小鼠肾发育中层黏连蛋白表达的实验研究

目的观察层黏连蛋白（LN）在小鼠肾发育过程中的表达规律及层黏连蛋白与细胞极性的关系。方法用免疫组织化学链霉菌素亲和生物素一过氧化物酶连接法测定不同胚龄和日龄小鼠肾层黏连蛋白的表达。结果层黏连蛋白在肾组织中的表达随着胚龄增大和肾成熟程度而增加。在生后肾组织中的单个细胞、多个细胞无腔形成和多个细胞有腔形成时均有表达。在肾发育过程中层黏连蛋白表达于输尿管芽周围、肾小体基膜、肾小管基膜、肾小囊基膜和肾间质,且肾小管基膜着色早于肾小体基膜。结论在肾发生和成熟过程中,层黏连蛋白参与细胞极性的形成,层黏连蛋白的分布具有一定的时空顺序,对基膜的发生、成熟起重要作用。     

乙酰肝素酶、层黏连蛋白及其受体的表达以及在卵巢癌转移中的作用

目的 :探讨乙酰肝素酶mRNA(acetyl heparanasemRNA)、层黏连蛋白 (laminin ,LN)及其受体 (lamininrecepter,LR) ,在 5 0例卵巢癌、33例淋巴结转移卵巢癌及 10例浆液性囊腺瘤中的表达 ,及其在卵巢癌转移中的作用。方法 :应用原位杂交和免疫组化染色方法 ,检测乙酰肝素酶mRNA转录水平及LN和LR的蛋白的表达及定位。结果 :乙酰肝素酶mRNA在卵巢癌病灶及转移淋巴结中的转录水平明显增强 ,原发灶与转移灶之间的表达差异显著 (P <0 .0 5 ) ,恶性肿瘤与良性肿瘤之间表达的差异更为明显 (P <0 .0 1)。LN在癌组织及转移淋巴结中的表达少 ;而LR的表达却明显增强。乙酰肝素酶mRNA与LN表达呈负相关 ,与LR的表达呈正相关。结论 :乙酰肝素酶mRNA的表达与LN和LR的表达之间分别呈正、负相关性 ,提示乙酰肝素酶是参与肿瘤的生长、侵袭和转移的方式之一     

67 ku层黏连蛋白受体与肿瘤侵袭和转移

层黏连蛋白是细胞外基质重要的成分之一。67 ku层黏连蛋白受体(67 ku laminin receptor,67 LR)是层黏连蛋白的一个非整合素受体。它是一种多功能蛋白,既参与核糖体的组装、成熟过程,又参与细胞的信号转导,还可作为多种病毒的细胞膜受体。可以和层黏连蛋白相互作用,调节肿瘤的增殖、黏附、微血管形成,加速细胞外基质的降解,促进肿瘤的侵袭转移,其作用机制可能与MAPK信号通路有关。67 LR在多种肿瘤中高表达,还可以作为肿瘤免疫治疗的靶标。     

层黏连蛋白和Ⅳ型胶原在小鼠肾发育中的表达

目的:观察层黏连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(CoⅣ)在小鼠肾发育中的时空性表达,探讨其与肾发育的关系.方法:采用免疫组织化学结合免疫印迹,检测不同胚龄及生后日龄小鼠肾组织LN和CoⅣ的表达及其含量变化.结果:LN在输尿管芽、各期肾小体、肾小管及集合管的基底膜处均有表达,并随肾的发育其表达量逐渐增加;CoⅣ在胚龄12 d时,在输尿管芽周围没有表达,以后,在各期肾小体、肾小管和集合管的基底膜处均有表达,随肾的发育其表达量逐渐增加.结论:推测LN和CoⅣ可能对小鼠肾发育以及成熟肾各结构的维持起重要作用.     

肉苁蓉对小鼠睾丸和附睾形态学及组织化学的影响

目的　观察肉苁蓉对小鼠睾丸和附睾的形态学及组织化学的影响。方法　选昆明系雄性小鼠 30只 ,随机分为用药Ⅰ、Ⅱ组与对照组。用肉苁蓉水煎液 (4g·kg-1·d-1和 8g·kg-1·d-1)灌胃 ,对照组用生理盐水灌胃 ,三周后处死小鼠 ,测定精液中精子数量、活率、运行速度等形态学指标 ,以及精浆中果糖含量。组织化学观察睾丸和附睾琥珀酸脱氢酶和非特异性脂酶反应。结果　给药组上述指标均高于对照组。结论　提示肉苁蓉确有壮阳补肾之功效。     

67ku层黏连蛋白受体促进肝癌细胞MMP-2和MMP-9的表达

目的研究分析67ku层黏连蛋白受体(laminin receptor,67LR)与肝癌细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及其组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)表达的关系,探讨67LR促进肝癌细胞体外侵袭能力的分子机制。方法以67LR转染HepG2的稳定细胞株及其对照细胞为材料,采用半定量RT-PCR分析目前已知的23种MMPs和4种TIMPs的表达及变化情况,对表达有变化的基因采用荧光定量PCR进行验证,采用明胶酶谱分析MMP活性的变化。结果半定量RT-PCR和荧光定量PCR发现,67LR高表达的LR4细胞,其MMP2,9的表达比67LR低表达的LR6及对照组pcD-NA-1细胞明显升高,明胶酶谱分析也揭示,LR4细胞分泌的MMP-2和MMP-9的活性明显上升。结论67LR可以促进肝癌细胞MMP-2和MMP-9的表达和分泌,从而促进肝癌细胞体外侵袭能力。     

层黏连蛋白受体1单克隆抗体抑制博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化

目的 研究层黏连蛋白受体1(LAMRl)单克隆抗体(mAb)干预博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化.方法 雄性SD大鼠72只,随机分为LAMRl mAb组(L)、对照组(C)和模型组(M)3组,气管内滴入博莱霉素(5 mg/kg体质量)制备肺纤维化模型.3组分别给予LAMRl mAb、地塞米松、生理盐水3次/周,腹腔注射,于第7、14、28天处死8只大鼠.HE染色观察肺纤维化程度;免疫组化方法检测肺组织中表面活性物质A(SP-A)的含量;ELISA测定血清中羟脯氨酸(Hyp)的含量;PCR方法检测肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及转化生长因子β1(TGF-β1) mRNA的含量.结果 各时间段,M组肺纤维化程度及Hyp含量均高于C组和L组,SP-A的含量均低于其余两组,M组肺组织的MMP-9和TGF-β1的mRNA的含量明显高于其余两组.结论 LAMRl mAb可明显减轻博莱霉素诱导的肺纤维化程度.     

大鼠睾丸和附睾中钙调素免疫组织化学定位的研究

用免疫组织化学ＡＢＣ法，观察了钙调素在大鼠睾丸和附睾的定位与分布。结果表明，钙调素免疫反应产物分布在精母细胞，精子细胞和精子中，而精原细胞，Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞和Ｌｅｙｄｉｇ细胞呈阴性反应。钙调素免疫反应既见于胞质中，也见于胞核中。相邻曲细精管钙调素免疫反庆强度呈明显的不均一性。不同发生阶段的生精细胞间免疫反应强度也存在差异。大附睾，钙调素免疫反应见于附睾管尾段主细胞顶端胞质内，偶见于主细胞的基底部     

检测层黏连蛋白双mAb夹心ELISA的建立

慢性肝病通常发展为肝纤维化，常规实验室检查对肝纤维化的诊断几乎毫无参考价值。肝组织活检对肝纤维化诊断是金标准，但因其具有创伤性，很难作为临床常规检查和动态观察。最近十几年来许多研究者致力于慢性肝病的血清学研究，希望能找到良好的无创伤性血清学指标来替代肝组织活检。血清层黏连蛋白(laminin，LN)的水平与肝纤维化的程度密切相关，并可作为肝纤维化早期诊断指标之一。     

锌缺乏导致小鼠睾丸游离锌离子和附睾精子数量减少

目的研究锌缺乏对小鼠睾丸游离锌离子和附睾精子数量的影响。方法锌缺乏饲养小鼠5周后,应用ZnSe金属自显影技术对小鼠睾丸和附睾进行染色,观察睾丸和附睾锌离子的分布,同时计数附睾精子数量,并与对照组小鼠的精子数量做对比。结果缺锌喂养后的小鼠睾丸游离锌离子明显减少,并且睾丸生精小管管腔狭小,生殖细胞层厚度增加,此外,附睾精子数量也明显低于对照组。结论睾丸和附睾内游离锌离子减少是锌缺乏小鼠精子数量下降的原因,本结果有助于改善男性生殖健康的状况。     

己烯雌酚对幼年香猪睾丸与附睾雌激素受体和一氧化氮合酶表达和分布的影响

目的 探讨己烯雌酚（DES）对幼年香猪睾丸和附睾中雌激素受体（ERs）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响,及DES对诱导雄性动物生精异常的作用机制。 方法 将20只20～25日龄幼年雄性香猪分成４组,对照组只注射生理盐水,实验组经腹腔每天注射DES(实验1组：0.03mg/kg;实验2组：0.3mg/kg;实验3组：3mg/kg),连续注射9d。最后１次注射24h后手术取出左侧睾丸和附睾组织经中性多聚甲醛固定,石蜡包埋,常规制备5μm石蜡切片,采用免疫组织化学SP法检测睾丸和附睾组织中ERα、ERβ和eNOS的表达。 结果 ERα只在输出小管上皮细胞胞核中表达;ERβ在输出小管上皮细胞、间质细胞及附睾管上皮细胞胞核中均有表达,在睾丸生精小管细胞胞质中也有少量表达。DES能够使ERα在输出小管中的表达率显著下降（P<0.05）。随着DES用量的增多,ERβ在输出小管和附睾管中的表达率显著升高（P<0.05）,当DES用量为3mg/kg时ERβ在输出小管和附睾管中的表达率明显高于用量0.03mg/kg和0.3mg/kg（P<0.05）。但0.03mg/kg用量的DES却使睾丸生精小管中ERβ的表达率显著性下降（P<0.05）,并在0.3mg/kg和3mg/kg用量时在睾丸生精小管中未能检测到ERβ受体的表达。eNOS在睾丸生精小管细胞和输出小管上皮细胞中都有表达,DES能促进eNOS在睾丸生精小管细胞中表达（P<0.05）而降低其在输出小管细胞中表达（P<0.05）。结论 DES明显影响ERs和eNOS在睾丸和附睾中的表达。     

Immunohistochemical localization of galectin-3 in boar testis and epididymis

The presence and distribution of galectin-3, a β-galactoside-binding protein, in boar testis and epididymis was studied. Western blot analysis detected galectin-3 in boar testis and epididymis. In particular, intense galectin-3 immunoreaction was seen in the tail of the epididymis, while it was moderate in the head and body. Galectin-3 immunolabelling was detected in the connective tissues of the testis. In the testis, galectin-3 was detected in some cells (presumably peritubular myoid cells), but not in Leydig cells or the cells of the seminiferous tubules. In the epididymis, the galectin-3 immunoreactivity in the connective tissues was the same as in the testis. Intense galectin-3 immunolabelling was seen in the covering epithelium of the epididymis tail, but in very few cells in the head and body. We postulate that galectin-3, immunodetected here in the connective tissues in the male reproductive organs, serves as an extracellular matrix. Furthermore, we postulate that intracellular galectin-3 in the epithelium of the epididymis tail plays a role in either the maintenance of the epithelium or as a source of galectin-3 in the seminal fluid; here it may play a role in sperm activation in the boar reproductive system.     

Synthesis and expression of laminin during human foetal lung development

Backgrounds: The lung develops by epithelial tubes budding and branching into a flexible mesenchyme. This growth is associated with the remodelling of the epithelial basement membrane, of which laminin is a major component. Methods: Both the synthesis and expression of laminin were studied in the human lung between 10 and 31 weeks of gestation, using in sity hybridization and immunohistochemistry. Results: The synthesis of the β chain was active in the epithelial and surrounding mesenchymal cells. The mRNAs coding for the γ chain were less abundant and mainly found in the epithelium. The synthesis of these two chains continued throughout gestation, and no significant difference in the density of hybridization grains could be detected between the tips of the expanding buds and the proximal portions. Immunohistochemical localization of laminin showed important modifications of the basement membrane during gestation. In the first part of the pseudoglandular stage the epithelial basement membrane stained continuously for laminin. Later, the basement membrane was labelled in a graded fashion: at the apex of the growing buds the staining became weak with focal disruptions. Both epithelial and mesenchymal synthesis of laminin remained active, while the polypeptide was undetectable using immunohistochemistry. Conclusions: These findings suggest that the remodelling of the basement membrane during human lung morphogenesis is probably not related to a decreasing synthesis of laminin, but to either a proteolytic degradation or the assembly of an inadequate complex undetectable with the polyclonal antibody antilaminin. © 1995 Wiley-Liss, Inc.     

环磷酰胺对大鼠睾丸和附睾的影响

目的探讨抗肿瘤药物所致大鼠睾丸和附睾损害,为寻找男性不育症中药治疗的研究提供理论依据。方法选用16只15周龄SD大鼠随机分为对照组和实验组,每组8只;实验组腹腔注射环磷酰胺20mg·kg-1·d-1,连续5d,用药2个月后,应用HE染色法研究大鼠睾丸、附睾远期组织学变化,用原位缺口末端标记法(TUNEL方法)检测生精细胞凋亡。结果实验组大鼠体重、睾丸和附睾重量均显著减轻(P<0.01),睾丸生精小管直径缩小、间距增宽、生精上皮变薄、生精细胞层次和数量减少、生精小管腔多未见精子形成,实验组睾丸生精小管直径、面积、生精上皮细胞数、均显著低于对照组(P<0.01);实验组生精细胞凋亡增多,与对照组比较,生精细胞显著凋亡(P<0.01);附睾管管腔内腔内精子稀少,含有大量脱落细胞,管壁变薄。结论环磷酰胺对大鼠睾丸、附睾远期损害明显,促进生精细胞凋亡。     

Pathology of testis and epididymis in native goats in southern Iran

A slaughterhouse-based survey was conducted to determine the type and the prevalence of lesions in the testis and epididymis of native bucks reared in southern Iran. Testis, epididymis, and tunica, which belonged to 425 bucks of various age groups, were inspected. The specimens were collected randomly during a 6-month period. Various abnormalities in testis and the epididymis were observed. Grossly, testicular mineralization was the most prevalent abnormality (n = 183, 45%) followed by degeneration or hypoplasia (n = 26, 6.4%), adhesion (n = 20, 4.9%), cryptorchidism (n = 12, 2.9%), congenital testicular cyst (n = 9, 2.2%), abscess (n = 4, 0.9%), and orchitis (n = 1, 0.2%). As the age of the bucks increased, the percentages of mineralization increased significantly (p < 0.05). Based on the results of the gross examination, congenital epididymal cysts were the most prevalent abnormality (n = 57, 14.4%) then followed by epididymal abscess (n = 12, 2.9%), melanosis (n = 10, 2.5%), and epididymitis (n = 3, 0.7%). Congenital epididymal cysts, 1 to 2 mm in diameter, were mostly located on the head of the epididymis. On histopathological examination, mineralization showed the highest prevalence rate in testis followed by hypoplasia and degeneration, besnoitiosis, orchitis, and edema. Besnoitiosis was also the predominant lesion in the head and tail of the epididymis followed by epididymitis, hypoplasia or degeneration, melanosis, and sperm granuloma. Besnoitia cysts were found in 11.3% of the testes, 14.1% of the epididymal heads, and 7.5% of the epididymal tails.     

The role of the epididymis in descensus testis and the topographical relationship between the testis and epididymis from the sixth month of pregnancy until immediately after birth

Summary The position of the testis, the relationship between the epididymis and the testis, as well as the development and regression of the gubernaculum were investigated in 18 testicles of children from the 26th week of pregnancy until a few weeks after birth. The most important role in descensus testiculorum is ascribed to the differentiation of the epididymis and the ductus deferens. It is androgen dependent. The testis descends in the processus vaginalis, being attached to its dorsal wall.     

SEL1L基因在食管癌中的表达及意义

目的探讨SEL1L（human Sel-1-like）mRNA及其蛋白在食管癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测90例手术切除的食管鳞状细胞癌、35例距癌灶边缘5am以上切缘的正常黏膜、60例癌旁黏膜及20例内窥镜活检的食管鳞状上皮不典型增生组织中SEL1L蛋白的表达;运用原位分子杂交技术检测上述癌组织、正常黏膜、癌旁黏膜中SEL1L mRNA的表达。结果（1）SEL1L mRNA在食管鳞状细胞癌的表达率为80．0％（72／90）,较正常黏膜的14．3％（5／35）和癌旁黏膜的16．7％（10／60）高（P〈0．01）;SEL1L mRNA在有淋巴结转移组的表达阳性率为92．7％（38／41）比无淋巴结转移组69．4％（34／49）高（P〈0．01）。（2）SEL1L蛋白在鳞状细胞癌的表达阳性率为87．8％（79／90）,在鳞状上皮不典型增生中的表达阳性率为90．0％（18／20）。分别较正常黏膜的14．3％（5／35）和癌旁黏膜的13．3％（8／60）高（P〈0．01）。SEL1L蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤位置、大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期均无明显相关性（P〉0．05）。（3）食管鳞状细胞癌组织中SEL1L mRNA和SEL1L蛋白的表达呈明显正相关（r=0．492,P〈0．01）。结论（1）SEL1L蛋白表达的调控主要在转录水平,SEL1L蛋白表达水平的升高主要是相应转录水平上调的结果。（2）SEL1L蛋白过表达可能是食管鳞状细胞癌发生的早期表现,SEL1L蛋白的检测可作为识别食管癌高风险患者的生物标记物。     

IL-8在兔动脉粥样硬化模型中斑块处的蛋白和基因表达

白细胞介素- 8(Interleukin- 8,IL- 8)是趋化因子CXC亚家族的一员,对中性粒细胞有趋化作用,可以诱导平滑肌细胞的增殖和迁移,是一个促血管生成因子,在动脉粥样硬化慢性炎症过程中起着重要作用。本文通过建立兔高脂血症动脉粥样硬化斑块模型,动态监测了在动脉粥样硬化发展过程中IL- 8的蛋白和基因表达,以了解IL- 8在动脉粥样硬化中的作用。采用免疫组化的方法定位IL- 8在高脂血症兔动脉粥样硬化斑块模型主动脉升弓部血管壁的蛋白表达,8、12周模型组内膜显著增厚并有明显阳性染色,半定量分析AS模型组阳性染色的面积分别是对照组的4 .4 8、8.76倍,平均积分光密度(IOD)值分别是对照组的4 .16、4 .36倍。采用双抗夹心EL ISA法测定兔血管组织匀浆液中的IL- 8蛋白表达量,8、12周AS模型组IL- 8蛋白含量与总蛋白比值和对照组比较均有显著性差异,分别是对照组的1.84、2 .0 6倍。用原位杂交的方法定位IL- 8m RNA的表达,8周模型组血管内膜有强的阳性染色,IL- 8m RNA的表达增加。本研究通过建立动脉粥样硬化模型,动态监测了整个动脉粥样硬化过程中IL-8的蛋白和基因表达。IL- 8的蛋白和基因上调主要是在高脂血症兔动脉粥样硬化模型的脂纹期     

促甲状腺激素释放激素受体1和2在二甲磺酸乙烷处理大鼠睾丸中的表达及意义

目的 探讨促甲状腺激素释放激素受体1,2（TRH-R1,TRH-R2)在二甲磺酸乙烷（EDS）处理大鼠睾丸中的表达及其在Leydig细胞中表达的意义。 方法 构建30只EDS处理大鼠模型,应用蛋白质免疫印迹杂交技术、免疫组织化学ABC法以及免疫荧光双标法,检测TRH-R1和TRH-R2在EDS处理后2d、7d、14 d、21d和28d大鼠睾丸中的表达和定位。 结果 免疫印迹杂交发现,EDS处理后2d至14d,大鼠睾丸组织未见TRH-R1和TRH-R2表达,在EDS处理后21d、28d再次检测到了TRH-R1和TRH-R2的表达;免疫组织化学染色显示,TRH-R1和TRH-R2表达于EDS处理后21d、28d大鼠睾丸生精小管周围的长梭形细胞,免疫荧光双标证实此类细胞为再生的Leydig祖细胞。 结论 TRH-R1和TRH-R2参与了Leydig细胞的再生过程,可能对成年型Leydig细胞的发育、分化具有调节作用。