伤处理,real-time PCR检测miR-25及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA的表达,Western blot检测HMGB1及细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和cleaved caspase-3的蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的变化,明确miR-25的高表达对缺氧/复氧所诱导的H9c2细胞凋亡及HMGB1表达的影响。然后通过双萤光素酶报告基因验证miR-25与HMGB1的靶向关系,并构建转染HMGB1 shRNA的H9c2稳定细胞系,行缺氧/复氧损伤处理,验证HMGB1是否参与缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡的调控。结果:与对照组相比,高表达miR-25组的H9c2细胞在缺氧/复氧诱导后HMGB1表达下调,Bcl-2表达上调,cleaved caspase-3蛋白水平下调,流式细胞术提示处于S期的细胞增多,G1期减少(P0.01)。双萤光素报告基因显示,转染miR-25 mimic+野生型HMGB1-3’UTR报告基因载体组萤光素酶活性明显下降;转染miR-25 inhibitor+野生型HMGB1-3’UTR和转染miR-25 mimic+突变型HMGB1-3’UTR报告基因载体组萤光素酶活性没有变化。转染HMGB1-shRNA的H9c2细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调,凋亡蛋白cleaved caspase-3蛋白水平下调,流式细胞术分析提示细胞凋亡减少,处于S期的细胞增多,G1期减少(P0.05)。结论:miR-25减少缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡,期作用机制可能与靶向调控HMGB1表达有关。     

T-cadherin在脂联素抑制缺氧/复氧导致的乳鼠心肌细胞凋亡中的作用*

 目的： 通过腺病毒介导的RNA干扰技术沉默一种新的脂联素（APN）受体T-cadherin的表达,并建立心肌细胞缺氧/复氧(H/R)模型, 观察T-cadherin对H/R所致心肌细胞凋亡的影响。方法： 选用原代培养72 h的心肌细胞进行实验,随机分为5组:（1）空白对照组:心肌细胞正常培养;（2）H/R组;（3）APN+H/R组;（4）Ad-T-cadherin-siRNA+APN+H/R组;（5）Ad-HK（腺病毒阴性对照)+APN+H/R组。首先,确定最适合的腺病毒感染滴度,RT-PCR和Western blotting检测腺病毒介导的干扰RNA对T-cadherin表达的影响效果;其次,通过流式细胞术和TUNEL检测心肌细胞的凋亡。结果： 原代培养获得高纯度的乳鼠心肌细胞。腺病毒感染的最佳MOI值为100,48 h后腺病毒的感染效率和红色荧光蛋白表达最强,其效率高于90%。RT-PCR和Western blotting证实腺病毒介导的siRNA转染的心肌细胞T-cadherin mRNA和蛋白水平均明显下降(P<0.05)。Ad-T-cadherin-siRNA+APN+H/R组心肌细胞凋亡率与APN+H/R组相比显著升高(P<0.05),与H/R组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论： 重组腺病毒Ad-T-cadherin-siRNA能够在体外高效感染原代心肌细胞,并成功降低T-cadherin在心肌细胞的表达;低表达的T-cadherin阻断了脂联素对缺氧/复氧诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用。     

辛伐他汀对大鼠肾缺血再灌注损伤后心肌Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的:观察辛伐他汀对肾缺血再灌注损伤后心肌组织的影响及其机制。方法:随机将36只大鼠分为假手术组、肾缺血再灌注组和辛伐他汀组,每组12只。后2组用夹闭双侧肾动脉的方法复制肾缺血再灌注损伤模型;辛伐他汀组在造模前给予辛伐他汀(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,持续2周。用生化检查检测血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、心肌组织丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,并用Western blot法检测Bcl-2和Bax的表达水平。结果:与假手术组比,缺血再灌注组SCr、BUN和心肌MDA含量均升高(P0.05),心肌LDH和CK活性增强(P0.05),心肌SOD活性明显下降(P0.05);与缺血再灌注组比较,辛伐他汀组SCr、BUN和心肌MDA的含量降低(P0.05),心肌LDH和CK活性明显减弱(P0.05),而心肌SOD活性增强(P0.05)。与假手术组比较,心肌Bcl-2与Bax的蛋白表达水平在肾缺血再灌注组增多(P0.05);与缺血组相比,Bax表达在辛伐他汀组明显降低,而Bcl-2表达增加(P0.05)。结论:辛伐他汀对肾缺血再灌注后的心肌有保护作用,保护机制可能与辛伐他汀可以消除自由基、升高Bcl-2蛋白表达和降低Bax蛋白表达有一定关系。     

TIR/BB-loop mimetic AS-1 protects vascular endothelial cells from injury induced by hypoxia/reoxygenation

Morphological and functional abnormalities of vascular endothelial cells (VECs) are risk factors of ischemia-reperfusion in skin flaps. Signaling pathway mediated by interleukin-1 receptor (IL-1R) is essential to hypoxia/reoxygenation (H/R) injury of VECs. While the TIR/BB-loop mimetic (AS-1) disrupts the interaction between IL-1R and myeloid differentiation primary-response protein 88 (MyD88), its role in the VECs dysfunction under H/R is unclear. In this study, we first showed that there was an infiltration of inflammatory cells and the apoptosis of VECs by using a skin flap section from patients who received flap transplantation. We then showed that the H/R treatment induced apoptosis and loss of cell migration of endothelial cell line H926 were attenuated by AS-1. Furthermore, our data suggested that AS-1 inhibits the interaction between IL-1R and MyD88, and subsequent phosphorylation of IκB and p38 pathway, as well as the nuclear localization of NF-KB subunit p65/p50. Thus, this study indicated that the protective role of AS-1 in H/R induced cellular injury may be due to the AS-1 mediated down-regulation of IL-1R signaling pathway.     

程序化细胞死亡因子5对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和自噬的影响及机制

目的:探讨程序化细胞死亡因子5(PDCD5)对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡和自噬的影响及其作用机制。方法:以H9c2心肌细胞系为研究对象,建立H/R损伤模型,采用RNA干扰方法抑制PDCD5的表达,MTT法检测心肌细胞的存活率,TUNEL显色法检测细胞凋亡率,RT-qPCR和Western blot法分别检测mRNA和蛋白的表达水平。结果:H/R损伤的H9c2心肌细胞中,PDCD5表达水平升高,同时细胞的存活率降低,细胞凋亡率和自噬水平增加,而PDCD5沉默能够增加细胞存活率,同时减少细胞凋亡率,促进Bax表达且抑制抑Bcl-2、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及自噬相关蛋白beclin-1的表达。此外,沉默PDCD5可通过降低p-P65的蛋白水平抑制NF-κB通路。结论:沉默PDCD5通过阻断NF-κB信号通路而抑制H/R损伤诱导的心肌细胞凋亡和自噬,从而保护心肌细胞。